專利名稱:一種以菊芋為原料生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇的方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及甘露醇的生產(chǎn),具體地說是一種以菊芋為原料,通過粉碎、酶解、濃縮
等手段加工成微生物可以利用的發(fā)酵原料,再利用微生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)甘露醇的方法。
背景技術(shù):
甘露醇(D-ma皿itol)又名甘露糖醇、己六醇。易溶于水,微溶于乙醇和甘油,對稀 酸、稀堿穩(wěn)定,是多元醇中唯一一種不吸濕的晶體。醫(yī)藥上,甘露醇主要作為脫水藥、利尿 藥,用于治療腦積水、降低顱內(nèi)壓、腎功能衰竭的輸液和針劑的配料中,也可與氨基酸等配 制成復(fù)合輸液,同時可作為防治早期腎功能不全的藥物中間體和腦血管舒張劑。由于其具 有不吸濕性,還可用作抗癌藥、抗菌藥以及維生素等片劑的賦型劑;在化學(xué)工業(yè)上,它可以 作為合成樹脂和涂料的原料、聚氯乙烯的增塑劑、合成洗滌劑的助洗劑及織物柔軟劑等;在 食品工業(yè)上,由于甘露醇不吸濕,甜度適宜,熱量低,無毒、副作用,在人體內(nèi)代謝與胰島素 無關(guān),不提高血糖值,不致齲齒等特點,可用作糖尿病、肥胖病人的甜味劑和功能性食品添 加劑。 目前世界上廣泛應(yīng)用的生產(chǎn)方法為提取法、化學(xué)合成法和電解還原法。但以上方 法不同程度地存在副產(chǎn)物山梨醇的產(chǎn)生,而且收率低。由于微生物發(fā)酵法生產(chǎn)甘露醇具有 其它生產(chǎn)方法所不具備的優(yōu)越性,能夠有效避免副產(chǎn)物山梨醇的產(chǎn)生,因此有著廣闊的應(yīng) 用前景。 許多微生物可通過其自身的細胞代謝工廠,將葡萄糖、果糖、甘露糖、木糖等糖源 發(fā)酵產(chǎn)生甘露醇。1966年Foda就利用產(chǎn)黃青霉(Penicilliumchrysoge皿m)發(fā)酵葡萄糖 溶液(50g/L)并成功地合成出24g/L甘露醇。Kyung-Hwa Song等(2002)分離出一株屬于 假絲酵母菌屬的甘露醇高產(chǎn)酵母菌株C.magnoliaeHH-Ol。該菌株在葡萄糖和果糖為碳源 的培養(yǎng)基中可以生產(chǎn)甘露醇。盡管酵母菌和絲狀真菌具有以葡萄糖等碳水化合物合成甘露 醇的能力,但其生產(chǎn)甘露醇的容積產(chǎn)率比較低,目前難以應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。而且,產(chǎn)甘露 醇真菌中的大多數(shù)可利用已經(jīng)生成的甘露醇,這使得應(yīng)用酵母菌或絲狀真菌發(fā)酵的過程難 以控制。純化所生產(chǎn)的甘露醇,尤其是以酵母菌生產(chǎn)的甘露醇,因其培養(yǎng)基內(nèi)含有高濃度的 甘油而使純化過程比較復(fù)雜。而乳酸菌,尤其是異型發(fā)酵乳酸菌在厭氧條件下,將乙?;?酸轉(zhuǎn)化成乙酸而不是乙醇,這樣就額外產(chǎn)生一個ATP。如此要完成脆0+的再生就需要一個 電子受體,而果糖恰好可以作為這樣一個受體,于是果糖在NAD(P)H依賴性甘露醇脫氫酶 的作用下被還原生成甘露醇。2006年,BadalC. Saha利用篩選到的乳酸菌Lactobacillus intermedius NRRL B-3693以酶解精制菊粉為底物,通過同步糖化發(fā)酵,在110小時內(nèi)可得 到0. 57g/g底物的收率。但工業(yè)化應(yīng)用,精制菊粉成本較高。 發(fā)酵用生物質(zhì)能源主要有以下幾種糖質(zhì)原料,淀粉質(zhì)原料,菊粉質(zhì)原料和木質(zhì)纖 維素類原料。