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高亞麻酸亞麻的制作方法

文檔序號:447798閱讀:401來源:國知局
專利名稱:高亞麻酸亞麻的制作方法
技術領域
本發(fā)明一般涉及農(nóng)業(yè)領域。更具體的,本發(fā)明涉及具有改變了的脂肪酸譜的亞麻種子,亞麻植物和亞麻油。
背景技術
不飽和脂肪酸包括單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸(PuFA)。PuFA有兩類ω-3和ω-6,它們被認為是必需脂肪酸(EFA),因為人類像所有哺乳動物一樣,不能合成這些脂肪酸,主要通過食物獲取它們。ω-3的一個代表是α-亞麻酸(LNA),并且在主要的種子油中,亞麻具有最高的亞麻酸含量。LNA代謝分解為二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),通過增加羧基基團的雙鍵,使碳鏈增長并使不飽和度增加。人類和動物能夠使LNA轉(zhuǎn)化為EPA和DHA。
必需脂肪酸有一些重要的功能它們能增加新陳代謝率,改善新陳代謝,增強氧攝入和能量的產(chǎn)生。EPA及其衍生物是包圍細胞的膜的組成成分,是膽固醇和三甘油酯的轉(zhuǎn)運和代謝過程中所必需的,是大腦正常發(fā)育和成人大腦功能發(fā)揮所必需的;人體從EPA生產(chǎn)激素樣物質(zhì),稱作前列腺素,它在人體中具有重要的調(diào)節(jié)作用,即調(diào)節(jié)動脈肌肉緊張,通過腎臟的鈉排泄,血小板粘附,炎癥反應和免疫功能。
除了在正常生長發(fā)育過程中是必需的,ω-3脂肪酸還在預防和治療下述疾病過程中發(fā)揮重要作用冠心病,高血壓,糖尿病,關節(jié)炎,以及其它炎性和自身免疫疾病,和癌癥。
培植亞麻主要是為了獲取亞麻油,亞麻油有許多工業(yè)用途制造油漆和涂料,油布,油墨,肥皂,漆皮,泥心油,制動襯面,等。亞麻籽油還可作為抗散裂劑和硬化劑,用于包括高速公路和橋梁的混凝土表面。
亞麻籽油作為工業(yè)用油是因為它的干燥特性,即當暴露在空氣中時能夠迅速干燥并形成持久的膜。亞麻籽油的這種干燥特性歸因于其高含量的不飽和脂肪酸,特別是亞麻酸。加拿大亞麻,根據(jù)栽培品種和生長條件,其亞麻酸含量為49-62%。種子形成時期的溫度和光周期會影響亞麻籽油中脂肪酸的不飽和程度。低溫和較長的光周期能增加亞麻酸的含量。其它影響亞麻酸含量變化的因素有土壤濕度,土壤肥沃程度和疾病的出現(xiàn)。
高亞麻酸亞麻油為人類營養(yǎng)品,動物飼料和寵物食品提供了一種有價值的、改進的ω-3脂肪酸來源。
很多工業(yè)應用都需要更高亞麻酸含量的亞麻籽油,并且其有可能產(chǎn)生新的工業(yè)用途。
明顯的,有生產(chǎn)高亞麻酸亞麻的需要。
發(fā)明概述本發(fā)明的第一個方面,提供了一種亞麻種子,該種子中的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
本發(fā)明的第二個方面,提供了一種亞麻種子,它是植物系M5791的產(chǎn)品。
本發(fā)明的第三個方面,提供了一種亞麻植物,它產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
本發(fā)明的第四個方面,提供了一種亞麻植物M5791。
本發(fā)明的第五個方面,提供了亞麻植物M5791的后代,該后代產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
本發(fā)明的第六個方面,提供了從上述亞麻植物獲得的種子。
本發(fā)明的第七個方面,提供了從上述種子制備的油。
本發(fā)明的第八個方面,提供了一種制備亞麻植物系的方法,包括下述步驟(a)將亞麻植物系M5791的植物或其后代與農(nóng)業(yè)優(yōu)良亞麻植物雜交,(b)篩選所述雜交的至少一個子代,該子代產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
