專利名稱：細(xì)菌集合體ebc1000及用該細(xì)菌集合體ebc1000對(duì)工業(yè)廢水、廢物和土壤中含有的難分解 ...的制作方法
通過(guò)使用物理或化學(xué)的方法如焚燒、垃圾掩埋法、化學(xué)制品、電解、膜分離或其它類似的方法，嘗試處理通常倒入海里的工業(yè)廢水或有害廢物中的難分解有毒物質(zhì)。但這些傳統(tǒng)方法存在經(jīng)濟(jì)上和環(huán)境上的問(wèn)題。而生物學(xué)處理方法是滿足環(huán)境學(xué)、衛(wèi)生學(xué)、生態(tài)學(xué)和經(jīng)濟(jì)學(xué)各方面要求的最有效，最安全的方法。已對(duì)生物學(xué)方法進(jìn)行了許多研究，如在河口處使用自然生態(tài)系統(tǒng)，如淤泥。但這些方法不能解決大量工業(yè)廢物的處理問(wèn)題。
本發(fā)明涉及一種新型細(xì)菌集合體EBC1000及一種用該細(xì)菌集合體EBC1000對(duì)包含于工業(yè)廢水，廢物，土壤或類似物中的難分解有毒化學(xué)物質(zhì)和含氯化合物進(jìn)行生物處理的方法。更具體說(shuō)，本發(fā)明涉及一種新型的細(xì)菌集合體EBC1000，它能夠顯著降解高濃度含氯化合物及從土壤和廢水中分離的、CODMn為20,000到100,000ppm的廢酸性或廢堿性難分解有毒化學(xué)物質(zhì)，如倒入海里的制藥工業(yè)廢水中的化學(xué)物質(zhì)，例如連二亞硫酸鈉、丁二烯、烷基芳基萘磺酸鈉、丙烯氰、乙二胺四乙酸四鈉二水合物、七水硫酸鐵、叔十二烷基硫醇、對(duì)甲烷氫過(guò)氧化物、N-二乙基羥基胺和CH3CN。
本發(fā)明人分離到一種新型的細(xì)菌集合體EBC1000(KCTC 0652 BP)，它具有快速降解包含在準(zhǔn)備倒入海里的土壤和廢水中的高濃度的難分解廢物及含氯化合物的特性，所用的土壤和廢水是在韓國(guó)蔚山工業(yè)廠區(qū)和石化工業(yè)廠區(qū)收集的。細(xì)菌集合體EBC1000包括9株菌，每株均有降解難分解廢物的能力。而且發(fā)現(xiàn)細(xì)菌集合體EBC1000以一種好氧方式降解準(zhǔn)備倒入海里的、制藥和石油工業(yè)廢水中的、化學(xué)耗氧量(CODMn)為20,000到100,000ppm的廢酸性或廢堿性難分解廢物，7天內(nèi)可降解80％，10天內(nèi)可降解90％，240小時(shí)內(nèi)可降解至少80％到90％。包含在制藥工業(yè)廢水中的廢酸性或堿性(例如pH 3或pH 14)難分解廢物的例子包括異丙醇(IPA，10,000到20,000ppm)，亞甲基氯(MC，100到7,000ppm)，NaOH(可變(changeable))，硫酸鈉(可變)，二甲胺(DMA，70到2,500ppm)、甲醇(MeOH，27,000到54,000ppm)，有機(jī)物和抗生素殘余物(40,000到100,000ppm)及氯離子(4,000到33,000ppm)。包含在石油工業(yè)廢水中的廢酸性或堿性(例如pH 1.2，3.0或5.0)難分解廢物的例子包括連二亞硫酸鈉(SHS，(NaSO2)2，30ppm)，丁二烯(BD，可變)，烷基芳基萘磺酸鈉(Tamol-SN，4,000到20,000ppm)，丙烯氰(AN，可變)，乙二胺四乙酸四鈉二水合物(EDTA，20到200ppm)，七水硫酸鐵(FES，60ppm)、叔十二烷基硫醇(TDDM，4,000ppm)，對(duì)甲烷氫過(guò)氧化物(PMH，400ppm)、N-二乙基羥基胺(DEHA，200ppm)和CH3CN(可變)。
因此，本發(fā)明提供一種新型的可降解難分解有毒化學(xué)物質(zhì)和含氯化合物的細(xì)菌集合體EBC1000，及一種用該細(xì)菌集合體EBC1000對(duì)污染工業(yè)廢水，廢物和土壤的難分解有毒化學(xué)物質(zhì)和含氯化合物進(jìn)行生物處理的方法。
發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案下面對(duì)分離，鑒定和測(cè)定新型細(xì)菌集合體EBC1000活性進(jìn)行描述。