糖質(zhì)原料來自于富含蔗糖的一類植物中,包括甜菜、甘蔗以及甜高粱等;淀粉 質(zhì)原料來自于富含淀粉的植物中,主要有玉米、小麥、木薯、甜薯;木質(zhì)纖維素原料存在于稻 草、木材等農(nóng)業(yè)殘余物,主要由纖維素(半纖維素和木質(zhì)素所組成,其中纖維素和半纖維素是碳水化合物組分)。菊粉質(zhì)原料的不同之處在于,分解后主要產(chǎn)生果糖基,所以對于那些 經(jīng)由果糖轉(zhuǎn)化得到目的產(chǎn)物的生產(chǎn)工藝來說,是質(zhì)優(yōu)價廉的原料。尤其是富含菊粉的菊科 植物——菊芋,其單位面積生物量產(chǎn)量高,耐受生物及非生物脅迫能力強,而且管理及種植 成本低。最重要的是,雖然淀粉是簡單易得的葡萄糖基原料,而且容易被多種微生物利用。 但一方面,國內(nèi)玉米淀粉遠遠滿足不了大規(guī)模發(fā)酵工業(yè)的發(fā)展,另一方面,工業(yè)用玉米涉及 與糧食的競爭,我國耕地面積有限,玉米人均占有量低,因此開發(fā)利用果糖基能源進行生物 質(zhì)轉(zhuǎn)化勢在必行。而有效利用菊芋中的聚合果糖和乳酸菌的細胞工廠生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露 醇,無疑是比較可行的路線之一。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是開發(fā)利用一種果糖基發(fā)酵原料——菊芋發(fā)酵生產(chǎn)甘露醇。菊芋, 通過粉碎、酶解糖化、濃縮等工藝加工,形成可供乳酸菌利用的發(fā)酵底物。經(jīng)過菌種的篩選 和發(fā)酵糖化菊芋汁條件的優(yōu)化,從而將菊芋中的聚合果糖有效地轉(zhuǎn)化為甘露醇。
所述糖化菊芋汁通過如下步驟獲得, 1)菊芋原料的預(yù)處理將菊芋塊莖曬干,經(jīng)粉碎機粉碎成粗顆粒5-10目,烘箱內(nèi) 6(TC烘干,得菊芋粗粉; 2)菊芋粗粉的酶解濃縮條件將菊芋粗粉以水溶解制成質(zhì)量濃度10 20%溶液, 加入1000U 100000U單位/升的菊粉酶,50 70。C水浴攪拌4 9小時充分糖化,紗布 過濾,上清42。C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,獲得糖化菊芋汁。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點 1)傳統(tǒng)的甘露醇生產(chǎn)方法,依賴于以葡萄糖出發(fā)的化學(xué)催化或生物轉(zhuǎn)化法。隨著 對產(chǎn)物純度和工業(yè)流程潔凈無污染要求的提高,生物轉(zhuǎn)化法生產(chǎn)甘露醇逐漸顯現(xiàn)出優(yōu)勢。 然而,對工業(yè)化應(yīng)用來說,廉價的初級生物質(zhì)原料是降低發(fā)酵成本的有效途徑之一。玉米 淀粉是最簡單易得的葡萄糖基原料,微生物利用起來也十分的容易。但用于工業(yè)的玉米占 玉米總產(chǎn)量的10%左右,每年僅1000多萬噸,因此國內(nèi)的玉米淀粉遠遠滿足不了大規(guī)模的 生物基產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,并涉及到與糧食和耕地的競爭。通過核算每公頃碳水化合物的產(chǎn)量, 我們發(fā)現(xiàn)菊芋和甜薯等作物的產(chǎn)量相當(7 15噸/公頃),甚至高于玉米(3. 45 5噸/ 公頃);通過改良品種,其種植成本呈下降趨勢;菊芋的種植周期也和玉米相當(150 180 天);而且耐寒(-4(TC)、耐旱(適合青海、陜西等荒漠化地區(qū)種植)、耐鹽堿。所以,糖化菊 芋汁可替代玉米淀粉進行發(fā)酵生產(chǎn),無需添加其他碳源,其豐富的果糖含量更可被乳酸菌 直接利用,通過其甘露醇脫氫酶系轉(zhuǎn)化為甘露醇。 2)乳酸菌同樣可發(fā)酵糖化菊芋汁產(chǎn)乳酸,而甘露醇可作為食品添加劑。因此乳酸 生產(chǎn)過程中伴隨少量甘露醇產(chǎn)生,既可改善乳酸口味,還避免提高血糖值,有利健康。
