草莓的脫毒方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了草莓的脫毒方法，是將草莓在35℃下熱處理7d后,逐步升溫至38℃,在濕度40%～68%、光照度4 000～5 000 Lx條件下熱處理35 d后,將長出的新莖莖尖再行組培,即可獲得100%的脫毒苗。本發(fā)明提供的草莓脫毒方法，具有以下有益效果：一是在短期內(nèi)加速繁殖草莓優(yōu)良品種以供商品化生產(chǎn)；二是挽救嚴(yán)重感染病毒的草莓優(yōu)良品種；三是結(jié)合輻射誘變進行草莓品種的改良和選育。
【專利說明】草莓的脫毒方法
[0001]
技術(shù)領(lǐng)域
[0002]本發(fā)明涉及草莓的脫毒方法。
【背景技術(shù)】
[0003]草莓感染的病毒很容易傳播給后代。病毒在作物體內(nèi)逐年積累，就會導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差。已知草莓能感染62種病毒和類菌質(zhì)體，因而每年都必須更新母株，脫毒后的母株可以減少更新次數(shù)，提高產(chǎn)量并進行連作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了草莓的脫毒方法。
[0005]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:草莓的脫毒方法，是將草莓在35°C下熱處理7d后，逐步升溫至38°C，在濕度40%?68%、光照度4 000?5 000 Lx條件下熱處理35 d后，將長出的新莖莖尖再行組培，即可獲得100%的脫毒苗。
[0006]進一步的，上述的草莓的脫毒方法，具體包括以下步驟:
1)外植體選擇:
選擇無病蟲、品種純正的健壯植株，栽于盆中，置人工氣候箱內(nèi)40°C處理16 h、35°C處理8 h、變溫處理4周，在新生嫩枝上，切取帶生長點的莖段3-4 cm為外植體，用流水沖洗干凈；
2)莖尖剝離:
將表面清洗過的外植體置于超凈工作臺上，用70%酒精表面消毒30 s，再用0.1%升汞消毒5-10min并不斷攪動，然后用無菌水沖洗3-5次，去鱗片，在解剖鏡下用針挑取帶I?2個葉原基的莖尖0.2-0.3mm，立即接種于莖尖分化培養(yǎng)基中，莖尖分化培養(yǎng)基組成為MS+6-BA0.5mg/L+IAA 0.05mg/L+鹿糖3%;
3)培養(yǎng)條件:
草莓莖尖培養(yǎng)需溫度為23-28°C，光照強度1000-3000 lx，光照12-16 h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3個月，待叢生芽形成后轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基；
4)快速增殖:
選取生長正常的試管苗，在增殖培養(yǎng)基上進行增殖，增殖培養(yǎng)基組成為MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.04mg/L+蔗糖3%，增殖培養(yǎng)每20-30 d繼代I次，總繼代次數(shù)不超過10次；
5)誘導(dǎo)生根:
選高2-3 cm的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，經(jīng)過20-30d的生根培養(yǎng)，形成完整植株的組培苗，生根培養(yǎng)基的組成為MS+BA 1.0 mg/L+蔗糖3%;
6)煉苗:
將生根后的試管苗移栽到經(jīng)過消毒的苗床或裝有消毒基質(zhì)的穴盤，置于由孔徑0.42_的網(wǎng)紗覆蓋的網(wǎng)室中，在溫度15-25 0C、相對濕度85%-90%的條件下進行煉苗，初期適當(dāng)遮陽，后期逐漸通風(fēng)和增加光照，2-3周后移栽苗成活；
7)病毒檢測:
用指示植物檢測法進行草毒斑駁病毒、草毒皺縮病毒、草毒鑲脈病毒和草莓輕黃邊病毒的檢測，未檢測出病毒的樣本，即為用于原種苗的繁殖的原原種苗；
8)原種苗的繁殖:
將脫毒原原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖的第I代植株即為用于生產(chǎn)用苗的繁殖放入脫毒原種苗，脫毒原種苗要接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過5%;
9)脫毒生產(chǎn)用苗繁殖:
將脫毒原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖后代即為脫毒生產(chǎn)用苗，脫毒生產(chǎn)用苗直接用于草莓生產(chǎn)，脫毒生產(chǎn)用苗需接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過20%。
[0007]本發(fā)明提供的草莓脫毒方法，具有以下有益效果:一是在短期內(nèi)加速繁殖草莓優(yōu)良品種以供商品化生產(chǎn);二是挽救嚴(yán)重感染病毒的草莓優(yōu)良品種;三是結(jié)合輻射誘變進行草莓品種的改良和選育。
【具體實施方式】
[0008]實施例1:
草莓的脫毒方法，是將草莓在35 °C下熱處理7d后，逐步升溫至38 °C，在濕度40%?68%、光照度4 000?5 000 Lx條件下熱處理35 d后，將長出的新莖莖尖再行組培，即可獲得100%
的脫毒苗。
[0009]具體包括以下步驟:
1)外植體選擇:
選擇無病蟲、品種純正的健壯植株，栽于盆中，置人工氣候箱內(nèi)40°C處理16 h、35°C處理8 h、變溫處理4周，在新生嫩枝上，切取帶生長點的莖段3-4 cm為外植體，用流水沖洗干凈；
2)莖尖剝離:
將表面清洗過的外植體置于超凈工作臺上，用70%酒精表面消毒30 s，再用0.1%升汞消毒5-10min并不斷攪動，然后用無菌水沖洗3-5次，去鱗片，在解剖鏡下用針挑取帶I?2個葉原基的莖尖0.2-0.3mm，立即接種于莖尖分化培養(yǎng)基中，莖尖分化培養(yǎng)基組成為MS+6-BA
0.5mg/L+IAA 0.05mg/L+鹿糖3%;
3)培養(yǎng)條件:
