專利名稱：飼養(yǎng)方法和飼料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種飼養(yǎng)生物的方法以及飼料。
發(fā)明目的本發(fā)明的主要目的是提供一種飼養(yǎng)生物的方法以及一種飼料，所說的飼料對預(yù)防和治療有用生物如培養(yǎng)的動物的疾病和對保持有用生物的健康是有效的。
(3)式(Ⅰ)4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物。
本發(fā)明的第二項(xiàng)發(fā)明涉及一種生物飼料，該飼料含有選自上述(a)、(b)和(c)中的至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物、式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮、和/或式(Ⅰ)4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物；該飼料是通過添加和/或通過稀釋上述物質(zhì)來生產(chǎn)的。
本發(fā)明的第三項(xiàng)發(fā)明涉及一種用于飼養(yǎng)生物的組合物，該組合物含有選自上述(a)、(b)和(c)中的至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物、式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮、和/或式(Ⅰ)4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物。
在本發(fā)明的第一至第三項(xiàng)發(fā)明中，生物是指例如培養(yǎng)的動物或?qū)欚B(yǎng)動物。培養(yǎng)的生物的例子是家養(yǎng)動物、實(shí)驗(yàn)室用動物、家禽、魚類、甲殼類動物或貝類。熱處理產(chǎn)物的例子是含有式(Ⅰ)4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的物質(zhì)。
本發(fā)明的飼料以用于改進(jìn)體格狀況的飼料為例。
本發(fā)明第三項(xiàng)發(fā)明的用于飼養(yǎng)生物的組合物，其例子是用于浸泡生物的組合物、飼料添加劑和飲料添加劑。發(fā)明詳述這里所說的，選自糖醛酸或糖醛酸衍生物、含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類、和含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)中的至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物不限于具體的某一種，只要它具有增加生物飼養(yǎng)效力的效果，如生存率、增肥率、產(chǎn)卵率、出生率或斷奶率。
糖醛酸是(也稱作葡萄糖醛酸)一種羥醛-酸的類名，其中醛糖上的醛基團(tuán)保持不反應(yīng)并且只有另一端的伯醇基團(tuán)被氧化成羧基。糖醛酸天然存在為動物和植物中的各種多糖類物質(zhì)的組分。
可用于本發(fā)明的糖醛酸的實(shí)例包括(但不限于此)半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖酸、甘露糖醛酸和艾杜糖醛酸。糖醛酸的衍生物包括其內(nèi)酯、酯、酰胺和鹽類。
這里所說的，含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類的實(shí)例包括(但不限于此)果膠、果膠酸、海藻酸、透明質(zhì)酸、肝素、硫酸乙酰肝素、巖藻依聚糖、硫酸軟骨素、軟骨素和硫酸皮膚素。還可以使用上述糖類的降解產(chǎn)物(化學(xué)、酶或物理處理的產(chǎn)物)以及降解產(chǎn)物的衍生物和鹽。
這里所說的，含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)不限于具體的某一種，只要物質(zhì)中含有上述的含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類?？梢允褂玫米灾参?、藻類、微生物和動物的含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)。
另一種方式是，可以直接使用經(jīng)加工的含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的農(nóng)業(yè)產(chǎn)品或海洋食物產(chǎn)品，或在干燥和磨碎后使用，作為本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物的原料。
在生產(chǎn)本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中使用的熱處理方法不限于具體的某一種，只要它能夠生產(chǎn)出具有生理活性的熱處理產(chǎn)物，所說的生理活性如能夠增加飼養(yǎng)效力的活性和能夠改進(jìn)體格狀況的活性。例如，可以將選自糖醛酸或糖醛酸衍生物、含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類、和含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)中的至少一種化合物在60-350℃下加熱幾秒至幾天，優(yōu)選在80-150℃下加熱幾分鐘至幾天。例如，本發(fā)明中所用的熱處理產(chǎn)物可以通過將果膠或海藻酸在80-150℃下加熱幾分鐘至幾天來獲得。此外，所說的熱處理產(chǎn)物可以通過將糖醛酸、糖醛酸的內(nèi)酯或糖醛酸酯在60-150℃下加熱幾分鐘至幾天來獲得。
