專利名稱：：一種含有脾臟多肽提取物的牛奶及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種含肽牛奶及其制備工藝，特別涉及一種從胎牛脾臟組織中提取脾臟多肽提取物的牛奶及其制備工藝。
背景技術(shù)：
：人們現(xiàn)代化的緊張快節(jié)奏生活方式，無(wú)形間促進(jìn)了惡性腫瘤，高脂血癥，高血壓，動(dòng)脈硬化，糖尿病，肥胖癥等的發(fā)生和大量亞健康人群的存在，也令人們更加關(guān)注自身的健康。除了對(duì)已病的治療外，更應(yīng)該注重未病的預(yù)防和保健。某些特殊的功能食品具有相應(yīng)的調(diào)節(jié)機(jī)體功能，可以增加對(duì)疾病的抵抗力。牛奶既是最富于營(yíng)養(yǎng)和人們最常用的食品之一，同時(shí)又是天然最優(yōu)良的乳劑，可以作為許多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、藥物和其它生物活性物質(zhì)理想的乳劑或營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化載體。雖然人類已經(jīng)發(fā)展了許多強(qiáng)化營(yíng)養(yǎng)素的牛奶，例如強(qiáng)化鈣、維生素A、D、牛黃酸等，但有關(guān)在牛奶中加入從胎牛脾臟組織中提取的脾臟多肽提取物的研究卻還未見(jiàn)有研究報(bào)道。脾臟活性肽又稱脾臟轉(zhuǎn)移因子，動(dòng)物脾臟產(chǎn)生的一簇多肽或蛋白質(zhì)激素，經(jīng)過(guò)活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)證明，具有促使淋巴干細(xì)胞分化及產(chǎn)生有細(xì)胞免疫活性的T細(xì)胞亞群的功能。動(dòng)物機(jī)體的特異性免疫包括細(xì)胞免疫和體液免疫，細(xì)胞免疫主要通過(guò)T淋巴細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)，體液免疫主要通過(guò)B淋巴細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)，并且有賴于T淋巴細(xì)胞的參與。實(shí)驗(yàn)證明脾臟轉(zhuǎn)移因子主要是通過(guò)T淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫機(jī)能，而B(niǎo)淋巴細(xì)胞在實(shí)現(xiàn)體液免疫機(jī)能的同時(shí)，也有T淋巴細(xì)胞的參與，因此，可認(rèn)為脾臟轉(zhuǎn)移因子有增強(qiáng)機(jī)體免疫的功能。目前脾臟活性肽在市場(chǎng)上只作為藥品的有效成分而應(yīng)用，用于抗感染藥，抗病毒抗真菌藥的免疫系統(tǒng)用藥。尚未有一種方法，將脾臟多肽提取物作為保健品中的有效成分，并結(jié)合牛奶的特殊保健功能，用以提高機(jī)體免疫功能。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于公開(kāi)一種含有從胎牛脾臟組織中提取的脾臟多肽提取物的牛奶，本發(fā)明的目的還在于公開(kāi)該牛奶的制備方法。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明肽乳的原料組成為牛奶100體積份脾臟多肽提取物0.12體積份。本發(fā)明肽乳的原料組成優(yōu)選為牛奶100體積份脾臟多肽提取物0.5體積份。本發(fā)明肽乳的原料組成優(yōu)選為牛奶100體積份脾臟多肽提取物0.25體積份。本發(fā)明肽乳的原料組成優(yōu)選為牛奶100體積份脾臟多肽提取物1.5體積份。其中脾臟多肽提取物的制備方法如下收集胎牛脾臟組織，將新鮮或冷凍的胎牛脾臟組織胞在室溫下用超純水洗凈，加入35倍體積的無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入38倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-1(TC-3(TC反復(fù)凍融23次;將凍融的勻漿在溫度48°C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心1030分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的脾臟多肽提取物；迸行除菌過(guò)濾，即得。其中脾臟多肽提取物的制備方法優(yōu)選為收集胎牛脾臟組織，將新鮮或冷凍的胎牛脾臟組織在室溫下用超純水洗凈，加入35倍體積的無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入5倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-2(TC反復(fù)凍融23次；將凍融的勻漿在溫度48'C,以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心20分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的部分，即得脾臟多肽提取物；進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得。脾臟多肽提取物中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%，90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽含量為8.913.6%。按常規(guī)方法將上述脾臟多肽提取物加入到鮮奶中，制成肽乳。本發(fā)明含肽牛奶是一種健康、安全并具有一定醫(yī)療作用的新型功能性食品，飲用該奶，可以改善腸道微生態(tài)環(huán)境，清除腸道中病原菌和腐敗菌及其產(chǎn)生的毒素，促進(jìn)機(jī)體健康。同時(shí)對(duì)人體安全無(wú)害，對(duì)腸道中一些有益微生物不會(huì)產(chǎn)生影響，沒(méi)有抗生素所具有的諸多副作用，不會(huì)使正常菌群失衡。通過(guò)現(xiàn)代的工藝方法提取有效成分可以制成保健品用于增強(qiáng)人體免疫力。