專利名稱：高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑及其制備的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種處理淀粉廢水的復合菌制劑及其制備方法。
背景技術：
用菌液絮凝處理淀粉廢水比常規(guī)的好氧-厭氧工藝處理可以節(jié)約投資成本六成以上。所以，該項技術具有重要的應用價值和廣闊的市場前景。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑及其制備方法。
本發(fā)明所采用的技術方案是高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑的制備方法，包括下述步驟1)菌體擴大培養(yǎng)分別挑取多粘芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)和啤酒酵母菌(Saccharomymycescerevisiae)均購于中科院微生物所菌種保存中心斜面保存菌種各一環(huán)，接種于LB培養(yǎng)液(胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，調pH7.5，121℃滅菌20min)10mL中，37℃振蕩培養(yǎng)24h～48h；將培養(yǎng)的菌液5～10mL再轉接入100mL新LB培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)24～48h至對數(shù)生長期(在600nm波長下，用722型分光光度計測定最大吸光值A約為1～2)。
2)取淀粉廢水90mL放于500mL的錐形瓶中，加入廢水重量0.1％-0.3％的酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃振蕩培養(yǎng)24～48h。
3)取淀粉廢水1000mL放于1000mL量筒中，加入10％CaCl225mL，再加入2)的25mL菌液，用2mol.L-1NaOH調pH9～10，攪拌2～3min，室溫放置2～3h后，虹吸除去上清液，沉淀用濾紙過濾，或者離心除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。以及由上述方法制備的高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑。
本發(fā)明的特點為1)以安全、可靠和不易基因突變的多粘芽孢桿菌和啤酒酵母菌組成復合菌群，利用他們的協(xié)同、共生作用，混合擴大培養(yǎng)后產生高效絮凝液。這兩種菌具有容易培養(yǎng)，可以直接利用淀粉廢水中的營養(yǎng)成分，而且，這兩種菌干燥后其菌體具有很高的營養(yǎng)價值，可以與沉淀物其它成分一起制備成富含蛋白的高級飼料。
2)制備菌液絮凝劑，成本低，除0.2％～0.3％的酵母膏外，其他所用試劑僅占總成本的1％左右。另外，用菌液絮凝處理淀粉廢水比常規(guī)的好氯-厭氧工藝處理可以節(jié)約投資成本六成以上，而且不受溫度的影響，在任何季節(jié)都可以進行廢水處理。所以，該項技術具有重要的應用價值和廣闊的市場前景。
本發(fā)明的有益效果1)絮凝效率高，以4g.L-1高齡土為對照，加入廢水重量2.5％的菌液絮凝率達98％。
2)淀粉廢水經絮凝處理后COD降至20mg/L，pH值8.0左右，已經接近地面水(II～III類)水質。處理后的廢水可以再用于甘薯淀粉的生產，也可以用于魚蝦的養(yǎng)殖，當然更可以用于農田灌溉。不僅避免了淀粉廢水對地上、地下水的污染，而且可以降低甘薯淀粉生產成本，又挽救回大量已浪費的水資源。
3)用復合菌制劑絮凝處理淀粉廢水，沉出物干燥后可以制備成富含蛋白質的高級飼料，變廢物為資源。
具體實施例方式
實施例11)菌體擴大培養(yǎng)分別挑取多粘芽孢桿菌和啤酒酵母菌斜面保存菌種各一環(huán)，接種于LB培養(yǎng)液(胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，調pH7.5，121℃滅菌20min)10mL中，37℃振蕩培養(yǎng)24～36h；將培養(yǎng)的菌液5～10mL再轉接入100mL新LB培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)24～48h至對數(shù)生長期(在600nm波長下，用722型分光光度計測定最大吸光值A約為1～2)。
2)取淀粉廢水90mL放于250mL的錐形瓶中，加入廢水重量0.1％～0.2％的酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃振蕩培養(yǎng)24h。
3)取淀粉廢水90mL放于100mL量筒中，加入10％CaCl22.5mL，再加入2)的2.5mL菌液，用2mol.L-1NaOH調pH9～10，攪拌2～3min，室溫放置3～5h后，虹吸除去上清液，沉淀用濾紙過濾，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后稱量沉淀物重0.28g.
