一種利用酸棗枝屑培養(yǎng)黑木耳的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于食用真菌栽培的技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種包含酸棗枝肩的黑木耳培養(yǎng) 料及其用于培養(yǎng)黑木耳的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黑木耳（Auriculariaauricula)在系統(tǒng)分類(lèi)上隸屬于真菌門(mén)、擔(dān)子菌亞門(mén)、異擔(dān) 子菌綱、木耳目、木耳科、木耳屬，與毛木耳同屬不同種。黑木耳是一種食、藥兼用蕈菌，色澤 黑褐，質(zhì)地柔軟呈膠質(zhì)狀，薄而有彈性，濕潤(rùn)時(shí)半透明，干燥時(shí)收縮變?yōu)榇嘤驳慕琴|(zhì)近似革 質(zhì)。味道鮮美，可葷可素，有"素中之葷"美譽(yù)，世界上稱之為"中餐中的黑色瑰寶"。黑木耳 含有蛋白質(zhì)、脂肪、多糖和鈣、磷、鐵等元素以及胡蘿卜素、維生素B1、維生素B2、煙酸等，還 含磷脂、固醇等營(yíng)養(yǎng)素，營(yíng)養(yǎng)豐富，被譽(yù)為"菌種之冠"。此外，黑木耳具有很高的藥用價(jià)值， 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研宄表明它具有補(bǔ)氣血、涼血止血、清潤(rùn)益胃、潤(rùn)燥利腸、舒筋活絡(luò)、輕身強(qiáng)志等功 效外，還具有降血糖作用、降血脂作用、抑制血小板凝集、抗血栓形成、提高機(jī)體免疫力、抗 衰老作用、抗突變和抗肝炎作用、對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的對(duì)抗作用、抗輻射作用、抗腫瘤作用、抗?jié)?瘍作用等功效。黑木耳作為我國(guó)傳統(tǒng)的保健食品和出口商品，深受?chē)?guó)內(nèi)外消費(fèi)者喜愛(ài)，具有 非常廣闊的開(kāi)發(fā)前景。
[0003] 酸棗為鼠李科棗屬的一種灌木。為我國(guó)北方較普通的一種野生資源，多分布在海 拔200-800米的低山丘陵區(qū)。僅以河北為例，可占河北太行山總面積的48. 1%。通常酸棗 枝的用途為：作柴燒，作蘺笆護(hù)墻用，作果園的防護(hù)墻用，作為防風(fēng)固沙之用。目前，對(duì)酸棗 枝椏資源化開(kāi)發(fā)尚未開(kāi)展，其豐富的野生資源不能充分被利用。造成極大的浪費(fèi)。以酸棗 枝肩為栽培原料，必然會(huì)產(chǎn)生很大的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益，在完善當(dāng)?shù)亟?jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)調(diào)整、實(shí)現(xiàn)循環(huán) 經(jīng)濟(jì)方面將發(fā)揮巨大的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種利用酸棗枝肩為培養(yǎng)黑木耳的方法，在對(duì)環(huán)境無(wú)污染并 且高收益的前提下實(shí)現(xiàn)農(nóng)林廢棄物的資源化循環(huán)利用。
[0005] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明所述目的，提供一種利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，包括如下 步驟：
[0006] A.液體菌種的制備和培養(yǎng)；
[0007] B.谷粒菌種的制備和培養(yǎng)；
[0008] C.栽培用培養(yǎng)基的制備；
[0009] D.無(wú)菌條件下，將步驟B制備得到的谷粒菌種接入步驟C制備得到的培養(yǎng)基，進(jìn)行 培養(yǎng)、出葫管理、米收；
[0010] 在步驟A或/和步驟B或/和步驟C的培養(yǎng)基中含有酸棗枝肩。