本發(fā)明的熱處理可以使用濕法加熱或者干法加熱。其中，出于包含在具有生理活性的本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的化合物的生產(chǎn)效率，優(yōu)選濕法加熱，其中所說的生理活性如可增加飼養(yǎng)效力的活性和可改進(jìn)體格狀況的活性，所說的化合物如式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮(此后簡稱為環(huán)戊烯酮)?？梢允褂萌魏螡穹訜?，如蒸汽加熱、加壓蒸汽加熱和加壓加熱。使用干燥熱風(fēng)的直接加熱和通過熱源分隔墻的間接加熱可以用作干法加熱。直接加熱的例子是空氣流干燥加熱和噴霧干燥加熱。轉(zhuǎn)鼓式干燥加熱等可以用作間接加熱。
可以使用任何方法來生產(chǎn)本發(fā)明的環(huán)戊烯酮。環(huán)戊烯酮可以按照化學(xué)合成法(碳水化合物源(Carbohydrate Res.)247:217-222(1993)；Helvetica Chimica Acta,55:2838-2844(1972))來合成?？梢允褂迷谶x自糖醛酸或糖醛酸衍生物、含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類、和含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)中的至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物中生產(chǎn)的環(huán)戊烯酮，或從中純化的產(chǎn)物。這些含有環(huán)戊烯酮的加熱處理產(chǎn)物以及從中部分純化或純化的產(chǎn)物可以用于本發(fā)明(WO 98/13328)。
本發(fā)明生產(chǎn)含環(huán)戊烯酮熱處理產(chǎn)物中所用的熱處理方法不限于具體某一種，只要它可以生產(chǎn)出環(huán)戊烯酮。例如，可以將糖醛酸或糖醛酸衍生物、含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類、和含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)在60-350℃下加熱幾秒至幾天，優(yōu)選在80-150℃下加熱幾分鐘至幾天。例如，含環(huán)戊烯酮的熱處理產(chǎn)物可以通過將果膠或海藻酸在80-150℃下加熱幾分鐘至幾天來獲得。此外，所說的含戊烯酮的熱處理產(chǎn)物可以通過將糖醛酸、糖醛酸的內(nèi)酯或糖醛酸酯在60-150℃下加熱幾分鐘至幾天來獲得。
盡管熱處理中所用的pH不限于某一具體范圍，但優(yōu)選在中性至酸性條件下進(jìn)行熱處理?？梢砸罁?jù)所用的原料來調(diào)節(jié)熱處理用的pH。通過在酸性條件下加熱可以加速環(huán)戊烯酮的生產(chǎn)。
熱處理過程中原料的濃度為通過熱處理可以生產(chǎn)出環(huán)戊烯酮的任何濃度范圍內(nèi)。濃度的確定要考慮到操作性、產(chǎn)率等等。
本發(fā)明的熱處理可以使用濕法加熱或者干法加熱。其中，出于環(huán)戊烯酮的生產(chǎn)效率，優(yōu)選濕法加熱。可以使用任何濕法加熱，如蒸汽加熱、加壓蒸汽加熱和加壓加熱。使用干燥熱風(fēng)的直接加熱和通過熱源分隔墻的間接加熱可以用作干法加熱。直接加熱的例子是空氣流干燥加熱和噴霧干燥加熱。轉(zhuǎn)鼓式干燥加熱等可以用作間接加熱。
本發(fā)明中所用的熱處理產(chǎn)物中的環(huán)戊烯酮可以通過已知的純化/分離手段來收集，包括化學(xué)手段和物理手段。可以結(jié)合使用常規(guī)的純化手段，如凝膠過濾、使用分子量分級膜的分級、溶劑提取、分餾和各種色譜法(離子交換樹脂、正相或反相)，來收集熱處理產(chǎn)物中的環(huán)戊烯酮。
例如，通過將1％的D-葡萄糖醛酸溶液作為糖醛酸在121℃下加熱4小時在熱處理產(chǎn)物中生產(chǎn)環(huán)戊烯酮。用溶劑提取熱處理產(chǎn)物中的環(huán)戊烯酮。將提取液濃縮。然后在硅膠柱色譜上分離濃縮物。將含有環(huán)戊烯酮的洗脫級分濃縮。用氯仿從濃縮物中提取環(huán)戊烯酮，由此在熱處理產(chǎn)物中分離環(huán)戊烯酮。
此外，通過將葡萄糖醛酸熱處理產(chǎn)物經(jīng)離子交換樹脂柱(優(yōu)選陰離子交換樹脂柱)并且收集非吸附性級分，來純化環(huán)戊烯酮?；蛘撸ㄟ^以下步驟獲得純化的環(huán)戊烯酮。將葡萄糖醛酸的熱處理產(chǎn)物經(jīng)活性碳柱。除去非吸附性級分。洗滌柱子。使用親水性有機(jī)溶劑(如乙醇水溶液，優(yōu)選40％或更高濃度的乙醇水溶液)進(jìn)行洗脫。另外，通過結(jié)合這些方法可以獲得高純化的環(huán)戊烯酮。
