一種滇黃精種子一步成苗的組培方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬中藥材種植技術領域，特別涉及一種滇黃精種子一步成苗的組培方法。
【背景技術】
[0002]滇黃精(Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl.)是百合科黃精屬草本植物，是常用中藥黃精三種基原植物之一。黃精作為常用中藥，在我國已有2000多年的用藥歷史，其性味甘平，入肺、脾、腎經。功效補中益氣，潤心肺，強筋骨。治虛損寒熱，肺癆咯血，病后體虛食少，筋骨軟弱，風濕疼痛，風癩癬疾，為補陰之品。近年來藥理研究表明，除上述功效外，黃精還有抗菌作用，尤其是對結核桿菌和真菌有顯著的效果，同時又有降低血壓的作用。近期研究結果還表明黃精對增加冠狀動脈血流量，減輕動脈粥樣硬化程度，提高肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)活性有明顯的作用。長期以來，由于人工栽培量較小，黃精藥材來源主要以野生采集為主。隨著市場對藥材黃精需求量的增加和野生資源的急劇減少，采集野生黃精不但不能滿足市場需求，更破壞了生態(tài)環(huán)境和黃精野生資源。由于黃精種子在自然條件下發(fā)芽率較低，自然條件下，黃精種子要經歷2個冬季休眠后，才能長出一片真葉，目前在黃精人工栽培中多采用塊莖進行無性繁殖。繁殖周期長、繁殖系數低。
[0003]申請?zhí)枮?201110450738.4，名稱為“黃精組培繁殖方法”的中國專利申請公開了一種黃精組培繁殖方法，具體為:黃精組培繁殖方法，包括引種滅菌、組織誘導、繼代培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和生根培養(yǎng)，其有益效果是通過組織培養(yǎng)，可以大量生產種苗，從塊莖到培養(yǎng)成生根苗，只需7個月，大大縮短了種苗生產時間和成本，提高了擴繁速度。
[0004]申請?zhí)枮?201210085056.2，名稱為“九華黃精的組培快繁方法”的中國專利申請公開了一種黃精組培繁殖方法，具體為:以黃精根狀莖為外植體，經過不定芽的誘導階段，叢芽增殖階段，生根階段和煉苗移栽階段，調配和優(yōu)選各培養(yǎng)階段的培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件，形成了每年擴繁速度為106倍的組培技術，實現(xiàn)了九華黃精的組織培養(yǎng)和快速穩(wěn)定繁殖，可以有效解決九華黃精的優(yōu)質種苗供應問題。
[0005]申請?zhí)枮?201310532853.5，名稱為“黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法”的中國專利申請公開了一種黃精根莖的組織培養(yǎng)基及離體再生方法；該黃精根莖的組織培養(yǎng)基包括誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基；使用所述黃精根莖的組織培養(yǎng)基進行黃精根莖離體再生的方法，包括芽的誘導、芽的增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)三個步驟。該發(fā)明利用植物組織培養(yǎng)技術建立了黃精離體再生體系，并對涉及的誘導培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基進行了選擇優(yōu)化，具有芽誘導率高、增殖系數高、生根率高、芽苗健壯、葉形葉色正常等優(yōu)點，能夠滿足市場對優(yōu)質黃精種苗的需要。
[0006]申請?zhí)枮?201410130683.2，名稱為“一種黃精的快速繁殖技術方法”的中國專利公開了一種黃精快速繁殖的方法，具體為:采用變溫處理加激素處理打破種子休眠，以及利用打破休眠，已經萌發(fā)的種子作材料進行離體誘導培養(yǎng)愈傷組織，經過分化培養(yǎng)和根誘導，無性繁殖黃精種苗。采用該技術能大大提高黃精繁殖倍數，縮短生產周期，減少用種量，降低生產成本。
[0007]上述技術，顯示了組織培養(yǎng)技術在黃精種苗繁育應用的可能性，申請?zhí)枮?201410130683.2，名稱為“ 一種黃精的快速繁殖技術方法”的中國專利與本發(fā)明類似，但該專利技術存在前處理、使用已經萌發(fā)的種子作離體誘導、培養(yǎng)愈傷組織、芽的誘導、芽的增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)等復雜程序，不但工序復雜、技術難度高、時間周期長，而且生產成本較高，不利于滇黃精種苗的大規(guī)模生產。
[0008]經文獻檢索，未見與本發(fā)明相同的公開報道。

【發(fā)明內容】

[0009]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術存在工序復雜、技術難度高、時間周期長，而且生產成本較高的缺陷，提供一種新的滇黃精種子一步成苗的組培方法。
[0010]本發(fā)明的目的通過下述技術方案實現(xiàn):
[0011]—種滇黃精種子一步成苗的組培方法，包括以下步驟如下:
[0012](I)滇黃精果實的選取
[0013]在10月，選取8成成熟的新鮮、無病蟲害的滇黃精果實，放置于4°C冰箱中保存7天;
[0014](2)滇黃精種子的處理
[0015]將選取的滇黃精果實剝去果皮，取出種子置入燒杯中，用體積分數為75%的酒精消毒Imin后，無菌水沖洗2?3次，轉入無菌工作臺，用質量分數為0.1 % HgCl2S液浸泡14?15min，再無菌水沖洗3?4次；
[0016](3)滇黃精種子一步成苗培養(yǎng)
[0017]將經步驟(2)處理的滇黃精種子，接種于盛有MS+BA 0.5mg/L培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，在培養(yǎng)溫度為25°C ±2°C，光照時間為12-14h/天，光照強度為1501x條件下培養(yǎng)至黃精種子萌發(fā)2片真葉時，將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)溫度為25°C ±2°C，光照時間為12h/天，光照強度為15001x條件下繼續(xù)培養(yǎng)至生根；
[0018]⑷煉苗移栽
[0019]將培養(yǎng)瓶塞打開后，置于20001x的光照下煉苗3?4d，取出生根苗，洗凈培養(yǎng)基，移栽到混合土中，并覆蓋保鮮膜，移栽后7d內保持沒有直射光照射，保鮮膜內溫度在15?30°C之間、且濕度在80%，7d后去膜，即得到滇黃精種苗；所述混合土由蛭石、黑土和珍珠巖按蛭石:黑土:珍珠巖的體積比為(10?14): (1.5?2.5):1混合而成。
[0020]步驟(3)中所述的滇黃精種子的接種于培養(yǎng)瓶中，滇黃精種子的密度優(yōu)選為10?15粒/瓶，培養(yǎng)瓶的直徑為7cm，高為11cm。
[0021]與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是:
[0022]本發(fā)明提出了新的技術方案，省略了離體誘導、培養(yǎng)愈傷組織、芽的增殖培養(yǎng)等復雜工序，從種子接種一步培養(yǎng)即可成苗，從收集種子至種子接種一步培育成生根組培苗，僅需90天-99天，繁育周期大大縮短，種子萌芽率達到90?95%，培育的苗壯，根系發(fā)達，煉苗成活率達100%，取得了預料不到的技術效果。
[0023]本發(fā)明方法能夠打破滇黃精種子休眠期，縮短滇黃精種子的萌芽期，促進滇黃精種子萌發(fā)，種子置于培養(yǎng)基25天-32天快速生成2片真葉，把滇黃精的萌芽期從兩個冬季縮短到I個月，萌芽率從大田種植的10?20%提高到90?95%，形成膨大根莖，生長出3?1cm長的根系，苗壯，直接可應用于黃精生產。
[0024]本發(fā)明方法簡便易行，成本