一種鹽度馴化花鱸仔魚(yú)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種鹽度馴化花驢仔魚(yú)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 花驢（Lateol油raxmacula1:us)隸屬于硬骨魚(yú)綱（Osteichsthyes)、驢形目 (Perciformes)、鶴科（Serranidae)、花驢屬（Xateol油rax)，又稱白花驢、驢子魚(yú)、板驢、青 食盧、屯星驢、驢魚(yú)、寨花。分布于中國(guó)和朝鮮沿海，是東北亞特有種。
[0003] 魚(yú)類胚胎和仔魚(yú)發(fā)育階段對(duì)鹽度要求較高，當(dāng)水體中的鹽度超出胚胎發(fā)育的適宜 鹽度范圍時(shí)，將導(dǎo)致胚胎發(fā)育異常、解化率與成活率減低，崎形率升高，仔魚(yú)生存活力下降 化aw址ara等，1997)。當(dāng)胚胎或仔魚(yú)無(wú)法對(duì)鹽度脅迫進(jìn)行緩解時(shí)，將導(dǎo)致器官或組織的崩潰 (Shi等，2008)。鹽度的變化主要體現(xiàn)為水體比重、滲透壓和離子組成的變化。
[0004] 水體比重對(duì)魚(yú)類胚胎、仔魚(yú)的影響：
[0005] 水體比重會(huì)影響卵的沉浮性，鹽度較高時(shí)，受精卵漂浮在水層表面，可W增加與空 氣的接觸，發(fā)育過(guò)程中排出的氨氮也能及時(shí)與下層水交換，為胚胎發(fā)育提供良好的水質(zhì)條 件；鹽度較低時(shí)，受精卵容易沉底堆積成塊，造成胚胎缺氧，且易受死亡胚胎的污染，造成解 化率降低和崎形率升高（王妍妍，2009)。同時(shí)鹽度偏低會(huì)使正常發(fā)育的卵沉底與死卵混在 一起，不利于生產(chǎn)中吸污操作。
[0006] 鹽度較低時(shí)，水體比重較低，初解解仔魚(yú)進(jìn)入浮游水層中開(kāi)口攝食需要消耗大量 能量游動(dòng)，影響主動(dòng)攝食，最終導(dǎo)致不能較好的完成內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)向外源性營(yíng)養(yǎng)的轉(zhuǎn)換。另外 在開(kāi)饌期，低鹽度也會(huì)影響仔魚(yú)上浮到水面吞咽空氣使饌膨脹，導(dǎo)致饌器官發(fā)育不良。
[0007] 滲透壓對(duì)魚(yú)類胚胎、仔魚(yú)的影響：
[0008] 鹽度對(duì)魚(yú)類胚胎、仔魚(yú)的影響的直接表現(xiàn)為打破魚(yú)體內(nèi)滲透壓平衡。鹽度太低或 太高都會(huì)造成卵膜內(nèi)外滲透壓差的劇烈變化，當(dāng)胚胎難W調(diào)節(jié)卵膜內(nèi)外的滲透壓平衡時(shí)， 將導(dǎo)致發(fā)育中的胚胎細(xì)胞不能正常分裂，引起胚胎死亡或者仔魚(yú)崎形，如出現(xiàn)分裂細(xì)胞融 合、解體，胚盤(pán)收縮、仔魚(yú)屯、包腫大、脊柱彎曲等（徐永江等，2005)。也有研究表明許多海 水魚(yú)類的受精卵能夠在高于或低于自然海水鹽度（30)的一定范圍內(nèi)保持其形態(tài)不發(fā)生改 變。Helvik(1992)指出運(yùn)主要是因?yàn)槭芫寻l(fā)育到神經(jīng)胚期W后，卵黃栓關(guān)閉，與外界環(huán)境 之間的物質(zhì)交換降低，并且建立起較為完善的鹽度調(diào)節(jié)系統(tǒng)。但當(dāng)鹽度變化范圍超過(guò)卵膜 的調(diào)節(jié)范圍時(shí)，細(xì)胞與周圍介質(zhì)之間的物質(zhì)平衡將被打破，卵細(xì)胞會(huì)發(fā)生損傷、破裂。鹽度 對(duì)于解化期的影響因魚(yú)類的不同而不同。 W09]Potts等（197扣研究發(fā)現(xiàn)，外界水環(huán)境的高滲作用對(duì)魚(yú)類的胚胎發(fā)育有一 定的促進(jìn)作用，能縮短受精卵的解化時(shí)間。易祖盛等（1999)在尖罐經(jīng)（切prinus acutidorsalis)、黃永春等（2006)在鮑狀黃姑魚(yú)（化bea miichthioides)的研究中均發(fā) 現(xiàn)受精卵的解化時(shí)間隨著鹽度的升高而縮短。但是對(duì)于另外一些魚(yú)類，鹽度升高反而會(huì) 減慢胚胎發(fā)育的速度。施兆鴻等（2008)在點(diǎn)帶石斑魚(yú)巧pine地elus coioiaes)、強(qiáng)俊等 (2009)在奧尼羅非魚(yú)（Oreoc虹omis niloti州sXO. aureus)、張寒野等（1998)在大銀魚(yú) (Protosalanxhyalocranius)的研究中均發(fā)現(xiàn)精卵的解化時(shí)間隨著隨著鹽度的增加逐漸 延長(zhǎng)。在適宜的鹽度范圍內(nèi)，魚(yú)類的胚胎解化時(shí)間受到鹽度的影響，但并不明顯。