4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物(此后簡稱為環(huán)戊烯酮衍生物)也可以用于本發(fā)明。環(huán)戊烯酮衍生物不限于具體的某一種，只要通過使用衍生物可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。例如，下式(Ⅱ)-(Ⅴ)的環(huán)戊烯酮衍生物 其中虛線表示的五元環(huán)中的鍵是指五元環(huán)可以是具有一個雙鍵的環(huán)戊烯環(huán)或是飽和環(huán)戊烷環(huán)；如果五元環(huán)是環(huán)戊烯環(huán)，則X1是OH、Y1是=O且Z1是H；如果五元環(huán)是環(huán)戊烷環(huán)，則X1是=O、Y1是OH且Z1是OH；W1是殘基，其中從含SH基團(tuán)的化合物中除去SH基團(tuán)； 其中R1和R2彼此可以相同或不同，并且是氫、脂族基團(tuán)、芳族基團(tuán)或芳族脂族基團(tuán)； 其中R3和R4彼此可以相同或不同，并且是氫、脂族基團(tuán)、芳族基團(tuán)或芳族脂族基團(tuán)，前提條件是R3和R4不同時為H；和 其中虛線表示的五元環(huán)中的鍵是指五元環(huán)可以是具有一個雙鍵的環(huán)戊烯環(huán)或是飽和環(huán)戊烷環(huán)；如果五元環(huán)是環(huán)戊烯環(huán)，則X2是OR5、Y2是=O且Z2是H；如果五元環(huán)是環(huán)戊烷環(huán)，X2是=O、Y2是OR6且Z2是OR7；R5是R8或-(CO)-R9；R6是H、R10或-(CO)-R11；R8是H、R12或-(CO)-R13(R8、R9、R10、R11、R12和R13彼此可以相同或不同，并且是脂族基團(tuán)、芳族基團(tuán)或芳族脂族基團(tuán)；R9、R11和R13可以是H)，前提條件是R6和R7不同時為H；W2是殘基，其中從含SH基團(tuán)的化合物中除去SH基團(tuán)。
本發(fā)明中可以使用含環(huán)戊烯酮衍生物或其鹽的物質(zhì)的旋光異構(gòu)體。
式(Ⅱ)的環(huán)戊烯酮衍生物在WO 98/39291中有詳細(xì)描述。該衍生物可以通過將環(huán)戊烯酮與含SH基團(tuán)的化合物如半胱氨酸或谷胱甘肽反應(yīng)來獲得。含該環(huán)戊烯酮衍生物的物質(zhì)可以通過向含環(huán)戊烯酮的物質(zhì)添加含SH基團(tuán)的化合物來獲得。該衍生物的例子為下式(Ⅵ)-(Ⅸ)的化合物 式(Ⅵ)的化合物是環(huán)戊烯酮與谷胱甘肽之間在酸性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物。式(Ⅶ)的化合物是環(huán)戊烯酮與谷胱甘肽之間在中性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物。式(Ⅷ)的化合物是環(huán)戊烯酮與半胱氨酸之間在酸性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物。式(Ⅸ)的化合物是環(huán)戊烯酮與半胱氨酸之間在中性條件下的反應(yīng)產(chǎn)物。
式(Ⅲ)的化合物在WO 98/40346和JP專利申請10-231659中有詳細(xì)描述。該衍生物可以通過將環(huán)戊烯酮與具有脂族基團(tuán)、芳族基團(tuán)或芳族脂族基團(tuán)的羧酸和/或其反應(yīng)性衍生物同時或順序反應(yīng)來獲得。該環(huán)戊烯酮衍生物的例子是二乙酰環(huán)戊烯酮、二苯甲酰環(huán)戊烯酮、二己酰環(huán)戊烯酮、二肉豆蔻酰環(huán)戊烯酮、二辛酰環(huán)戊烯酮、二-3-辛烯酰環(huán)戊烯酮、二丁酰環(huán)戊烯酮、二癸酰環(huán)戊烯酮、二戊酰環(huán)戊烯酮、二丙酰環(huán)戊烯酮、二-2-己烯酰環(huán)戊烯酮、二異丁酰環(huán)戊烯酮、二甲氧基乙酰環(huán)戊烯酮、甲氧基富馬酰環(huán)戊烯酮和甲氧基馬來酰環(huán)戊烯酮。下式(Ⅹ)表示二丙酰環(huán)戊烯酮的結(jié)構(gòu)。下式(Ⅺ)表示二苯甲酰環(huán)戊烯酮的結(jié)構(gòu)。
式(Ⅳ)的環(huán)戊烯酮衍生物在WO 99/00349中有詳細(xì)描述。該衍生物可以通過將環(huán)戊烯酮與具有脂族基團(tuán)、芳族基團(tuán)或芳族脂族基團(tuán)的醇和/或其反應(yīng)性衍生物同時或順序反應(yīng)來獲得。該環(huán)戊烯酮衍生物的例子是4-芐基環(huán)戊烯酮醚、5-芐基環(huán)戊烯酮醚、4,5-二芐基環(huán)戊烯酮醚、4-叔丁基環(huán)戊烯酮醚、5-叔丁基環(huán)戊烯酮醚和4,5-二叔丁基環(huán)戊烯酮醚。下式(Ⅻ)和(ⅩⅢ)分別表示5-芐基環(huán)戊烯酮醚和4,5-二叔丁基環(huán)戊烯酮醚的結(jié)構(gòu)。
式(Ⅴ)的環(huán)戊烯酮衍生物在JP專利申請10-232746中有詳細(xì)描述。該衍生物可以通過將式(Ⅲ)的化合物或式(Ⅳ)的化合物與含SH基團(tuán)的化合物如半胱氨酸或谷胱甘肽反應(yīng)獲得。該衍生物的實(shí)例包括下式(ⅩⅣ)和(ⅩⅤ)的化合物。
式(ⅩⅣ)的化合物是二己酰環(huán)戊烯酮與谷胱甘肽之間的反應(yīng)產(chǎn)物。式(ⅩⅤ)的化合物是4,5-二叔丁基環(huán)戊烯酮醚與谷胱甘肽之間的反應(yīng)產(chǎn)物。
本發(fā)明中優(yōu)選使用具有α,β不飽和羰基結(jié)構(gòu)的環(huán)戊烯酮衍生物。