1.分離新型細(xì)菌集合體EBC1000(1)從樣品的振蕩培養(yǎng)物中分離40株菌。
將取自蔚山工業(yè)廠區(qū)的土壤(1克)和廢水(10毫升)接種到廢酸性和堿性廢物液體培養(yǎng)基(制備如下K2PO4(0.65g)，KH2PO4(0.17g)，MgSO4(0.1g)，NaNO3(0.5g)及10％制藥和石油工業(yè)廢液中包含難分解化學(xué)物質(zhì)的廢酸性和堿性廢水，溶于1升去離子水中，pH 0到14)和含氯化合物液體培養(yǎng)基(制備如下K2PO4(0.65g)，KH2PO4(0.17g)，MgSO4(0.1g)，NaNO3(0.5g)及五氯苯酚(PCP，50ppm)，溶于1升去離子水中，pH7.2)中，然后在20到30℃振蕩培養(yǎng)5天以上。
收集1毫升振蕩培養(yǎng)物并接種到廢棄的酸性或廢棄的堿性固體培養(yǎng)基(制備如下在廢棄的酸性或堿性液體培養(yǎng)基中僅加入1.5％瓊脂，pH7.0)及含氯化合物固體培養(yǎng)基(制備如下在含氯化合物液體培養(yǎng)基中加入20毫克BTB和1.5％瓊脂)中，然后在20到30℃振蕩培養(yǎng)10天。
將分離到的每個(gè)純菌落進(jìn)一步接種到上述培養(yǎng)基中，然后振蕩培養(yǎng)，這樣分離到40株有用的細(xì)菌，它們各自形成不同的菌落形式，而且連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)后有相同的菌落。
(2)將步驟(1)中分離到的細(xì)菌在濃度遞增的難分解廢水培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，從而分離出9株能力更高的菌株。
步驟(1)中分離到的細(xì)菌各自順次接種到基本培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基包含50％粗廢水和80％含有制藥和石油廢水中的難分解化學(xué)物質(zhì)的廢水，及包含500ppm五氯苯酚化合物，然后重復(fù)步驟(1)中同樣的流程，這樣分離到9株可生長(zhǎng)在含有更高含量難分解化學(xué)物質(zhì)的廢水中的，能力更高的菌株。
這9株細(xì)菌，分別被命名為EBC100，EBC101，EBC103，EBC104，EBC105，EBC106，EBC107，EBC108和EBC109，組成一個(gè)名為“EBC1000”的細(xì)菌集合體。
該新型的細(xì)菌集合體EBC1000于1999年8月12日保藏在韓國(guó)生物科學(xué)與生物技術(shù)研究所的韓國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)為KCTC 0652BP。
2.細(xì)菌集合體EBC1000生長(zhǎng)條件的優(yōu)化在Luria-Bertani營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(在1升去離子水中含有10克細(xì)菌用胰蛋白胨，5克細(xì)菌用酵母培養(yǎng)物及10克氯化鈉)中、pH 5到8、25到35℃、50到100rpm/min振蕩培養(yǎng)24到48小時(shí)，細(xì)菌集合體EBC1000生長(zhǎng)最好。在同樣的條件下，細(xì)菌集合體EBC1000連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)后，生長(zhǎng)也很好。
