專利名稱：骨填補劑的制造方法、骨填補劑以及三維細胞培養(yǎng)載體、色譜法用分離載體的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及應(yīng)用粉末注射成形法的骨填補劑以及骨填補劑和三 維細胞培養(yǎng)載體的制造方法等。更詳細而言，本發(fā)明涉及應(yīng)用粉末 注射成形法的具有多個突起部的微小骨填補劑的制造方法、骨填補 劑和三維細胞培養(yǎng)載體等。
背景技術(shù)：
以往，當(dāng)因事故或治療而使骨的一部分缺損時，例如通過在缺損 骨中填充與骨組織置換的骨填補劑，來促進缺損骨再生。作為這種
骨填補劑的原料，采用羥磷灰石或P-TCP等磷酸鈣類物質(zhì)、聚乳酸 等生物可降解性塑料等。
在日本專利特開2004-97259號公報(專利文獻1)中公開了具 有所謂的四腳(Tetrapod注冊商標(biāo))形狀的骨填補劑(骨固定材料) (例如該公報的圖1~圖3)。而且，作為制造四腳(注冊商標(biāo))形 狀的骨填補劑的方法，公開了采用分型金屬模的熔融成形法(該公 報的段落
和段落
)。但是，通過這種采用了分型金屬模 的熔融成形來制造的骨填補劑不一定具有足夠的強度。而且，將磷 酸鈣類物質(zhì)或生物可降解聚合物通過熔融成形制造時，存在所得骨 填補劑的尺寸精度和成形密度不均的問題。此外，還存在所得骨填 補劑的表面形態(tài)參差不齊的問題。另外，該公報所記載的方法還存 在不適合大量生產(chǎn)的問題。
在日本專利特開平11-206871號公報中公開了使用聚乳酸或羥 磷灰石并通過在注射成形后進行單軸拉伸等來制造桿狀或片狀的骨 填補劑的方法(該公報的段落
)。但是，所得骨填補劑是聚乳酸等高分子或這種高分子與磷酸鈣類物質(zhì)的混合物。另外，在該公 報的實施例中，利用擠壓成形來制造片狀的骨填補劑(該公報的段
落
)。若采用擠出成形，則無法制造具有例如四腳狀這樣的復(fù) 雜形狀的骨填補劑。
另外，粉末注射成形法被用于制造金屬或陶瓷。但是，粉末注射 成形法釆用缺乏生物相溶性的物質(zhì)作為粘合劑，因此之前沒人設(shè)想 用粉末注射成形法來形成埋入生物體內(nèi)用于組織置換目的的物質(zhì)。 而且，由于骨填補劑在生物體內(nèi)必須具有骨組織置換能力，因此僅 使用鈣類物質(zhì)等粉末利用粉末注射成形法來形成骨填補劑，無法得 到理想的骨填補劑。
專利文獻1:日本專利特開2004-97259號7>才艮 專利文獻2:日本專利特開平11-206871號乂iSR
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供用于制造骨填補劑的新方法。 本發(fā)明的目的在于提供形狀和密度的偏差少的骨填補劑的制造 方法。
本發(fā)明的目的在于提供在注射成形時容易與金屬模分離的骨填 補劑的制造方法。
本發(fā)明的目的在于提供具有規(guī)定強度的骨填補劑以及這種骨填 補劑的制造方法。
本發(fā)明的目的在于提供能獲得規(guī)定藥理效果的骨填補劑以及這 種骨填補劑的制造方法。
關(guān)于細胞培養(yǎng)，迄今為止只進行二維細胞培養(yǎng)。本發(fā)明顛覆這種 概念，其目的在于提供能三維培養(yǎng)細胞的載體。
本發(fā)明的目的在于提供作為上述骨填補劑而言迄今為止未曾考 慮過的利用形態(tài)。具體而言，提供三維細胞培養(yǎng)載體、色譜法用分 離載體等用途。
根據(jù)普通的方法，即使希望用粉末注射成形法來獲得具有微小復(fù)雜形狀的骨填補劑，但，例如成形體粘附于固定金屬模等也無法順 利制造。在本發(fā)明中，為了制造、最好能大量生產(chǎn)具有良好物性的 骨填補劑，進行了各種努力，從而完成了發(fā)明。本發(fā)明基本上而言
基于如下發(fā)現(xiàn)將一直以來用于制造金屬或陶瓷的粉末注射成形法 應(yīng)用于采用磷酸鈣類物質(zhì)等4丐類物質(zhì)作為原料粉末的材料，進行各 種努力，能制造各個骨填補劑的表面積和密度的偏差少且具備作為 骨填補劑的合適的硬度等物性的骨填補劑。如上所述，由于各個骨 填補劑的表面積和密度均 一 ，因此即使藥劑被摻入到骨填補劑中， 也能給予適量的藥劑。此外，由于大小均一，因此能在維持各骨填 補劑的強度的同時，得到整體而言合適的空隙率。另外，本發(fā)明還 基于下述觀點通過使用凝聚特定制作的金屬模以及使用規(guī)定的原 料，能有效地防止成形體附著于固定金屬模。
本發(fā)明的骨填補劑的制造方法基本而言涉及包含如下工序的骨 填補劑的制造方法等，即將含有含4丐類物質(zhì)的原材料和粘合劑的 材料混合的混合工序；使用在上述混合工序中得到的混合物，通過 采用具有金屬模的注射成形機的注射成形，得到具有規(guī)定形狀的成 形體的成形工序；將在上述成形工序中得到的成形體中含有的粘合 劑除去，得到脫脂體的脫粘合劑(脫脂)工序；以及將上述脫粘合 劑工序后的脫脂體加熱，燒結(jié)得到燒結(jié)體的燒結(jié)工序。
某一側(cè)面所涉及的本發(fā)明的骨填補劑的制造方法，其中，作為鉤 類物質(zhì)，可列舉含有磷酸鈣類物質(zhì)或碳酸鈣類物質(zhì)中的任一者或兩 者的4丐類物質(zhì)，作為上述磷酸鉤類物質(zhì)，可列舉羥磷灰石、碳酸化 磷灰石、氟磷灰石、氯磷灰石、P-TCP、 oc-TCP、偏磷酸鈣、磷酸 四鈞、 -疇酸氬4丐、石粦酸八鈣、二;粦酸四氫鈣、焦石粦酸鈣、它們的鹽、 和它們的溶劑化物中的任1種或2種以上。通過使用這些物質(zhì)，有 效地與骨細胞進行置換，因此能提供有助于骨再生的骨填補劑。
用本發(fā)明的制造方法得到的骨填補劑 一般比較微小，必須具備作 為骨填補劑的合適的物性。因此，本發(fā)明的骨填補劑的制造方法的 優(yōu)選側(cè)面為，通過特殊規(guī)定原料中添加的粘合劑的種類和量，得到理想的骨填補劑。具體而言，可列舉上述任一骨填補劑的制造方法， 其中，上述粘合劑含有(曱基)丙烯酸類樹脂、蠟潤滑劑和潤滑劑。 可列舉技術(shù)方案1所述的骨填補劑的制造方法，其中，粘合劑含有
蠟潤滑劑，上述蠟潤滑劑含有熔點為40°C ~ IO(TC的蠟。由于采用熔 點低的蠟作為蠟潤滑劑，因此容易與金屬模分離，能有效地制造骨 填補劑。本發(fā)明的優(yōu)選方式為上述任一骨填補劑的制造方法，其中， 上述粘合劑含有(甲基)丙烯酸類樹脂、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、 石蠟、硬脂酸和鄰苯二曱酸二丁酯，在上述混合工序中，向混合機 中投入上述(曱基)丙烯酸類樹脂和上述乙烯-乙酸乙烯酯共聚物， 邊混合邊向混合機中投入上述原材料、上述石蠟和上述硬脂酸，邊 混合邊向混合機中投入上述鄰苯二曱酸二丁酯。雖然制造骨填補劑 并不容易，但用上述特定的樹脂能制造最佳的骨填補劑。
補劑的制造方法，其中，除了含有鈣類物質(zhì)的原材料和粘合劑外， 還含有玻璃成分。能控制骨填補劑的強度即可擴大骨填補劑的應(yīng)用。 由于含有玻璃成分，因而能獲得強度高的骨填補劑。
補劑的制造方法，其中，除了含有鈣類物質(zhì)的原材料和粘合劑外， 還含有鹽分或糖分。由于本發(fā)明的骨填補劑預(yù)計在生物體內(nèi)或體外 培養(yǎng)骨細胞等，因此希望細胞盡可能容易附著。若用含有鹽分或糖 分的原料來制造骨填補劑，則之后通過在水等中浸漬來除去鹽分或 糖分，能得到多孔性的骨填補劑。這樣，鹽分或糖分去除的部分形 成孔，即可得到適于細胞培養(yǎng)的物理結(jié)構(gòu)。
補劑的制造方法，其中，上述骨填補劑的形狀為具有多個(例如4 個以上)突起部，上述金屬模具有設(shè)有用于注入材料(例如混合物 等)的注入口的固定金屬模和在注入材料時與上述固定金屬模接觸 而成形后與上述固定金屬模分離的可動金屬模，上述固定金屬模為 了從上述多個突起部中的某一 突起部的頂端部注入注射成形用材料，使上述注入口位于所上述頂端部，上述固定金屬模與上述可動 金屬模的接合面具有從端面向中心方向逐漸向注入口方向傾斜的傾 斜面，上述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī)定楔形部的凹部。制造骨填 補劑常常會遇到困難。本領(lǐng)域技術(shù)人員，若采用注射成形法，則會
明的骨填補劑很微小，很難先分別制造各突起部然后將它們組合。 為此，在注射成形時的金屬模上下功夫，通過1次注射成形即可得 到具有多個突起部的注射體。設(shè)計例如上述固定金屬模與上述可動 金屬模的接合面具有從端面向中心方向逐漸向注入口方向傾斜的傾 斜面這樣的具有三維接合面的金屬模，使成形體易從固定金屬模脫 離。例如，若采用接合面為平面的分型金屬模，則成形體殘留于固 定金屬模的可能性高，此時很難從金屬模取下成形體。而且，很難 完全除去堵塞于金屬模的成形體。但在上述金屬模中，通過使接合 面傾斜，降低了成形體在固定金屬模殘留的可能性。
本發(fā)明中使用的優(yōu)選方式為上述任一 骨填補劑的制造方法，楔形
部的高度為l|im~ 1 x l02pm。若成形體殘留于固定金屬模，則無法 制造骨填補劑。該楔形部發(fā)揮可動金屬模的楔形部的作用，因此在 取下金屬模時能防止成形體殘留于固定金屬模。
本發(fā)明中使用的優(yōu)選方式為上述任一骨填補劑的制造方法，其 中，上述可動金屬模的深度為lpm 2x 10pm且具有1個或多個槽。 若成形體殘留于固定金屬模，則無法制造骨填補劑。該槽部分能增 加可動金屬模部分的表面積，因此在取下金屬模時能防止成形體殘 留于固定金屬模。
本發(fā)明中使用的優(yōu)選方式為上述任 一 骨填補劑的制造方法，其中 上述骨填補劑的形狀為具有4個突起部(優(yōu)選為4個突起向正四面 體的各頂點的方向延伸的四腳狀骨填補劑)，上述可動金屬模具有 設(shè)置在突起部內(nèi)側(cè)的突出銷。從金屬模取出成形體是注射成形中非 常重要的一步。在該方式中，由于將突出銷設(shè)在位于突起部的內(nèi)側(cè) 的位置(以j更定向從一個突起部的頂端的相反方向穿過金屬模中心向該突起部的頂端方向移動)，因而能有效地取出成形體。
本發(fā)明中使用的優(yōu)選方式為上述任一 骨填補劑的制造方法，其中 上述骨填補劑的形狀為具有多個突起部，上述金屬模具有固定金屬 模和在注入材料時與上述固定金屬模接觸而成形后與上述固定金屬
模分離的可動金屬模，注入注射成形用材料的注入口位于上述固定 金屬模與上述可動金屬模的接合面上，上述固定金屬模與上述可動
金屬模的接合面具有從端面向中心方向逐漸向上述骨填補劑的中心 方向傾斜的傾斜面，上述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī)定楔形部的凹 槽。通過在注射成形時的金屬模上下功夫，以1次注射成形即可得 到具有多個突起部的射出體。
的制造方法，其中，上述脫粘合劑工序含有在到達ll(TC 300。C的 第一溫度保持時間之前以rC/小時~ 3 x 1()2。C/小時(優(yōu)選1(TC/小 時 2x 1(^。C/小時)的速度升溫的加熱工序。例如，根據(jù)粘合劑中 含有的樹脂的熱分解溫度，具有多個階段的升溫時間和溫度保持時 間。如此在多階段提高溫度進行脫粘合劑，因而能從熱分解溫度低 的樹脂開始有效地發(fā)生熱分解，能有效地進行脫粘合劑。特別是使熱分 解溫度低的樹脂有效地發(fā)生熱分解，能提高燒結(jié)性。在本發(fā)明中，由于 如上所述那樣提高溫度，因此能有效地使熱分解溫度低的樹脂發(fā)生熱分 解。
某 一 側(cè)面涉及的本發(fā)明的骨填補劑的制造方法是上述任 一 骨填 補劑的制造方法，其包含對在上述燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或 涂布藥劑的工序。另外，本發(fā)明的優(yōu)選方式為上述任一骨填補劑的 制造方法，其中，作為上述藥劑，采用骨生成'軟骨形成促進劑(包 含軟骨形成促進因子)、關(guān)節(jié)疾病治療劑、骨 軟骨疾病預(yù)防和/或 治療劑、骨再生劑、骨吸收抑制物質(zhì)、血管新生促進劑、抗菌劑、 抗生素或抗癌劑中的l種或2種以上?，F(xiàn)有的骨填補劑僅筒單地給 予到骨組織的缺損部位來使骨再生。但本發(fā)明的骨填補劑通過在該 骨填補劑上涂布藥劑，不僅能促進骨的再生，還能預(yù)防感染等。即，本發(fā)明還提供具有表面被粘合性賦予劑含浸、涂布或粉末混合的多個突 起部，和鈣類物質(zhì)的骨填補劑。
某 一 側(cè)面涉及的本發(fā)明的骨填補劑的制造方法是上述任 一 骨填 補劑的制造方法，其包含對在上述燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或 涂布粘合性賦予劑的工序。作為上述粘合性賦予劑，可列舉凝血酶。 另外，本發(fā)明的某一實施方式為技術(shù)方案1所述任一骨填補劑的制 造方法，其中，按照上述骨填補劑的制造方法制造大量骨填補劑(或
燒結(jié)體)，制備2種含有粘合性賦予劑的組合物；在某一骨填補劑 組含浸或涂布第l組合物，制成第l骨填補劑組；在另一骨填補劑 組含浸或涂布第2組合物，制成第2骨填補劑組，將含有上述第1 骨填補劑組和上述第2骨填補劑組的骨填補劑組作為骨填補劑，其 中上述第1組合物質(zhì)是含有下述通式(I )或(II )表示的化合物 或含有3 ~ 8個下述通式(III )表示的重復(fù)單元的化合物中的1種或 2種以上的第1化合物；和第1稀釋劑(或載體)，上述第2組合物 是含有下述通式(I )或(II )表示的化合物或含有3 ~ 8個下述通 式(III )表示的重復(fù)單元的化合物中的1種或2種以上的第2化合 物，和第2稀釋劑，
<formula>formula see original document page 13</formula> (I)