本發(fā)明中使用的熱處理產(chǎn)物、環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物具有諸如制癌活性、抗腫瘤細(xì)胞增生活性、誘發(fā)編程性細(xì)胞死亡活性、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ抑制活性、誘發(fā)腫瘤細(xì)胞分化活性、抗風(fēng)濕活性、抑制類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎活性、誘發(fā)Fas抗原產(chǎn)生的活性、抗菌活性、抗病毒活性、改善肝功的活性、誘發(fā)熱激蛋白的活性、使血液組分正?；幕钚浴⒃鰪?qiáng)腫瘤免疫的活性、抗炎活性、抑制腫瘤壞死因子產(chǎn)生的活性、抑制一氧化二氮產(chǎn)生的活性和免疫調(diào)節(jié)活性等生理活性，其中所說的免疫調(diào)節(jié)活性例如抑制遲發(fā)性超敏的活性、抑制淋巴細(xì)胞胚細(xì)胞樣轉(zhuǎn)變的活性、抑制混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的活性、抑制IgE產(chǎn)生的活性和抑制角叉菜膠水腫的活性。基于這些活性，本發(fā)明的含有用于本發(fā)明熱處理產(chǎn)物、環(huán)戊烯酮和/或環(huán)戊烯酮衍生物作為活性成分的飼料，非常適合作為用于改進(jìn)生物體格狀況的飼料，例如用于激活生物防御機(jī)理的飼料、用于激活抗體產(chǎn)生機(jī)理的飼料、用于使糖類代謝正?；娘暳匣蛴行ПＷo(hù)和預(yù)防致病生物傳染的飼料。
由環(huán)戊烯酮和含SH基團(tuán)化合物生產(chǎn)的式(Ⅱ)環(huán)戊烯酮化合物可作為生物在環(huán)戊烯酮和含SH基團(tuán)化合物的存在下的代謝產(chǎn)物來生產(chǎn)。本發(fā)明的飼料包括含有環(huán)戊烯酮和含SH基團(tuán)化合物如半胱氨酸或谷胱甘肽的飼料，并且其中環(huán)戊烯酮衍生物在飼料或在活體中生產(chǎn)。這種本發(fā)明飼料的飼料是非常有效的。
選自糖醛酸或糖醛酸衍生物、含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類、和含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì)中的至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物(此后簡稱作本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物)，其每日劑量通常為每kg所針對生物的體重1-20000mg?？梢詫崽幚懋a(chǎn)物添加到人造混合飼料所用的原料中，并且與之混合。另一種方式是，可以將其與用于人造混合飼料的粉狀原料混合，然后添加到其它原料中并且與之混合。
環(huán)戊烯酮和/或其衍生物的每日劑量通常為每kg所針對生物(如培養(yǎng)的生物)的體重O.01-200mg。可以將其添加到人造混合飼料所用的原料中，并且與之混合。另一種方式是，可以將其與用于人造混合飼料的粉狀形式的原料混合，然后添加到其它原料中并且與之混合?？梢詫⑦x自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物直接添加到用于所針對生物的飼料中，并且與之混合。
本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物在生物飼料中的含量不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的含量為0.05-50w/w％。
環(huán)戊烯酮和/或其衍生物在生物飼料中的含量不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的含量為0.O1-1w/w％。
人造混合飼料包括使用得自動物的原料如魚粉、酪蛋白和烏賊粉；得自植物的原料如大豆粕、小麥面粉、淀粉和飼料酵母；動物油如魚肝油和烏賊肝油；植物油如大豆油和菜籽油；維生素；無機(jī)鹽；氨基酸；抗氧化劑等作為原料生產(chǎn)的飼料。人造混合飼料還包括魚飼料，如魚肉糜。
本發(fā)明的飼料生產(chǎn)方法不限于具體的某一種，只要所產(chǎn)生的飼料中含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物，通過添加和/或通過稀釋上述至少一種化合物來生產(chǎn)。
可以通過將化合物直接添加到池塘、水罐、貯水池或飼養(yǎng)區(qū)的水或海水中并且將生物浸泡在其中，來給所針對的生物施用選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物。當(dāng)減少所針對生物要攝取的飼料時，該浸泡方法特別有效。
環(huán)戊烯酮和/或其衍生物在水或海水中的濃度不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的濃度為0.00001-0.01w/w％。
本發(fā)明熱處理產(chǎn)物在水或海水中的濃度不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的濃度為0.005-5w/w％。
此外，可以將含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物的飲料作為飼養(yǎng)用飲料給所針對的生物飲用。
環(huán)戊烯酮和/或其衍生物在飲料中的濃度不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的濃度為0.0001-1w/w％。
本發(fā)明熱處理產(chǎn)物在飲料中的濃度不限于某一具體范圍，并且可以根據(jù)對象來確定。適宜的濃度為0.005-5w/w％。