3.鑒定細(xì)菌集合體EBC1000被命名為EBC100、EBC101、EBC103、EBC104、EBC105、EBC106、EBC107、EBC108和EBC109的組成細(xì)菌集合體EBC1000的各株細(xì)菌，是革蘭氏陰性和陽(yáng)性細(xì)菌的混合物，并有不同的形狀和大小。當(dāng)在Luria-Bertani培養(yǎng)基中培養(yǎng)24小時(shí)后，EBC100形成一直徑1毫米的圓形菌落，EBC101形成一大的直徑約2毫米的圓形菌落，EBC103形成一厚的直徑約2毫米的圓形菌落，EBC104和EBC105形成一小的直徑約0.5毫米的圓形菌落，EBC106形成一厚的直徑約3毫米的圓形菌落，EBC107形成一直徑約1.2毫米的褐色菌落，EBC108形成一直徑約1毫米的黃色菌落，EBC109形成一直徑約2毫米的雙環(huán)菌落，這9株菌均為好氧的通氣的細(xì)菌。EBC100，EBC101，EBC103，EBC106，EBC107和EBC108在pH 3到4的強(qiáng)酸條件下和pH 9到11的強(qiáng)堿條件下均有較高的成活性。EBC104，EBC105和EBC109生長(zhǎng)較慢，而EBC100，EBC104，EBC105和EBC109表現(xiàn)出運(yùn)動(dòng)性。
關(guān)于細(xì)菌集合體EBC1000中各組成株的屬的描述如下EBC100，EBC101和EBC103是克雷伯氏菌屬的菌株，EBC105是普羅威登斯菌屬的菌株，EBC104和EBC109是埃希氏菌屬的菌株，EBC106是芽孢桿菌屬的菌株，EBC107是革蘭氏陰性菌，EBC108是革蘭氏陽(yáng)性菌。
各菌株的特征列于表1和2中。

此外，每個(gè)菌株都通過(guò)氣相色譜對(duì)脂肪酸甲酯(FAMEs)進(jìn)行了分析。
FAMEs的測(cè)定是用Hewlett Packard系列II的色譜模型S890A(Micorbial ID.Inc.，Delaware，USA)進(jìn)行的，它具有一個(gè)25cm×0.22mm×0.33的色譜分離柱，如用甲基苯基硅膠融合的毛細(xì)管氣相色譜柱(HP 19091 B-102)。
氣相色譜是在以下條件下進(jìn)行的載氣為氫氣，柱頭壓為10psi，分流比為100∶1，分流流量為50ml/min，隔片凈化流量為5ml/min，F(xiàn)ID(火焰電離檢測(cè)器)氫氣流量為30ml/min，F(xiàn)ID氮?dú)饬髁繛?0ml/min，F(xiàn)ID空氣流量為30ml/min，起始溫度為170℃，程序升溫速度為5℃/min，最終溫度為270℃，F(xiàn)ID檢測(cè)器溫度為300℃，進(jìn)樣口溫度為250℃，進(jìn)樣體積為2微升。
利用微生物鑒定系統(tǒng)軟件(Microbial ID，Inc.，Delaware，USA)獲得FAME圖譜。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)混合物比較及測(cè)定持留時(shí)間，峰區(qū)域和峰的百分比可以對(duì)色譜峰進(jìn)行鑒定。
通過(guò)對(duì)EBC100，EBC101和EBC103三株菌分別進(jìn)行FAMEs測(cè)定，發(fā)現(xiàn)它們的胞內(nèi)脂肪酸組成如下EBC100為C120，C140，C160，C161，C170 cyclo，C140 3OH；EBC101為C120，C140，C150，C160，C170cyclo，C140 3OH；EBC103為C140，C150，C160，C170 cyclo，C1403OH。
4.分離細(xì)菌集合體EBC1000的組成菌株通過(guò)以下流程從細(xì)菌集合體EBC1000分離單個(gè)菌株。
當(dāng)培養(yǎng)在Luria-Bertani固體瓊脂營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(在950毫升去離子水中含有10克細(xì)菌用蛋白胨，5克細(xì)菌用酵母培養(yǎng)物，10克氯化鈉及1.5％瓊脂)中，EBC106(Bacillus)的特征為形成厚的Bacillus特定的皺褶，EBC107(革蘭氏陰性菌)形成褐色菌落，EBC108(革蘭氏陽(yáng)性菌)形成黃色菌落。