3)發(fā)酵以及后續(xù)的分離提純過程簡單、技術(shù)成熟,便于大規(guī)模生產(chǎn),無毒無害,成 分簡單。加之菊芋本身很多成分已被食品工業(yè)開發(fā)應(yīng)用,因此發(fā)酵原料更是安全有益。
總之,該方法不僅沒有副產(chǎn)物山梨醇產(chǎn)生,而且生產(chǎn)成本低,原料來源廣泛,工藝 簡單,技術(shù)路線成熟,可產(chǎn)業(yè)化實施。此外,乳酸菌培養(yǎng)容易,生長速率高,工業(yè)生產(chǎn)中通過 短期培養(yǎng)即可積累大量目標產(chǎn)物-甘露醇;發(fā)酵過程無需通氣,無需高速攪拌(滿足混合 均勻的基本攪拌即可),節(jié)省了能耗;發(fā)酵液中甘露醇提取簡單,利用其低溶解度可迅速結(jié)晶,便于分離。
圖1應(yīng)用例1中各乳酸菌的甘露醇產(chǎn)量(總糖濃度20g/L); 圖2應(yīng)用例2中各乳酸菌生物量(總糖濃度40g/L, Control =對照,SJAJ =糖化
菊芋汁); 圖3應(yīng)用例3中各乳酸菌生物量(總糖濃度169g/L, SJAJ =糖化菊芋汁);
圖4應(yīng)用例3中總糖轉(zhuǎn)化率(總糖濃度169g/L, SJAJ =糖化菊芋汁)。
具體實施例方式
實施例1糖化菊芋汁的制備 1)菊芋塊莖的處理工藝將菊芋塊莖曬干,經(jīng)粉碎機粉碎成粗粉(5-10目),烘箱內(nèi)6(TC烘干,密封待用。 2)將制成的菊芋粗粉浸入5(TC水中制成質(zhì)量濃度10%的溶液,通過l麗aOH, 1MHC1調(diào)節(jié)其pH值至6. 5,按每升加入50000U單位的菊粉酶的比例配制菊芋粗粉酶解反應(yīng)液(菊粉酶酶活定義為每分鐘水解底物產(chǎn)生1微摩爾果糖所需要的酶量),以5(TC水浴攪拌6小時糖化。 3)將酶解后的反應(yīng)液紗布過濾,上清離心。之后42t:旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原上清液體
積的1/3,制成濃縮的糖化菊芋汁,稀釋后經(jīng)HPLC檢測,確定其總糖濃度為100g/L(葡萄糖
/果糖=3:1)。 實施例2 與實施例1不同之處在于 2)將制成的菊芋粗粉浸入6(TC水中制成質(zhì)量濃度20%的溶液,通過l麗aOH, 1MHC1調(diào)節(jié)其pH值至6. 5,按每升加入100000U單位的菊粉酶的比例配制菊芋粗粉酶解反應(yīng)液(菊粉酶酶活定義為每分鐘水解底物產(chǎn)生1微摩爾果糖所需要的酶量),以6(TC水浴攪拌6小時糖化。 3)將酶解后的反應(yīng)液紗布過濾,上清離心。之后42t:旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原上清液體積的1/4,制成濃縮的糖化菊芋汁,稀釋后經(jīng)HPLC檢測,確定其總糖濃度為150g/L(葡萄糖/果糖=4:1)。
應(yīng)用例1 將七種乳酸菌(來源于中國普通微生物菌種保藏管理中心CGMCC,菌種號為-Lactobacillus brevis AS1.7, Lactobacillus buchneri AS1. 13, Lactobacillusbuchneri AS1. 40, Lactobacillus fermenti咖 AS1. 1880, Lactobacillus fermentiumAS1.2029,Leuconostoc mesenteroides AS1.20,Leuconostoc mesenteroides AS1. 544)分別接入20g/L果糖標準品作碳源的MRS培養(yǎng)基(酪蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母提取物5g,乙酸鈉5g,檸檬酸二銨2g, Tween801g, K2HP042g, MgS04 7H20 0. 2g, MnS04 H200. 05g,蒸餾水定容至1.0L)中發(fā)酵,厭氧條件通過厭氧塞實現(xiàn)。培養(yǎng)條件為培養(yǎng)液初始pH值通過lMNa0H, 1M HCl調(diào)節(jié)至6. 5 6. 8, 50ml裝載容積(100ml錐形瓶),5%接種量,30°C , lOOrpm輕搖,發(fā)酵時間72小時。