[0011] 所述的利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，步驟A中黑木耳的液體菌種培養(yǎng)基中 作為底物誘導(dǎo)物提前加入酸棗枝肩；其優(yōu)化液體菌種培養(yǎng)基配方重量百分比為：馬鈴薯 20%，酸棗枝肩 5%，麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2P04 0.3%，MgS04 0? 15%，VBi10mg/L，羧甲 基纖維素0.3%，水1000mL，pH自然。
[0012] 所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，所述步驟A中液體菌種的制備步驟如下：
[0013]a. -級(jí)液體菌種的制備
[0014]無(wú)菌條件下，將市售母種接入一級(jí)液體培養(yǎng)基中，25°C、160r/min恒溫振蕩培養(yǎng) 7d，即制得一級(jí)液體菌種；
[0015]所述一級(jí)液體菌種培養(yǎng)基包括：以重量百分比計(jì)，馬鈴薯20 %，麩皮3 %，葡萄糖 2%,KH2P04 0.3%,MgS04 0. 15 %,CMC0.3%,YB,lOmg/L；
[0016] b.二級(jí)液體菌種的制備
[0017] 所述二級(jí)液體菌種培養(yǎng)基配方重量百分比為：馬鈴薯20 %，酸棗枝肩5 %，麩皮 3%，葡萄糖 2%，KH2P04 0.3%，MgS04 0? 15%，CMC0.3%，VBi10mg/L，制備方法是將馬鈴 薯、酸棗枝肩粉和麩皮加水l〇〇〇mL共煮，開(kāi)鍋后保持微沸30分鐘，過(guò)濾，取濾液，趁熱加入 其它組分，攪拌化開(kāi)后，定容至水l〇〇〇mL，分裝，滅菌，待接種；
[0018]無(wú)菌條件下，將一級(jí)液體菌種以10 %的接種量接入二級(jí)液體培養(yǎng)基中，25 °C、 160r/min恒溫振蕩培養(yǎng)7d，即制得二級(jí)液體菌種。
[0019] 所述的利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，步驟B中黑木耳的谷粒菌種培養(yǎng)基中也 作為底物誘導(dǎo)物、提前加入酸棗枝肩；其優(yōu)化的谷粒菌種培養(yǎng)基配方：玉米粒85%，酸棗枝 肩10%，麩皮4%，生石灰1%。
[0020] 所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，所述步驟B中谷粒菌種的制備特征在于：
[0021] 將步驟A得到的二級(jí)液體菌種接入谷粒菌種培養(yǎng)基，接種量為10%，22_24°C培養(yǎng) 至滿，得到谷粒菌種。
[0022] 所述的利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，步驟C中酸棗枝肩作為栽培黑木耳的主 料，栽培培養(yǎng)基重量組成包括：酸棗枝肩60 %、棉籽皮19 %、柿木肩10 %、麩皮10 %、生石灰
[0023] 所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，所述步驟C中酸棗枝肩培養(yǎng)基的制備特征 在于：將酸棗枝，柿木碎段粉碎成木肩狀，配以棉籽皮、麩皮和生石灰，料水比為1 : 1.4,堆 悶30min，裝入容器內(nèi)，滅菌，冷卻后備用。
[0024] 所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，步驟D中谷粒菌種的接種量為5-10%。
[0025]所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)基栽培黑木耳的方法，液體培養(yǎng)基中所用酸棗枝肩，事先 粉碎并過(guò)80目篩。
[0026]所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，步驟C中酸棗枝肩培養(yǎng)基的滅菌條件為 121°C高壓滅菌150min或100°C常壓滅菌24h。
[0027]所述利用酸棗枝肩培養(yǎng)料栽培黑木耳的方法，谷粒菌種培養(yǎng)基中所用酸棗枝肩， 事先粉碎為木肩狀。
[0028]本發(fā)明的技術(shù)進(jìn)步效果表現(xiàn)在以酸棗枝肩作為栽培黑木耳的主要原料，優(yōu)勢(shì)主要 有三點(diǎn)：
[0029] 1、對(duì)于食用菌而言，為其提供生長(zhǎng)所需碳源。