式(I )中，Xi和X2相同或不同，表示-R/COONHS (Ri表示 d匿C 亞烷基。)、-COR^COONHS(I^表示CrC7亞烷基。)、-NOCOR、 R2 (W表示C廣C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基。)、-I^NHs ( R1 表示d-C 亞烷基。)、-111811(111表示C廣C7亞烷基。)或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n表示80~ 1000的整數(shù)，<formula>formula see original document page 14</formula>
式(II )中，Xn-廣Xn-4分別相同或不同，表示-R/COONHS (R1 表示C廣C7亞烷基。)、-CORtOONHS (W表示d畫C 亞烷基。)、 -NOCOR1- R2( R1表示d-C7亞烷基，112表示馬來酰亞胺基。)、-R^NI^ (R1表示d-C7亞烷基。)、-R!SH (R1表示d-C7亞烷基。)或 -C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n!w ru-4分別相同或 不同，表示20 ~ 250的整數(shù)，
<formula>formula see original document page 14</formula>
式(III)中，Xm表示-R^COONHS (R/表示C廣C7亞烷基。)、 -CORiCOONHS、 -NOCOR、R2 (W表示d-C 亞烷基，R2表示馬來 酰亞胺基。)、-:r/NH2 (W表示C廣C7亞烷基。)、-R^H(R'表示 C廣C7亞烷基。)或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n m表示10 ~ 150的整數(shù)。
上述骨填補劑的制造方法的更優(yōu)選方式為，上述第1化合物含有
1種或2種以上通式(I )或(II )中Xp X2或Xn-廣Xn-4分別相
同或不同、為-NOCOR1- F"或-I^NH2的化合物，上述第2化合物含
有1種或2種以上通式(I )或(II )中Xp X2或Xn—廣Xn-4分別
相同或不同、為-COR/COONHS、 -R^SH或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、 間-或?qū)?亞苯基)的化合物。骨填補劑旨在向生物體內(nèi)投與。而且，希望在生物體內(nèi)大量骨填 補劑相互結(jié)合從而維持立體結(jié)構(gòu)。若采用現(xiàn)有的骨填補劑，則立體 結(jié)構(gòu)容易破壞，因此缺乏強度。但是，通過使用上述粘合性賦予劑， 能提高骨填補劑之間的粘合性以及與骨組織之間的粘合性，從而維 持立體結(jié)構(gòu)。另外，當(dāng)粘合性賦予劑不易發(fā)生熱變性時，可事先將 粘合性賦予劑與原料粉末混合，得到粉末混合粘合性賦予劑的骨填 補劑(此時，不僅在骨填補劑的表面存在粘合性賦予劑，在表面與 骨組織置換后的新表面上也存在粘合性賦予劑，因而能維持粘合 性)。而且，粘合性賦予劑也可直接以粉狀散布于成形體或燒結(jié)體 的表面。此外，也可將大量的骨填補劑與粉末狀粘合性賦予劑混合， 適當(dāng)攪拌進行粉體混合，從而使粘合性賦予劑附著在骨填補劑的表 面。即，本發(fā)明還提供具有鈣類物質(zhì)和在表面含浸、涂布或粉體混 合有粘合性賦予劑的多個突起部的骨填補劑。
劑的制造方法，其中，上述骨填補劑具有4個突起部，該4個突起 部是從正四面體的中心向各頂點的方向延伸形成的。若是具有這種 形狀的骨填補劑，則能形成理想的連通孔等，能容易地培養(yǎng)細胞等。
某 一 側(cè)面涉及的本發(fā)明的骨填補劑的利用方法為，含有具有多個 突起部且含有鈣類物質(zhì)的上述任一骨填補劑的三維細胞培養(yǎng)載體。 該三維細胞培養(yǎng)載體的優(yōu)選方式為，上述骨填補劑是在其表面含浸、 涂布或粉體混合有藥劑或粘合性賦予劑的骨填補劑。以往，細胞培 養(yǎng)只用培養(yǎng)皿等進行二維培養(yǎng)。利用本發(fā)明，能有效地在體外對細 胞進行三維培養(yǎng)。
某一側(cè)面涉及的本發(fā)明的骨填補劑的利用方法為，含有鈣類物質(zhì) 且具有多個突起部的骨填補劑的色謙法用分離載體。如后述的試驗 例所證實，本發(fā)明的骨填補劑具有理想的吸附性等，而且其吸附性
可通過調(diào)節(jié)骨填補劑的空隙等來進行控制。因此，可將大量的骨填 補劑作為色譜法用的分離載體來使用。
根據(jù)本發(fā)明，在制造骨填補劑時，對用磷酸鈣類物質(zhì)作為原料粉末的材料采用粉末注射成形法，因而能提供形狀精度高、體積偏差 少的骨填補劑的制造方法。
根據(jù)本發(fā)明，采用含有規(guī)定蠟的材料作為粘合劑，因而能提供易 于從金屬模分離的骨填補劑的制造方法。
根據(jù)本發(fā)明，如后述實施例中所證實，能提供具有規(guī)定強度的骨 填補劑以及這種骨填補劑的制造方法。
此外，本發(fā)明的骨填補劑通過在其成形體的表面等涂布藥劑來發(fā) 揮作為具有特定藥理效果的藥劑的功能，因此根據(jù)本發(fā)明，能提供 可獲得特定藥理效果的骨填補劑以及這種骨填補劑的制造方法。
關(guān)于細胞培養(yǎng)，迄今為止只進行二維培養(yǎng)，但根據(jù)本發(fā)明，如后 述的實施例所證實，顛覆上述概念，能提供可通過有效地使用大量 骨填補劑來對細胞進行三維培養(yǎng)的載體。
作為上述骨填補劑而言迄今為止未曾考慮過的利用形態(tài)，本發(fā)明 能提供三維細胞培養(yǎng)載體、色譜法用分離載體等用途。
子的示意圖。
圖2是用于說明四腳狀骨填補劑的例子的示意圖。圖2(A)表 示側(cè)視圖，圖2(B)表示俯視圖，圖2(C)表示立體圖。
圖3是用于說明去頭四腳狀骨填補劑的例子的示意圖。圖3(A) 和圖3 (B)表示側(cè)視圖，圖3 (C)表示俯視圖，圖3 (D)表示立 體圖。
圖4是用于說明具有3個突起部的骨填補劑的例子的示意圖。圖 4(A)表示立體圖，圖4 (B)表示從上方所見的圖。
圖5是用于說明半球形骨填補劑的例子的示意圖。圖5 (A)表 示立體圖，圖5(B)表示仰視圖。
圖6是用于說明在下表面具有l(wèi)個或多個挖空部的骨填補劑的例 子的示意圖。圖6(A)表示立體圖，圖6(B)表示仰視圖。圖7是用于說明雙頭狀骨填補劑的例子的示意圖。圖7 (A)表 示立體圖，圖7 (B)和圖7 (C)表示側(cè)視圖。
圖8是用于說明在其中央部位具有突起部的骨填補劑的例子的 示意圖。圖8(A)表示立體圖，圖8(B)表示側(cè)視圖。
圖9是用于說明十字形骨填補劑的例子的示意圖。圖9 (A)表 示立體圖，圖9(B)表示俯視圖，圖9(C)表示側(cè)視圖，圖9(D) 表示仰—見圖。
圖IO是用于說明近似平面狀的骨填補劑的例子的示意圖。圖10 (A)表示立體圖，圖10(B)表示俯視圖，圖10(C)表示側(cè)視圖。 圖11是用于說明在平面的一端或兩端具有突起部的骨填補劑的 例子的示意圖。
圖。圖12(A)表示立體圖，圖12(B)表示側(cè)視圖。 圖13是骨填補劑的CAD設(shè)計圖。
圖14是用照片代替圖紙表示實施例1中得到的骨填補劑。 圖15是用電子顯微鏡照片代替圖紙表示實施例1中得到的骨填 補劑。
圖16是用電子顯微鏡照片代替圖紙表示聚集后的實施例1中得 到的骨填補劑。
圖17是實施例1中得到的骨填補劑的燒結(jié)溫度與彎曲強度的關(guān) 系圖。
圖18是用微型X射線CT圖像代替圖紙表示實施例1中得到的 骨填補劑和現(xiàn)有的人工骨制品聚集時的狀況。圖18(A)表示本發(fā) 明的骨填補劑聚集的樣子，圖18 (B)表示現(xiàn)有的人工骨顆粒聚集 的樣子。圖18 (C)表示本發(fā)明的骨填補劑在冷凍管內(nèi)填充的樣子。 圖18 (D)表示現(xiàn)有的人工骨制品在冷凍管內(nèi)填充的樣子。
圖19 ( A) - (F)是用照片代替圖紙用于確認(rèn)本發(fā)明的骨填補劑 的細胞粘合性。圖19 (A)是無培養(yǎng)細胞的骨填補劑培養(yǎng)4天后的 骨填補劑的照片，圖19 ( B )是將成骨細胞類細胞抹MC3T3進行培養(yǎng)4天后的骨填補劑的照片，圖19 (C)是無培養(yǎng)細胞的骨填補劑 培養(yǎng)6天后經(jīng)堿性磷酸酶(ALP)染色的骨填補劑的照片，圖19(D) 是將成骨細胞類細胞林MC3T3進行培養(yǎng)6天后經(jīng)堿性磷酸酶染色的 骨填補劑的照片，圖19 (E)是無培養(yǎng)細胞的骨填補劑培養(yǎng)IO天后 經(jīng)堿性磷酸酶染色的骨填補劑的照片，圖19 (F)是將成骨細胞類細 胞林MC3T3進行培養(yǎng)IO天后經(jīng)堿性磷酸酶染色的骨填補劑的照片。 符號說明
1金屬模合模后形狀
2與注入口對應(yīng)的部分
3接合面
4楔形部
11骨填補劑
12突起部
13頂端部
21孑L部
22挖空部
23骨填補劑的厚度
31主體部
32頭部
33頭部
42腳部
43臺部
具體實施例方式
下面說明本發(fā)明的骨填補劑的制造方法。本發(fā)明的骨填補劑的制 造方法基本而言是具有突起部的骨填補劑的制造方法，其包含如下
工序?qū)⒑锈}類物質(zhì)的原材料及含有粘合劑的材料混合的混合工 序；用上述混合工序中得到的混合物，通過采用具有金屬模的注射成形機的注射成形，來得到具有規(guī)定形狀的成形體的成形工序；將 包含在上述成形工序中得到的成形體中的粘合劑除去，得到脫脂體 的脫粘合劑(脫脂)工序；以及，將上述脫粘合劑工序后的脫脂體 加熱，燒結(jié)得到燒結(jié)體的燒結(jié)工序。另外，還可以適當(dāng)含有用于對 成形體進行后處理的后處理工序等公知的工序。
用本發(fā)明的骨填補劑的制造方法獲得的各骨填補劑大小均 一 ，因 此即使使骨填補劑含有藥劑，也能給予適當(dāng)量的藥劑。此外，該骨 填補劑密度均勻且能控制大小，因此能維持各骨填補劑的強度，同 時在給予大量骨填補劑時能得到合適的空隙率。下面對骨填補劑制 造方法的各工序進4亍說明。
混合的工序。作為原料，優(yōu)選使用粉末原料。在混合工序中，將原 料粉末與粘合劑等輔材料混合，制成適于注射成形的形態(tài)。 [原料粉末的種類]
作為原料粉末，可列舉鈣類物質(zhì)。上述鈣類物質(zhì)有磷酸鈣類物質(zhì)、 碳酸釣類物質(zhì)、乳酸鈣以及葡萄糖酸鈣，其中，優(yōu)選磷酸鈣類物質(zhì) 或碳酸釣類物質(zhì)。作為原料粉末的磷酸鉤類物質(zhì)，更具體而言可列 舉羥磷灰石、碳酸化磷灰石、氟磷灰石、氯磷灰石、p -TCP、 a -TCP、 偏磷酸鈣、磷酸四鈣、磷酸氫鈣、二磷酸四氫鈣、焦磷酸鈣、它們 的鹽、它們的溶劑^^物和它們的二水合物等中的l種或2種以上， 其中優(yōu)選(3-TCP或羥磷灰石。另外，作為碳酸鈣類物質(zhì)，可列舉碳 酸4丐或碳酸氫鈣，其中優(yōu)選碳酸鈣。但是，原料粉末并不限于這些， 可適當(dāng)采用作為骨填補劑的原料使用的公知物質(zhì)。
原料粉末若過小，則需要大量的粘合劑以形成金屬模，所得骨填 補劑的物性下降。另一方面，若原料粉末過大，則有時原料粉末會 進入成形機的螺桿與缸套間的間隙而卡住或有時不能順利進行燒 結(jié)。在本發(fā)明中，基本而言進行粉末注射成形，但并不一定總是使用金屬粉末。因此，實驗的結(jié)果顯示，原料粉末的粒徑大小例如可
在0.01 lOOpm( 0.01 pm以上，100|tim以下。下同。)，優(yōu)選0.1pm~ 20pm。在通常的粉末冶金中，例如采用100pm左右大小的粉末。例 如，在日本專利特開2004-97259號公報(上述專利文獻1 )中采用 粒徑150pm以下的幾磷灰石粉(該公報的段落
)。但是，在 本發(fā)明中原料粉末與粘合劑混合，為了提高混合得到的混合物的流 動性、并提高燒結(jié)體的密度，優(yōu)選使用具有較小粒徑的原料粉末。 另一方面，由本發(fā)明制造的骨填補劑雖要具有某種程度的強度，但 可預(yù)測埋入體內(nèi)時會被破骨細胞等侵蝕。從這種觀點出發(fā)，可使粉 末的大小為0.1pm 50jim， 4尤選0.5pm~ 10pm。 [輔材料]
在混合工序中，將粘合劑等原材料以外的材料(1種或多種化合 物)與原材料混合。作為上述粘合劑，可列舉含有(曱基)丙烯酸 類樹脂、蠟潤滑劑、(優(yōu)選(曱基)丙烯酸類樹脂以外的熱塑性樹 脂)、以及含潤滑劑的材料。作為曱基丙烯酸類樹脂或丙烯酸類樹 脂，可列舉異丁烯烯酸樹脂或丙烯酸樹脂，具體可列舉甲基丙烯酸 正丁酯或曱基丙烯酸甲酯的聚合物、或曱基丙烯酸正丁酯和曱基丙 烯酸曱酯的共聚物。甲基丙烯酸類樹脂或丙烯酸類樹脂的分子量不 受特殊限制，可在不影響所得骨填補劑的物性的前提下作適當(dāng)調(diào)整， 例如，重均分子量為1 x 103~ 1 x 105。粘合劑中的甲基丙烯酸類樹 脂或丙烯酸類樹脂的含量沒有特殊限制，可在不影響所得骨填補劑 的物性的前提下作適當(dāng)調(diào)整，例如1重量％~50重量％。
作為蠟潤滑劑，可列舉熔點為40°C ~ IO(TC的蠟，優(yōu)選4(TC ~70 。C。作為具有上述熔點的蠟，例如可適當(dāng)采用公知的石蠟。通過使 用具有上述熔點的蠟，在注射成形時可使成形體易于從金屬模脫離。 而且，若采用熔點為60°C 65。C的蠟潤滑劑，則無需使金屬模充分 冷卻即可耳又出成形體，因而更理想。
作為蠟潤滑劑的例子，可列舉液體石蠟、三十碳六烯、異三十烷 等烴油；油酸、妥爾油以及異硬脂酸等高級脂肪酸；月桂醇、油醇、異硬脂醇以及辛基十二烷醇等高級醇；曱基聚硅氧烷、苯曱基聚硅 氧烷、曱基氬聚硅氧烷以及十曱基聚硅氧烷等硅油；肉豆蔻酸異丙 酯、棕櫚酸異丙酯、月桂酸己酯、油酸油酯、油酸癸酯、肉豆蔻酸 辛基十二烷基酯、二甲基辛酸十六烷基酯(hexyl decyl dimethyl octanoate )、鄰苯二曱酸二乙酯以及鄰苯二甲酸二 丁酯等酯；ff梨油、 山茶油、龜油、澳大利亞堅果油、玉米油、芝麻油、桃仁油、小麥 胚芽油、山茶花油、蓖麻油、亞麻籽油、紅花油、棉籽油、紫蘇子 油、大豆油、花生油、茶沖予油、相卩子油、米^泉油、萄^肓范油、杏^[二 油、橄欖油、胡蘿卜油、葡萄籽油、菜籽油、山茶油、荷荷葩油、 卯黃油、羊毛脂油以及貂油等動植物油類；甘油、二甘油、三甘油、 三辛酸甘油以及三異棕櫚酸甘油等甘油中的l種或2種以上。另外， 蠟潤滑劑的熔點可通過適當(dāng)調(diào)節(jié)上述原料的分子量或組成比來調(diào) 節(jié)。