對(duì)于其它菌株，可通過(guò)將細(xì)菌集合體EBC1000稀釋涂布在去氧膽酸鹽瓊脂上對(duì)其菌落進(jìn)行鑒定，該去氧膽酸鹽瓊脂是在1升去離子水中含10克細(xì)菌用蛋白胨，10克細(xì)菌用乳糖，1克去氧膽酸鈉，5克氯化鈉，2克磷酸氫二鉀，1克檸檬酸鐵，1克檸檬酸鈉，15克細(xì)菌用瓊脂及0.03克中性紅(Difco manual，1984)。當(dāng)在去氧膽酸鹽瓊脂上培養(yǎng)24小時(shí)后，EBC100，EBC101和EBC103形成有黏度的紅白斑，且其大小略有不同，EBC104形成無(wú)黏度的紅白斑，EBC105形成有黏度的褐色斑，EBC106和EBC107形成有黏度的淡褐色斑，EBC108形成有黏度的無(wú)色斑，EBC109形成有黏度的紅色斑(參考Dictionary of Microbiology and MolecularBiology，2nd，Paul Singleton Dian Sainsbury，1987)。
5.細(xì)菌集合體EBC1000的特征(1)細(xì)菌集合體EBC1000對(duì)烷基芳基萘磺酸鈉(Tamol-SN)的降解速度將濃度遞增的500ppm、1000ppm、2000ppm和4000ppm Tamol-SN加入到基本培養(yǎng)基中(pH7.2)，該培養(yǎng)基的制備是將0.065g K2HPO4、0.017gKH2PO4、0.1g MgSO4和0.5g NaNO3溶于1升去離子水中而得到的。接種細(xì)菌集合體EBC1000后，通過(guò)消逝時(shí)間測(cè)定Tamol-SN的濃度和吸收值，結(jié)果列于表3中。
如表3所示，當(dāng)Tamol-SN的濃度為500ppm時(shí)，Tamol-SN每小時(shí)的降解速度為1.3mg/l/h，當(dāng)Tamol-SN的濃度為4000ppm時(shí)，降解速度為4.0mg/l/h。
(2)細(xì)菌集合體EBC1000對(duì)五氯苯酚化合物的降解速度將濃度遞增的200ppm，500ppm，1000ppm和2000ppm五氯苯酚化合物加入到培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基的制備是將20mg BTB溶解在(1)中所描述的基本培養(yǎng)基中。接種細(xì)菌集合體EBC1000后，每小時(shí)測(cè)定五氯苯酚的濃度和吸收值，結(jié)果列于表4中。
6.用細(xì)菌集合體EBC1000處理難分解工業(yè)廢水實(shí)驗(yàn)例1用細(xì)菌集合體EBC1000處理包含在石油工業(yè)廢水中的難分解特殊乳化劑。
將1％石油加工廠所用的，典型的難分解化學(xué)物質(zhì)烷基芳基萘磺酸鈉(Tamol-SN)的粗液加入到50ml基本培養(yǎng)基(pH7.2)中，該培養(yǎng)基的制備是將0.065g K2HPO4、0.017g KH2PO4、0.1g MgSO4和0.5g NaNO3溶于1升去離子水中而得到的。接種2.0×104/ml細(xì)菌集合體EBC1000后，在25到30℃，100rpm振蕩培養(yǎng)10天。結(jié)果列于表5中。
如表5所示，培養(yǎng)4天后，Tamol-SN的濃度為850ppm，細(xì)菌數(shù)為2.5×107CFU/ml。
實(shí)驗(yàn)例2用細(xì)菌集合體EBC1000處理石油加工廠中難分解粗廢水。
從蔚山工業(yè)廠區(qū)石油加工廠中收集準(zhǔn)備倒入海里的，廢棄的酸性和堿性難分解廢水。該廢水包含4000ppm烷基芳基萘磺酸鈉(Tamol-SN)，連二亞硫酸鈉[(NaSO2)2]，丁二烯(BD)、丙烯氰(AN)、乙二胺四乙酸四鈉二水合物(EDTA)、七水硫酸鐵(FES)、叔十二烷基硫醇(TDDM)、對(duì)甲烷氫過(guò)氧化物(PMH)、N-二乙基羥基胺(DEHA)和CH3CN等。將1.2×107/ml細(xì)菌集合體EBC1000接種到200ml粗廢液中，25到30℃，80rpm振蕩培養(yǎng)10天。結(jié)果列于表6中。
如表6所示，培養(yǎng)10天后，粗廢液的COD值降到750ppm，降解效率為80％。TOC和BOD值和COD值一樣，有一個(gè)下降的趨勢(shì)，而且細(xì)菌數(shù)至少增加100倍，達(dá)到5.1×109CFU/ml。