(c)亞麻植物自體授粉,且因此使M5791子代的種子的亞麻酸含量穩(wěn)定。
附圖簡述表1是各種主要種子油中的脂肪酸組成。
表2是亞麻和高亞麻酸亞麻(M5791)的脂肪酸組成和碘值。
表3是加拿大各省的亞麻種子中的亞麻酸含量。
表4是四種在亞麻合作試驗中廣泛種植的加拿大亞麻栽培種的亞麻酸含量。
表5是M5791亞麻酸含量的分析結(jié)果。
表6是田間試驗中M5791的亞麻酸含量。


圖1顯示的是脂肪酸的結(jié)構(gòu)式。第一個數(shù)字(冒號之前)代表分子中的碳原子數(shù),第二個數(shù)字代表雙鍵的數(shù)量。ω3,ω6,ω9表示在給定脂肪酸分子中第一個雙鍵的位置。
圖2顯示的是n-6和n-3多不飽和脂肪酸的延長和去飽和作用。
圖3顯示的是高亞麻酸亞麻M5791的譜系。
優(yōu)選實施方案的描述除非另有定義,本文中所有的技術和科學術語與本發(fā)明所屬技術領域的普通技術人員通常理解的意義相同。雖然,與本文所描述的相似或相同的任意方法和材料都可以用于實踐和試驗本發(fā)明,本文所述的方法和材料是優(yōu)選的。本文提到的所有文獻都結(jié)合于此作為參考。
定義本文中,“高亞麻酸亞麻”是指亞麻種子或亞麻植物,其亞麻酸含量超過總脂肪酸的65%。
本文中,“炎性疾病”是指與炎性級聯(lián)反應的不適或過度激活有關的疾病。
本文中,“自身疫疾病”是指以通過宿主免疫系統(tǒng)破壞宿主組織為特征的疾病。
本發(fā)明涉及亞麻種子,亞麻植物或其產(chǎn)品,其中亞麻酸超過總脂肪酸含量的65%。在一些實施方案中,亞麻酸含量可能超過總脂肪酸含量的70%。在另一些實施方案中,亞麻酸含量可能達到總脂肪酸含量的70%-80%或70-75%。
如本文所討論的,亞麻系雜交能產(chǎn)生高亞麻酸亞麻系,命名為M5791。如表4和5所示,M5791顯示出比其它亞麻系高的多的亞麻酸含量。
本領域技術人員應當知道,如本文所述,生長條件能夠影響亞麻酸含量。然而,亞麻系M5791能夠用本領域已知的栽培和加工亞麻的方法進行培育和加工。
從種子中提取油的任何方法,即溶劑,冷壓,或蒸餾都不會改變M5791油的亞麻酸含量。
如上所述,亞麻和/或亞麻籽油已經(jīng)存在于很多工業(yè)產(chǎn)品,營養(yǎng)品和藥品中。
例如,亞麻籽油由于其干燥特性被用作工業(yè)用油,該特性與亞麻酸含量成直接比例關系。亞麻籽油的工業(yè)用途包括但不限于制造制動襯面,粘合劑,制造硬質(zhì)板和纖維板,保護性涂料、油漆、房屋用底漆、清漆、噴漆、染料、醇酸樹脂、瓷釉、環(huán)氧化油、地板涂料、油布、油毯、防水油布和其它涂層布、漆皮、工業(yè)用化學脂肪酸、肥皂、甘油、油墨、潤磨油、新聞用紙、泥心油、嵌縫化合物、防水化合物、水泥砂膠、鑄造用粘合劑、制動襯面、硬板、鞋油、除草劑、殺蟲劑載體、處理混凝土的抗散裂劑和硬化劑,回火油,粘合油和用于硬質(zhì)板及其類似物的高共軛油。因此,使用從高亞麻酸亞麻中獲取的亞麻籽油會產(chǎn)生,例如快干的油漆,涂料,墨水等。亞麻籽油工業(yè)用途的例子包括但不限于美國專利US5965633,5693715,5653789,3488202和4002585。
另外,上述亞麻籽油提取過程中剩余的渣滓也有工業(yè)用途,例如,作為動物飼料和寵物的食物。本領域人員應當知道,從高亞麻酸亞麻種子獲得的渣滓可以應用于本領域已知的亞麻種子渣滓的任何用途。由于具有較高的亞麻酸含量,高亞麻酸渣滓更有益處。
上述亞麻種子可以用于,例如生產(chǎn)高蛋白動物飼料。亞麻種子,亞麻油或渣滓可用于飼養(yǎng)奶牛和肉牛,豬和/或家禽,以增加由它們獲得的食品的亞麻酸水平,這些食品例如蛋,肉和奶。如上所述,種子和渣滓可用作寵物食物,種子和油還可作為養(yǎng)殖魚類的亞麻酸來源。