可以按照常規(guī)方法來生產(chǎn)含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物作為活性成分的用于飼養(yǎng)生物的組合物(例如，用于浸泡生物的組合物、飼料添加劑和飲料添加劑)。
本發(fā)明所應(yīng)用的生物包括(但不限于此)培養(yǎng)的動物如家養(yǎng)動物(例如馬、牛、豬、綿羊、山羊、駱駝和美洲駝)；實(shí)驗(yàn)室用動物(例如小鼠、大鼠、天竺鼠和兔子)；家禽(例如雞、鴨、火雞和鴕鳥)；魚類(例如紅海鳊、隆頭魚、異形鰈、比目魚、黃條 幼黃條 紫 金槍魚、金獅、香魚、鮭魚、鱘魚、虎鲀(tiger globefish)、鰻魚、鱈魚(lochs)和鯰魚)；甲殼類動物(例如龍蝦、黑色斑節(jié)蝦、黃海對蝦和青蟹)和貝類(例如鮑、蠑螺貝、扇貝和牡蠣)以及寵物(例如狗和貓)。本發(fā)明可以廣泛應(yīng)用于陸地動物和水生動物。
當(dāng)給小鼠口服施用100mg/kg單劑量的環(huán)戊烯酮或其衍生物時，沒有觀察到死亡。此外，當(dāng)給小鼠口服施用300mg/kg單劑量的本發(fā)明熱處理產(chǎn)物時，沒有觀察到死亡。
預(yù)防或治療所針對生物如家養(yǎng)動物、實(shí)驗(yàn)室動物、家禽、魚、甲殼類動物、內(nèi)類和寵物中的細(xì)菌傳染和病毒傳染。這種預(yù)防或治療可以通過給生物喂養(yǎng)含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物或本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中至少一種化合物的飼料來實(shí)現(xiàn)?；蛘?，通過將生物浸泡在含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物或本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中至少一種化合物的溶液中來實(shí)現(xiàn)。此外，可使被傳染生物中的疾病狀態(tài)明顯得到改善。另外，可保持所針對生物的健康，導(dǎo)致生存率、增肥率、產(chǎn)卵率、出生率、斷奶率、生長率等的明顯改進(jìn)。
培養(yǎng)的動物具有如下問題。(1)因頻繁發(fā)生細(xì)菌傳染引起的疾病。由于這種生物在有限的區(qū)域內(nèi)培養(yǎng)，它們所有都會被傳染而且一旦出現(xiàn)傳染疾病便會在短時間內(nèi)死亡。(2)這種生物易受寄生蟲傳染、營養(yǎng)性疾病、環(huán)境疾病和腫瘤的影響。(3)因狹窄的飼養(yǎng)區(qū)域造成較大的壓迫感，致使培養(yǎng)生物將體表在飼養(yǎng)設(shè)施上摩擦并且被刮傷。刮傷引起細(xì)菌和寄生蟲容易附著在動物上。(4)因壓迫感造成飼料的攝取減少，導(dǎo)致生長遲緩。本發(fā)明用于改進(jìn)體格狀況的飼料可以大大減少狹窄區(qū)域中飼養(yǎng)的培養(yǎng)動物的壓迫感，預(yù)防體表與飼養(yǎng)設(shè)施的摩擦，使生物的食欲更好，并且基于其各種的生理活性如抗細(xì)菌活性、抗炎活性和防老化活性，明顯增加生長率、出生率、產(chǎn)卵率、斷奶率、疾病預(yù)防率等等。
本發(fā)明提供一種用于陸地動物或水生動物的飼料，和用于浸泡生物的含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中至少一種化合物的溶液。該飼料和溶液非常適用作抗細(xì)菌飼料、抗病毒飼料、用于浸泡生物的抗細(xì)菌溶液和用于浸泡生物的抗病毒溶液。
本發(fā)明提供一種陸地動物或水生動物的飼養(yǎng)方法，和預(yù)防或治療陸地動物和水生動物疾病的方法，其中所說的疾病例如由致病微生物如細(xì)菌、真菌或病毒引起的傳染性疾病，其特征在于所說的方法包括給動物施用選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中的至少一種化合物。
此外，本發(fā)明提供一種生物的飼養(yǎng)方法或者治療或預(yù)防疾病的方法，其特征在于所說的方法包括將陸地動物或水生動物浸泡在含有選自環(huán)戊烯酮、其衍生物和本發(fā)明熱處理產(chǎn)物中至少一種化合物的水溶液中。
本發(fā)明的方法對治療或預(yù)防培養(yǎng)的魚類的傳染性疾病(如異形鰈的淋巴囊腫病毒傳染、滑行細(xì)菌傳染疾病和鵝口瘡疾病、鲀的傳染疾病)是明顯有效的。當(dāng)確認(rèn)了這些傳染疾病的開始或征兆時，通過使用本發(fā)明的飼料或本發(fā)明的浸泡生物的方法，可以防止商業(yè)價值的損失或因這些疾病引起的損害出現(xiàn)。此外，本發(fā)明不需要常規(guī)使用的抗生素和福爾馬林。由此，解決了殘留毒性所帶來的問題。
(2)將海藻酸HFD、非泡脹性海藻酸(Wako Pure ChemicalIndustries，編號011-13341)、海帶(Kjellmaniella crassifolia)的干燥粉末、巖衣藻的干燥粉末(產(chǎn)品名稱Algin Gold,Andes Boeki出售)或巨藻科nigrescence的干燥粉末(產(chǎn)品名稱海藻粉(SeaweedPowder):Andes Boeki出售)以5％的濃度懸浮于水中。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至約2之后，將懸浮液在121℃下加熱4小時。通過離心從各自的加熱混合物中除去固體，并且獲得經(jīng)加熱的上清液。
