Hffl 42138的種子所培育的 植物的基因組中并且在其上與選自SEQ ID N0:11、SEQ ID No:13、SEQ ID No:15、SEQ ID No:17、SEQIDNo:19、SEQIDN0:21、SEQIDNo:23和SEQIDNo:25的至少一種分子標(biāo)記 連鎖。本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠從本發(fā)明辣椒植物的基因組分離本發(fā)明類萜總含量增加性狀 的核酸或其部分，并且使用它產(chǎn)生與一種或兩種QTL并與本發(fā)明性狀連鎖的新分子標(biāo)記。
[0091] 本發(fā)明還涉及分子標(biāo)記鑒定QTLl和/或QTL2和/或QTL3或開(kāi)發(fā)辣椒植物的用途，所 述辣椒植物產(chǎn)生具有增加的類萜總含量的果實(shí)，其中所述分子標(biāo)記選自SEQ ID N〇:l、SEQ ID No:3、SEQ ID No:5、SEQ ID No:7、SEQ ID No:9、SEQ ID No:ll、SEQ ID No:13、SEQ ID No:15、SEQIDNo:17、SEQIDNo:19、SEQIDNo:21、SEQIDNo:23和SEQIDNo:25。
[0092] 本發(fā)明還涉及所述分子標(biāo)記鑒定或開(kāi)發(fā)與引起類萜總含量增加的QTLl和/或QTL2 和/或QTL3連鎖的其他標(biāo)記的用途。
[0093]為了確立本發(fā)明QTLl在種子或植物的基因組中存在，至少一種分子標(biāo)記是必需 的，但是可以使用根據(jù)SEQ ID No: 1、SEQ ID No: 3、SEQ ID No: 5、SEQ ID No: 7和 SEQ ID N〇:9的分子標(biāo)記的任何組合。為了確立本發(fā)明QTL2在種子或植物的基因組中存在，至少一 種分子標(biāo)記是必需的，但是可以使用根據(jù)SEQ ID No:15、SEQ ID No:17、SEQ ID No:19、SEQ ID No:21、SEQ ID No:23和SEQ ID No:25的分子標(biāo)記的任何組合。QTL3可以用根據(jù)SEQ ID No: 11和/或SEQ ID No: 13的標(biāo)記鑒定。
[0094]對(duì)本發(fā)明類萜總含量增加性狀分離的植物群體的基因分型可以使用選自SEQ ID No:1 外加 SEQ ID No:2、SEQ ID No:3外加 SEQ ID No:4、SEQ ID No:5外加 SEQ ID No:6、SEQ ID No:7外加 SEQ ID No:8和SEQ ID No:9外加 SEQ ID No: 10的至少一個(gè)分子標(biāo)記集合進(jìn) 行，和/或使用選自 SEQ ID No: 15外加 SEQ ID No: 16、SEQ ID No: 17外加 SEQ ID No: 18、SEQ ID No: 19外加 SEQ ID No: 20、SEQ ID No: 21 外加 SEQ ID No:22、SEQ ID No:23外加 SEQ ID No: 24和SEQ ID No:25外加 SEQ ID No:26的至少一個(gè)分子標(biāo)記集合進(jìn)行和/或通過(guò)使用選 自 SEQ ID No: 11外加 SEQ ID No: 12和SEQ ID No: 13外加 SEQ ID No: 14的至少一個(gè)分子標(biāo) 記集合進(jìn)行。也可以在種質(zhì)滲入過(guò)程的任一世代中通過(guò)生物化學(xué)分析在表型上確定本發(fā)明 類萜總含量增加性狀的存在。
[0095]在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種用于產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的辣椒植物的方 法，所述方法包括
[0096] a)將包含QTLUQTL2和QTL3中至少一者的植物與另一種植物雜交；
[0097] b)選擇在下一個(gè)世代中具有該性狀的植物；
[0098] c)任選地進(jìn)行額外一輪或多輪自交或雜交，并且隨后選出包含/顯示本發(fā)明性狀 的植物。