本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)例中所用的分析方法如下所述，作為參考1)COD(Mn)分析化學(xué)耗氧量(COD)是根據(jù)正式的水污染和廢物處理檢測(cè)方法(OfficialNo.1993-42，the Ministry of Environment)及標(biāo)準(zhǔn)方法(APHA，AWWA，WPCF，18thed.)通過(guò)COD Mn方法進(jìn)行測(cè)定。向水浴中加入硫酸和0.025NKMNO4后，加入10ml準(zhǔn)備倒入海里的粗廢液或廢物質(zhì)，及有害物質(zhì)用微生物降解處理后的廢水，加熱到100℃，保持30分鐘。然后加入0.025NNa2C2O4，用KMNO4滴定混合物，以測(cè)定COD的實(shí)際消耗。
2)BOD分析生物耗氧量(BOD)的測(cè)定是根據(jù)正式的水污染和廢物處理檢測(cè)方法及標(biāo)準(zhǔn)方法，在20℃生物反應(yīng)5天后測(cè)定消耗的溶解氧的量。
3)TOC分析根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方法，將粗廢物，廢水和不同時(shí)間的取樣進(jìn)行離心，用TOC分析儀(TOC-5000 A，Shimadzu com.)分析所得的上清液中總有機(jī)碳(TOC)的含量。
4)CFU檢驗(yàn)根據(jù)細(xì)菌檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)方法，通過(guò)平板計(jì)數(shù)法分析集合體中的天然細(xì)菌和處理后的各接種樣品。測(cè)定試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)細(xì)菌的生長(zhǎng)和有害物質(zhì)降解的消耗時(shí)間。
5)提取和分析含氯化合物按照韓國(guó)專利No.154295或韓國(guó)專利申請(qǐng)No.98-20706的內(nèi)容及本發(fā)明人的文獻(xiàn)(Journal of Applied Microbiology 85-1-1-8，1998；Journal of KoreaSoil Environment Sociey，1-1-39-46，1996)，提取和分析含氯化合物。
實(shí)驗(yàn)例3用細(xì)菌集合體EBC1000處理制藥加工廠中難分解廢水。
收集蔚山工業(yè)廠區(qū)和中北部地區(qū)制藥加工廠中準(zhǔn)備倒入海里的，廢棄的酸性和堿性難分解廢水。該廢水包含藥品殘余物及異丙醇(IPA)、亞甲基氯(MC)、氫氧化鈉、硫酸鈉、二甲胺(DMA)和甲醇，它們的CODMn值較高，在20,000ppm到10,000ppm。在每200ml廢水中接種2.0×107/ml細(xì)菌集合體EBC1000，20到25℃，通風(fēng)培養(yǎng)14天。結(jié)果列于表7中。
如表7所示，培養(yǎng)10天后，粗廢水的COD值降到4000ppm，降解效率為90％。TOC和BOD值和COD值一樣，也有一個(gè)下降的趨勢(shì)，而且細(xì)菌數(shù)至少增加1000倍，達(dá)到1.6×1010CFU/ml。
7.對(duì)被含氯化合物污染的土壤和木材的檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)例4用細(xì)菌集合體EBC1000處理被含氯化合物污染的土壤。
將600g被五氯苯酚化合物(PCP)污染的土壤分散到5升自來(lái)水中，持續(xù)分散1天，然后加到一個(gè)盛泥漿的裝置中。與Bu34菌株+11株降解菌(一株韓國(guó)專利申請(qǐng)No.98-20706所介紹的菌株Bu1和10株可降解五氯苯酚的未鑒定菌株)+1株天然的未鑒定菌株(通過(guò)相對(duì)比較分離而得，考慮到天然菌株的分布，作為除降解株之外的對(duì)照)對(duì)五氯苯酚化合物的降解效率相比較，該新型的細(xì)菌集合體EBC1000表現(xiàn)出稍高的降解效率，如表8所示。例如，培養(yǎng)14天后，Bu34菌株降解含氯化合物的效率為96％，而細(xì)菌集合體EBC1000的效率為98％。