使用分光光度計比色法確定乳酸菌不同生長時間的生物量。使用HPLC系統(tǒng)(陰離子交換柱DIONEX CarboPac PA1)和脈沖安培檢測器檢測底物果糖、產(chǎn)物甘露醇,以及可能出現(xiàn)的副產(chǎn)物——山梨醇。甘露醇產(chǎn)量見圖l。結(jié)果表明,以上乳酸菌除Lactobacillusfermentium AS1. 2029夕卜,均能利用果糖生長并代謝生產(chǎn)甘露醇。并且,經(jīng)HPLC顯示,這七種乳酸菌發(fā)酵過程中均不產(chǎn)生副產(chǎn)物山梨醇。本實例也證明了這六種乳酸菌有利用糖化菊芋汁的潛力。 應(yīng)用例2將應(yīng)用例1中選擇出的六種乳酸菌(Lactobacillusbrevis AS1. 7,Lactobacillus buchneri AS1. 13, Lactobacillus buchneri AS1.40Lactobacillusfermentium AS1. 1880,Leuconostoc mesenteroides AS1. 20,Leuconostoc mesenteroidesAS1. 544)分別接入40g/L總糖濃度的糖化菊芋汁(由實施例2中濃縮糖化菊芋汁配制而成)和以果糖、葡萄糖標準品按4 : 1比例配制的總糖濃度40g/L對照溶液中。培養(yǎng)條件同應(yīng)用例1。 使用分光光度計比色法確定乳酸菌不同生長時間的生物量。使用HPLC系統(tǒng)(陰離子交換柱DIONEX CarboPacTMPAl)和脈沖安培檢測器檢測發(fā)酵液中底物葡萄糖和果糖、產(chǎn)物甘露醇的含量。 結(jié)果顯示,在糖化菊芋汁所配培養(yǎng)基上生長的乳酸菌的最高生物量高于標準品配制的培養(yǎng)基上生長的乳酸菌(如圖2),說明在乳酸菌發(fā)酵生產(chǎn)中,果糖化的菊芋粉是完全可以代替玉米淀粉作為發(fā)酵原料供乳酸菌生長的。甘露醇產(chǎn)量除Leuconostocmesenteroides AS1. 544以外,果糖轉(zhuǎn)化率均超過50% 。而且生物量結(jié)果顯示,AS1. 544生長狀況不夠理想,不適宜發(fā)酵生產(chǎn)。 應(yīng)用例3選擇應(yīng)用例2中利用菊芋生長代謝狀況良好的五種乳酸 菌 (Lactobacillus brevis AS 1. 7, Lactobaci1lus buchnerii AS1.13,Lactobaci1lusbuchneri AS1.40 Lactobacillus fermentium AS1.1880,Leuconostocmesenteroides AS1. 20)以接入169g/L總糖濃度的糖化菊芋汁((由實施例2的濃縮糖化菊芋汁配制而成)中,培養(yǎng)條件同應(yīng)用例l。生物量及底物、產(chǎn)物濃度的測定方法同上兩實例。結(jié)果證明,五種乳酸菌能夠在高濃度糖化菊芋汁做碳源的培養(yǎng)基中生長(如圖3),最高的能達到80%總糖轉(zhuǎn)化率的甘露醇產(chǎn)量。尤其是Lactobacillus brevisAS1.7,利用菊芋轉(zhuǎn)化甘露醇的容積生產(chǎn)率可達到0.94(g/(L化))(如圖4)??梢姼邼舛染沼髮θ樗峋种菩?yīng)并不明顯,乳酸菌仍能利用其葡萄糖成分生長并利用其果糖成分進行代謝。而AS 1.7和AS 1.2是選擇出的具備放大生產(chǎn)潛力的甘露醇生產(chǎn)菌株,有進一步優(yōu)化、改造的潛力。 應(yīng)用例4優(yōu)化乳酸菌Lactobacillus brevis AS1. 7以糖化菊芋汁為碳源生物轉(zhuǎn)化為甘露醇的發(fā)酵條件。 