[0010] Johnson等（1986)認(rèn)為初解仔魚(yú)的滲透壓調(diào)節(jié)機(jī)制不完善，當(dāng)環(huán)境鹽度較低時(shí)， 接近仔魚(yú)的等滲點(diǎn)，仔魚(yú)用于維持體內(nèi)滲透壓的穩(wěn)定所消耗的能量減少，有利于仔魚(yú)的生 存；在高鹽度水體中，仔魚(yú)會(huì)因其滲透調(diào)節(jié)能力弱而大量失水，導(dǎo)致能量快速消耗，活動(dòng)能 力減弱，最終因?yàn)椴荒苤鲃?dòng)攝食而引起死亡率急劇上升（Tsukamoro等，1984)。Tytler等也 認(rèn)為滲透壓調(diào)節(jié)耗能過(guò)多會(huì)使得初解仔魚(yú)內(nèi)源性營(yíng)養(yǎng)消耗嚴(yán)重而達(dá)到不可逆點(diǎn)。海水硬骨 魚(yú)初解仔魚(yú)體液中的鹽度通常為12~16,當(dāng)環(huán)境鹽度較低時(shí)，仔魚(yú)用于維持體內(nèi)滲透壓的 穩(wěn)定而消耗的能量也減少，從而有利于仔魚(yú)的生存（Tytler等，1988)
[0011] 離子組成對(duì)魚(yú)類胚胎、仔魚(yú)的影響：
[0012] 海水鹽度變化往往造成海水中不同離子含量和比例的變化，而魚(yú)類胚胎、仔魚(yú) 的發(fā)育均會(huì)受到水體中的離子成分的影響。Lee等認(rèn)為離魚(yú)（MugilC巧halus)的受精 卵在沒(méi)有Ca2+的人工海水中不能破膜；而在沒(méi)有Mg2+的人工海水中能夠發(fā)育到破膜階 段，但不能解出仔魚(yú)或解出的仔魚(yú)會(huì)立即死亡化ee等，1983)。施兆鴻等在黑觸（Sparus macrocephalus)的研究中得到了相似的結(jié)論，即在沒(méi)有Ca2+的海水中不能解出仔魚(yú)；在沒(méi) 有Mg2+的海水中僅能解出少量崎形仔魚(yú)；低K+對(duì)黑銅受精卵解化沒(méi)有明顯影響，但對(duì)早 期仔魚(yú)影響顯著（施兆鴻等，199W。王廣軍等認(rèn)為Ca27Mg2+比值對(duì)日本媛綱（Anguilla japonica)的受精卵解化率有影響（王廣軍等，2002)。
[0013]Ca2+是控制細(xì)胞膜對(duì)其他離子和水滲透的一個(gè)重要離子，與跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)，而且分 布在血漿中的Ca2+(血巧）與成骨作用相關(guān)（王廣軍等，2002)。王波等（1996)認(rèn)為水體中 總硬度特別是Ca2+對(duì)魚(yú)類的生長(zhǎng)和生存有顯著的影響，并證明了淡水和海水中的化2+嚴(yán)重 影響眼斑擬石首魚(yú)（Sciaenopocella化S)的生存。多種研究表明，Mg2+是新陳代謝過(guò)程中 參與許多生化反應(yīng)的輔酶；當(dāng)細(xì)胞膜中參與物質(zhì)主動(dòng)運(yùn)輸?shù)妮d體化累缺少1護(hù)時(shí)，便不具 有活力（王義強(qiáng)等，1990)，進(jìn)而影響機(jī)體的正常生理功能。
[0014] 房文紅等（1999)報(bào)道了不同r對(duì)大銀魚(yú)仔魚(yú)存活率的影響?；痳sberg等（1996) 用地下咸水養(yǎng)殖美國(guó)紅魚(yú)（Sciaenopsocella化S)發(fā)現(xiàn)其存活率與地下咸水的化VV比值 顯著負(fù)相關(guān)，同時(shí)和r/cr比值正相關(guān)。
[0015] 專利201410578949.X公開(kāi)了一種花驢無(wú)公害淡水人工養(yǎng)殖技術(shù)，包括如下內(nèi)容： 通過(guò)一系列措施改變花驢生長(zhǎng)條件：整理消毒淡化池、精選優(yōu)質(zhì)魚(yú)苗并選用與魚(yú)苗產(chǎn)地同 濃度海水養(yǎng)殖、按一定濃度梯度逐步淡化海水、魚(yú)糜巧料喂養(yǎng)、待幼魚(yú)達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)后轉(zhuǎn)入 成魚(yú)方式養(yǎng)殖、并調(diào)節(jié)此過(guò)程中天氣、水溫、攝食等對(duì)花驢生長(zhǎng)的影響，使花驢適應(yīng)人工養(yǎng) 殖環(huán)境，從而有效提高其產(chǎn)量和效益，獲得優(yōu)質(zhì)無(wú)公害花驢，推動(dòng)花驢養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016] 本發(fā)明提供了一種鹽度馴化花驢仔魚(yú)的方法。