蠟潤滑劑的分子量不受特殊限制，可在不影響所得骨填補劑的物 性的前提下作適當(dāng)調(diào)整，例如重均分子量為lxlo2~lxio6。粘合 劑中的蠟潤滑劑的含量沒有特殊限制，可在不影響所得骨填補劑的 物性的前^是下作適當(dāng)調(diào)節(jié)，例如1重量％~ 50重量％。
作為熱塑性樹脂，可使用聚縮醛樹脂、(曱基)丙烯酸樹脂、聚 烯烴樹脂、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物和聚乙烯醇縮丁醛中的任1種或 2種以上。但是，在本發(fā)明中，作為熱塑性樹脂，優(yōu)選具有(甲基) 丙烯酸酯樹脂和(甲基)丙烯酸類樹脂以外的樹脂。其中，優(yōu)選乙 烯-乙酸乙烯酯共聚物。
熱塑性樹脂的分子量不受特殊限制，可在不影響所得骨填補劑的 物性的前提下作適當(dāng)調(diào)整，例如重均分子量為lxl03~lxio5。粘 合劑中的熱塑性樹脂的含量沒有特殊限制，可在不影響所得骨填補 劑的物性的前提下適當(dāng)調(diào)整，例如1重量％~50重量％。
作為潤滑劑(蠟潤滑劑以外的潤滑劑)，可列舉硬脂酸、硬脂酸 的鹽、硬脂酸或其鹽的水合物、CrC5烷基硬脂酸(CrC5烷基表示 碳原子數(shù)為1 5的烷基。下同)中的1種或2種以上；或它們中的任一種和聚乙二醇或聚甘油。粘合劑中的潤滑劑含量沒有特殊限制， 可在不影響所得骨填補劑的物性的前提下作適當(dāng)調(diào)整，例如0.5重量
%~15重量％。由于采用上述潤滑劑，因而易于從金屬模取出成形
體。另外，潤滑劑也可作為分散劑起作用。
作為其他構(gòu)成粘合劑的化合物，可列舉鄰苯二曱酸酯類。關(guān)于鄰 苯二曱酸酯類，據(jù)報道其對人體有危險性，但在本發(fā)明的優(yōu)選方式 中使粘合劑完全熱分解，因此在粘合劑中也可含有這種生物體親和 性不佳的化合物。作為上述鄰苯二曱酸酯類，可列舉鄰苯二曱酸二
丁酯等CrCs烷基鄰苯二甲酸酯。如后述實施例所證實，使用上述鄰 苯二曱酸酯類可得到具有更好物性的骨填補劑。
鄰苯二曱酸酯類的分子量沒有特殊限制，可在不影響所得骨填補 劑的物性的前提下作適當(dāng)調(diào)整，例如重均分子量lxlo4~lxio7。 鄰苯二曱酸酯類以揮發(fā)性不佳為宜。粘合劑中的鄰苯二甲酸酯類的
含量沒有特殊限制，可在不影響所得骨填補劑的物性的前提下作適 當(dāng)調(diào)整，例如0重量％~20重量％，優(yōu)選0.5重量％~ 15重量％。 [粘合劑的添加量]
粘合劑在后續(xù)的脫粘合劑工序等中通過熱分解等被除去。即，粘 合劑存在過的部分基本上成為空隙。因此，通過控制原料中添加的 粘合劑的量，即可調(diào)節(jié)所得骨填補劑的空隙率和強度。但在一般情 況下，所需粘合劑的量為填埋原材料的粒子間的足夠量。這是因為 若粘合劑的添加量少，則無法得到合適的流動性，依次導(dǎo)致缺料或 縮凹變形等注射成形缺陷、所得成形體的形狀或密度不均。因此， 作為粘合劑的添加量，以原材料的重量為100重量份時，粘合劑的 添加量為10重量份~ 100重量份，也可以是20重量份 50重量份。 原材料和粘合劑中的粘合劑的配比為25容積％~ 70容積％,優(yōu)選30 容積％ ~ 55容積％，更優(yōu)選35容積％ ~ 45容積％。
原材料和含有粘合劑的材料中含有玻璃成分的骨填補劑的制造方法。作為玻璃成分，可適當(dāng)采用以二氧化硅為主要成分的石英玻璃； 含有5重量％~20重量％8203的硼硅玻璃；含有5重量％~40重量 %鉛的鉛玻璃；含有5重量％~30重量％鉀的鉀玻璃；含有氟化鈉、 氟化鋁和氟化鍶的氟鋁硅酸鹽玻璃；或在這些玻璃中適當(dāng)混入硼酸、 氧化鑭、氧化釓、氧化鈮、氧化鋯或鋇中的1種或2種以上的玻璃。 通過加入玻璃成分，可降低燒結(jié)體的燒結(jié)性，在燒結(jié)體的表面或內(nèi) 部形成微小的裂縫或孔，從而能得到適合培養(yǎng)細胞的骨填補劑。另 一方面，認(rèn)為玻璃成分使骨填補劑的強度提高，因此即使產(chǎn)生裂縫 或孔，也能得到具有良好強度的骨填補劑。作為玻璃成分，可采用 鈦、鈦合金、鈷-鉻合金、不銹鋼、鋁、鋯，也可將它們適量混合。 可適當(dāng)使用磷灰石(Ca1Q ( P04 ) 60 )等磷酸鈣類結(jié)晶或 CaO-Si02-MgO-P205類結(jié)晶化玻璃等磷酸鈣類結(jié)晶化玻璃。
關(guān)于玻璃成分的添加量，可根據(jù)所需的骨填補劑的物性來適當(dāng)調(diào) 整，例如，以原材料的重量為100重量份時，玻璃成分的添加量可 為1重量份 20重量份，也可以是2重量份~ IO重量份。混合材料 中的玻璃成分的配比為1容積％ ~ 20容積％,優(yōu)選2容積％ ~ 10容 積％,更優(yōu)選3容積％ ~ 10容積％。
質(zhì)的原材料和含有粘合劑的材料"，和鹽分或糖分(優(yōu)選鹽分)。 通過加入鹽分或糖分，可降低燒結(jié)體的燒結(jié)性，使燒結(jié)體的表面或 內(nèi)部形成微小的裂縫或孔，從而能得到適合用于培養(yǎng)細胞的骨填補 劑。另外，在得到骨填補劑后，將之浸漬于水等中，以除去鹽分或 糖分，得到多孔質(zhì)的骨填補劑，從而能得到適合用于培養(yǎng)細胞的骨 填補劑。鹽分和糖分可適當(dāng)釆用公知的鹽分或糖分。作為鹽分，優(yōu) 選在水等中溶解且在粘合劑被熱分解的溫度下不發(fā)生熱分解的鹽 分，特別優(yōu)選無機鹽，具體可列舉氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣或碳酸 鈣。作為糖分，可適當(dāng)采用蔗糖、葡萄糖、果糖等公知的糖分。另 外，本發(fā)明的優(yōu)選方式為，與鹽分或糖分分開或與鹽分或糖分同時適當(dāng)含有熱分解性成分的方式。熱分解性成分指在混合工序中不發(fā) 生熱分解但在成形工序或燒結(jié)工序或在高于成形工序或燒結(jié)工序的 加熱溫度的高溫下發(fā)生熱分解的成分。若適當(dāng)含有這樣的熱分解成 分，則在成形中、燒結(jié)中、燒結(jié)后的任一階段發(fā)生熱分解，從而能 得到具有適當(dāng)空隙的骨填補劑。
關(guān)于鹽分或糖分的添加量，可根據(jù)所需的骨填補劑的物性作適當(dāng)
調(diào)整，例如，以原材料的重量為100重量份時，鹽分或糖分的添加 量為1重量份~20重量份，也可以是2重量份~ 10重量份?；旌喜?料中的鹽分或糖分的配比可為1容積％~30容積％,優(yōu)選2容積％~ 20容積％,更優(yōu)選3容積％~ 10容積％。另外，若添加熱分解性成 分，則最好添加同樣量的鹽分或糖分。 [混合]
在混合工序中，將上述原料粉末和粘合劑等混合。由此得到作為 注射成形用材料的混合物。若原料粉末沒有混合均勻，則會產(chǎn)生成 形體形狀尺寸不佳等問題。特別是從使藥物的給藥量 一 定的觀點出 發(fā)，由本發(fā)明的制造方法得到的骨填補劑優(yōu)選形狀一定，因此希望 盡可能將原料混合均勻。
混合工序中的溫度可根據(jù)粘合劑的種類等作適當(dāng)調(diào)整，但若溫度 低，則無法混合，若溫度高，則粘合劑發(fā)生熱分解，因此溫度可為 110°C~ 240°C,優(yōu)選130°C ~ 190°C,更優(yōu)選140°C ~ 160°C 。
關(guān)于混合工序的時間，為了將原料均勻混合需較長時間，但若時 間過長，則在混合中粘合劑有時會發(fā)生熱分解，因此可根據(jù)粘合劑 的種類等來適當(dāng)調(diào)整，如30分鐘 5小時，也可以是45分鐘 1.5 小時。
作為混合工序中的混合機，可適當(dāng)4吏用例如加壓式捏合機、單軸 或雙軸的擠出式捏合機。由本發(fā)明得到的骨填補劑由于是考慮用于 移植的藥劑，因此最好避免因混合機的葉片磨損而混入雜質(zhì)。從這 樣的觀點出發(fā)，混合機的葉片以采用高硬度的葉片為宜，優(yōu)選采用 形成T i n涂層等表面保護層那樣的經(jīng)表面處理的葉片?；旌瞎ば蚶缛缦虏僮骷纯?。首先，將捏合機加熱至事先設(shè)定好 的溫度后，將熔點高的粘合劑先投入混合機。粘合劑熔融至一定程 度，投入原料粉末。然后，將熔點低的粘合劑和原料粉末一起投入
混合機，投入1/2容積量~ 4/5容積量的原料后，投入DBP (鄰苯二 曱酸二丁酯)等低揮發(fā)成分，然后投入剩余的原材料。這樣，通過 先將高熔點的粘合劑(高粘性)與原料粉末混合，可獲得分散粉末 的凝集的效果。
具體而言，將(甲基)丙烯酸類樹脂和上述乙烯-乙酸乙烯酯共 聚物投入混合機，邊混合邊向混合機中投入上述原材料、上述石蠟 以及上述硬脂酸，邊混合邊向混合機中投入上述鄰苯二曱酸二丁酯。 通過如此進行混合，即可得到作為注射成形用材料的混合物。
但在本發(fā)明中，由于所得骨填補劑將來要與骨進行置換，因此可 在成形品中形成微小的裂縫，以促進與骨的置換。從這樣的觀點出 發(fā)，例如可使混合時間為15分鐘~ 30分鐘，混合溫度為80°C ~ 100 。C。
成形工序是通過注射成形來得到具有規(guī)定形狀的成形體的工序。 骨填補劑優(yōu)選為具有從正四面體的中心向各頂點的方向延伸的4個 突起部的形狀。以下，對用于制造這種骨填補劑的金屬模的例子進
模的例子的示意圖。圖中，1表示金屬模合模后的形狀，2表示與注 入口對應(yīng)的部分，3表示接合面，4表示楔形部。上述金屬模具有: 設(shè)有用于注入材料的注入口(澆口)的固定金屬模；和在注入材料 時與上述固定金屬模接觸而成形后與上述固定金屬模分離的可動金 屬模的金屬模。上述金屬模可為如下金屬模，即金屬模的注入口 位于一個突起部的頂端部位，從而^[吏注入成形材津+乂人注入口注入， 固定金屬模和可動金屬模的接合面(分型面)位于其余的3個突起 部，其中可動金屬模在上述剩余的3個突起部的內(nèi)側(cè)設(shè)有突出銷(推 桿)。"剩余的3個突起部的內(nèi)側(cè)"是指從圖1 (A)的下方朝向符號2—方的方向。
上述任一骨填補劑的制造方法，其中，上述骨填補劑為具有多個 (例如4個以上)突起部的形狀，上述金屬模具有設(shè)有用于注入 材料的注入口的固定金屬模和在注入材料時與上述固定金屬模接觸 而成形后與上述固定金屬模分離的可動金屬模，在上述固定金屬模 中，為了從上述多個突起部中的某一突起部的頂端部注入注射成形 用材料，而在上述頂端部設(shè)置上述注入口 ，上述固定金屬模與上述 可動金屬模的接合面具有從端面向接合面的中心方向逐漸向固定金 屬模的注入口方向傾斜的傾斜面，上述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī) 定楔形部的凹部。如圖1所示，設(shè)于與突起部對應(yīng)的部位的接合面 并非水平，而是越靠近中心越向注入口方向傾斜。
通過1次成形很難制造骨填補劑。本領(lǐng)域的技術(shù)人員若采用注射 成形，則會考慮先形成各突起部再將它們組合的制造方法。但是， 本發(fā)明的骨填補劑很微小，很難分別制造各突起部后再將它們組合。 因此，通過在注射成形時的金屬模上下功夫，用1次注射成形即可 得到具有多個突起部的注射體。例如，設(shè)計出上述固定金屬模與上 述可動金屬模的接合面具有從端面向中心方向逐漸向注入口方向傾 斜的傾斜面這樣的具有三維接合面的金屬模，易于從固定金屬模取 出成形體。例如，當(dāng)采用接合面是平面的分型金屬模時，成形體殘 留于固定金屬模的可能性高，此時很難從金屬模取出成形體。而且， 很難完全除去金屬模上的堵塞的成形體。但是，若采用上述金屬模， 則由于接合面傾斜，從而降低了成形體殘留于固定金屬模的可能性。
本發(fā)明中使用的金屬模的優(yōu)選方式為楔形部(4 )的高度為1 pm ~ 1 x 102,(優(yōu)選5阿~ 2 x 10,或5,~ 1 x IO阿)。關(guān)于楔形部 的形狀，只要起到楔形部的作用即可，沒有特殊限制，可采用公知 的形狀。在圖1中，楔形部的數(shù)量設(shè)為3(位于與各突起部的頂端對 應(yīng)的部位)，但楔形部的數(shù)量和位置不受特殊限制，也可設(shè)在突起 部的頂端部以外的部分(例如突起部的主體部)。若成形體殘留于 固定金屬模，則無法制造骨填補劑。該楔形部部分發(fā)揮像可動金屬模的楔形部的作用，因而在取下金屬模時能防止成形體殘留于固定 金屬模。
上述任一種骨填補劑的制造方法中，本發(fā)明使用的金屬模的優(yōu)選
方式為上述可動金屬模具有深lpm~ 2 x lOjim (優(yōu)選5pm~ 1 x 10pm)的1個或多個凹槽(優(yōu)選平行凹槽或螺旋形凹槽)。若成形 體殘留于固定金屬模，則無法制造骨填補劑。該凹槽使可動金屬模 部分的表面積增加，因而在取下金屬模時能防止成形體殘留于固定 金屬模。上述凹槽例如可設(shè)在突起部的主體部分。
上述任 一 骨填補劑的制造方法中，本發(fā)明使用的優(yōu)選方式為上述 骨填補劑為具有4個突起部的形狀，在上述可動金屬模側(cè)設(shè)置位于 突起部內(nèi)側(cè)的突出銷。與金屬模分離在注射成形中非常重要。在該 方式中，由于在突起部的內(nèi)側(cè)(從一個突起部的頂端的相反方向向 中心或該一個突起部的頂端方向移動)設(shè)置突出銷，因而能有效地 取出成形體。
上述任一骨填補劑的制造方法中，本發(fā)明采用的優(yōu)選方式為上 述骨填補劑為具有多個突起部的形狀，上述金屬模具有固定金屬 模和在注入材料時與上述固定金屬模接觸而成形后與上述固定金屬
模分離的可動金屬模，注入注射成形用材料的注入口位于上述固定 金屬模與上述可動金屬模的接合面，上述固定金屬模與上述可動金
屬^t的接合面具有乂人端面向中心方向逐漸向上述骨填補劑的中心方 向傾斜的傾斜面，上述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī)定楔形部的凹槽 部。通過在注射成形時的金屬模上下功夫，用1次注射成形即可得
到具有多個突起部的成形體。