[0099]可以在F1或F2代或任何其他世代中使用與如本文所述的性狀連鎖的分子標(biāo)記以 分子方式和/或以表型方式選擇具有類萜總含量增加性狀的植物。
[0100]在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及一種用于產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的辣椒植物的方 法，所述方法包括
[0101] a)將包含QTLUQTL2和QTL3中至少一者的植物與另一種植物雜交；
[0102] b)任選地將所產(chǎn)生的Fl與優(yōu)選的親本回交；
[0103] c)選擇在下一個(gè)世代中具有該性狀的植物；
[0104] d)任選地進(jìn)行額外一輪或多輪自交或雜交，并且隨后選出包含該性狀的植物。
[0105] 本發(fā)明額外地提供一種將另一個(gè)所需性狀引入具有類萜總含量增加性狀的辣椒 植物中的方法，所述方法包括：
[0106] a)將包含QTLl、QTL2和QTL3中至少一者的植物與包含又一個(gè)所需性狀的第二辣椒 植物雜交以產(chǎn)生Fl后代；
[0107] b)選出包含所述類萜總含量增加性狀和所需性狀的Fl后代植物；
[0108] c)將選擇的Fl后代植物與任一個(gè)親本雜交，以產(chǎn)生回交后代；
[0109] d)選擇包含所需性狀和類萜總含量增加性狀的回交后代植物;并且
[0110] e)任選地連續(xù)重復(fù)步驟c)和d)-次或多次，以產(chǎn)生選擇的第四代或更高代回交后 代，所述回交后代包含所需性狀和類萜總含量增加性狀的第四代或更高代回交后代。本發(fā) 明包括通過(guò)這種方法產(chǎn)生的辣椒植物。
[0111] 適當(dāng)?shù)?，上述方法中的至少一種親本植物是從其代表性樣品以保藏編號(hào)NCIMB 42140或NCHMB 42138保藏的種子所生長(zhǎng)成的植物。
[0112] 詞"性狀"在本申請(qǐng)的情境下指植物的表型。特別地，詞"性狀"指本發(fā)明性狀，更具 體地指具有類萜總含量增加的辣椒果實(shí)性狀。術(shù)語(yǔ)"QTL"（8卩"數(shù)量性狀基因座"）用于植物 的基因組中引起本發(fā)明類萜總含量增加性狀的遺傳信息。當(dāng)植物顯示本發(fā)明的類萜總含量 增加性狀時(shí)，其基因組包含引起本發(fā)明性狀的QTL1、QTL2和QTL3中至少一者。植物因此具有 至少一種本發(fā)明QTL。在本發(fā)明中，本發(fā)明的QTL是:連鎖群I(LGl)上來(lái)自風(fēng)鈴椒的種質(zhì)滲入 QTLl;連鎖群10.1(LGlO. 1)上來(lái)自風(fēng)鈴椒的種質(zhì)滲入QTL2和連鎖群10. l(LGlO.l)上來(lái)自風(fēng) 鈴椒的又一個(gè)種質(zhì)滲入QTL3。
[0113] 顯然提供本發(fā)明性狀的親本不必然地是從所保藏種子直接培育的植物。親本也可 以是通過(guò)例如自交或雜交獲得的來(lái)自所保藏種子的后代植物，或來(lái)自通過(guò)其他手段鑒定具 有本發(fā)明性狀的種子的后代植物。
[0114] 在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)使用根據(jù)SEQ ID No:l、SEQ ID No:3、SEQ ID No:5、SEQ ID No:7、SEQ ID No:9、SEQ ID No:ll、SEQ ID No:13、SEQ ID No:15、SEQ ID No:17、SEQ ID No: 19、SEQ ID No: 21、SEQ ID No:23和SEQ ID No:25的任一種標(biāo)記或任何標(biāo)記組合在 Fl代或任何其他世代中選擇具有類萜總含量增加性狀的植物。在另一個(gè)方面，在雜交F2或 備選地回交F2中啟動(dòng)本發(fā)明性狀的選擇?？梢园幢硇头绞揭约巴ㄟ^(guò)使用所述標(biāo)記，在F2中 進(jìn)行植物的選擇，其中所述標(biāo)記直接或間接檢測(cè)作為該性狀基礎(chǔ)的本發(fā)明QTL1、QTL2和 QTL3中一者或多者。表型選擇可以適當(dāng)?shù)赝ㄟ^(guò)確定辣椒果實(shí)的生物化學(xué)概況進(jìn)行。