將脾臟多肽提取物與牛奶有機(jī)結(jié)合，發(fā)揮了二者的優(yōu)勢(shì)，既能將奶制品的一些功能，如牛奶中的蛋白質(zhì)是人體可直接吸收利用的優(yōu)質(zhì)蛋白，主要含酪蛋白、白蛋白、球蛋白、乳蛋白，所含20多種人體所需氨基酸，且礦物質(zhì)和微量元素都是溶解狀態(tài)，很容易被人體消化吸收。脾臟多肽提取物又對(duì)機(jī)體的特異性免疫起到了直接的積極作用，可以明顯增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。因此，將在市場(chǎng)上有很好的應(yīng)用前景，將為人類的保健事業(yè)做出貢獻(xiàn)。下述實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1本發(fā)明所述脾臟多肽提取物對(duì)干細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的增殖作用實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)結(jié)果如表1，脾臟多肽提取物1:100、1:200、1:400、1:800、1:1600五個(gè)稀釋濃度組的淋巴細(xì)胞增殖率均顯著高于空白組，可以有效促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖；表l脾臟多肽提取物對(duì)淋巴細(xì)胞增殖活力的影響(體外)稀釋倍數(shù)OD值增殖率1:100稀釋1.388±0.1361'263,9%1:200稀釋1.197±0.1081'241.3%1:400稀釋1.216±0.071'243.6%1:800稀釋1.237±0.1661'246.0%1:1600稀釋1.316±0.0911'255.4%空白0.847±0.036-畫(huà)注l.P<0.05，與空白組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，含脾臟多肽提取物者增殖率高；2.P>0.05，不同稀釋濃度之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)例2本發(fā)明肽乳對(duì)小鼠免疫功能的影響SPF級(jí)昆明小鼠90只，46周齡，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組30只；A組給予本發(fā)明肽乳0.5ml/天灌胃；B組給予普通純牛奶0.5ml/天灌胃，C組給予生理鹽水O.5ml/天灌胃；連續(xù)灌胃15天后，調(diào)整初始細(xì)胞數(shù)約0.7X107ml，以細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)，結(jié)果如表2:表2肽乳對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞增殖活力的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注1.A組與B組比較P〈0.05，與普通純牛奶組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本發(fā)明含肽乳增值率高；2.A組與C組比較P〈0.05，與生理鹽水組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本發(fā)明含肽乳增殖率高；3.B組與C組比較P>0.05，與生理鹽水組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不能認(rèn)為普通牛奶與生理鹽水增值率有差別；連續(xù)灌胃45天后，按照O.lml/10g體重從小鼠的尾靜脈注入墨汁；在注入墨汁后2min、10min后，分別從眼球靜脈叢取血20ul，并立即將其加入到2ml0.1%Na2C03溶液中；用酶標(biāo)儀在620nm波長(zhǎng)處測(cè)定OD值，以0.1%Na2C03溶液作空白對(duì)照，計(jì)算小鼠吞噬指數(shù)，結(jié)果如表3:表3肽乳對(duì)小鼠非特異性免疫功能的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注1.A組與B組比較P〈0.05，與普通純牛奶組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本發(fā)明含肽乳校正的吞噬指數(shù)比普通牛奶高；2.A組與C組比較P<0.05，與生理鹽水組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，本發(fā)明含肽乳校正的吞噬指數(shù)比生理鹽水高；3.B組與C組比較P〉0.05，與生理鹽水組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不能認(rèn)為普通牛奶與生理鹽水有差別；結(jié)果證明本發(fā)明肽乳可以顯著增強(qiáng)小鼠細(xì)胞免疫功能和單核一巨噬細(xì)胞功能，具有免疫增強(qiáng)作用。下述實(shí)施例均能實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)例所述的效果。具體實(shí)施方式實(shí)施例l:收集胎牛脾臟組織，將新鮮的胎牛脾臟組織胞在室溫下用超純水洗凈，加入4倍體積無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入5倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-2(TC反復(fù)凍融2次；將凍融的勻漿在溫度48"C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心20分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的脾臟多肽提取物，其中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%，90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽含量為8.913.6%;進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得；將lml脾臟多肽提取物加入到200ml鮮乳中，包裝，即成肽乳。