實(shí)驗(yàn)例5將每5g廢棄木材的碎片和鋸屑加入到65ml基本培養(yǎng)基中，接種EBC1000，然后在30℃，90到100rpm振蕩培養(yǎng)90小時(shí)。結(jié)果列于表9中。如表9所示，接種培養(yǎng)80小時(shí)后，五氯苯酚(PCP)的降解效率為98％，EBC1000的細(xì)菌數(shù)目增加100倍。
實(shí)驗(yàn)例6將200g廢棄木材的鋸屑加入到250ml基本液體培養(yǎng)基中，接種2.0×108/g(木材)的EBC1000，然后將濕氣和菌株加到鋸屑中，混合物在室溫下放置200天(參考“composting Method”，McBain etal.，Biodegradation 6，47-55，1995)。結(jié)果列于表10中。如表10所示，新型細(xì)菌集合體EBC1000在更短的時(shí)間內(nèi)表現(xiàn)出比Bu1或Bu34更高的降解效率。
從上面的實(shí)驗(yàn)例可看出，新型細(xì)菌集合體EBC1000可用來(lái)有效降解含氯化合物和包含在準(zhǔn)備倒入海里的廢水中的，高濃度的難降解有毒化學(xué)物質(zhì)。
8.通過(guò)EBC1000中單個(gè)組成菌株對(duì)難分解廢水[COD(Mn方法)]和五氯苯酚化合物進(jìn)行降解的分析實(shí)驗(yàn)將分離到的EBC100、EBC101、EBC103、EBC104、EBC105、EBC106、EBC107、EBC108和EBC109的純菌落接種到20ml廢酸性或堿性廢水液體培養(yǎng)基(制備如下用1升去離子水稀釋10％廢酸性和堿性廢水，并包含0.65g K2PO4、0.17g KH2PO4、0.1g MgSO4、0.5g NaNO3及制藥和石油工業(yè)廢水中難分解化學(xué)物質(zhì)，pH 0到14)和20ml含氯化合物液體培養(yǎng)基(制備如下0.65g K2PO4，0.17g KH2PO4，0.1g MgSO4，0.5g NaNO3及50ppm五氯苯酚，溶于1升去離子水中，pH7.2)中。在20到30℃振蕩培養(yǎng)10天以上，測(cè)定COD值和PCP濃度。結(jié)果如下，平均來(lái)說(shuō)，EBC100使COD和PCP濃度降低85％，EBC101和EBC103使COD和PCP濃度降低67％，EBC106，EBC107和EBC108使COD和PCP濃度降低50到55％，EBC104，EBC5和EBC109使COD和PCP濃度降低約20％。結(jié)果表明，細(xì)菌集合體EBC1000中的單個(gè)組成菌株具有降解難分解有毒化學(xué)物質(zhì)和含氯化合物的能力，但細(xì)菌集合體EBC1000比單個(gè)的組成菌株有更高的生長(zhǎng)量和更高的降解效率。
如上所述，新型的細(xì)菌集合體EBC1000具有快速降解包含在準(zhǔn)備倒入海里的工業(yè)廢水和有害廢物中的高濃度難分解化學(xué)物質(zhì)，及純化被含氯化合物污染的土壤、木材、地表水和地下水的能力，從而可很好地預(yù)防和修復(fù)環(huán)境污染。
另外，細(xì)菌集合體EBC1000可通過(guò)通氣方式用于處理準(zhǔn)備倒入海里的高濃度難分解廢物，或被含氯化合物污染的土壤、木材、地表水和地下水，并可以回收被污染的木材。本發(fā)明還提供一種用于回收被污染的木材或土壤的假單胞菌Bu34菌株(韓國(guó)專利No.154295)和克雷伯氏菌屬的Bu1菌株(韓國(guó)專利申請(qǐng)No.98-20706)的混合物。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)菌集合體EBC1000(KCTC0652 BP)，其在Luria-Bertani營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上、pH 5到8、溫度25到35℃、振蕩50-100rpm/min的條件下培養(yǎng)24到48小時(shí)，最適于生長(zhǎng)，其中所述Luria-Bertani營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基是指在1升去離子水中含有10克細(xì)菌用胰蛋白胨，5克細(xì)菌用酵母培養(yǎng)物及10克氯化鈉的培養(yǎng)基，細(xì)菌集合體EBC1000在相同條件下連續(xù)轉(zhuǎn)接培養(yǎng)，生長(zhǎng)很好。