[0115] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在F3代或更晚世代中開(kāi)始選擇具有類萜總含量增加性狀的植 物。
[0116] 在一個(gè)實(shí)施方案中，包含本發(fā)明QTLUQTL2和QTL3中一者或多者的植物是近交系、 雜交體、雙單倍體或分離群植物。
[0117] 本發(fā)明還提供一種通過(guò)使用產(chǎn)生雙單倍體品系的雙單倍體生成技術(shù)，產(chǎn)生具有類 萜總含量增加性狀的辣椒植物的方法，其中所述雙單倍體品系包含所述性狀。
[0118] 另外，本發(fā)明涉及雜交種子，所述雜交種子可以培育成具有類萜總含量增加性狀 的植物，并涉及一種產(chǎn)生這種雜交種子的方法，所述方法包括將第一親本植物與第二親本 植物雜交并收獲所產(chǎn)生的雜交種子，其中所述第一親本植物和/或所述第二親本植物是如 要求保護(hù)的植物。
[0119] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的雜交辣椒植 物的方法，所述方法包括將第一親本辣椒植物與第二親本辣椒植物雜交并收獲所得到的雜 交種子，其中第一親本植物和/或第二親本植物具有類萜總含量增加性狀，并且將所述雜交 種子培育成具有類萜總含量增加性狀的雜交植物。
[0120] 本發(fā)明還涉及一種用于產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的辣椒植物的方法。適當(dāng)?shù)?通過(guò)使用在其基因組中包含導(dǎo)致類萜總含量增加性狀的QTLl、QTL2和QTL3中至少一者的種 子以長(zhǎng)出所述辣椒植物，做到這一點(diǎn)。種子適當(dāng)?shù)厥瞧浯硇詷悠芬员２鼐幪?hào)NCMB 42140 或NCHMB 42138在NCHMB保藏的種子。
[0121] 本發(fā)明還涉及一種生產(chǎn)種子的方法，所述方法包括從具有類萜總含量增加性狀的 辣椒植物的種子培育辣椒植物，允許植物產(chǎn)生種子，并收獲這些種子。通過(guò)雜交或自交適當(dāng) 地進(jìn)行種子的生產(chǎn)。具有類萜總含量增加性狀的辣椒植物適當(dāng)?shù)貜钠浠蚪M中包含QTL1、 QTL2和QTL3中至少一者的種子培育。這類種子的代表性樣品以保藏編號(hào)NCHMB 42140和/或 NCHMB 42138保藏在NCHMB。
[0122] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種通過(guò)使用組織培養(yǎng)法產(chǎn)生具有類萜總含量增 加性狀的辣椒植物的方法。
[0123] 本發(fā)明另外涉及一種通過(guò)使用營(yíng)養(yǎng)性繁殖法產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的辣 椒植物的方法。
[0124] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種通過(guò)使用基因修飾方法，產(chǎn)生具有類萜總含 量增加性狀的辣椒植物的方法，其中所述基因修飾方法將QTLI、QTL2和QTL3中一者或多者 種質(zhì)滲入辣椒植物中?；蛐揎棸ㄊ褂脕?lái)自不可雜交物種的基因或合成基因進(jìn)行轉(zhuǎn)基因 修飾或基因轉(zhuǎn)移和使用來(lái)自作物植物本身或來(lái)自性相容供體植物的編碼(農(nóng)業(yè))性狀的天 然基因進(jìn)行同源轉(zhuǎn)基因修飾或同源轉(zhuǎn)基因。
[0125] 在一個(gè)實(shí)施方案中，從中獲得遺傳信息、尤其獲得本發(fā)明QTLl、QTL2和QTL3的來(lái)源 由從保藏的種子培育的植物或由其有性或營(yíng)養(yǎng)繁殖后代形成。
[0126] 本發(fā)明還涉及一種用于開(kāi)發(fā)辣椒植物的育種方法，所述辣椒植物具有類萜總含量 增加性狀，其中使用包含QTLl、QTL2和QTL3中至少一者的種質(zhì)。種質(zhì)是由生物的全部遺傳特 征構(gòu)成并且根據(jù)本發(fā)明，至少涵蓋產(chǎn)生本發(fā)明的類萜總含量增加性狀。