在HPLC上分析各自的加熱上清液，以測定環(huán)戊烯酮的產(chǎn)率。HPLC所用的條件如下。TSK凝膠DOS-80TSQA(4.6×250mm)；流速1ml/min；洗脫水+0.1％TFA(0-15分鐘)和50％乙腈+0.1％TFA(15-30分鐘)；檢測UV 250nm。在相同條件下使用規(guī)定濃度的環(huán)戊烯酮進(jìn)行HPLC分析，來制備以面積為基礎(chǔ)的校準(zhǔn)曲線。然后測定各個樣品中的環(huán)戊烯酮濃度。
結(jié)果，在海藻酸HFD、海藻酸、昆布干燥粉末、巖衣藻干燥粉末和巨藻科nigrescence干燥粉末的加熱上清液中分別產(chǎn)生10.9mM、9.63mM、1.89mM、1.87mM和1.75mM的環(huán)戊烯酮。使用這些上清液作為含環(huán)戊烯酮的溶液。
(3)將10g D-葡萄糖醛酸(Sigma,G5269)溶解于1升水中。將溶液在121℃下加熱4小時，然后減壓濃縮至約10ml體積。向其中添加40ml乙酸丁酯∶乙酸∶水=3∶2∶2混合物的上層。將混合物離心獲得上清液，將該上清液減壓濃縮至約10ml體積。
將提取物經(jīng)硅膠BW-300SP色譜柱(2×28cm,Fuji Sylysia)。使用乙酸丁酯∶乙酸∶水=3∶2∶2混合物的上層作為洗脫劑、在0.2kg/cm2壓力(使用壓縮機(jī))和5ml/min流速下進(jìn)行分離。每個級分中含有10ml分級洗脫液。取每個級分的一部分在薄層色譜上分析。結(jié)果在第61和第80級分中含有高純度的環(huán)戊烯酮。收集這些級分并且減壓濃縮。用40ml氯仿提取濃縮物。將提取物減壓濃縮獲得100mg環(huán)戊烯酮。
使用Palpack型S柱在正相HPLC上分離制備品，并且基于215nm下的紫外線吸光度進(jìn)行檢測。該過程證實(shí)制備品的純度為98％。
通過向134kg下表1所示的濕飼料添加7kg海藻酸熱處理產(chǎn)物，制備用于得病異形鰈的飼料。將該飼料給浸泡過的異形鰈每天喂養(yǎng)兩次，以便得到0.78g/kg/天的海藻酸熱處理產(chǎn)物。
表1

在開始施用飼料后24天異形鰈嘴部周圍的白塊消失。大部分異形鰈的淋巴囊腫病得到改善。1300條異形鰈中的500條得到治愈，并且1300條中的665條第24天轉(zhuǎn)好，說明了熱處理產(chǎn)物的明顯效果。據(jù)觀察沒有淋巴囊腫病復(fù)發(fā)。
如上所述，當(dāng)將魚浸泡在本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物溶液中并且給魚喂養(yǎng)本發(fā)明的飼料時，觀察到了魚病治愈和魚病狀況改善的效果。
使用參考實(shí)施例1-(2)中所述的熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(3)中所述的環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物，也觀察到了同樣的效果。
此外，當(dāng)將本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(2)所述的熱處理產(chǎn)物、環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物用于沒有淋巴囊腫病的魚時，據(jù)觀察沒有發(fā)生魚淋巴囊腫病，說明了它們明顯的預(yù)防效果。
表2

在第8天喂養(yǎng)后，1800條中600條異形鰈的嘴部周圍結(jié)塊消失。由此，這些魚的淋巴囊腫病得到治愈，并且可以將它們轉(zhuǎn)移至另一處魚保護(hù)區(qū)。1800條異形鰈中的900條差不多得到治愈，而1800條異形鰈中的300條死亡。讓600條新的患有淋巴囊腫病的異形鰈加入900條正在轉(zhuǎn)好的魚。給魚施用四次以上的飼料。1500條異形鰈中的400條治愈并且據(jù)觀察1500條中的800條的疾病狀況得到改善。據(jù)觀察沒有淋巴囊腫病復(fù)發(fā)或其他疾病出現(xiàn)，說明了該熱處理產(chǎn)物的預(yù)防效果。
如上所述，口服施用本發(fā)明的處理產(chǎn)物對魚的疾病是有效的。為發(fā)揮效果需要約8次喂養(yǎng)。
使用參考實(shí)施例1-(2)中所述的熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(3)中所述的環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物，也觀察到了同樣的效果。此外，類似地處理沒有染病的魚時，據(jù)觀察沒有發(fā)生魚淋巴囊腫病，說明了它們預(yù)防魚傳染病的效果。
對照組用市售的干顆粒飼料(Otohime No.4；Nisshin FlourMilling)喂養(yǎng)2400條異形鰈，每天喂養(yǎng)一次。將它們在25000 l海水罐中喂養(yǎng)。
浸泡組通過向裝有400 l海水添加880g海藻酸熱處理產(chǎn)物并且開始供應(yīng)氧氣來制備用于浸泡的水罐。將2375幼條異形鰈分散在籃中，以便每個籃中含有數(shù)百條魚。將它們在浸泡水罐中浸泡30分鐘。浸泡后，在25000 l海水罐中用市售的干顆粒飼料喂養(yǎng)它們，每天喂養(yǎng)一次。
海藻酸熱處理產(chǎn)物施用組(1)在25000 l海水罐中喂養(yǎng)2380條幼異形鰈，每天喂養(yǎng)一次，喂養(yǎng)通過向78kg下表3所示的濕飼料中添加500g海藻酸熱處理產(chǎn)物而制備的飼料。