如上所述,多不飽和脂肪酸,例如亞麻酸,是必需脂肪酸,是增強新陳代謝、氧氣攝取和產(chǎn)生能量所必需的。因此,含有從高亞麻酸亞麻系中獲得的物質(zhì)的營養(yǎng)補充物或食品會有較高的多不飽和脂肪并因此更有益處。所以,高亞麻酸亞麻系,種子或其產(chǎn)品可以用于,例如,人類消費的營養(yǎng)補充物,食品,寵物的食物和動物飼料??墒秤玫漠a(chǎn)品包括,但不限于,蛋糕,松餅,面包制品(整個種子或面粉),替代烘焙制品或者熟的和干的谷類食品中的芝麻。亞麻酸或亞麻產(chǎn)品用作營養(yǎng)補充劑或食品的例子包括,但不限于US5069903和US6060101。
如上所述,亞麻酸也可預防和/或治療多種疾病,包括,例如冠心病,高血壓,糖尿病,關節(jié)炎和其它炎性或自身免疫性疾病。在這些實施方案中,制備了含有來自高亞麻酸亞麻物質(zhì)的補充劑或藥物成分,并使用它們治療和/或預防上述疾病。亞麻和/或亞麻籽油的醫(yī)療用途的實例包括但不限于US5859055,4415554,5468776和4058594。
在這些實施方案中,高亞麻酸亞麻籽油或高亞麻酸亞麻可以包含在片劑,膠囊,酊劑,軟膏,糊劑,乳劑等。
在一些實施方案中,治療有效濃度或劑量的高亞麻酸亞麻或亞麻籽油可與制藥學上或藥理學上可接受,生物可降解或非生物可降解的載體,賦形劑或稀釋劑聯(lián)合使用。載體的例子包括但不限于,例如聚(乙烯/乙酸乙烯酯),乳酸和羥基乙酸的共聚物,聚乳酸,明膠,膠原,多糖,聚(D,L丙交酯),聚蘋果酸,聚己內(nèi)酯,纖維素,白蛋白,淀粉,酪蛋白,糊精,聚酯,乙醇,丙烯酸酯,聚氨酯,聚乙烯,乙烯聚合物,乙二醇及其它們的混合物等。標準稀釋劑包括明膠,酪蛋白,卵磷脂,阿拉伯樹膠,膽固醇,黃芪膠,硬脂酸,殺藻胺,硬脂酸鈣,硬脂酸甘油酯,十六醇十八醇混合物,cetomacrogol乳化蠟,山梨醇酯,聚氧乙烯烷基醚,聚氧乙烯蓖麻油衍生物,聚氧乙烯山梨酸酯,聚乙二醇,聚氧乙烯硬脂酸酯,膠體二氧化硅,磷酸鹽,十二烷基硫酸鈉,羧甲基纖維素鈣,羧甲基纖維素鈉,甲基纖維素,羥乙基纖維素,羥丙基纖維素,羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯,非結(jié)晶纖維素,硅酸鎂鋁,三乙醇胺,聚乙烯醇,聚乙烯吡咯烷酮,糖和淀粉。參見,例如RemingtonThe Science and Practice of Pharmacy(第20版),2000,Gennaro,AR ed.,Eaton,PAMack Publishing Co.。
在另一些實施方案中,從高亞麻酸亞麻植物的種子中獲得的油用作其它藥物化合物的載體或稀釋劑。
本領域人員知道,應當根據(jù)所需用途,基于載體的特性和釋放特點選擇本技術領域已知的特定載體和載體組合。
所以,高亞麻酸亞麻系,其種子或其產(chǎn)品可以用于生產(chǎn)本領域已知的任何含有亞麻的產(chǎn)品。本領域人員應當知道,這些產(chǎn)品含有更高的亞麻酸含量并且更有益處。
本領域人員應當知道,可以使用本領域已知的方法,用亞麻植物M5791和其它亞麻系制備遺傳雜交體。
現(xiàn)在以實施例描述本發(fā)明,但本發(fā)明并不限于實施例的范圍。
實施例1-培植方法培植方法高亞麻酸亞麻是以傳統(tǒng)的植物培植方法培育的,即品種雜交,繁殖種系和收獲種系登記,在AAFC現(xiàn)代研究中心(AAFC Morden ResearchCentre,Morden,MB),從雜交體中篩選高亞麻酸含量的獨立個體。高亞麻酸亞麻的培育過程包括6次雜交。每次雜交,用譜系培植方法將F2代和隨后的雜交子代繁殖到F7代。從F2代開始篩選高亞麻酸含量的個體。應用Daun et al(J.Amer.Oil Chemists Society,60,1983)描述的方法,采用氣-液色譜分析F2代植株半粒種子的脂肪酸酯。使用剩余的種子,在溫室中培育高亞麻酸基因型的F3代。根據(jù)亞麻酸含量,從F4代中篩選單個植株。在冷室中培育此篩選植株的F5代。在Morden篩選高亞麻酸含量的F6代,并大量收獲種子。在冷室中培育積累F7代的種子。在1998,1999和2000年進行的重復試驗以及1998和1999年進行的田間試驗中評估高亞麻酸亞麻(表5)。
