一種載銀蛋白緩釋動(dòng)物用消毒劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種載銀蛋白緩釋動(dòng)物用消毒劑的制備方法，屬于動(dòng)物消毒劑制備領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]消毒劑是指用于殺滅傳播媒介上病原微生物，使其達(dá)到無害化要求的制劑。消毒是指根據(jù)不同的生產(chǎn)環(huán)節(jié)、對(duì)象，用適宜的方法(包括物理、化學(xué)或生物學(xué))清除或殺滅畜禽體表及其生存環(huán)境中的病原微生物及其他有害微生物。由于動(dòng)物用藥的限制及其存在的弊端，人們已充分認(rèn)識(shí)到消毒在防控動(dòng)物疫病時(shí)的重要作用。目前，畜禽業(yè)應(yīng)用較多的是化學(xué)消毒劑，主要分為鹵素類(氯制劑、碘制劑、溴制劑)、醛類、酚類、醇類、氧化劑類、表面活性劑類、酸堿類等。其作用機(jī)理就是改變微生物賴以生存的環(huán)境，致使微生物的內(nèi)外結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，主要代謝機(jī)能出現(xiàn)障礙，生長(zhǎng)發(fā)育受阻，從而喪失活性，失去致病力。
[0003]氯制劑主要對(duì)細(xì)菌、芽孢、病毒及真菌殺菌作用強(qiáng)，屬高效消毒劑，但其藥效持續(xù)時(shí)間較短，藥物不易久存，且具有較強(qiáng)的刺激性和腐蝕性，長(zhǎng)期使用會(huì)對(duì)環(huán)境造成嚴(yán)重的破壞;碘制劑屬于中效消毒劑，其稀溶液毒性低、無腐蝕性，但不穩(wěn)定，須現(xiàn)用現(xiàn)配;溴制劑殺菌效力與氯制劑差不多，除藻性能好，但價(jià)格高;醛類消毒劑抗菌譜廣、殺菌作用強(qiáng)，具有殺滅細(xì)胞、芽孢、真菌和病毒的作用，但對(duì)人畜有較強(qiáng)的刺激性，性質(zhì)不穩(wěn)定;酚類屬中效消毒劑，因其PH值低，易受堿性有機(jī)物質(zhì)的影響，對(duì)環(huán)境有污染，具有刺激性氣味，對(duì)人和畜禽機(jī)體的黏膜系統(tǒng)有刺激性，且具有氣味滯留性，對(duì)人和畜禽具有很強(qiáng)的毒性，不宜用作養(yǎng)殖期間消毒，其殺菌效果也較差;醇類屬中效消毒劑，易揮發(fā)，不易保存，對(duì)皮膚、黏膜刺激性小;氧化劑類消毒后在物品上不留殘余毒性，但化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，因其具有強(qiáng)氧化性，高濃度時(shí)可刺激、損害皮膚黏膜、腐蝕物品，長(zhǎng)期使用對(duì)人和動(dòng)物眼睛、呼吸道黏膜、環(huán)境有強(qiáng)力的破壞。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題:針對(duì)目前動(dòng)物消毒劑易殘留，穩(wěn)定性差，對(duì)黏膜刺激性大，且在有機(jī)物存在時(shí)，易失效揮發(fā)的弊端，提供了一種以花椒種子為原料，將其晾干并粉碎，與石油醚混合加熱回流后，抽濾得濾渣與鹽酸混合離心分離收集下層沉淀干燥得花椒種子蛋白，加入去離子水溶解，與酸性蛋白酶酶解離心分離旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得蛋白抗菌肽，與CuFe204、AgN03溶液制得的載銀氧化物置于無水乙醇中振蕩分散，減壓抽濾并收集濾餅干燥制得動(dòng)物用消毒劑的方法。本發(fā)明所制備的動(dòng)物消毒劑穩(wěn)定性好，綠色環(huán)保，使用后藥物無殘留，藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。
[0005]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下所述的技術(shù)方案是:
(I)選取新鮮的花椒種子，對(duì)其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末將其置于50?60°C烘箱中干燥6?8h，制備得花椒種子粉末，隨后按固液質(zhì)量比1: 25，將花椒種子粉末與石油醚攪拌混合，加熱升溫并使其回流4?5h，待回流完成后，對(duì)其抽濾并收集濾渣，在60?70 0C烘箱中干燥3?4h，制備得脫脂花椒種子粉末；
(2)按固液質(zhì)量比1:10，將脫脂花椒種子粉末與質(zhì)量濃度為10%的鹽酸溶液攪拌混合2?3h，隨后對(duì)其離心分離并收集下層沉淀，用蒸餾水洗滌3?5次，真空干燥3?4h，制備得花椒種子蛋白；
(3)選取上述制備的10?15g的花椒種子蛋白和80?85mL的去離子水，攪拌混合使其完全溶解后，將其置于30?40°C恒溫加熱2?3h，用質(zhì)量濃度為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.0?6.5，隨后添加0.5?1.0g的酸性蛋白酶，在200?300r/min搖床振蕩酶解4?6h ；
(4)待酶解完成后，對(duì)其加熱升溫至95?100°C滅酶處理10?15min，隨后靜置冷卻至20?30°C，在7800?8000r/min下離心分離10?15min，收集上清液并加蒸饋水稀釋其pH至
7.0,再在30?35°C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集干燥蛋白抗菌肽備用；
(5)按Cu2+和Fe2+摩爾比1:2，將Cu(NO3)2，和Fe (NO3)2攪拌混合，制備得混合硝酸鹽，按混合硝酸鹽與去離子水質(zhì)量比1: 25攪拌混合，制備得混合硝酸鹽溶液，再按質(zhì)量比1:1，將上述制備的混合硝酸鹽溶液與質(zhì)量濃度為20%的氫氧化鈉溶解攪拌混合，減壓抽濾，收集濾餅并置于高壓反應(yīng)釜中，在300?350°C下水熱合成2?3h，隨后對(duì)其抽濾并收集濾餅，將其置于60?80 0C烘箱中干燥6?8h，制備得CuFe2O4 ；
(6)按CuFe2O4和AgNO3溶液質(zhì)量比1:1000，將上述制備的CuFe2O4與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的AgN03溶液攪拌混合，加熱升溫?cái)嚢杌旌?0?15min后，對(duì)其抽濾并收集濾餅，將其置于200?300°C馬弗爐中煅燒3?4h，制備得載銀氧化物，再將步驟(4)備用的蛋白抗菌肽與載銀氧化物按質(zhì)量比100:1置于無水乙醇中振蕩分散I?2h，隨后減壓抽濾并收集濾餅，將其置于60?80°C烘箱中干燥6?8h，即可制備得一種載銀蛋白緩釋動(dòng)物用消毒劑。
[0006]本發(fā)明的應(yīng)用方法:將本發(fā)明制得的載銀蛋白緩釋動(dòng)物用消毒劑放入噴槍中，控制壓力為0.5?0.8MPa，噴入量為3?5mg/m3，均勻噴灑于動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)所即可。該動(dòng)物用消毒劑無刺激性氣味和腐蝕性，使用后藥物無殘留，藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，可有效殺滅細(xì)菌、病毒、蟲卵，減少動(dòng)物疾病的發(fā)生。
[0007]本發(fā)明與其他方法相比，有益技術(shù)效果是:
(1)本發(fā)明所制備的動(dòng)物消毒劑穩(wěn)定性好，對(duì)黏膜刺激性和動(dòng)物皮膚腐蝕性?。?br> (2)使用后藥物無殘留，不受有機(jī)物影響，藥效持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，藥物貯存時(shí)間久，綠色環(huán)保。
【具體實(shí)施方式】