海藻酸熱處理產(chǎn)物施用組(2)在25000 l海水罐中喂養(yǎng)2357條幼異形鰈，每天喂養(yǎng)一次，喂養(yǎng)通過向88kg下表4所示的濕飼料中添加5200g海藻酸熱處理產(chǎn)物而制備的飼料。
結(jié)果示于表5。
表3

表4

表5

如表5所示，在檢測的第9天，浸泡組、海藻酸熱處理產(chǎn)物施用組(1)和海藻酸熱處理產(chǎn)物施用組(2)的死魚數(shù)相比于對照組有所減少，說明海藻酸的熱處理產(chǎn)物對滑行細(xì)菌病有效果。
使用參考實(shí)施例1-(2)中所述的熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(3)中所述的環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物，也觀察到了同樣的效果。此外，類似地處理沒有染病的魚時，據(jù)觀察沒有發(fā)生感染，說明了它們預(yù)防魚傳染病的效果。實(shí)施例4如下制備含有海藻酸熱處理產(chǎn)物的飼料，該飼料要給在海中培養(yǎng)期間患有鵝口瘡病的2000條虎鲀(平均體重450g)喂養(yǎng)一天。將1.11kg參考實(shí)施例1-(1)所述的海藻酸熱處理產(chǎn)物溶解于水中，體積達(dá)到1.5 l。用該溶液浸漬10kg干顆粒飼料(鲀用的Otohime:NisshinFlour Milling)。將整個飼料每天一次地喂養(yǎng)魚，以便得到20mg/kg體重/天的環(huán)戊烯酮(施用含海藻酸熱處理產(chǎn)物的飼料的組)。
作為對照，給患有鵝口瘡病的2000條虎鲀(平均體重450g)喂養(yǎng)10kg干顆粒飼料(鲀用的Otohime:Nisshin Flour Milling)，每天喂養(yǎng)一次(對照組)。
含海藻酸熱處理產(chǎn)物的飼料喂養(yǎng)三周。在對照組中，2000條患有鵝口瘡的虎鲀中有202條死亡。另一方面，在施用含海藻酸熱處理產(chǎn)物的飼料的組中，2000條得病的虎鲀中有121條死亡，結(jié)果是死亡率減少了約一半。具體說，第三周期間，對照組中死亡53條魚而在施用含海藻酸熱處理產(chǎn)物的飼料的組中，死亡僅8條。這個結(jié)果說明施用3周海藻酸的熱處理產(chǎn)物便足以治療鵝口瘡病。據(jù)觀察在治愈的虎鲀中沒有鵝口瘡病的復(fù)發(fā)，說明了預(yù)防鵝口瘡傳染的效果。
如上所述，口服施用本發(fā)明的熱處理產(chǎn)物對鲀中的傳染疾病有明顯的效果。使用參考實(shí)施例1-(2)中所述的熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(3)中所述的環(huán)戊烯酮或環(huán)戊烯酮衍生物，也觀察到了類似的效果。此外，類似地處理沒有染病的魚時，據(jù)觀察沒有發(fā)生感染，說明了它們預(yù)防魚傳染病的效果。
此外，據(jù)觀察在按上述所施用的魚中沒有發(fā)生感染，說明了預(yù)防感染的效果。實(shí)施例6將實(shí)施例1-(1)所述的果膠熱處理產(chǎn)物以12mg/kg/天的量提供給用市售混合飼料喂養(yǎng)的8周母雞，結(jié)果產(chǎn)蛋率增加。
當(dāng)將參考實(shí)施例1-(3)所述的環(huán)戊烯酮以63μg/kg/天的量提供給用市售混合飼料喂養(yǎng)的8周母雞，觀察到類似的結(jié)果。
使用參考實(shí)施例1-(1)中所述的海藻酸熱處理產(chǎn)物、參考實(shí)施例1-(2)的熱處理產(chǎn)物或環(huán)戊烯酮衍生物，也觀察到了類似的效果。
此外，據(jù)觀察在按上述所施用的雞中沒有發(fā)生感染，說明了預(yù)防禽類感染的效果。
權(quán)利要求
1．一種飼養(yǎng)生物的方法，其特征在于該方法包括給生物施用(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物，所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物；(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類；和(c)含有糖類的物質(zhì)，該糖類含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物；(2)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮 和/或(3)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物。
2．權(quán)利要求1的方法，其中生物是培養(yǎng)的動物或?qū)櫸铩?br> 3．權(quán)利要求2的方法，其中培養(yǎng)的生物是家養(yǎng)動物、實(shí)驗(yàn)室用動物、家禽、魚類、甲殼類動物或貝類。
4．權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的方法，其中熱處理產(chǎn)物是含有式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的物質(zhì)。