2.一種用細(xì)菌集合體EBC1000處理準(zhǔn)備倒入海里的制藥或石油工業(yè)廢水中含有的廢酸或堿性難分解有毒化學(xué)物質(zhì)、或含氯化合物的方法，其中制藥工業(yè)廢水所含有的難分解有毒化學(xué)物質(zhì)包括異丙醇，亞甲基氯，NaOH，硫酸鈉，二甲胺和甲醇，石油工業(yè)廢水中所含有的難分解有毒化學(xué)物質(zhì)包括連二亞硫酸鈉[(NaSO2)2]，丁二烯，烷基芳基萘磺酸鈉，丙烯氰，乙二胺四乙酸四鈉二水合物，七水硫酸鐵、叔十二烷基硫醇，對(duì)甲烷氫過(guò)氧化物、N-二乙基羥基胺和CH3CN，含氯化合物包括五氯苯酚(PCP)。
3.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC100。
4.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC101。
5.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC103。
6.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含埃希氏菌屬的一種菌株EBC104。
7.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含普羅威登斯菌屬的一種菌株EBC105。
8.如權(quán)利要求1中所要求的細(xì)菌集合體EBC1000，其包含埃希氏菌屬的一種菌株EBC109。
9.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC100。
10.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC101。
11.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含克雷伯氏菌屬的一種菌株EBC103。
12.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含埃希氏菌屬的一種菌株EBC104。
13.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含普羅威登斯菌屬的一種菌株EBC105。
14.如權(quán)利要求2中所要求的方法，其中細(xì)菌集合體EBC1000包含埃希氏菌屬的一種菌株EBC109。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新型細(xì)菌集合體EBC1000(KCTC 0652 BP)和一種用該細(xì)菌集合體EBC1000對(duì)含氯化合物及包含在工業(yè)廢水、廢物和土壤中的難分解有毒化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行生物處理的方法。新型細(xì)菌集合體EBC1000(KCTC 0652 BP)由易培養(yǎng)的好氧細(xì)菌組成,可用于降解含氯化合物和包含在工業(yè)廢物中的,高濃度的廢棄的酸性或堿性難分解有毒化學(xué)物質(zhì),如IPA,MC,DMA,AN,SHS,BD,Tamol－SN,EDTA,FES,TDDM,PMH,DEHA,MeOH,NaOH和CH
文檔編號(hào)C12R1/01GK1370227SQ00811835
公開(kāi)日2002年9月18日 申請(qǐng)日期2000年7月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月20日
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