將以2X葡萄糖為碳源的MRS種子培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h的LactobacillusbrevisAS1. 7接入糖化菊芋汁中批式厭氧發(fā)酵(裝載容積100ml/500ml錐形瓶),確定總糖初始濃度、PH值、溫度、通氣、攪拌等對乳酸菌發(fā)酵糖化菊芋汁生產(chǎn)甘露醇的影響(底物、產(chǎn)物測定方法同前)。該菌利用糖化菊芋汁發(fā)酵的最佳條件為批式發(fā)酵起始總糖濃度150g/L(另加入蛋白胨3X, MgS04 7H20 0. 01 %,擰檬酸二銨0. 2%,乙酸鈉0. 5%, MnS04 H200. 08% ) ;pH5. 5 6. 0 ;溫度35 37°C ;接種量5% 10% ;100rpm攪拌;無通氣。此條件下批式發(fā)酵可得到最大細胞比生長速率(0. 5L/h)和甘露醇轉(zhuǎn)化率(81.5%,對總糖)。對Lactobacillus brevis AS1. 7進一步在含1升糖化菊芋汁培養(yǎng)基(總糖濃度100g/L,果糖/葡萄糖=4 : 1,另加入蛋白胨3^,MgS0^7H20 0.01%,檸檬酸二銨0. 2%,乙酸鈉0. 5%,MnS04*H20 0.08%)的5升發(fā)酵中培養(yǎng),采用補料方式在發(fā)酵24h后以30ml/h速率加入濃度為100g/L的糖化菊芋汁48h。發(fā)酵終止,可得到160g甘露醇。乳酸菌AS 1. 7不僅能利用糖化菊芋汁批式發(fā)酵生產(chǎn)甘露醇,獲得較高的轉(zhuǎn)化率和生產(chǎn)速率,而且可以應(yīng)用于連續(xù)生產(chǎn),以糖化菊芋汁中單糖成分有效維持生長并高產(chǎn)甘露醇。
權(quán)利要求
一種以菊芋為原料生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇的方法,其特征在于以總糖濃度40~300g/L,果糖/葡萄糖比例范圍為3∶1~4∶1的糖化菊芋汁為底物碳源配制發(fā)酵培養(yǎng)基,經(jīng)微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇;所述微生物為短乳桿菌Lactobacillus brevis,布氏乳桿菌Lactobacillusbuchneri,發(fā)酵乳桿菌Lactobacillus fermentium或腸膜明串珠菌Leuconostocmesenteroides。
2. 按照權(quán)利要求l所述的方法,其特征在于所述糖化菊芋汁是通過如下過程獲取的,將菊芋塊莖粉碎為5 10目的粗粉,配制成質(zhì)量濃度2 20 %的水溶液,加入1000U 100000U單位比例的菊粉酶、配制成酶解反應(yīng)液,菊粉酶酶活定義為每分鐘水解底物產(chǎn)生1 微摩爾果糖所需要的酶量,調(diào)pH至4 6, 50 7(TC反應(yīng)4 9h,酶反應(yīng)進行完全后,紗布 過濾后將上清液于30-5(TC濃縮至原上清液體積的1/5 1/2 ;得到總糖濃度100 300g/ L的濃縮糖化菊芋汁,其果糖/葡萄糖比例為3 : 1 4 : 1;以濃縮糖化菊芋汁加水配制總糖濃度范圍是40 300g/L糖化菊芋汁,其為微生物可 以利用的富含單糖的反應(yīng)液原料,將反應(yīng)液調(diào)至pH = 6. 2-6. 8,滅菌。
3. 按照權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述短乳桿菌Lactobacillusbrevis,布 氏乳桿菌Lactobacillus buchneri,發(fā)酵乳桿菌Lactobacillusfermentium或腸膜明串珠 菌Leuconostoc mesenteroides是指野生型微生物,或通過遺傳工程與基因改造的微生物, 能夠利用權(quán)利要求2中的糖化菊芋汁生長,并代謝產(chǎn)生乳酸及甘露醇。