雜交F1-溫室F2-田間;通過半種子分析篩選高亞麻酸基因型F3-溫室F4-田間;篩選高亞麻酸含量的植株F5-冷室F6-田間;篩選高亞麻酸含量的種系并大量收獲種子F7-在冷室培育積累種子F8-在馬尼托巴(Manitoba)進行的重復試驗F9-在馬尼托巴進行的重復試驗以及在馬尼托巴和阿爾伯達(Alberta)進行的田間試驗

93-14492/93-15117y/3/92-235-4/93-15117y93-14492-NorLin/5173(M2854)//Culbert/FP827(91-4086)93-15117y-AC Linora/427-2(91-9791)//NorLin/Szegedi 62(91-4036)92-235-4-NorLin/5173(M2854)//McGregor/FP842(M3547)雜交日期第1次和第2次雜交 -1993年第3次雜交 -1995年譜系/雜交親本來源植物品種 來源AC Linora1AAFCAC McGregor2AFFCNorLin3AFFCRaja AFFCRedwood 654薩斯喀徹溫大學(U.of Saskatchewan),Saskatoon,SKCulbert5明尼蘇達大學(U.of Minnesota),St.Paul,Minn種系(AAFC培育的)5173-McGregor//Redwood 65/High Oil Line/3/C1 2941FP827-McGregor/3/Redwood 65//Valuta/RajaFP842-C12847/Culbert登記 來源Szegedi 62匈牙利Valuta瑞典C12847美國C12941美國
427-2阿根廷High Oil Line未知植物品種的描述1Can.J.Plant Sci.73839-841,19832Can.J.Plant Sci.66175-176,19863Can.J.Plant Sci.66171-173,19864Can.J.Plant Sci.45515-516,19655Crop Sci.17823,1977雖然以上描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施例,應當理解并意識到可以對其進行各種修飾,所附的權(quán)利要求包括所有這些落入本發(fā)明保護范圍的修飾。
表1 主要種子油中的脂肪酸組成脂肪酸含量%飽和酸 油酸 亞油酸 亞麻酸亞麻 9 20 13 58卡奴拉(Canola)6 58 26 10紅花 9 20 70 <1向日葵11 20 69 -玉米 13 25 61 1橄欖 14 77 81大豆 15 24 54 7花生 18 48 34 -棉籽 27 19 54 -出處農(nóng)業(yè)手冊(Agricultural Handbook)No.8-4。Human Nutr.Inform.Serv.,U.S.Dept.Agric.,Washington,DC.1979
表2 亞麻和高亞麻酸亞麻(M5791)的脂肪酸組成油中脂肪酸% 亞麻高亞麻酸亞麻棕櫚酸 C16:05.4 4.5硬脂酸 C18:03.1 2.2油酸 C18:117.19.7亞油酸 C18:214.710.8亞麻酸 C18:359.672.8碘值 196 217表3 加拿大各省亞麻種子的亞麻酸含量(1992-1999年)馬尼托巴薩斯喀徹溫 阿爾伯達 平均值1992 59.1 58.7 55.7 58.81993 57.9 61.0 60.7 59.71994 58.6 60.5 56.9 59.61995 55.8 59.4 60.8 58.11996 57.8 59.3 59.8 58.71997 58.8 57.4 58.9 58.01998 57.2 56.6 56.9 56.81999 60.4 59.4 59.0 59.6平均值58.2 59.0 58.6 58.7出處加拿大西部亞麻種子質(zhì)量,Grain Research Laboratory,Canadian Grain Commission,Winnipeg,MB.根據(jù)國際組織標準動物和植物脂肪和油脂15055081990E,用氣相色譜測定脂肪酸的甲基酯來確定亞麻酸含量。