[0017] 本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0018] 本發(fā)明的鹽度馴化花驢仔魚(yú)的方法是在第1-4天進(jìn)行淡化養(yǎng)殖，第5-10天進(jìn)行穩(wěn) 定培養(yǎng)；初始海水鹽度為30,第1-4天，每日降低1-4個(gè)鹽度；養(yǎng)殖條件為：溫度16~20°C， 日光燈控制光照強(qiáng)度為400~lOOOlux;第4日開(kāi)始投喂經(jīng)室外池塘培育的輪蟲(chóng)，密度保持 在5~10個(gè)/mU每日吸污并穩(wěn)定培育至lOd。
[0019] 淡化通過(guò)添加自來(lái)水完成。
[0020] 每日降低2和4鹽度，同時(shí)添加巧、儀離子濃度至海水濃度。
[0021] 本發(fā)明的積極效果如下：
[0022] 本發(fā)明的鹽度馴化花驢仔魚(yú)的方法能夠提供花驢的存活率，更加有利于花驢生 長(zhǎng)，改善ATP酶活性和抗氧化酶活性，為花驢早期階段進(jìn)行淡水養(yǎng)殖奠定了基礎(chǔ)。
【附圖說(shuō)明】
[0023] 圖1是不同鹽度馴化下花驢仔魚(yú)的存活率圖；
[0024] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。 陽(yáng)02引 圖2是不同鹽度馴化下0~4D地(A)和4~10化h度）花驢仔魚(yú)的生長(zhǎng)率圖；
[00%] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<〇. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。
[0027] 圖3是不同鹽度馴化下花驢仔魚(yú)卵黃囊（A)和油球做的消耗圖；
[0028] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。
[0029] 圖4是不同鹽度馴化下4D地內(nèi)花驢仔魚(yú)的卵黃囊和油球的利用效率圖；
[0030] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<〇. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。 陽(yáng)03U 圖5是不同鹽度馴化下l(Mph花驢仔魚(yú)化+、K+-ATP酶相對(duì)活性圖；
[0032] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。 陽(yáng)03引 圖6是不同鹽度馴化下l(Mph花驢仔魚(yú)Ca2+、Mg化-ATP酶相對(duì)活性圖；
[0034] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。
[0035] 圖7是不同鹽度馴化下l(Mph花驢仔魚(yú)過(guò)氧化氨酶相對(duì)活性圖；
[0036] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。
[0037] 圖8是不同鹽度馴化下l(Mph花驢仔魚(yú)超氧化物歧化酶相對(duì)活性圖；
[0038] 注：數(shù)值用平均值+標(biāo)準(zhǔn)誤表示，標(biāo)有不同字母的數(shù)值表示顯著差異（P<0. 05)， 否則表示差異不顯著（P> 0. 05)。
【具體實(shí)施方式】
[0039] 下面的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)描述。 陽(yáng)040] 實(shí)施例1
[0041] 1實(shí)驗(yàn)材料 陽(yáng)0創(chuàng) 1. 1受精卵解化
[0043] 實(shí)驗(yàn)用受精卵購(gòu)于廣東江口某水產(chǎn)養(yǎng)殖場(chǎng)，為福建沿海網(wǎng)箱養(yǎng)殖的親魚(yú)經(jīng)室內(nèi)暫 養(yǎng)、人工催產(chǎn)和授精后得到。在水溫16°C條件下，受精卵收集完畢并運(yùn)至珠海市斗口區(qū)河口 漁業(yè)研究所時(shí)處于原腸胚晚期。每個(gè)0. 5m3解化桶里解化約20萬(wàn)粒受精卵，微充氣，鹽度 30,加熱棒控溫15~18°C，經(jīng)3化解出。
[0044] 1.2實(shí)驗(yàn)用水來(lái)源