在成形工序中，優(yōu)選用注射成形才幾進行注射成形。注射成形機沒 有特殊限制，可適當(dāng)使用公知的注射成形機。作為注射成形機，可 列舉立式或臥式；高壓式、中壓式或低壓式；柱塞式或螺桿式等， 但是，為了用上述磷酸鈣類物質(zhì)制造具有微小突起部的骨填補劑， 可優(yōu)選使用橫型螺桿式(優(yōu)選高壓式)的注射成形機。但是，當(dāng)螺 桿.缸套磨損等產(chǎn)生的雜質(zhì)混入成形體，若是普通的成形體，則不會有什么特殊問題，但本發(fā)明的骨填補劑旨在投向生物體內(nèi)，因此
有可能產(chǎn)生問題。為此，優(yōu)選在螺桿的表面設(shè)置TiN涂層等磨損保 護層。
脫粘合劑工序是將上述成形工序中得到的成形體中含有的粘合 劑除去以得到脫脂體的工序。脫粘合劑工序也稱為脫脂工序。若在 該脫粘合劑工序中沒有充分除去粘合劑，則在后續(xù)的燒結(jié)工序中有 時會在成形體上產(chǎn)生龜裂或出現(xiàn)氣孔。在脫脂工序中，希望在不產(chǎn) 生變形或裂縫等缺陷的前提下完成脫粘合劑。用于除去粘合劑的方 法有升華法、自然干燥法、溶劑提取法和加熱脫脂法等，優(yōu)選加熱 脫脂法。加熱脫脂法包括在大氣環(huán)境、減壓環(huán)境、加壓環(huán)境以及氣 體環(huán)境下進行的方法等，優(yōu)選在大氣環(huán)境下加熱進行脫脂。在脫脂 爐中投入成形體時，優(yōu)選載置于陶瓷定位器(多孔質(zhì)、致密質(zhì))。 當(dāng)成形體形狀大時(厚度厚)，優(yōu)選氧化鋁等多孔質(zhì)定位器。最好 要防止定位器污染、避免因加熱使來自定位器材質(zhì)的成分變?yōu)殡s質(zhì)。
關(guān)于脫脂工序，例如可根據(jù)粘合劑中含有的樹脂的熱分解溫度而 具有多階段的升溫時間和溫度保持時間。特別是使熱分解溫度低的 樹脂有效地?zé)岱纸饽芴岣邿Y(jié)性。本發(fā)明由于按上述方法提高溫度， 因而能使熱分解溫度低的樹脂有效地?zé)岱纸狻Ｔ诒景l(fā)明的優(yōu)選方式 中，盡管骨填補劑投向生物體，也可以在粘合劑中含有生物體親和 性不佳的化合物。這種化合物特別是以熔點低的粘合劑為多數(shù)。因 此，在加熱工序中，為了使熔點低的粘合劑完全地蒸發(fā)，優(yōu)選較緩 慢地提高溫度，具體而言，在到達110°C ~ 300。C的第一溫度保持時 間之前(優(yōu)選在到達230。C 250。C之前)，以rC/小時~ 3 x 102°C/ 小時的速度升溫，優(yōu)選以1 x 10。C/小時~2x 102匸/小時的速度升溫， 更優(yōu)選以2x 10。C/小時~ 5 x 10。C/小時的速度升溫，也可以以3 x 10 。C/小時~4x 10。C/小時的速度升溫。溫度保持工序例如為2x10分 4中~ 5小時， <尤選3xl0分4中~ 2小時。燒結(jié)工序是用于對脫粘合劑工序后的成形體進行加熱的工序。例
如，在日本專利特開2004-97259號公報(上述專利文獻1 )中，在 1250。C下燒結(jié)1小時(該公報的段落
)。但在本發(fā)明的優(yōu)選方 式中，從大氣環(huán)境加熱至最高溫度為9x 102°C ~ 1.1 x io3°C。這是因 為若采用a-TCP等原材料，則能有效地轉(zhuǎn)變?yōu)?3-TCP。高溫保持時 間例如為5 x 10"小時~ 3小時。另夕卜，燒結(jié)工序中，在加熱工序(以 及溫度保持工序)后，通常進行冷卻工序。冷卻工序只要適當(dāng)采用 公知的冷卻方法即可。包含冷卻時間在內(nèi)的燒結(jié)時間例如為6小時~ 5 x 10小時，優(yōu)選1 x 10小時~ 3 x 10小時。成形溫度可為1 x io2°C ~ 1.5xl02°C。金屬模溫度可為1 x 10°C ~3x l(TC。 [后處理工序]
后處理工序是對燒結(jié)后的成形體進行后處理的可選擇性工序。具 體而言，可列舉消除推桿痕或?qū)Τ尚误w進行清洗。
本發(fā)明的優(yōu)選方式為，除原料粉末外，添加公知的藥劑。這樣， 由于本發(fā)明制造的骨填補劑的體積大致 一 樣，因此骨填補劑能用作 合適的藥劑的載體。如此添加的藥劑優(yōu)選即使在高溫下也不有損活 性的藥劑。
本發(fā)明的另 一 優(yōu)選實施方式為在制得的骨填補劑(或燒結(jié)工序后 得到的燒結(jié)體)中適當(dāng)含浸或涂布藥劑。作為藥劑的涂布方法，可 列舉將藥劑溶解于公知的藥學(xué)上允許的稀釋劑(溶劑)中得到醫(yī) 藥組合物，用該醫(yī)藥組合物進行浸漬涂布、噴霧涂布或旋轉(zhuǎn)涂布。 其中，優(yōu)選浸漬涂布。若浸漬涂布藥劑，則藥劑會滲透到骨填補劑 的表面或內(nèi)部。即，本發(fā)明還能提供含浸或涂布有規(guī)定藥劑的骨填 補劑。
本發(fā)明的骨填補劑的優(yōu)選方式為具備骨生成 軟骨形成促進劑 (含有軟骨形成促進因子)、關(guān)節(jié)疾病治療劑、骨'軟骨疾病預(yù)防
和/或治療劑、骨再生劑、骨吸收抑制劑物質(zhì)、血管新生促進劑、抗 菌劑、抗生素或抗癌劑作為上述藥劑的上述骨填補劑。本發(fā)明的骨填補劑的優(yōu)選方式為具備下述通式(IV)表示的噻吩并吲唑衍生物 作為上述藥劑的上述骨填補劑。式(IV)所示的p塞吩并吲唑衍生物 (4, 5-二氫-l-曱基-lH-噻吩并[3, 4-g]。引唑衍生物)例如可根據(jù)日 本專利特開2002-356419號公報中記載的方法來制造。關(guān)于藥劑，在 本發(fā)明的骨填補劑中優(yōu)選含有可獲得特定藥效的有效量的藥劑。即， 在本發(fā)明中，由于可采用公知的藥劑，因此可適當(dāng)調(diào)節(jié)該藥劑的含 量以給予能使該藥劑發(fā)揮特定作用的必要的量(有效量)。
式(IV )中，R"表示羧酰胺基(-CH ( NH2) ( C02H ) ) 、 -CH (NH2) ( S03H ) 、 -CH ( NH2) ( S02NHRD ) 、 -CH ( NH2) ( PO (NH2) OH)以及-CH (NH2) ( PO ( OR11 ) OH )(式中R"表示碳 原子數(shù)為1~5的直鏈烷基。)，其中最優(yōu)選羧酰胺基。
骨生成*軟骨形成促進劑只要是能促進骨生成或軟骨形成的制劑 即可，可適當(dāng)利用公知的制劑。作為具體的軟骨形成促進劑，可列 舉國際公開公報2002年087620號中公開的2-[l畫(2, 2畫二乙氧基畫 乙基)-3- (3-對曱苯基-脲基)-2, 3-二氫-lH-吲咮-3-基]-N-對曱苯基 -乙酰胺。作為軟骨形成促進劑，可列舉骨生成促進因子。骨生成促 進因子一般#皮稱為BMP( Bone morphogenetic protein:骨形成蛋白)， 該BMP從細胞外作用于未分化的間充質(zhì)細胞，將其遺傳性狀分化為 軟骨細胞和造骨細胞，是誘導(dǎo)軟骨、誘導(dǎo)骨的物質(zhì)。作為骨生成促 進因子，可列舉BMP1 ~ 13。在本發(fā)明中用BMP作為藥劑時的BMP， 可以是由基因重組或從Dunn骨肉瘤分離、純化而得到的BMP(Takaoka，K.，BiomedicalResearch，2(5)466-471(1981))中的任一種, 可用公知的制造方法來獲得。 [關(guān)節(jié)疾病治療劑]
作為關(guān)節(jié)疾病治療劑，可列舉p3 8MAP激酶抑制劑(WO00/64894 等中記載的p塞唑類化合物等)；基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(MMPI); 潑尼松龍、氫化可的松、曱基潑尼松龍、地塞倍他米松、倍他米松 等抗炎癥甾體制劑；以及吲哚美辛、雙氯芬酸、氯索洛芬、布洛芬、 吡羅昔康、舒林酸等非甾體類消炎鎮(zhèn)痛劑。
作為骨 軟骨疾病預(yù)防 治療劑，包括下述物質(zhì)中的任1種或2 種以上的混合物可列舉前列腺素Al衍生物、維生素D衍生物、 維生素K2衍生物、二十碳五烯酸衍生物、千基膦酸、二膦酸衍生物、 性激素書f生物、酚磺酞書f生物、苯并噻喃或苯并慮平(benzothiepine ) 衍生物、噻。分并吲哇書f生物、四烯曱萘醌(Menatetrenone )衍生物、 賽菊芋黃素衍生物等非肽類骨形成促進作用物質(zhì)；和難溶性肽類骨 形成促進物質(zhì)中的任1種或2種以上的混合物。它們均可用公知的 方法來獲得。骨 軟骨疾病預(yù)防劑是預(yù)防患上骨 軟骨疾病的制劑 或防止骨 軟骨疾病發(fā)展的制劑中的任一者或兩者。
作為骨再生劑，可列舉鈣調(diào)蛋白、放線菌素D、環(huán)孢菌素A、硫 酸葡糖胺、鹽酸葡糖胺、骨髓提取物、磷酸鈣、乳酸/羥乙酸/s-己 內(nèi)酯共聚物、富含血小板血漿或人骨髓間充質(zhì)細胞中的任1種或2 種以上的混合物。它們均可由知的方法來獲得。
作為骨吸收抑制物質(zhì)，可列舉雌激素、降鈣素以及二磷酸鹽中的 任1種或2種以上的混合物。它們均可由7>知的方法來獲得。 [血管新生促進劑]
作為血管新生促進劑，可列舉靛藍胭脂紅、4-[N-甲基-N. (2-苯 基乙基)氨基]-1-(3, 5-二曱基-4-丙?；被綍貂?哌啶、4(5H-7，8, 9， 10-四氫-5, 7, 7, 10, 10-五曱基苯并[e]萘并[2, 3-b][1, 4]
二氮雜卓-i3-基)苯曱酸、激活蛋白c、烏洛騰生n樣肽化合物、成
纖維細胞生長因子(FGF)(包含堿性FGF和酸性FGF)、血管內(nèi) 皮細胞生長因子(VEGF)(優(yōu)選血小板衍生因子)、肝細胞生長因 子(HGF)、促血管生成素(包含促血管生成素-l和促血管生成素 -2)、血小板源性生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子(IGF) 或平滑肌胚胎型肌球蛋白重鏈(SMemb)的1種或2種以上的混合 物。其中，優(yōu)選成纖維細胞生長因子(Hockel， M.等.，Arch. Surg., No.l28， p.423， 1993 )。作為成纖維細胞生長因子，優(yōu)選堿性成纖維 細胞生長因子(bFGF)，更具體而言，可列舉曲弗明(基因重組)。 即，本發(fā)明的骨填補劑的優(yōu)選方式之一為具備曲弗明、其鹽、其溶 劑化物、或其前藥作為上述藥劑的上述骨填補劑。"其鹽"指曲弗 明的鹽，具體的鹽與之前說明的鹽相同。"其溶劑化物"指曲弗明 的溶劑化物，具體的溶劑化物與之前說明的溶劑化物相同。"其前 藥"指曲弗明的前藥，給藥后在生物體內(nèi)等轉(zhuǎn)變?yōu)榍ッ鳌⑵潆婋x 物(離子)或其鹽等的制劑。具體而言，可列舉具有氨基等保護基 且在生物體內(nèi)去保護基后具有與曲氟明同樣功能的物質(zhì)。 [抗菌劑或抗生素]
作為抗菌劑或抗生素，可適當(dāng)采用公知的抗菌劑和抗生素。作為 具體的抗菌劑或抗生素，可列舉磺胺醋酰(sulfacetamide)、磺胺甲 二唑(sulfamethizol)、磺胺二曱基嘧咬(sulfadimidine)、磺胺曱 基嘧啶(sulfamerazine )、磺胺嘧啶(sulfadiazine)等磺胺制劑；氯 霉素(chloramphenicol: CP)、曱砜霉素(thiamphenicol)等氯霉素 類抗菌劑；氧氟沙星(ofloxacin: OFLX )、環(huán)丙沙星(ciprofloxacin: CPFX)、恩氟沙星(enrofloxacin)、洛美沙星(lomefloxaxin: LFLX )、 ,氟沙星(mfloxacin)、左氧氟沙星(levofloxacin: LVFX)、氟羅 沙星(fleroxacin: FLRX)、那氟沙星(nadifloxacin: NDFX)、諾 氟沙星(norfloxacin: NFLX)、司帕沙星(sparfloxacin: SPFX)等 會啉酮類抗菌劑；夫西地酸(fusidic acid: FA );夫沙芬凈(fusafungine );福賜美仙(fosfomycin: FOM );莫匹羅星(mupirocin: MUP); 溴莫普林(brodimoprim );地紅霉素(dirithromycin ); 芐基青霉素(benzylpenicillin: PCG )、青霉素G '普魯卡因(penicillin G procaine)、千基青霉素 苯星青霉素(千基青霉素苯星青霉素鹽， benzathine penicillin )、 苯氧曱基青霉素(phenoxymethylpenicillin; 青霉素V)、甲氧西林(methicillin)、氨節(jié)青霉素(ampicillin: ABPC)、氯唑西林(cloxacillin: MCIPC )、羧千青霉素(carbenicillin )、 匹氨西林(pivampicillin: PVPC )、阿莫西林(AMPC )、酞氨,青 霉素(talampicilliln: TAPC )、巴氨西林(bacampicillin: BAPC )、 替卡西林(ticarcillin: TIPC )、阿洛西林(azlocillin )、美洛西林 (mezlocillin)、 匹美西林(pivmecillinam: PMPC )、艱拉西林 (piperacillin : PIPC )、 阿莫西林畫克拉維酸(amoxicillin : AMPC/clavulanic-acid: CVA; co-amoxiclav )、阿巾白西林(apalcillin )、 替莫西林(temocillin )、替卡西林國克拉維酸(ticarcillin/clavulanic acid: CVA)、氨爺青霉素-舒巴坦(ampicillin: ABPC/sulbactam: SBT)、 舒他西林(sultamicillin: SBTPC )、哌拉西林-他佐巴坦(piperacillin: PIPC/tazobactam: TAZ )等青霉素類抗生素;鏈霉素(streptomycin: SM)等鏈霉素類抗生素；氯四環(huán)素(chlortetracycline )、金霉素 (aureomycin )、 氯霉素(chloramphenicol : CP ) 、 土霉素 (oxytetracycline: OTC )、去甲基氯四環(huán)素(demethylchlortetracycline、 demeclocycline 、 ledermycin®)、賴曱環(huán)素(lymecycline)、 多西 環(huán)素(doxycycline: DOXY)、米諾環(huán)素(minocycline: MINO)等 四環(huán)素類4元生素；殺斤霉素(neomycin)、 大》見霉素(spectinomycin: SPCM)、慶大霉素(gentamycin: GM)、妥布霉素(tobramycin: TOB)、阿米卡星(amikacin: AMK)、小諾霉素(mic腦omicin: MCR)、異帕米星(isepamicin: ISP )、阿貝卡星(arbekacin: ABK) 等氨基糖苷類抗生素；紅霉素(erythromycin: EM)、乙酰螺旋霉素 (spiramycin: SPM)、羅紅霉素(roxithromycin)、阿奇紅霉素 (azithromycin: AZM)、麥迪霉素(midecamycin: MDM)、克拉紅霉素(clarithromycin: CAM)等大環(huán)內(nèi)酯類抗生素；萬古霉素