4. 按照權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述發(fā)酵培養(yǎng)基成分中碳源僅由糖化菊 芋汁提供,發(fā)酵培養(yǎng)基中還添加有其它成分,發(fā)酵培養(yǎng)基中其它成分的質(zhì)量體積g/ml含量 為蛋白胨或玉米漿3 5%,MgS04 *7H200. 01% 0. 05%,檸檬酸二銨0. 1-0. 3%,乙酸鈉 0. 2-0. 5 % , MnS04 H200. 02-0. 08 % 。
5. 按照權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇過程的發(fā)酵 條件為,發(fā)酵培養(yǎng)基中酶解后的糖化菊芋汁為唯一碳源;進行批式發(fā)酵生產(chǎn),以權(quán)利要求4 中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為起始發(fā)酵培養(yǎng)基,起始發(fā)酵培養(yǎng)基中糖化菊芋汁濃度40 300g/L,培 養(yǎng)溫度30-35°C, pH = 6. 2-6. 8,攪拌80-100rpm,不通氣,發(fā)酵周期30 150h。
6. 按照權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇過程的發(fā) 酵條件為,發(fā)酵培養(yǎng)基中酶解后的糖化菊芋汁為唯一碳源,補料發(fā)酵也是補加所需濃度的 糖化菊芋汁;進行補料發(fā)酵生產(chǎn),以權(quán)利要求4中所述發(fā)酵培養(yǎng)基為起始發(fā)酵培養(yǎng)基,且 起始發(fā)酵培養(yǎng)基中糖化菊芋汁濃度40 200g/L ;培養(yǎng)溫度30-35°C, pH = 6. 2-6. 8,攪拌 80-100rpm,不通氣;補入濃度為40 200g/L糖化菊芋汁,補料速率20 50ml/h ;發(fā)酵周 期30 150h。
7. 按照權(quán)利要求l所述的方法,其特征在于所述微生物轉(zhuǎn)化生產(chǎn)甘露醇過程中,甘露 醇處于微生物發(fā)酵后的發(fā)酵液中,發(fā)酵液中甘露醇的分離純化過程為,發(fā)酵液經(jīng)離心或過 濾除去菌體,再蒸發(fā)濃縮上清液,出現(xiàn)結(jié)晶,離心后得甘露醇晶體。
全文摘要
本發(fā)明涉及利用一種優(yōu)質(zhì)果糖基生物質(zhì)原料——菊芋的糖化處理工藝及以菊芋為碳源發(fā)酵生產(chǎn)甘露醇的菌種選擇和工藝優(yōu)化,1)將菊芋塊莖粉碎成粗顆粒,水浸酶解6小時后過濾,上清42℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,得高果糖濃度的糖化菊芋汁;2)建立高效液相色譜分析檢測條件,能夠同步分析發(fā)酵液底物(葡萄糖和果糖)及產(chǎn)物(甘露醇)的含量;3)利用不同總糖濃度的糖化菊芋汁考察了7種乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)乳酸及甘露醇的生產(chǎn)能力,確定了一種果糖轉(zhuǎn)化率高、生產(chǎn)強度高的乳酸菌并優(yōu)化了其生產(chǎn)發(fā)酵條件和耐受底物的最高濃度。通過補料發(fā)酵可提高生產(chǎn)效率并連續(xù)化大量生產(chǎn)甘露醇。該方法不僅沒有副產(chǎn)物山梨醇產(chǎn)生,而且生產(chǎn)成本低,原料來源廣泛,工藝簡單,技術(shù)路線成熟,可產(chǎn)業(yè)化實施。
文檔編號C12R1/225GK101736058SQ20081022906
公開日2010年6月16日 申請日期2008年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2008年11月26日
發(fā)明者周正, 曹海龍, 朱豫, 李曙光, 杜昱光, 白雪芳 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所