[0030] 2、酸棗枝目前尚未得到開(kāi)發(fā)利用，資源豐富，為食用菌栽培提供了一種價(jià)格低廉 的栽培原料，生產(chǎn)成本低，經(jīng)濟(jì)效益高。
[0031] 3、從生態(tài)的角度來(lái)看，實(shí)現(xiàn)了農(nóng)林廢棄物的再利用，具有可觀的經(jīng)濟(jì)效益和廣闊 的應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明所述內(nèi)容做進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。
[0033] 實(shí)施例：利用酸棗枝肩培養(yǎng)黑木耳的方法，黑木耳菌種為市場(chǎng)采購(gòu)
[0034] 常規(guī)工藝：母種-擴(kuò)繁-棉籽皮原種-酸棗枝肩或棉籽皮栽培種-酸棗枝肩出菇 袋-發(fā)菌管理-出菇管理-采摘。
[0035] 液體菌種應(yīng)用工藝：母種-擴(kuò)繁-液體菌種的發(fā)酵-谷粒菌種_酸棗枝肩出菇 袋-發(fā)菌管理-出菇管理-采摘。
[0036] 本發(fā)明添加酸棗枝肩的液體菌種工藝可縮短整個(gè)生產(chǎn)周期三分之一以上，下面重 點(diǎn)介紹液體菌種工藝：
[0037] A.液體菌種的制備
[0038] 一級(jí)液體菌種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯20%，麩皮3%，葡萄糖2%，KH2P04 0.3%， MgS04 0.15%，CMCOJKVBi10mg/L，pH自然；制備方法是馬鈴薯、麩皮共煮沸30min， 過(guò)濾去渣得浸提液加入其他成分。一級(jí)液體菌種制備時(shí)使用500mL錐形瓶，裝液量為 200mL，121°C高壓滅菌30min后，無(wú)菌條件下接入市售的PDA斜面菌種，每瓶接種量為4塊 0. 5cmX0. 5cm菌種塊。接種后在25°C、160r/min的條件下，恒溫振蕩培養(yǎng)7d。
[0039] 二級(jí)液體菌種培養(yǎng)基配方：馬鈴薯20 %，酸棗枝肩粉5 %，麩皮3 %，葡萄糖2 %， KH2P04 0? 3%，MgS04 0? 15%，CMC0? 3%，VBJOmg/L，pH自然；制備方法是酸棗枝肩粉碎過(guò) 80目篩得粉狀，與馬鈴薯、麩皮共煮沸30min，過(guò)濾去渣得浸提液。
[0040] 二級(jí)液體菌種裝液量規(guī)格、滅菌條件及培養(yǎng)條件同上，接種量為10%。
[0041] 在二級(jí)液體菌種制備階段，測(cè)定優(yōu)化液體菌種發(fā)酵液中漆酶酶活及羧甲基纖維素 酶酶活（CMC酶活），以未添加酸棗枝肩粉末的培養(yǎng)基為對(duì)照，以發(fā)現(xiàn)酸棗枝肩粉末在液體 菌種中是否有底物誘導(dǎo)作用的優(yōu)勢(shì)。酶活測(cè)定結(jié)果如表1所示。
[0042] 漆酶酶活力定義：在一定條件下，每分鐘使反應(yīng)液0D值增加0. 001的酶量定義為 一個(gè)漆酶酶活力單位（U)。
[0043] 羧甲基纖維素酶酶活力（CMC酶活）定義：在一定條件下，每分鐘酶解底物產(chǎn)生 1yg葡萄糖的酶量定義為一個(gè)羧甲基纖維素酶酶活力單位（u)。
[0044] 表1黑木耳的酶活數(shù)據(jù)
[0045]
[0046] 由表1可知，本發(fā)明所述二級(jí)液體培養(yǎng)基的漆酶酶活、纖維素酶酶活均比對(duì)照組 (未添加酸棗枝肩）高，可見(jiàn)在液體培養(yǎng)基中添加酸棗枝肩對(duì)黑木耳菌絲的漆酶和纖維素 酶的分泌起到了一定的底物誘導(dǎo)作用，讓菌絲提前適應(yīng)底物（酸棗枝肩），從而加快菌絲在 培養(yǎng)料上的生長(zhǎng)速度，縮短栽培周期。
[0047] B.谷粒菌種的制備
[0048] 谷粒菌種培養(yǎng)基配方：玉米粒85%，酸棗枝肩10%，麩皮4%，生石灰1%。
[0049] 準(zhǔn)確稱取培養(yǎng)基各組成成分，料水比1 :1. 4進(jìn)行拌料，裝入17cmX32cmX0. 005cm聚乙烯塑料袋，每袋裝干料300g，制備120袋。將優(yōu)化得到的二級(jí)液體菌種以及未添加酸棗 枝肩的對(duì)照組液體菌種分別接入谷粒菌種培養(yǎng)基，分別接種60袋，