表4 四種在亞麻合作試驗*中廣泛種植的加拿大亞麻的亞麻酸含量(試驗在馬尼托巴和薩斯喀徹溫的8個地點進行,1995-1999年)Manitoba SaskatchewanMorden Portage la Rosebank Brandon Indian Head Melfort Saskatoon Scott MeanPrairie1995AC McDuff 52.5 53.8 53.5 49.0 57.256.254.9 56.254.2CDC Normandy54.0 55.7 55.8 52.8 60.256.856.5 58.756.3Flanders55.0 56.5 56.3 52.0 60.258.957.5 58.956.9NorLin 53.8 55.4 54.5 53.1 60.056.756.5 58.956.1平均值 53.8 55.4 55.0 51.7 59.457.156.3 58.255.91996AC McDuff 53.6 55.2 55.5 52.6 55.453.854.4 56.054.6CDC Normandy55.8 54.6 57.6 54.9 58.256.756.4 58.156.5Flanders57.3 58.3 58.0 54.3 57.856.256.8 558.7 57.2NorLin 55.2 54.2 56.8 54.7 57.855.456.0 57.756.0平均值 55.5 55.6 57.0 54.1 57.355.555.9 57.656.01997AC McDuff 53.3 55.4 56.0 52.2 49.753.152.1 50.652.8CDC Normandy53.0 55.0 58.0 52.1 52.951.655.1 54.354.0Flanders55.9 58.9 58.1 53.8 53.954.855.1 53.755.5NorLin 52.9 56.8 57.7 53.1 51.952.555.4 53.954.3平均值 53.8 56.5 57.4 52.8 52.153.054.4 53.154.11998AC McDuff 51.5 51.9 51.4 46.9 50.847.949.5 45.549.5CDC Normandy53.8 53.2 53.2 48.9 53.751.452.3 48.251.8Flanders52.6 54.3 54.6 49.7 53.552.753.0 47.852.3
NorLin 52.753.554.049.853.450.051.348.051.6平均值 52.653.253.348.852.850.751.547.451.31999AC McDuff57.158.859.258.459.853.451.652.056.3CDC Normandy 59.959.060.058.260.153.556.155.557.8Flanders 60.261.162.449.061.454.654.755.658.7NorLin 59.459.059.858.859.453.355.454.957.5平均值 59.159.660.358.660.253.754.454.557.6總平均值 55.056.056.653.256.454.054.554.2*合作試驗由Prairie Registration Recommending Committee on Grain指導進行。根據(jù)Daun等人描述的方法(J.Amer.Oil Chemists’Society,60,1983),用氣-液色譜測定脂肪酸酯來確定亞麻酸含量。
表5 與三種商業(yè)栽培品種比較,1998和1999年在馬尼托巴進行的重復試驗中高亞麻酸亞麻M5791的亞麻酸含量*MordenBurdickPortage la Prairie1998高亞麻酸亞麻 70.1AC Emerson57.0Flanders 53.1NorLin55.21999試驗1高亞麻酸亞麻 70.9 71.9 72.7AC Emerson61.7 60.6 65.1Flanders 60.4 60.6 62.5NorLin59.7 57.8 59.3試驗2高亞麻酸亞麻 71.9 70.3AC Emerson58.6 59.2Flanders 58.2 60.3NorLin56.9 59.3試驗3高亞麻酸亞麻 72.0 71.3AC Emerson60.5 61.6Flanders 60.0 60.9NorLin58.6 58.2*根據(jù)Daun等人描述的方法(J.Amer.Oil Chemists’Society,60,1983),用氣-液色譜測定脂肪酸酯確定亞麻酸含量。