(vancomycin: VCM )、替考拉寧(teicoplanin: TEIC )等糖肽類抗 生素；粘菌素(colistin: CL )等多肽類抗生素；維吉尼霉素
(virginiamycin )、普那霉素(pristinamycin )等鏈陽菌素類抗生素； 克林霉素(clindamycin: CLDM)等林可霉素類抗生素；頭孢氨節(jié)
(cephalexin: CEX )、頭孢唑啉(cefazolin: CEZ )、頭孑包才立定(cefradine: CED)、頭孢羥氨爺(cefadroxil: CDX)、頭孢孟多(cefamandole: CMD )、頭孢吹辛(cefuroxime: CXM )、頭孢克洛(cefclor: CCL )、 頭孢p塞將(cefotaxime: CTX)、頭孢磺啶(cefsulodin: CFS)、頭 孢哌酮(cefperazone)、頭孢替安(cefotiam: CTM)、頭孢曲松
(ceftriaxone: CTRX)、頭孢曱將(cefmenoxime: CMX)、頭孢他 口定(ceftazidime: CAZ) 、 ceftiroxime、 頭孑包尼西(cefonicid)、 頭 孢匹胺(cefpiramide: CPM )、頭孢派酮-舒巴坦(cefoperazone: CPZ/sulbactam: SBT)、頭孢泊肝(cefpodoxime: CPDX)、頭孢地 口秦(cefozidime )、頭孢地尼(cefdinir: CFDN )、頭孢他美(cefetamet: CEMT)、頭孢匹羅(cefpirome: CPR)、頭孢丙烯(cefprozil)、 頭孢丁烯(ceftibufen)、頭孢吡肟(cefepime: CFPM)等頭孢菌素 類抗生素；頭孢西丁 (cefoxitin: CFX)、頭孢美唑(cefmetazole: CMZ)、頭孢替坦(cefotetan: CTT)等頭霉素類抗生素；拉氧頭孢
(latamoxef: LMOX)、氟氧頭孢(flomoxef: FMOX)等氧頭孢烯 類抗生素；亞胺培南國西司他丁 (imipenem: IPM/cilastatin: CS;泰 能®)等碳青霉烯類抗生素；氨曲南(aztreonam: AZT)等單環(huán) 內(nèi)酰胺類抗生素；氯拉卡比(loracarbef; LCBF )等碳頭孢烯類抗生 素；巾白尼i咅南"咅4也米隆(panipenem: PAPM/betamipron: BP)等碳 青霉烯類抗生素；泰利霉素(telithromycin: TEL)等酮內(nèi)酯類抗生 素中的l種或2種以上適當(dāng)混合的混合物。 [4元癌劑]
抗癌劑是用于治療或預(yù)防癌癥的藥物?？蛇m當(dāng)采用公知的抗癌 劑。具體而言，可列舉OK-432 (商品名Picibanil)等抗癌溶鏈菌制劑；云芝多糖、香菇多糖、裂殖菌多糖、西索菲蘭等抗癌多糖；絲 裂霉素C(商品名Mitomycin等)、放線菌素D(商品名Cosmegen )、 鹽酸博來霉素(商品名BLEO)、硫酸博來霉素(商品名BLEOS)、 鹽酸柔紅霉素(商品名Daunomycin)、鹽酸阿霉素(商品名Adriacin)、 新制癌菌素(商品名Neocarzinostatin)、鹽酸阿柔比星(商品名 Aclacinon)或鹽酸表柔比星(商品名Pharmorubicin )等抗癌抗生素； 長春堿等有絲分裂抑制劑；順鉑、卡鉑以及環(huán)磷酰胺等烷化劑；例 如5-氟尿嘧咬、阿糖胞苷和羥基尿(hydroxyurea) 、 N-{5-[N- (3, 4-二氫-2-甲基-4-氧代喹唑啉-6-基甲基)-N-甲氨基]-2-噻吩曱酰 基》-L-谷氨酸等抗代謝劑；阿霉素、博來霉素等抗癌抗生素；例如天 門冬酰胺酶等酶；依托泊苷等拓樸異構(gòu)酶抑制劑；干擾素等生物反 應(yīng)修飾劑；"NOLVADEX ，，(三苯氧胺)等抗雌激素劑；
"CASODEX"等抗雄激素物質(zhì)；氟尿嘧啶、替加氟、替加氟.尿嘧 啶以及曱氨喋呤等代謝拮抗劑；長春新堿(vincistine)等植物堿； 絲裂霉素C、放線菌素D、鹽酸博來霉素、硫酸博來霉素、鹽酸柔 紅霉素、鹽酸阿霉素、新制癌菌素、鹽酸阿柔比星、阿克拉霉素和 鹽酸表柔比星等抗癌抗生素；環(huán)三磷漆-鉑絡(luò)合物復(fù)合體(cyclotri phosphazene-platinum complex )、順柏4自絡(luò)合物復(fù)合體等柏絡(luò)合物。 另外，由于期待本發(fā)明的骨填補劑在生物體內(nèi)促進與骨組織的置 換，因此可在骨填補劑中含浸或在表面涂布含有特定多肽或基因的 藥劑。作為這樣的多肽或基因，可列舉堿性成纖維細胞生長因子
(bFGF)、血小板衍生的生長因子(PDGF)、胰島素、胰島素樣生 長因子(IGF)、肝細胞生長因子(HGF)、膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng) 因子(GDNF)、神經(jīng)營養(yǎng)因子(NF)、激素、細胞因子、骨形成 因子(BMP)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)、血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF) 等。其中，優(yōu)選促進血管新生和/或骨形成的生長因子。作為這樣的 生長因子，可列舉例如骨形成因子(BMP)、骨生長因子(BGF)、 血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)。具體而 言，可列舉在日本特許第3713290號中公開的的calponin基因(一種鈣結(jié)合蛋白)等。關(guān)于基因，可在骨填補劑中含有對于基因治療 有效的量?；蚩芍苯?棵基因)或以膠束狀或以轉(zhuǎn)化到病毒載體 等公知載體中的重組載體的形式含有。另外，藥劑可以是公知的基
因的抗體。
基因可用通常的方法基于公知的堿基序列進行調(diào)節(jié)。例如，從造
骨細胞提取RNA，基于公知的堿基序列制備引物，用PCR法克隆， 從而調(diào)節(jié)耙基因的cDNA。另外，也可使用購入的市售品。
本發(fā)明的骨填補劑的優(yōu)選方式為含有穩(wěn)定劑的上述骨填補劑。作 為穩(wěn)定劑，可適當(dāng)使用聚合物等中使用的公知的穩(wěn)定劑，特別是藥 學(xué)上允許的穩(wěn)定劑。另外，本發(fā)明的骨填補劑主要在生物體內(nèi)長期 維持強度。在生物體內(nèi)由于存在蛋白酶等酶，骨填補劑會在早期被 分解。為此，在本發(fā)明的優(yōu)選方式中，可列舉含有蛋白酶抑制劑等 抑制劑作為穩(wěn)定劑。該抑制劑可適當(dāng)使用公知的酶抑制劑。作為具 體的蛋白酶抑制劑，可列舉4- (2-氨乙基)苯磺酰氟、抑肽酶 (Aprotinin)、貝他茵(Bestain) 、 4丐蛋白酶抑制劑I 、 4丐蛋白酶 抑制劑II、糜蛋白酶抑制劑(Chymostain) 、 3, 4-二氯異香豆素(3, 4-Dichloroisocoumarin ) 、 E陽64、 EDTA、 EGTA、孝L月包素(Lactacystin )、 亮肽素(Leupeptin) 、 MG-115、 MG-132 、胃蛋白酶抑制劑(PepstainA )、 苯基甲基磺酰氟、蛋白酶體抑制劑I、對曱苯磺酰-L-賴氨酸氯曱基 酮、對曱苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮或酪氨酸抑制劑中的1種或2 種以上。這些蛋白酶抑制劑均有市售，且這些蛋白酶抑制劑的抑制 濃度也為公知。由本發(fā)明的骨填補劑形成的化合物的優(yōu)選方式為在 生物體內(nèi)長期維持強度，對藥劑具有緩釋性。因此，關(guān)于本發(fā)明的 骨填補劑，優(yōu)選含有上述蛋白酶抑制劑的1次給藥量的2倍~100 倍的量，更優(yōu)選含有2倍 50倍的量。蛋白酶抑制劑的具體量根據(jù) 所用蛋白酶抑制劑的種類等而各異，優(yōu)選含有作為蛋白酶抑制劑有 效起作用的量(有效量)，通常在每lg骨填補劑中含有O.lpg ~ 0.5mg， 也可以含有l(wèi)pg 0.1mg,或含有10jig 0.1mg。具體的給藥量與給 予骨填補劑的部位的溶劑大致成比例增加。[粘合性賦予劑]
本發(fā)明的另 一優(yōu)選實施方式為在制得的骨填補劑(或燒結(jié)工序后 得到的燒結(jié)體)中適當(dāng)含浸或涂布粘合性賦予劑。當(dāng)粘合性賦予劑 為耐熱性的物質(zhì)時，可以在原料粉末中事先混合粘合性賦予劑，得 到粉體混合粘合性賦予劑的骨填補劑(此時，除了在骨填補劑的表 面存在粘合性賦予劑，在表面與骨組織置換后的新表面上也存在粘 合性賦予劑，因而能維持粘合性)。另外，粘合性賦予劑也可以直 接以粉狀撒布于成形體或燒結(jié)體的表面。此外，通過將大量骨填補 劑與粉末粘合性賦予劑混合并適當(dāng)攪拌，進行粉體混合，也可在固 填補劑的表面附著粘合性賦予劑。粘合性賦予劑也可與上述藥劑一 起含浸或涂布，亦可單獨含浸或涂布粘合性賦予劑。粘合性賦予劑 是用于提高骨填補劑之間的粘合性的添加劑，優(yōu)選單是粘合性賦予 劑時沒有較高的粘合性，但在生物體內(nèi)通過與體內(nèi)的細胞等接觸后 粘合性提高的物質(zhì)。作為具體的粘合性賦予劑，可列舉凝血酶。凝 血酶是使血液易于凝固的酶之一 。凝血酶在生物體內(nèi)的作用為產(chǎn)生 使血液凝固的凝血物質(zhì)即血纖維蛋白。在由凝血酶產(chǎn)生的血纖維蛋 白的作用下，血液易凝固。因此，若用凝血酶作為粘合性賦予劑， 則骨填補劑表面的粘合性提高，從而將骨填補劑與骨填補劑固定， 提高作為骨填補劑整體的強度。關(guān)于凝血酶，可采用與上述藥劑相 同的方法，以與上述藥劑相同的量含浸或涂布凝血酶。
在本發(fā)明的優(yōu)選方式中，包括制備2種含有粘合性賦予劑的組 合物；在某一骨填補劑組含浸或涂布第1組合物，作為第1骨填補 劑組；在另一骨填補劑組含浸或涂布第2組合物，作為第2骨填補 劑組，將含有上述第1骨填補劑組和上述第2骨填補劑組的骨填補 劑組作為骨填補劑使用。例如，上述第l組合物是含有下述通式(I ) 或(II )表示的化合物或含有3~8個下述通式(III )表示的重復(fù)單 元的化合物中的1種或2種以上的第1化合物，且具有第1稀釋劑 (或載體)，上述第2組合物是含有下述通式(I )或(II )表示 的化合物或含有3 ~ 8個下述通式(III )表示的重復(fù)單元的化合物中的1種或2種以上的第2化合物，且具有第2稀釋劑。 X「 (OCH2CH2) n —X2 (I)
式(I )中，Xi和X2相同或不同，表示-R^COONHS (R/表示 d-C7亞烷基)、-COWCOONHS ( R1表示C廣C7亞烷基)、-NOCOR1-R2 (W表示d-C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基)、-R/NH2 (W表 示d-C 亞烷基)、-R^SH ( R1表示d-C7亞烷基)或-C02PhN02 ( Ph 表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n表示80~ 1000的整數(shù)。
式(II )中，Xw和Xn-4分別相同或不同，表示-R^COONHS (R: 表示d-C7亞烷基)、-COWCOONHS (Ri表示C廣C7亞烷基)、
-:^0(:0111-112(111表示c廣C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基)、-r/nh:
(R1表示d-C7亞烷基)、-Wsm R1表示CrC7亞烷基)或-C02PhNO: (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n^ nn.4分別相同或不同，各自 表示20- 250的整數(shù)。
式(III )中，Xm表示-R^COONHS ( R1表示CVC7亞烷基)、 國COR/COONHS、 -NOCOR^-R2 (R!表示C廣C7亞烷基，R2表示馬來 酰亞胺基)、-R/NHz ( R1表示d-C7亞烷基)、( R1表示d-C 亞烷基)或-C02PhN02(Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，nm表示10~150的整數(shù)。
通式(I )表示的化合物是式(I )中Xi和X2相同或不同， 表示-R/COONHS、 -COR!COONHS、 ->^0(:0111-112(112表示馬來酰亞 胺基)、-R/NH" -R^SH或-C02PhN02， n表示80~ 1000的整數(shù)的 化合物。在通式(I )中，Xi和X2優(yōu)選相同。在通式(I )中，R1 表示C廣C7亞烷基，優(yōu)選為d-Cs亞烷基，更優(yōu)選為d-C2亞烷基或 Cs亞烷基。在通式(I )中，Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基，優(yōu)選對 亞苯基。在通式(I )中，n表示80 ~ 1000的整數(shù)，優(yōu)選100 ~ 500。