[0008]首先選取新鮮的花椒種子，對(duì)其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末將其置于50?600C烘箱中干燥6?8h，制備得花椒種子粉末，隨后按固液質(zhì)量比1:25，將花椒種子粉末與石油醚攪拌混合，加熱升溫并使其回流4?5h，待回流完成后，對(duì)其抽濾并收集濾渣，在60?70°C烘箱中干燥3?4h，制備得脫脂花椒種子粉末;然后按固液質(zhì)量比1:10，將脫脂花椒種子粉末與質(zhì)量濃度為10%的鹽酸溶液攪拌混合2?3h，隨后對(duì)其離心分離并收集下層沉淀，用蒸餾水洗滌3?5次，真空干燥3?4h，制備得花椒種子蛋白；再選取上述制備的10?15g的花椒種子蛋白和80?85mL的去離子水，攪拌混合使其完全溶解后，將其置于30?40°C恒溫加熱2?3h，用質(zhì)量濃度為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.0?6.5，隨后添加0.5?1.0g的酸性蛋白酶，在200?300r/min搖床振蕩酶解4?6h;待酶解完成后，對(duì)其加熱升溫至95?100 °C滅酶處理10?15min，隨后靜置冷卻至20?30°C，在7800?8000r/min下離心分離10?15min，收集上清液并加蒸餾水稀釋其PH至7.0，再在30?35 °C下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集干燥蛋白抗菌肽備用;按Cu2+和Fe2+摩爾比1:2，將Cu(NO3)2，和Fe(NO3)2攪拌混合，制備得混合硝酸鹽，按混合硝酸鹽與去離子水質(zhì)量比1:25攪拌混合，制備得混合硝酸鹽溶液，再按質(zhì)量比1:1，將上述制備的混合硝酸鹽溶液與質(zhì)量濃度為20%的氫氧化鈉溶解攪拌混合，減壓抽濾，收集濾餅并置于高壓反應(yīng)釜中，在300?350°C下水熱合成2?3h，隨后對(duì)其抽濾并收集濾餅，將其置于60?80°C烘箱中干燥6?8h，制備得CuFe2O4;最后按CuFe2O4和AgNO3溶液質(zhì)量比1:1000，將上述制備的CuFe2(k與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的AgN03溶液攪拌混合，加熱升溫?cái)嚢杌旌?0?15min后，對(duì)其抽濾并收集濾餅，將其置于200?300°C馬弗爐中煅燒3?4h，制備得載銀氧化物，再將備用的蛋白抗菌肽與載銀氧化物按質(zhì)量比100:1置于無水乙醇中振蕩分散I?2h，隨后減壓抽濾并收集濾餅，將其置于60?80°C烘箱中干燥6?8h，即可制備得一種載銀蛋白緩釋動(dòng)物用消毒劑。
[0009]實(shí)例I
首先選取新鮮的花椒種子，對(duì)其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末將其置于50°C烘箱中干燥6h，制備得花椒種子粉末，隨后按固液質(zhì)量比1:25，將花椒種子粉末與石油醚攪拌混合，加熱升溫并使其回流4h，待回流完成后，對(duì)其抽濾并收集濾渣，在60°C烘箱中干燥3h，制備得脫脂花椒種子粉末;然后按固液質(zhì)量比1:10，將脫脂花椒種子粉末與質(zhì)量濃度為10%的鹽酸溶液攪拌混合2h，隨后對(duì)其離心分離并收集下層沉淀，用蒸餾水洗滌3次，真空干燥3h，制備得花椒種子蛋白；再選取上述制備的1g的花椒種子蛋白和SOmL的去離子水，攪拌混合使其完全溶解后，將其置于30°C恒溫加熱2h，用質(zhì)量濃度為10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH至6.0，隨后添加0.5g的酸性蛋白酶，在200r/min搖床振蕩酶解4h;待酶解完成后，對(duì)其加熱升溫至95°C滅酶處理1min，隨后靜置冷卻至20°C，在7800r/min下離心分離1min，收集上清液并加蒸餾水稀釋其PH至7.0，在30 V下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，收集干燥蛋白抗菌肽備用；按Cu2+和Fe2+摩爾比1:2，將Cu(NO3)2，和Fe(NO3)2攪拌混合，制備得混合硝酸鹽，按混合硝酸鹽與去離子水質(zhì)量比1: 25攪拌混合，制備得混合硝酸鹽溶液，再按質(zhì)量比1:1，將上述制備的混合硝酸鹽溶液與質(zhì)量濃度為20%的