草莓莖尖培養(yǎng)需溫度為23-28°C，光照強度1000-3000 lx，光照12-16 h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3個月，待叢生芽形成后轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基；
4)快速增殖:
選取生長正常的試管苗，在增殖培養(yǎng)基上進行增殖，增殖培養(yǎng)基組成為MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.04mg/L+蔗糖3%，增殖培養(yǎng)每20-30 d繼代I次，總繼代次數(shù)不超過10次；
5)誘導(dǎo)生根: 選高2-3 cm的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，經(jīng)過20-30d的生根培養(yǎng)，形成完整植株的組培苗，生根培養(yǎng)基的組成為MS+BA 1.0 mg/L+蔗糖3%;
6)煉苗:
將生根后的試管苗移栽到經(jīng)過消毒的苗床或裝有消毒基質(zhì)的穴盤，置于由孔徑0.42_的網(wǎng)紗覆蓋的網(wǎng)室中，在溫度15-25 0C、相對濕度85%-90%的條件下進行煉苗，初期適當(dāng)遮陽，后期逐漸通風(fēng)和增加光照，2-3周后移栽苗成活；
7)病毒檢測:
用指示植物檢測法進行草毒斑駁病毒、草毒皺縮病毒、草毒鑲脈病毒和草莓輕黃邊病毒的檢測，未檢測出病毒的樣本，即為用于原種苗的繁殖的原原種苗；
8)原種苗的繁殖:
將脫毒原原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖的第I代植株即為用于生產(chǎn)用苗的繁殖放入脫毒原種苗，脫毒原種苗要接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過5%;
9)脫毒生產(chǎn)用苗繁殖:
將脫毒原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖后代即為脫毒生產(chǎn)用苗，脫毒生產(chǎn)用苗直接用于草莓生產(chǎn)，脫毒生產(chǎn)用苗需接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過20%。
[0010]最后應(yīng)說明的是:以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項】
1.草莓的脫毒方法，其特征在于，是將草莓在35°C下熱處理7d后，逐步升溫至380C，在濕度40%?68%、光照度4 000?5 000 Lx條件下熱處理35 d后，將長出的新莖莖尖再行組培，即可獲得100%的脫毒苗。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的草莓的脫毒方法，其特征在于，具體包括以下步驟: 1)外植體選擇: 選擇無病蟲、品種純正的健壯植株，栽于盆中，置人工氣候箱內(nèi)40°C處理16 h、35°C處理8 h、變溫處理4周，在新生嫩枝上，切取帶生長點的莖段3-4 cm為外植體，用流水沖洗干凈； 2)莖尖剝離: 將表面清洗過的外植體置于超凈工作臺上，用70%酒精表面消毒30 s，再用0.1%升汞消毒5-10min并不斷攪動，然后用無菌水沖洗3-5次，去鱗片，在解剖鏡下用針挑取帶I?2個葉原基的莖尖0.2-0.3mm，立即接種于莖尖分化培養(yǎng)基中，莖尖分化培養(yǎng)基組成為MS+6-BA.0.5mg/L+IAA 0.05mg/L+鹿糖3%; 3)培養(yǎng)條件: 草莓莖尖培養(yǎng)需溫度為23-28°C，光照強度1000-3000 lx，光照12-16 h/d，誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3個月，待叢生芽形成后轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基； 4)快速增殖: 選取生長正常的試管苗，在增殖培養(yǎng)基上進行增殖，增殖培養(yǎng)基組成為MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.04mg/L+蔗糖3%，增殖培養(yǎng)每20-30 d繼代I次，總繼代次數(shù)不超過10次； 5)誘導(dǎo)生根: 選高2-3 cm的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，經(jīng)過20-30d的生根培養(yǎng)，形成完整植株的組培苗，生根培養(yǎng)基的組成為MS+BA 1.0 mg/L+蔗糖3%; 6)煉苗: 將生根后的試管苗移栽到經(jīng)過消毒的苗床或裝有消毒基質(zhì)的穴盤，置于由孔徑0.42_的網(wǎng)紗覆蓋的網(wǎng)室中，在溫度15-25 0C、相對濕度85%-90%的條件下進行煉苗，初期適當(dāng)遮陽，后期逐漸通風(fēng)和增加光照，2-3周后移栽苗成活； 7)病毒檢測: 用指示植物檢測法進行草毒斑駁病毒、草毒皺縮病毒、草毒鑲脈病毒和草莓輕黃邊病毒的檢測，未檢測出病毒的樣本，即為用于原種苗的繁殖的原原種苗； 8)原種苗的繁殖: 將脫毒原原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖的第I代植株即為用于生產(chǎn)用苗的繁殖放入脫毒原種苗，脫毒原種苗要接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過5%; 9)脫毒生產(chǎn)用苗繁殖: 將脫毒原種苗定植于無土壤線蟲、無草莓病源和防蟲隔離區(qū)內(nèi)，分株繁殖后代即為脫毒生產(chǎn)用苗，脫毒生產(chǎn)用苗直接用于草莓生產(chǎn)，脫毒生產(chǎn)用苗需接受病毒檢測機構(gòu)的定期病毒檢測，病毒感染率不超過20%。
【文檔編號】A01H4/00GK105993947SQ201610353731
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年5月25日
【發(fā)明人】楊建冬
【申請人】楊建冬