實施例21)菌體擴大培養(yǎng)分別挑取芽孢桿菌和酵母菌斜面保存菌種各一環(huán)，接種于LB培養(yǎng)液(胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，調pH7.5，121℃滅菌20min)10mL中，37℃振蕩培養(yǎng)24～36h；將培養(yǎng)的菌液5～10mL再轉接入100mL新LB培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)24～48h至對數(shù)生長期(在600nm波長下，用722型分光光度計測定最大吸光值A約為1～2)。
2)取淀粉廢水(與實施例一相同)180mL放于1000mL的錐形瓶中，加入廢水重量的0.1％～0.2％的酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH7.5，接入1)的菌液20mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃振蕩培養(yǎng)24h。
3)取淀粉廢水(與實施例一相同)900mL放于1000mL量筒中，加入10％CaCl225mL，再加入2)的25mL菌液，用2mol.L-1NaOH調pH9.5，攪拌2～3min，室溫放置3h后，虹吸除去上清液，沉淀用濾紙過濾，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后稱量沉淀物重5.47g.
實施例31)菌體擴大培養(yǎng)分別挑取芽孢桿菌和酵母菌斜面保存菌種各一環(huán)，接種于LB培養(yǎng)液(胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，調pH7.5，121℃滅菌20min)10mL中，37℃振蕩培養(yǎng)36～48h；將培養(yǎng)的菌液5～10mL再轉接入100mL新LB培養(yǎng)液中，37℃振蕩培養(yǎng)24～48h至對數(shù)生長期至對數(shù)生長期(在600nm波長下，用722型分光光度計測定最大吸光值A約為1～2)。
2)取淀粉廢水(另一批廢水)270mL放于1000mL的錐形瓶中，加入廢水重量0.2％～0.3％的酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH8.0，接入1)的菌液30mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃振蕩培養(yǎng)48h。
3)取淀粉廢水(另一批廢水，同2))1800mL放于2000mL量筒中，加入10％CaCl2 50mL，再加入2)的50mL菌液，用2mol.L-1NaOH調pH10，攪拌2～3min，室溫放置2h后，虹吸除去上清液，沉淀用濾紙過濾，除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。干燥后稱量沉淀物重10.86g。
權利要求
1.一種高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑的制備方法，包括下述步驟1)菌體擴大培養(yǎng) 分別挑取多粘芽孢桿菌(Bacillus polymyxa)和啤酒酵母菌(Saccharomymyces cerevisiae)斜面保存菌種各一環(huán)，接種于10mL LB培養(yǎng)液中，(LB培養(yǎng)液由胰蛋白胨10g，酵母膏5g，氯化鈉10g，蒸餾水1000mL，調pH7.5，121℃滅菌20min制成)在37℃下振蕩培養(yǎng)24～48h；將培養(yǎng)的菌液5～10mL再轉接入100mL新LB培養(yǎng)液中，37℃，振蕩培養(yǎng)24～48h至對數(shù)生長期(在600nm波長下，用722型分光光度計測定最大吸光值A約為1～2)；2)取淀粉廢水80～90mL放于500mL的錐形瓶中，加入廢水重量0.1％-0.3％的酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH7.5～8.0，接入1)的菌液10～20mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃，振蕩培養(yǎng)24～48h；3)取淀粉廢水1000mL放于1000mL量筒中，加入10％CaCl225mL，再加入2)的25mL菌液，用2mol.L-1NaOH調pH9～10，攪拌2～3min，室溫放置2～3h后，虹吸除去上清液，沉淀用濾紙過濾，或者離心除去沉淀物中的水，在80℃下烘干沉淀物。
2.一種如權利要求1所述的高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種處理淀粉廢水的復合菌制劑及其制備方法。本發(fā)明高效絮凝處理淀粉廢水的復合菌制劑的制備方法，包括下述步驟1)菌體擴大培養(yǎng)；2)取淀粉廢水放于錐形瓶中，加入酵母膏，用過飽和氫氧化鈣溶液調pH7.5～8.0，接入1)的菌液10mL，瓶口覆蓋3～4層滅菌紗布，25～30℃振蕩培養(yǎng)24～48h；3)取淀粉廢水放于量筒中，加入10％CaCl
文檔編號C12N1/20GK1752201SQ20051001458
公開日2006年3月29日 申請日期2005年7月20日 優(yōu)先權日2005年7月20日
發(fā)明者張清敏, 李琳, 崔合香, 崔小會 申請人:南開大學