通式(II )表示的化合物是式(II )中Xu和Xn-4分別相同
或不同，表示國R/COONHS、 -COI^COONHS, -NOCORi-R2 (R2表示 馬來酰亞胺基)、-R/NH^ -R/SH或-C02PhN02, nn.i nn-4分別相 同或不同，各自表示20~ 250的整數(shù)。在通式(II)中，X,w和Xn .4優(yōu)選全部相同。在通式(II )中，R1表示CrC7亞烷基，優(yōu)選為 C廣Cs亞烷基，更優(yōu)選為d-C2亞烷基或Cs亞烷基。在通式(II )中， Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基，優(yōu)選對亞苯基。在通式(II )中，nn .廣nn-4優(yōu)選全部相同。在通式(II )中，nn-廣ru-4表示20~ 250的 整數(shù)，優(yōu)選40 200的整數(shù)。
具有通式(III )表示的重復(fù)單元的化合物是式(HI )中Xm表 示-R^COONHS、 -COR^COONHS, -NOCOR1-R2 (尺2表示馬來酰亞胺 基)、-R^NH2、 -R^SH或-C02PhN02， nm表示10~150的整數(shù)。在通 式(m)中，R/表示C廣C7亞烷基，優(yōu)選為C廣Cs亞烷基，更優(yōu)選為
d-C2亞烷基或Cs亞烷基。在通式(m)中，Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基，優(yōu)選對亞苯基。具有通式(III)表示的重復(fù)單元的化合物
的重復(fù)單元的數(shù)目優(yōu)選3~5,更優(yōu)選4。另外，優(yōu)選在通式(m)
表示的化合物的末端也具有通式(III )的Xm表示的官能團。更具體 而言，優(yōu)選在兩末端都具有式X『(OCH2CH2) nIII-0-CH2-CH (-O-(CH2CH20) nlII- Xm) - CH2畫表示的基團和式Xin- ( OCH2CH2) nIII -0-CH2-CH (國O畫(CH2CH20 ) nIII- XIIt )畫CH2陽0國表示的基團。
本發(fā)明的粘合性賦予劑的優(yōu)選方式為，上述第1化合物含有1種或2種以上通式(I )或(II )中Xp X2或Xn-廣Xn-4分別相同
或不同、為-NOCOR、I^或-RiNH2的化合物，上述第2化合物含有1
種或2種以上通式(I )或(II )中Xp X2或Xn.廣Xn-4分別相同
或不同、為-COR/COONHS、畫R/SH或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)的化合物。
在第l組合物中混合的第l化合物，優(yōu)選使用官能團為-NOCOR1-R"或-I^NH2的化合物(特別是官能團為-R/NH2的化合物)。作為第 2化合物，優(yōu)選與第1化合物混合后迅速進行交聯(lián)反應(yīng)且最終得到的 化合物具有規(guī)定的強度(彈力性)和形狀穩(wěn)定性的化合物。作為第1 化合物與第2化合物的組合，優(yōu)選得到的化合物通過形成特定的立 體結(jié)構(gòu)而僅持續(xù)釋放適量所含藥劑的化合物。從這種觀點出發(fā)，在 第2組合物中混合的第2化合物優(yōu)選官能團為-COR^COONHS、 -WSH 或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)的化合物(特別是官 能團為-COR/COONHS的化合物)。另外，最好是第1化合物和第2 化合物均為通式(II )表示的化合物。作為第1化合物的官能團和 第2化合物的官能團的組合，優(yōu)選丙胺基與琥珀酰亞胺基的組合。
本發(fā)明的粘合性賦予劑的另 一優(yōu)選方式為，上述第1化合物含有
1種或2種以上通式(I )或(II )中X!、 X2或X,w Xn-4分別相
同或不同、為-NOCOR1- R2 (R1表示C廣Cs亞烷基)或國R^NH2 ( R1 表示d-Cs亞烷基)的化合物，上述第2化合物含有1種或2種以上 通式(I )或(II )中Xp X2或Xm X"4分別相同或不同、為 -COR^COONHS、 -R^SH ( R1表示C廣Cs亞烷基)或國C02PhN02 ( Ph 表示對亞苯基)的化合物。
構(gòu)成化合物的化合物的分子量沒有特殊限制，用分子量(數(shù)均分 子量)為3 x 103 ~ 4 x 104的化合物(化合物)也能得到良好的化合 物，若采用含有分子量為1 x I04~3x 104的化合物的化合物，則能 得到更好的化合物。
化合物的濃度不受特殊限制，構(gòu)成化合物的化合物的濃度在第1 組合物或第2組合物中分別為5mM 20mM的范圍。若采用該濃度的化合物，則可得到特別優(yōu)選的化合物。且可推測當(dāng)化合物的濃度
在各組合物中為6mM 30mM時，能得到特別有效的化合物。
通式(I )或(II )表示的化合物以及含有3 ~ 8個通式(III ) 表示的重復(fù)單元的化合物除了市售外，還可用公知的合成方法合成。
通式(I )或(II )表示的化合物以及含有3 ~ 8個通式(III ) 表示的重復(fù)單元的化合物分別可以是其鹽或其溶劑化物。
"其鹽"指上述化合物的鹽，特別是藥學(xué)上允許的上述化合物的 鹽。本說明書中的"藥學(xué)上允許"指對受體無害。本發(fā)明的聚磷酸 可用常規(guī)方法制成鹽。作為其鹽，可列舉鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽等堿金 屬鹽；鈣鹽、鎂鹽等堿土類金屬鹽；鋁鹽、鐵鹽、鋅鹽、銅鹽、鎳 鹽、鈷鹽等金屬鹽；銨鹽等無機鹽；叔辛基胺鹽、二節(jié)基胺鹽、嗎 啉鹽、葡糖胺鹽、苯基甘氨酸烷基酯鹽、乙二胺茶堿鹽、N-甲基葡 糖胺鹽、胍鹽、二乙胺鹽、三乙胺鹽、二環(huán)己胺鹽、N， N， -二千乙 烯二胺鹽、氯普魯卡因鹽、普魯卡因鹽、二乙醇胺鹽、N-爺基-N-苯 乙胺鹽、哌。秦鹽、四曱銨鹽、三(羥甲基)氨基曱烷鹽等有機鹽等 胺鹽。其中，作為聚磷酸的鹽，優(yōu)選堿金屬鹽，更優(yōu)選鈉鹽。本說 明書中的"其鹽"不僅包括無水鹽還包括含水鹽。這些鹽例如在生 物體內(nèi)等電離而具有與上述化合物相同的作用。
"其溶劑化物"指上述化合物的溶劑化物。作為溶劑化物，可列 舉水合物。本發(fā)明的制劑例如置于大氣中，或通過重結(jié)晶而吸收水 分，吸附水附著，而形成水合物。形成這種溶劑化物的情況也屬于 "其溶劑化物"。這些溶劑化物在生物體內(nèi)等電離而具有與上述化 合物相同的作用。
本發(fā)明的粘合性賦予劑的優(yōu)選方式為，采用公知的藥學(xué)上允許的 稀釋劑作為稀釋劑。作為具體的稀釋劑，可采用由水、磷酸緩沖液、 檸檬酸緩沖液、磷酸緩沖生理鹽水或生理鹽水中的1種或2種以上 的混合溶液組成的溶劑。
稀釋劑(或溶劑)的酸度沒有特殊限制，可列舉pH3 pH11, 如后述實施例4等所證實，為了將得到的化合物的強度提高到某一程度，優(yōu)選pH5 pH10，進一步優(yōu)選pH6 pH9，更優(yōu)選pH7 pH8。 稀釋劑的摩爾濃度(M)沒有特殊限制，可列舉lmM 1M,如后述 實施例5等所證實，為了將得到的化合物的強度提高到某一程度， 優(yōu)選5mM ~ 300mM,進一步優(yōu)選10mM ~ 200mM,更優(yōu)選15mM ~ 100mM。
本發(fā)明的粘合性賦予劑的優(yōu)選方式為，上述第1組合物和上述第 2組合物中的任一方或雙方含有穩(wěn)定劑。作為穩(wěn)定劑，可適當(dāng)采用聚 合物等中使用的公知的穩(wěn)定劑，特別是藥學(xué)上允許的穩(wěn)定劑。另夕卜， 期待由本發(fā)明的粘合性賦予劑得到的化合物主要在生物體內(nèi)能長期 維持強度。在生物體內(nèi)由于存在蛋白酶等酶，因此可設(shè)想到化合物 被分解。為此，在本發(fā)明的優(yōu)選方式中，可列舉含有蛋白酶抑制劑 等抑制劑作為穩(wěn)定劑。作為該抑制劑，可適當(dāng)使用公知的酶抑制劑。 作為具體的蛋白酶抑制劑，可列舉4- (2-氨乙基)苯磺酰氟、抑肽 酶(Aprotinin)、貝他茵(Bestain)、《丐蛋白酶抑制劑I 、 4丐蛋白 酶抑制劑II、糜蛋白酶抑制劑(Chymostain) 、 3, 4-二氯異香豆素 (3 , 4畫Dichloroisocoumarin ) 、 E國64 、 EDTA 、 EGTA 、乳胞素 (Lactacystin )、亮肽素(Leupepetin ) 、 MG陽115、 MG-132、胃蛋 白酶抑制劑(PepstainA)、苯基曱基磺酰氟、蛋白酶體抑制劑I 、 對曱苯磺酰-L-賴氨酸氯曱基酮、對曱苯磺酰-L-苯丙氨酸氯曱基酮或 酪氨酸抑制劑中的l種或2種以上。這些蛋白酶抑制劑均有市售， 且這些蛋白酶抑制劑的抑制濃度也為公知。由本發(fā)明的粘合性賦予 劑形成的化合物的優(yōu)選方式為在生物體內(nèi)長期維持強度，對藥劑具 有緩釋性。因此，本發(fā)明的粘合性賦予劑優(yōu)選含有上述蛋白酶抑制 劑的1次給藥量的2倍~ 100倍的量，更優(yōu)選含有2倍 50倍的量。 蛋白酶抑制劑的具體量根據(jù)所用蛋白酶抑制劑的種類等而各異，優(yōu) 選含有作為蛋白酶抑制劑有效起作用的量(有效量)，通常在每lmL
粘合性賦予劑中含有0.1pg~ 0.5mg，也可含有l(wèi)pg~ O.lmg,亦可含 有10|ig ~ O.lmg。
當(dāng)同時使用上述粘合性賦予劑和藥劑時，由粘合性賦予劑構(gòu)成的化合物攝入藥劑，賦予合適的釋放性，可用作具有緩釋性的骨填補 劑。通過控制粘合性賦予劑的構(gòu)成并控制穩(wěn)定劑的添加量，能控制 化合物的降解度，從而能調(diào)節(jié)藥劑的釋放性。即，本發(fā)明還提供通 過控制在粘合性賦予劑中添加的穩(wěn)定劑的量來控制藥劑的釋放性的 方法。
另外，在骨填補劑的表面設(shè)置被覆層是本發(fā)明的優(yōu)選方式。該被
覆層的厚度可適當(dāng)調(diào)節(jié)，例如為lpm~ 5 x 10pm。 一皮覆層中例如含 有具有親水基的生物相容性化合物。作為親水基，可列舉OH基、 COOH基、NH3基、C03基、S03H基等，若被覆層含有具有與自然 骨中所含的磷灰石(Cai。 (P04) 6 (OH) 2)的親水基相同的親水基 即OH基的化合物，則與骨的相容性良好，促進骨再生反應(yīng)，因而 特別優(yōu)選。在水玻璃(Na20 . Si02 . nH20)中邊攪拌邊混入鹽酸、 硝酸、硫酸等酸水溶液，在顯示適當(dāng)粘度時浸漬骨填補劑，提起， 再浸漬到水中，使Na+離子溶解，即可在骨填補劑表面形成二氧化硅 凝膠層。也可在硅(或鈦)的醇鹽即四曱氧基硅烷(鈦酸鹽)、四 乙氧基硅烷(鈦酸鹽)、四丙氧基硅烷(鈦酸鹽)、四異丙氧基硅 烷(鈦酸鹽)或四丁氧基硅烷(鈦酸鹽)的醇溶液中，適當(dāng)混合作 為催化劑的鹽酸、硝酸、硫酸、乙酸等酸水溶液或含有氨的水溶液， 使硅(鈦)的醇鹽進行水解、聚合反應(yīng)，在顯示適當(dāng)粘度的階段浸 漬骨填補劑，提起，在骨填補劑的表面形成二氧化硅凝膠層(二氧 化鈥凝膠層)。 [骨填補劑]
按上述方法得到的骨填補劑的尺寸精度高，偏差小。而且，缺陷 品少，能批量生產(chǎn)。本發(fā)明的骨填補劑優(yōu)選為具有多個突起部的形 狀，更優(yōu)選多個突起部以線對稱、面對稱或空間對稱的方式配置。 作為骨填補劑的優(yōu)選具體形狀，可列舉四腳狀(具有4個從正四面
體的中心向各頂點方向延伸的突起部的形狀)或具有n個從正n面 體(n=6、 8、 12等)的中心向各頂點的方向延伸的突起部的形狀。 骨填補劑的大小(能容納骨填補劑的球的直徑大小)可為lx10 mm ~ 5mm，優(yōu)選5 x 10-2mm ~ 3mm, 更優(yōu)選1 x 10-2mm ~ 2mm, 進一步優(yōu)選2 x 10"mm 1.5mm。此外，若采用在其表面涂布有特定 藥劑的骨填補劑，則不僅能有效地治療特定的疾病，還能給予合適 的給藥量。下面，結(jié)合附圖對本發(fā)明的骨填補劑的優(yōu)選形狀進行說 明。
圖2是用于說明四腳狀骨填補劑的例子的示意圖。圖2 (A)是 側(cè)視圖，圖2(B)是俯視圖，圖2(C)是立體圖。另外，圖中"Fig." 表示"圖"的意思(下同)。圖2中所示的骨填補劑(11 )是四腳 狀(具有4個從正四面體的中心向各頂點方向延伸的突起部(12) 的形狀)的骨填補劑。另外，各突起部(12)的頂端部(13)優(yōu)選 設(shè)成錐形形成順滑的形狀(下同)。如圖2所示，各突起部(12) 可具有實質(zhì)上相同的形狀，但其中的一兩個也可以是較小的形狀。 各突起部可具有越靠近頂端部(13 )越細的圓錐臺狀的形狀。各突 起部的頂端也可以是半球形(下同)。
圖3是用于說明去頭四腳狀骨填補劑的例子的示意圖。圖3(A) 和圖3 (B)表示側(cè)視圖，圖(3) C表示俯視圖，圖(3) D表示立 體圖。該方式的骨填補劑是將圖2所示的四腳狀骨填補劑的一個突 起部從中間切斷后的形狀的骨填補劑。即，具有3個從正四面體的 中心向各頂點方向延伸的突起部和向剩余一頂點延伸的比其他突起
部短的突起部的骨填補劑。由于具有這樣的形狀，因此在使用大量 骨填補劑時，可使連通孔的大小小于四腳狀的骨填補劑，能提高骨 填補劑的整體強度。
圖4是用于說明具有3個突起部的骨填補劑的例子的示意圖。圖 4(A)表示立體圖，圖4(B)表示俯視圖。例如，可列舉在形成正 四面體的棱線的位置上具有突起部的骨填補劑。各突起部的頂端可 為半球形。該方式的骨填補劑由于大量骨填補劑相互絡(luò)合，因而能
形成具有牢固結(jié)合的骨填補劑。
圖5是用于說明半球形骨填補劑的例子的示意圖。圖5 (A)表 示立體圖，圖5 (B)表示仰視圖。如圖5 (A)所示，該方式的骨填補劑優(yōu)選具有從半球的頂點部分向下方貫通的孔部(21)。由于 具有該孔部(21),因此當(dāng)大量骨填補劑聚集時，能形成可使細胞 有效滲透的連通孔?？撞康男螤顩]有特殊限制，如圖5(A)所示， 優(yōu)選為圓柱形挖空孔。當(dāng)半球的半徑為r時，該圓柱形挖空孔的圓半 徑可為r/10~2r/3,優(yōu)選r/5 ~ r/2。若釆用這種程度的挖空孔，則能 在維持骨填補劑的強度的同時形成理想的孔。該方式的骨填補劑更 優(yōu)選在下表面還設(shè)有挖空部(22 )。骨填補劑的厚度(23 )可為r/20 ~ r/3,優(yōu)選r/10 r/4。