實(shí)施例2:收集胎牛脾臟組織，將冷凍的胎牛脾臟組織胞在室溫下用超純水洗凈，加入5倍體積無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入3倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-3(TC反復(fù)凍融3次；將凍融的勻漿在溫度48。C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心IO分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的脾臟多肽提取物，其中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%，90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽含量為8.913.6進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得；將0.5ml脾臟多肽提取物加入到200ml鮮乳中，包裝，即成肽乳。實(shí)施例3:收集胎牛脾臟組織，將新鮮的胎牛脾臟組織胞在室溫下用超純水洗凈，加入3倍體積無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入8倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-10'C反復(fù)凍融2次；將凍融的勻漿在溫度48"C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心30分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的脾臟多肽提取物，其中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%,90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽含量為8.913.6%;進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得；將3ml脾臟多肽提取物加入到200ml鮮乳中，包裝，即成肽乳。權(quán)利要求1、一種含有脾臟多肽提取物的牛奶，其特征在于100體積份牛奶中含有脾臟多肽提取物0.1～2體積份；其中脾臟多肽提取物的制備方法包括以下步驟收集胎牛脾臟組織，將新鮮或冷凍的胎牛脾臟組織在室溫下用超純水洗凈，加入3～5倍體積的無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入3～8倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-10℃～-30℃反復(fù)凍融2～3次；將凍融的勻漿在溫度4～8℃，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心10～30分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量＜30000道爾頓的脾臟多肽提取物；進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得。2、如權(quán)利要求1所述的牛奶，其特征在于100體積份牛奶中含有脾臟多肽提取物0.25、0.5或1.5體積份。3、如權(quán)利要求1或2所述的牛奶的制備方法，其特征在于按常規(guī)方法將脾臟多肽提取物加入到鮮奶中，制成肽乳。4、如權(quán)利要求3所述的牛奶的制備方法，其特征在于包括以下步驟收集胎牛脾臟組織，將新鮮或冷凍的胎牛脾臟組織在室溫下用超純水洗凈，加入35倍體積的無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入38倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-l(TC_3(TC反復(fù)凍融23次；將凍融的勻漿在溫度48'C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心1030分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的脾臟多肽提取物；進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得；將腦多肽提取物加入到鮮奶中，制成肽乳。5、如權(quán)利要求4所述的牛奶的制備方法，其特征在于其中脾臟多肽提取物的制備方法包括以下步驟收集胎牛脾臟組織，將新鮮或冷凍的胎牛脾臟組織在室溫下用超純水洗凈，加入35倍體積的無(wú)菌超純水，制成勻漿；再加入5倍體積的無(wú)菌超純水，混勻，置-20'C反復(fù)凍融23次；將凍融的勻漿在溫度48。C，以每分鐘8000轉(zhuǎn)離心20分鐘，去除沉淀；用切向流超濾設(shè)備截留上清液，取分子量<30000道爾頓的部分，即得脾臟多肽提取物;進(jìn)行除菌過(guò)濾，即得。6、如權(quán)利要求4或5所述的牛奶的制備方法，其特征在于脾臟多肽提取物中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%，90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽的含量為8.913.6%。7、如權(quán)利要求1或2所述的牛奶，其特征在于脾臟多肽提取物中分子量低于90道爾頓的多肽含量為48.0%55.5%，90130道爾頓的多肽含量為10.1%10.2%，130270道爾頓的多肽含量為25.5%28.2%，27030000道爾頓的多肽的含量為8.913.6%。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種含肽牛奶及其制備方法。本發(fā)明牛奶是通過(guò)在普通牛奶中添加一種從胎牛脾臟組織中提取的脾臟多肽提取物，并經(jīng)均質(zhì)工藝加工制成；其中制備脾臟多肽提取物的過(guò)程中采用勻漿、凍融、截留、過(guò)濾等步驟，制得的脾臟多肽提取物分子量＜30000道爾頓。大量實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的含肽牛奶具有提高機(jī)體免疫力的作用。文檔編號(hào)A23C9/152GK101167495SQ20071017860公開(kāi)日2008年4月30日申請(qǐng)日期2007年12月3日優(yōu)先權(quán)日2007年12月3日發(fā)明者杜啟科,谷登峰,陸家海申請(qǐng)人:于忠波