[0127] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的辣椒植物的 方法，其中使用包含賦予所述性狀的本發(fā)明QTL或多種QTL的植物的后代或繁殖材料作為將 所述性狀種質(zhì)滲入另一種辣椒植物的來(lái)源。
[0128] 另外，本發(fā)明涉及三個(gè)所謂的總類萜增加基因，所述基因?qū)е戮哂斜景l(fā)明類萜總 含量增加性狀的辣椒植物，并且所述基因如代表性樣品以保藏編號(hào)NCIMB 42140(基因在 LGl上)和NCHffi 42138(兩個(gè)基因在LG10.1上)在NCHffi保藏的植物的基因組中那樣存在。熟 練育種者知道如何使用這種植物作為這三個(gè)基因中一者（NCIMB 42140)或兩者（NCIMB 42138)的來(lái)源以將類萜總含量增加性狀或表型種質(zhì)滲入植物中。
[0129] 本發(fā)明還涉及導(dǎo)致產(chǎn)生下述果實(shí)的辣椒植物的QTLl、QTL2和QTL3中至少一者的用 途，用于產(chǎn)生具有類萜總含量增加性狀的植物，尤其具有總類萜增加性狀的辣椒植物，其中 所述果實(shí)具有類萜總含量增加性狀，所述QTLl如其代表性樣品以保藏編號(hào)NCMB 42140保 藏的植物的基因組中那樣存在并且QTL2和QTL31如其代表性樣品以保藏編號(hào)NCMB 42138 保藏的植物的基因組中那樣存在。
[0130] 根據(jù)另一個(gè)方面，本發(fā)明涉及非天然存在的植物，所述植物產(chǎn)生具有增加的類萜 總含量的果實(shí)，并且增加的類萜總含量是植物基因組中存在QTLl、QTL2和QTL3至少之一的 結(jié)果。包含QTLl的代表性種子以保藏編號(hào)NCMB 42140保藏在NCMB，并且包含QTL2和QTL3 的代表性種子以保藏編號(hào)NCMB 42138保藏在NCMB。非天然存在的植物尤其是突變體植 物。
[0131] 如果沒(méi)有明確提到，則在上述方法中，具有類萜總含量增加性狀的種子和植物由 所涉及辣椒植物的基因組中存在QTLl、QTL2和QTL3至少一者引起。包含QTLl的所述植物的 代表性種子以保藏編號(hào)NCHMB 42140保藏在NCHMB，并且包含QTL2和QTL3的所述植物的代表 性種子以保藏編號(hào)NCHMB 42138保藏在NCHMB。
[0132] 在本申請(qǐng)中，談及類萜總含量增加優(yōu)選地指類單萜總含量增加。
[0133] 萜類和類萜是基于異戊二烯單位組合的天然存在烴。在本申請(qǐng)中，術(shù)語(yǔ)"類萜"和 "砲類"互換使用并且涵蓋可以按這些術(shù)語(yǔ)分類的全部化合物。
[0134] 如本申請(qǐng)中所用的"種質(zhì)滲入"意指借助雜交和選擇將性狀引入不攜帶該性狀的 植物。
[0135] 術(shù)語(yǔ)'核酸'用于含有引起本發(fā)明性狀的遺傳信息的大分子、DNA或RNA分子。當(dāng)植 物顯示本發(fā)明表型性狀時(shí)，其基因組包含引起該性狀的核酸。植物因此具有本發(fā)明的核酸。 在本發(fā)明中，核酸是連鎖群I(LGl)上從風(fēng)鈴椒種質(zhì)滲入的QTLl的部分或是連鎖群10.1 (LG10.1)上從風(fēng)鈴椒種質(zhì)滲入的QTL2和/或QTL3的部分，或涵蓋所述QTL2和/或QTL3。
[0136] 本發(fā)明優(yōu)選地提供一種具有產(chǎn)生類萜總含量增加的果實(shí)性狀的辣椒植物，所述植 物通過(guò)本文中所述的和/或技術(shù)人員熟悉的任何方法可獲得。
[0137] 在不存在分子標(biāo)記的情況下或在重組已經(jīng)在QTL和其標(biāo)記之間如此發(fā)生從而該標(biāo) 記是不再具有預(yù)示性的情況下，可以通過(guò)等位性檢驗(yàn)確定在具有類萜總含量增加的植物 中，所述性狀是否由與本發(fā)明QTLUQTL2和QTL3中一者或多者相同或相似的遺傳信息引起。 為了進(jìn)行等位性檢驗(yàn)，對(duì)QTLl、QTL2和QTL3中一者或多者純合