圖6是用于說明在下表面具有1個或多個挖空孔的骨填補劑的例 子的示意圖。圖6(A)表示立體圖，圖6(B)表示仰視圖。該方 式的骨填補劑是在半球形下表面具有1個或多個半缺圓柱的挖空孔 的骨填補劑的例子。半球的下表面與半缺圓柱的半缺面(既非底面 又非上表面的平面部分)最后構(gòu)成同一平面。由于具有這樣的半缺 面的挖空孔(24),因此能在確保骨填補劑強度的同時設(shè)孔，能賦 予適用于培養(yǎng)細胞等的理想物性。另外，圖6所述的骨移植術(shù)可適 當(dāng)采用圖5所述的骨填補劑的構(gòu)成。此外，設(shè)于下表面的半缺圓柱 形挖空部的圓的半徑可為r/10~2r/3,優(yōu)選r/5 ~ r/2。
圖7是用于說明雙頭狀骨填補劑的例子的示意圖。圖7 (A)表 示立體圖，圖7 (B)和圖7 (C)表示側(cè)視圖。該方式的骨填補劑為 在主體部(31 )的兩端具有2個頭部(32、 33)的形狀。由于具有 這樣的形狀，因此在使用大量骨填補劑時，可牢固地絡(luò)合，并能形 成大小合適的連通孔，能提高骨填補劑整體的強度。另外，圖7列 舉了頭部和主體部為T字形的骨填補劑的例子，但頭部的形狀也可 以是十字形，還可以按規(guī)定的角度設(shè)置多個突起。另外，圖7列舉 了 2個頭部偏離90度的骨填補劑的例子，但2個頭部所成的角度也 可以是45度、O度或30度。
圖。圖8(A)表示立體圖，圖8(B)表示側(cè)視圖。該方式的骨填 補劑是在圖7所示的骨填補劑的主體部(31)上進一步具有貫穿主體部的突起部的骨填補劑。由于具有這樣的形狀，因此在使用大量 骨填補劑時，可牢固地絡(luò)合，并形成大小合適的連通孔，能提高骨
填補劑整體的強度。該方式的骨填補劑可適當(dāng)采用圖7所述的構(gòu)成。 圖9是用于說明十字形骨填補劑的例子的示意圖。圖9(A)表 示立體圖，圖9(B)表示俯視圖，圖9(C)表示側(cè)視圖，圖9(D) 表示仰視圖。如圖9 (C)和圖9(D)所示，該方式的骨填補劑在 十字的底面部分的末端分別具有腳部，在十字的中央的下部優(yōu)選設(shè) 有空隙。由于具有這樣的形狀，因而能形成大小合適的連通孔。
圖IO是用于說明近似平面狀的骨填補劑的例子的示意圖。圖10 (A)表示立體圖，圖10(B)表示俯視圖，圖10(C)表示側(cè)視圖。
這樣的形狀，因而能形成大小合適的連通孔。
圖11是用于說明在平面的一端或兩端具有突起部的骨填補劑的 例子的示意圖。該形態(tài)的骨填補劑由于在扁平的主體部的端部具有突起 部，因而無法簡單重疊。由于具有這樣的形狀，因而能形成大小合適的 連通孔。另外，該方式的骨填補劑優(yōu)選如圖11所示那樣在主體部具有 凹部。由于具有這樣的形狀，因而能形成大小合適的連通孔。
圖12是用于說明具有傾斜的上表面的骨填補劑的例子的示意 圖。圖12 ( A)表示立體圖，圖12 (B)表示側(cè)視圖。如圖12所示， 該方式的骨填補劑具有腳部(42)和安置于上述腳部(42)的臺部 (43)，腳部(42)的底面與臺部(43)的上表面為傾斜的結(jié)構(gòu)。 由于具有這樣的形狀，因此該方式的骨填補劑因具有傾斜的上表面 而無法簡單重疊。籍此，可確保連通孔。
由本發(fā)明的制造方法制造的骨填補劑注入骨缺損部位、骨質(zhì)疏松 部位或骨延長部位。另外，除了在骨缺損部位等骨間隙填充骨填補 劑外，還可用作特定藥劑的載體。這樣，不僅能用于治療或預(yù)防骨 類疾病，還能在各種疾病的治療或預(yù)防中應(yīng)用。接著，對本發(fā)明的優(yōu)選三維細胞培養(yǎng)載體進行說明。三維細胞培 養(yǎng)載體基本而言適當(dāng)使用上述骨填補劑。即，本發(fā)明的三維細胞培 養(yǎng)載體是含有鈣類物質(zhì)且具有多個突起部的骨填補劑的三維細胞培 養(yǎng)載體。如后述的實施例所證實，本發(fā)明的骨填補劑具有良好的空 隙，其結(jié)果是，培養(yǎng)細胞沿各骨填補劑爬升，可在三維培養(yǎng)細胞。 即，本發(fā)明還提供應(yīng)用骨填補劑的體外細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。
另外，三維細胞培養(yǎng)載體優(yōu)選大量使用上述任一骨填補劑。三維 細胞培養(yǎng)載體的高度可根據(jù)想要得到的細胞的量等作適當(dāng)調(diào)整，如
lpm以上lm以下，優(yōu)選3pm以上10cm以下，進一步優(yōu)選10pm以 上5cm以下，更優(yōu)選50pm以上lcm以下。
若使骨填補劑為多孔質(zhì)，則可有效地使細胞爬升，因此作為骨填 補劑，例如優(yōu)選適當(dāng)含有上述鹽分。通過在原料中混入氯化鈉等鹽 成分，在燒結(jié)后向燒結(jié)體加水使鹽溶解，即可得到多孔質(zhì)的骨填補 劑。另外，若使燒結(jié)性下降來設(shè)置微小的龜裂等，則細胞可進入骨 填補劑的內(nèi)部，因而能良好地培養(yǎng)細胞。為了使燒結(jié)性下降，例如 降低燒結(jié)溫度或增加原料粉末的大小等。
本發(fā)明的三維細胞培養(yǎng)載體的優(yōu)選方式為在骨填補劑的表面含 浸或涂布藥劑或粘合性賦予劑的三維細胞培養(yǎng)載體。特別是在骨填 補劑的表面含浸或涂布粘合性賦予劑的三維細胞培養(yǎng)載體，由于骨 填補劑組能長期維持良好的立體結(jié)構(gòu)，因而能持續(xù)有效地培養(yǎng)細胞。 這里使用的粘合性賦予劑可采用與上述說明的粘合性賦予劑相同的 物質(zhì)并按相同的方法使用。例如，培養(yǎng)的細胞可沖殳入生物體內(nèi)，上 述粘合性賦予劑具有良好的生物相溶性，因此即使將培養(yǎng)的細胞直 接投入生物體內(nèi)也沒有什么危險性。
某側(cè)面涉及的本發(fā)明的骨填補劑的利用方法為含有4丐類物質(zhì)且 具有多個突起部的骨填補劑的色譜法用分離載體。如后述的試驗例 所證實，本發(fā)明的骨填補劑具有良好的吸附性等，而且其吸附性可 通過調(diào)節(jié)骨填補劑的空隙等來控制。因此，可將大量的骨填補劑用 作色譜法用的分離載體。具體的色譜法的利用方法為將適量的骨填補劑填充到色譜法用的色譜柱中，向色譜柱中注入溶液即可。 實施例1
下面，用實施例具體說明本發(fā)明的骨填補劑的制造方法。但是， 本發(fā)明不限于實施例，還包括本領(lǐng)域技術(shù)人員可想到的各種變形例。 (1 )混合工序
作為原料粉末，采用a-TCP (太平化學(xué)產(chǎn)業(yè)制，粒徑10nm)。 相對于100重量份的原料粉末摻入24重量份的粘合劑。作為粘合劑， 采用乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、聚甲基丙烯酸丁酯、石蠟、鄰苯二曱 酸二丁酯和硬脂酸按30: 30: 30: 5: 5的重量比配合的粘合劑。將 300cc加壓式捏合機加熱至150°C,按熔點從高到低的順序投入粘合 劑，投完后混合60分鐘，冷卻。將得到的混合物在陶瓷制的罐形磨 料機中粉碎，得到成形用的材料(混合物或顆粒)。
(2) 成形工序
用CAD形成骨填補劑的形狀后，按照該CAD形狀制造金屬模。 圖13是骨填補劑的CAD設(shè)計圖。金屬模使用SKD11淬火材料，釆 用包括12個空腔的模。金屬模的結(jié)構(gòu)如下4個突起部中的一個端 面作為澆口，在剩余3個突起部的中央線上作為變形部分形成固定 金屬模與可動金屬模接合面，在3個突起部的內(nèi)側(cè)設(shè)置推桿。作為 注射成形機，采用鎖模力為12噸的臥式注射成形機。將射出壓力的 初期設(shè)定值設(shè)為12Gpa。另外，成形機缸套的溫度設(shè)為130°C，金屬 模溫度設(shè)為20°C。
(3) 脫粘合劑工序
在大氣脫脂爐中，在大氣環(huán)境下加熱至最高溫度IOO(TC，保持1 小時后爐內(nèi)冷卻。脫粘合劑工序包含冷卻時間在內(nèi)為18小時。作為 定位器，采用90%氧化鋁(氣孔率20%)。
(4) 燒結(jié)工序
從大氣環(huán)境加熱至最高溫度IOO(TC,保持1小時后冷卻。包含 冷卻時間在內(nèi)的燒結(jié)時間為18小時。定位器直接采用脫粘合劑工序 的定位器。所得骨填補劑的彎曲強度為6.1MPa (n=18)。所得骨填補劑如圖14~圖16所示。圖14是代替圖紙而用照片 表示的實施例1中得到的骨填補劑。圖15是代替圖紙而用電子顯微 鏡照片表示的實施例1中得到的骨填補劑。圖16是代替圖紙而用電 子顯微鏡照片表示的實施例1中得到的骨填補劑聚集后的狀況。
-骨填補劑的燒結(jié)溫度與其彎曲強度的檢驗-
改變制造骨填補劑時的燒結(jié)溫度，制造多種骨填補劑，根據(jù)JIS 的R1601檢驗所得骨填補劑的彎曲強度。其結(jié)果如圖17所示。圖 17是實施例1中得到的骨填補劑的燒結(jié)溫度與彎曲強度的關(guān)系圖。 從圖17可知，燒結(jié)溫度越高，得到的骨填補劑的彎曲強度越高，通 過控制燒結(jié)溫度能控制所得骨填補劑的彎曲強度。此外，根據(jù)本發(fā) 明，可得到彎曲強度為2MPa 10MPa (優(yōu)選4MPa 9MPa、更優(yōu)選 6MPa~9MPa)的骨i真才卜齊寸。
-骨填補劑在生物體內(nèi)的填充狀況的檢驗-
大量骨填補劑在生物體內(nèi)形成合適的連通孔使生物細胞進入該 連通孔來促進骨再生。因此，當(dāng)骨填補劑在生物體內(nèi)投與時，優(yōu)選 形成合適的連通孔。為此，在本試驗例中，對本發(fā)明的骨填補劑在 生物體內(nèi)如何聚集進行檢驗。另外，為了比較，對現(xiàn)有的人工骨顆 粒是否聚集進行檢驗。該人工骨顆粒是將塊狀的骨填補劑(日本奧 林巴斯制奧斯泛朗)粉碎而成的顆粒。具體而言，通過微型X射線 CT來確認(rèn)本發(fā)明的骨填補劑和現(xiàn)有的人工骨顆粒在2ml冷凍管內(nèi)聚 集時構(gòu)建的連通孔結(jié)構(gòu)。其結(jié)果如圖18所示。圖18是代替圖紙而 用微型X射線CT圖像表示的實施例1中得到的骨填補劑和現(xiàn)有的 人工骨制品聚集時樣子。圖18 (A)表示本發(fā)明的骨填補劑聚集的 樣子，圖18 (B)表示現(xiàn)有的人工骨顆粒聚集的樣子。圖18(C)表 示本發(fā)明的骨填補劑在冷凍管內(nèi)填充的樣子。圖18(D)表示現(xiàn)有 的人工骨制品在冷凍管內(nèi)填充的樣子。
由圖18(A)可知，本發(fā)明的骨填補劑趨向于自組織化地聚集在腳部的連接部。其結(jié)果使聚集的骨填補劑限制彼此的移動。還可知， 上述聚集狀態(tài)所產(chǎn)生的空隙結(jié)構(gòu)形成良好的連通孔。由于空隙結(jié)構(gòu)反映 骨填補劑的腳長和角度，因此通過調(diào)節(jié)腳長或角度即可調(diào)節(jié)空間結(jié)構(gòu)。 因此，可以說本發(fā)明的骨填補劑不僅在形態(tài)穩(wěn)定性上優(yōu)異，而且還能任
意構(gòu)建骨傳導(dǎo)空間。此外，骨填補劑的密度在CT圖像中大致均勻。
另一方面，如圖18(B)所示，人工骨顆粒聚集時的粒子間距離 的偏差大，可認(rèn)為在空隙結(jié)構(gòu)的再現(xiàn)性以及形態(tài)保持性上存在問題。 特別是在新創(chuàng)傷等富含液性成分的區(qū)域，當(dāng)埋入人工骨顆粒時，由 于液體化現(xiàn)象，粒子間隙結(jié)構(gòu)破壞的可能性高。因此，用人工骨顆 粒而得不到治療效果的可能性高。人工骨顆粒除了顆粒的間隙結(jié)構(gòu) 外，在顆粒內(nèi)還存在數(shù)百微米的氣泡。認(rèn)為人工顆粒在生物體內(nèi)時 細胞等進入到該氣泡。但氣泡的形狀不均勻，并非是促進骨形成的 理想形狀。因此，從這點出發(fā)，可認(rèn)為采用人工骨顆粒無法得到理 想的骨再生效果。另外，在現(xiàn)有的人工骨顆粒中存在低密度部位， 密度不均一。
如圖18 ( C )所示，本發(fā)明的骨填補劑沿冷凍管內(nèi)部的管壁填充， 填充性良好。另一方面，如圖18(D)所示，現(xiàn)有的人工骨制品不沿冷 凍管內(nèi)部的管壁填充，產(chǎn)生填充不良部位(空隙)(參照圖18(D)的 箭頭)。這種空隙成為破壞埋入人工骨制品等時的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定性的因素。 即，本發(fā)明的骨填補劑在大量填補劑聚集時優(yōu)選形成大小合適的孔或連 通孔，但不希望形成填充不良部位那樣的過大的孔。由此可知，本發(fā)明 的骨填補劑在大量給予時能作為良好的骨填補劑起作用。
-骨填補劑作為三維細胞培養(yǎng)體系的檢驗-
將造骨類細胞抹MC3T3 (MC3T3-E1 (來自小鼠頭蓋骨的造骨細 胞類細胞林))進行平面培養(yǎng)，在匯合后，將實施例1中得到的骨 填補劑組置于其上，繼續(xù)培養(yǎng)，經(jīng)時用顯微鏡觀察。細胞培養(yǎng)采用 在達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基(DMEM培養(yǎng)基)中添加10。/。FBS和 1%青霉素-鏈霉素的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基每4天換一次。另一方面，作為對比，未添加細胞抹而裝入骨填補劑，進行觀察。另外，在第6、 10 天進行堿性磷酸酶(ALP)染色，將造骨細胞染色?？勺C實本發(fā)明 的骨填補劑具有良好的細胞粘合性。其結(jié)果如圖19所示。