表6 1998和1999年,田間試驗中高亞麻酸亞麻(M5791)的亞麻酸含量地點 年份 亞麻酸含量%Fisher Branch,MB199872.71999田1 72.7田2 72.2Erickson,MB 199872.91999田1 72.9田2 72.9Gadsby,AB 199872.61999田1 72.6田2 73.1亞麻的用途亞麻籽油(高亞麻酸)粘合劑,例如制造硬質(zhì)板和纖維板,保護涂層 油漆,房屋漆底漆,清漆,噴漆,染料,醇酸樹脂,瓷釉,環(huán)氧化油粗制和精煉地板覆蓋材料油布煮沸 防水油布、油毯和其它涂層布潤磨油漆皮熱沸騰(聚合化油) 工業(yè)化學品脂肪酸,肥皂,甘油油墨,潤磨油,新聞紙,泥心油,嵌縫膠,防水劑,膠泥,鑄造粘合劑,制動襯面,硬質(zhì)板,鞋油,除草劑和殺蟲劑載體處理混凝土的抗散裂劑和硬化劑回火油,粘合油和用于硬質(zhì)板的高共軛油種子 專門食用產(chǎn)品-蛋糕,松餅
-面包制品(整個種子或面粉)-替代烘焙制品中的芝麻-熟的和干的谷類食品種子和油 健康食品-亞麻酸來源-制造藥丸-包含在藥物介質(zhì)突變體中亞麻渣滓 高蛋白動物飼料種子,亞麻油,渣滓奶牛和肉牛,豬和家禽的飼料,以增加由它們獲得的食品,例如蛋,肉和奶的亞麻酸水平。
寵物食物種子和渣滓魚類養(yǎng)殖的飼料種子和油—魚類,例如鮭魚,生長所需的亞麻酸來源。
權(quán)利要求
1.亞麻種子,其亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
2.權(quán)利要求1所述的亞麻種子,其中亞麻酸含量超過70%。
3.亞麻種子,它是植物系M5791的產(chǎn)品。
4.亞麻植物,它產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
5.權(quán)利要求4所述的亞麻植物,其中亞麻酸含量超過70%。
6.亞麻植物M5791。
7.亞麻植物M5791的后代,其中所述后代產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
8.權(quán)利要求7所述的后代,其中亞麻酸含量超過70%。
9.權(quán)利要求4,5,6,7或8所述亞麻植物的種子。
10.從權(quán)利要求1,2,3或9所述種子制備的油。
11.包含權(quán)利要求1,2,3或8所述的亞麻種子的產(chǎn)品。
12.權(quán)利要求11所述的產(chǎn)品,其中亞麻種子是磨碎的。
13.一種生產(chǎn)亞麻植物系的方法,包括以下步驟(a)將亞麻植物系M5791植物或其后代與農(nóng)業(yè)優(yōu)良亞麻植物雜交;和(b)篩選所述雜交的至少一個子代,該子代產(chǎn)生的種子的亞麻酸含量超過所述種子總脂肪酸含量的65%。
14.含有從亞麻種子提取油后剩余渣滓的產(chǎn)品,所述亞麻種子的亞麻酸含量超過65%。
全文摘要
本發(fā)明涉及生產(chǎn)和應用亞麻酸含量大于 65%總脂肪酸含量的亞麻種子。
文檔編號A21D13/08GK1642410SQ03806083
公開日2005年7月20日 申請日期2003年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月30日
發(fā)明者E·O·凱納舒克 申請人:由加拿大農(nóng)業(yè)及農(nóng)產(chǎn)品部長代表的加拿大女王陛下
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