5．一種生物飼料，該飼料含有以下物質(zhì)并通過添加和/或稀釋該物質(zhì)來生產(chǎn)(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物，所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物；(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類；和(c)含有糖類的物質(zhì)，該糖類含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物；(2)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮 和/或(3)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物。
6．權(quán)利要求5的飼料，其是用于培養(yǎng)的動物的飼料或用于寵物的飼料。
7．權(quán)利要求6的飼料，其中培養(yǎng)的生物是家養(yǎng)動物、實(shí)驗(yàn)室用動物、家禽、魚類、甲殼類動物和貝類。
8．權(quán)利要求5-7任一項(xiàng)的飼料，其是用于改進(jìn)體格狀況的飼料。
9．權(quán)利要求5-8任一項(xiàng)的飼料，其中熱處理產(chǎn)物是含有式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的物質(zhì)。
10．一種用于飼養(yǎng)生物的組合物，該組合物含有(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物，所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物；(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類；和(c)含有糖類的物質(zhì)，該糖類含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物；(2)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮 和/或(3)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物。
11．權(quán)利要求10的組合物，其是用于飼養(yǎng)培養(yǎng)的動物的組合物或用于飼養(yǎng)寵物的組合物。
12．權(quán)利要求11的組合物，其中培養(yǎng)的生物是家養(yǎng)動物、實(shí)驗(yàn)室用動物、家禽、魚類、甲殼類動物或貝類。
13．權(quán)利要求10-12任一項(xiàng)的組合物，其中熱處理產(chǎn)物是含有式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的物質(zhì)。
14．權(quán)利要求10-13任一項(xiàng)的組合物，其是用于浸泡生物的組合物。
15．權(quán)利要求10-13任一項(xiàng)的組合物，其是飼料添加劑。
16．權(quán)利要求10-13任一項(xiàng)的組合物，其是用于飲料的添加劑。
17．(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物，所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物；(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類；和(c)含有糖類的物質(zhì)，該糖類含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物；(2)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮 和/或(3)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物，在制造生物飼料中的用途。
18．(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物，所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物；(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類；和(c)含有糖類的物質(zhì)，該糖類含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物；(2)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮 和/或(3)式(Ⅰ)的4,5-二羥基-2-環(huán)戊烯-1-酮的衍生物，在制造用于飼養(yǎng)生物的組合物中的用途。
全文摘要
一種飼養(yǎng)有用生物如培養(yǎng)的動物的方法,該方法可有效預(yù)防生物疾病、治療生物疾病和保持生物健康,其特征在于給生物施用(1)至少一種化合物的熱處理產(chǎn)物,所說的化合物選自(a)糖醛酸或糖醛酸衍生物,(b)含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物的糖類,和(c)含有含糖醛酸和/或糖醛酸衍生物糖類的物質(zhì);(2)4,5－二羥基－2－環(huán)戊烯－1－酮;和/或(3)4,5－二羥基－2－環(huán)戊烯－1－酮的衍生物;以及有效的飼料。
文檔編號A23K1/16GK1315857SQ99810282
公開日2001年10月3日 申請日期1999年8月3日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月4日
發(fā)明者加藤郁之進(jìn) 申請人:寶酒造株式會社