圖19表示代替圖紙而用照片確認(rèn)骨填補劑的細胞粘合性。圖19 (A)是無培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)4天后的骨填補劑的照片，圖19 (B)是 將造骨細胞類細胞抹MC3T3進行平面培養(yǎng)4天后的骨填補劑的照 片，圖19 (C)是無培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)6天后經(jīng)堿性磷酸酶(ALP)染 色的骨填補劑的照片，圖19 (D)是將造骨細胞類細胞林MC3T3進 行平面培養(yǎng)6天后經(jīng)堿性磷酸酶染色的骨填補劑的照片，圖19 (E) 是無培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)10天后經(jīng)堿性磷酸酶染色的骨填補劑的照片， 圖19 (F)是將造骨細胞類細胞抹MC3T3進行平面培養(yǎng)10天后經(jīng) 堿性磷酸酶染色的骨填補劑的照片。
由圖19 (A)和圖19 (B)可知，無細胞時在骨填補劑的表面沒 有任何附著，但在細胞上培養(yǎng)骨填補劑后，在表面附著細胞。由圖 19 (D)所示的培養(yǎng)6天后經(jīng)ALP染色的骨填補劑的照片可知，造 骨細胞沿骨填補劑側(cè)部的斜坡的爬升。由圖19(F)可知，細胞培養(yǎng) 10天后的骨填補劑的整個表面均附有細胞。由此可知，本發(fā)明的骨 填補劑是有效的三維培養(yǎng)載體。
工業(yè)上的可利用性
由本發(fā)明的制造方法制造的骨填補劑注入到骨缺損部位、骨質(zhì)疏 松部位或骨延長部位，除了在骨缺損部位等的骨間隙內(nèi)填充外，還 可用作特定藥劑的載體。因此，本發(fā)明的骨填補劑可在醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)等 領(lǐng)域中應(yīng)用。
另外，本發(fā)明的三維培養(yǎng)載體顛覆了迄今為止僅進行二維細胞培 養(yǎng)的概念，能提供可進行三維細胞培養(yǎng)的載體，因此，可在使用細 胞培養(yǎng)的醫(yī)藥 生物產(chǎn)業(yè)的領(lǐng)域中應(yīng)用。
權(quán)利要求
1. 一種骨填補劑的制造方法，其包含將含有鈣類物質(zhì)的原材料和含有粘合劑的材料混合的混合工序；使用在所述混合工序中得到的混合物，通過采用具有金屬模的注射成形機的注射成形，得到具有規(guī)定形狀的成形體的成形工序；將在所述成形工序中得到的成形體中含有的粘合劑除去，得到脫脂體的脫粘合劑(脫脂)工序；以及，將所述脫粘合劑工序后的脫脂體加熱，燒結(jié)得到燒結(jié)體的燒結(jié)工序。
2. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述鈣類 物質(zhì)含有磷酸釣類物質(zhì)或碳酸鉤類物質(zhì)中的任一者或兩者。
3. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述鈣類 物質(zhì)含有磷酸鈣類物質(zhì)，所述磷酸鈣類物質(zhì)是羥磷灰石、碳酸化磷灰石、氟磷灰石、氯磷 灰石、(3-TCP、 ot-TCP、偏磷酸鉤、磷酸四釣、磷酸氬釣、磷酸八 4丐、二磷酸四氫鉤、焦磷酸鉤、它們的鹽、和它們的溶劑化物中的 任1種或2種以上。
4. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述粘合 劑含有(甲基)丙烯酸類樹脂、蠟潤滑劑和潤滑劑。
5. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述粘合 劑含有蠟潤滑劑，所述蠟潤滑劑含有熔點為40°C ~ IO(TC的蠟。
6. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述粘合 劑含有(甲基)丙烯酸類樹脂、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、石蠟、硬 脂酸和鄰苯二曱酸二丁酯，在所述混合工序中，向混合機中投入所述(甲基)丙烯酸類樹脂 和所述乙烯-乙酸乙烯基共聚物，邊混合邊向混合機中投入所述原材 料、所述石蠟和所述硬脂酸，邊混合邊向混合機中投入所述鄰苯二曱酸二丁酯。
7. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述"含 有鈣類物質(zhì)的原材料以及含有粘合劑的材料"除了含有含4丐類物質(zhì) 的原材料以及粘合劑外還含有玻璃成分。
8. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述"含 有鈣類物質(zhì)的原材料以及含有粘合劑的材料"除了含有含鉤類物質(zhì) 的原材料以及粘合劑外還含有鹽分或糖分。
9. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述骨填補劑的形狀為具有多個突起部，所述金屬模具有設(shè)有用于注入材料的注入口的固定金屬模；和在注入材料時與所述固定金屬模接觸而成形后與所述固定金 屬模分離的可動金屬模，其中，所述固定金屬模為了從所述多個突起部中的某一突起部的 頂端部注入注射成形用材^f" ， ^f吏所述注入口 ^f立于所述頂端部，其中，所述固定金屬模與所述可動金屬模的接合面具有從端面向 中心方向逐漸向注入口方向傾斜的傾斜面，其中，所述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī)定楔形部的凹部。
10. 如權(quán)利要求9所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述楔形 部的高度為lnm~ 1 x 102|im。
11. 如權(quán)利要求9所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述可動 金屬模具有一個或多個深度為l|um~2x 10pm的凹槽。
12. 如權(quán)利要求9所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述骨填 補劑的形狀為具有4個突起部，在所述可動金屬模上設(shè)置位于突起部內(nèi)側(cè)的突出銷。
13. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述骨填 補劑的形狀為具有多個突起部，所述金屬模具有 固定金屬模；和在注入材料時與所述固定金屬模接觸而成形后與所述固定金屬模分離的可動金屬模，其中，注入注射成形用材料的注入口位于所述固定金屬模與所述可動金屬模的接合面上，其中，所述固定金屬模與所述可動金屬模的接合面具有從端面向 中心方向逐漸向所述骨填補劑的中心方向傾斜的傾斜面，其中，所述可動金屬模具有用于設(shè)置規(guī)定楔形部的凹槽。
14. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述脫粘 合劑工序包括在到達110°C ~ 300。C的第一溫度保持時間之前以rc/ 小時~ 3 x 102匸/小時的速度升溫的加熱工序。
15. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其包含對在所述 燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或涂布藥劑的工序。
16. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其包含對在所述 燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或涂布藥劑的工序，作為所述藥劑，采用骨生成.軟骨形成促進劑(包含軟骨形成促 進因子)、關(guān)節(jié)疾病治療劑、骨 軟骨疾病預(yù)防和/或治療劑、骨再 生劑、骨吸收抑制物質(zhì)、血管新生促進劑、抗菌劑、抗生素或抗癌 劑中的1種或2種以上。
17. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其包含對在所述 燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或涂布粘合性賦予劑的工序。
18. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其包含對在所述 燒結(jié)工序中得到的燒結(jié)體含浸或涂布粘合性賦予劑的工序，所述粘合性賦予劑是凝血酶。
19. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，按照權(quán)利 要求1所述的骨填補劑的制造方法制造大量骨填補劑，準(zhǔn)備2種含 有粘合性賦予劑的組合物，在某一骨填補劑組含浸或涂布第l組合 物，制成第l骨填補劑組，在另一骨填補劑組含浸或涂布第2組合 物，制成第2骨填補劑組，將含有所述第1骨填補劑組和所述第2 骨填補劑組的骨填補劑組作為骨填補劑，所述第1組合物是含有下述通式(I )或(II )表示的化合物或含有3 8個下述通式(III)表示的重復(fù)單元的化合物中的l種或2 種以上的第l化合物，且具有第l稀釋劑(或載體)，所述第2組 合物是含有下述通式(I )或(II )表示的化合物或含有3 ~ 8個下 述通式(III )表示的重復(fù)單元的化合物中的1種或2種以上的第2 化合物，且具有第2稀釋劑， X「 (OCH2CH2) n —X2 (I)式(I )中，Xi和X2相同或不同，表示-R^COONHS (Ri表示 d-C 亞烷基)、-COI^COONHS( R1表示d-C7亞烷基。)、-NOCOR1-R2 (R/表示C廣C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基。)、-R/NHzCR1 表示C廣C7亞烷基。)、-RiSH(Ri表示C廣C7亞烷基。)或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n表示80~ 1000的整數(shù)，■q.............................《CH，C H之0卡…...........................................'x!t.節(jié)<formula>formula see original document page 5</formula>式(II)中，Xn-廣Xn-4分別相同或不同，表示-R、OONHS (R1 表示C廠C7亞烷基。)、-COR/COONHS (R/表示C廣C7亞烷基。)、 ->^0(:0111-112(111表示C廣C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基。)、-R^NH2 (W表示C廣C7亞烷基。)、-I^SH (W表示C廣C7亞烷基。)或 -C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，~ ru-4分別相同或 不同，表示20 250的整數(shù)，<formula>formula see original document page 6</formula>式(III)中，Xm表示-R^COONHS (R/表示C廣C7亞烷基。)、-cor/coonhs、 -nocorZ-r2 (W表示c廣C7亞烷基，R2表示馬來酰亞胺基。)、-R/NH (R/表示C廣C7亞烷基。)、-111811(111表示 C廣C7亞烷基。)或-C02PhN02 (Ph表示鄰-、間-或?qū)?亞苯基)，n m表示10 ~ 150的整數(shù)。
20. 如權(quán)利要求19所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述第 1化合物含有1種或2種以上通式(I )或(II )中X2或X!w Xn-4分別相同或不同、為-NOCORi-I^或-R/NH2的化合物，所述第2化合物含有1種或2種以上通式(I )或(II )中X2或Xn-j Xn-4分別相同或不同、為-COR/COONHS、 -R^SH或-C02PhN02 (Ph 表示鄰_、間-或?qū)?亞苯基)的化合物。
21. 如權(quán)利要求1所述的骨填補劑的制造方法，其中，所述骨填補 劑的形狀為具有從正四面體的中心向各頂點的方向延伸的4個突起部。
22. —種骨填補劑，包括4丐類物質(zhì)和表面含浸或涂布藥劑的多 個突起部。
23. —種骨填補劑，包括鈣類物質(zhì)和表面含浸、涂布或粉體混 合粘合性賦予劑的多個突起部。
24. —種三維細胞培養(yǎng)載體，包括具有4丐類物質(zhì)和多個突起部 的骨填補劑。
25. 如權(quán)利要求24所述的三維細胞培養(yǎng)載體，其中，所述骨填補 劑是在其表面含浸、涂布或粉體混合藥劑或粘合性賦予劑的骨填補劑。
26. —種色譜法用分離載體，包括具有鈣類物質(zhì)和多個突起部 的骨填補劑。
全文摘要
本發(fā)明提供骨填補劑的新型制造方法。上述技術(shù)課題采用如下骨填補劑的制造方法等來解決，該骨填補劑的制造方法包含將含有鈣類物質(zhì)的原材料和含有粘合劑的材料混合的混合工序；使用在上述混合工序中得到的混合物，通過采用具有金屬模的注射成形機的注射成形，得到具有規(guī)定形狀的成形體的成形工序；將在上述成形工序中得到的成形體中含有的粘合劑除去，得到脫脂體的脫粘合劑(脫脂)工序；以及，將上述脫粘合劑工序后的脫脂體加熱，燒結(jié)得到燒結(jié)體的燒結(jié)工序。
文檔編號C12M3/00GK101415450SQ200780011789
公開日2009年4月22日 申請日期2007年2月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月14日
發(fā)明者寺岡啟, 清水康太郎, 鄭雄一, 鈴木茂樹, 高根勝久 申請人:國立大學(xué)法人東京大學(xué);獨立行政法人產(chǎn)業(yè)技術(shù)綜合研究所;21世紀(jì)國際新技術(shù)株式會社;高斯株式會社