專(zhuān)利名稱(chēng):光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種藥材種植方法及應(yīng)用，具體為ー種將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
中藥現(xiàn)代化是我國(guó)中醫(yī)藥事業(yè)的重要任務(wù)。中藥的質(zhì)量是中藥現(xiàn)代化、國(guó)際化的基礎(chǔ)和保證，包括有效性和安全性?xún)蓚€(gè)方面。而中藥材生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化是其源頭，所以中藥材的種植必須解決兩個(gè)問(wèn)題ー是無(wú)公害。即重金屬含量和農(nóng)藥殘留量必須達(dá)標(biāo)；ニ是要有中藥材內(nèi)在質(zhì)量的保證，即有效成分含量達(dá)標(biāo)穩(wěn)定。
目前，研究者們?cè)谵r(nóng)業(yè)上推廣應(yīng)用生物肥料，生物肥料具有無(wú)毒無(wú)害，改良土壌， 不污染環(huán)境的特點(diǎn)。光合細(xì)菌(Photosynthetic Bacteria,簡(jiǎn)稱(chēng)PSB)培養(yǎng)液即是ー種生物肥料，且與其它生物肥料相比，更具有多種綜合效能，它是以自配培養(yǎng)基為原料、活性光合細(xì)菌為菌種，經(jīng)現(xiàn)代生物工程技術(shù)研制而成的ー種復(fù)合性生物肥料。光合細(xì)菌具有生物固氮，分解硫化物以及農(nóng)藥、化肥等多種有毒有害物質(zhì)的能力，從而改善藥材的營(yíng)養(yǎng)狀況。
現(xiàn)有技術(shù)中，已有文獻(xiàn)和專(zhuān)利報(bào)道光合細(xì)菌培養(yǎng)液具有促進(jìn)農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育、 提高產(chǎn)量(可使蔬菜增產(chǎn)20%以上，糧食作物如小麥、水稻、玉米等增產(chǎn)10-40%)、防治病蟲(chóng)害、降低硝酸鹽含量等明顯功效；且該菌肥無(wú)毒、無(wú)害。如公開(kāi)號(hào)為CN101597579A的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，一種農(nóng)用光合細(xì)菌制劑的生產(chǎn)方法；公開(kāi)號(hào)為CN1101498A的發(fā)明專(zhuān)利，利用微生物生產(chǎn)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑及其生產(chǎn)方法；公開(kāi)號(hào)為CN1386845A的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，ー種農(nóng)藥殘留降解菌劑及其生產(chǎn)方法；公開(kāi)號(hào)為CN101139233A的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，活性生物肥料及其制備方法。學(xué)術(shù)論文，鄭卓輝等，光合細(xì)菌對(duì)菜心農(nóng)藥殘留的降解效果，廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007年第7期；夏青等，光合細(xì)菌菌液對(duì)甜椒生長(zhǎng)的影響研究，中國(guó)生態(tài)農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)， 2006年第2期；張景節(jié)等，施用光合細(xì)菌對(duì)大棚作物生長(zhǎng)性狀和產(chǎn)量的影響，河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008年第2期；王秋菊等，光合細(xì)菌在水稻上的施用方法及作用機(jī)理研究，土壌肥料科學(xué)，2006年第I期。
上述已有技術(shù)中基本為促進(jìn)農(nóng)作物的生長(zhǎng)發(fā)育、提高產(chǎn)量、防治病蟲(chóng)害、降低硝酸鹽含量等改善作物生長(zhǎng)的報(bào)道，無(wú)光合細(xì)菌應(yīng)用于中藥材種植中提高中藥材浸出物含量及有效成分含量的報(bào)道，亦無(wú)解決中藥材種植中不能輪作的問(wèn)題，降低普通肥料用量的報(bào)道。
按照《中華人民共和國(guó)藥典》規(guī)定，藥材浸出物測(cè)定指用水或醇為溶劑對(duì)藥材和飲片中可溶性物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定?？梢宰鳛樗幉牡馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中的ー個(gè)重要指標(biāo)。尤其是該藥材的活性成分或指標(biāo)性成分不清或含量很低或尚無(wú)精確的定量方法時(shí)采用。所以藥材浸出物的多少，及其中有效成分的含量可以作為藥材質(zhì)量及其藥材提取物產(chǎn)量和質(zhì)量的表征指標(biāo)。 而且有效成分的増加和浸出物的増加可以提高藥材的利用率，實(shí)現(xiàn)藥材的可持續(xù)利用，保護(hù)資源；可以促進(jìn)我國(guó)GAP的實(shí)施、大大提高經(jīng)濟(jì)效益。

發(fā)明內(nèi)容
[0007]本發(fā)明的目的是提供一種光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法，該方法可以提高藥材有效成分及浸出物含量。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的方案是一種光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法，包括以下種植步驟
I)在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10-1/5的光合細(xì)菌種子培養(yǎng)液，在 2500Lux光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3-15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOici個(gè)/ml的光合細(xì)菌培養(yǎng)液。
2)光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的10-100倍，以每畝5_20kg的使用量結(jié)合澆水均勻灌溉施于將要種植藥材的土壤中。
3)光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的10 — 100倍，播種前浸種10-60分鐘。
4)光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的30-200倍，定苗或移栽后、入冬前、第二年返青后，以每畝藥材I-IOkg的使用量隨澆水灌根。
5)光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的30-200倍，以每畝藥材每次I-IOkg的使用量均勻噴施，當(dāng)年藥材苗期I次、生長(zhǎng)期2次，或第二年返青后I次、生長(zhǎng)期2次。
所述的光合細(xì)菌培養(yǎng)液中光合細(xì)菌為紅螺菌屬Rhodospirillium、紅假單胞菌屬
紅細(xì)菌屬Rhodobacter中的任意一株菌或它們的任意組合。
所述的紅螺菌屬RhodospiriIlium 為深紅紅螺菌 iRhodospiriIlium rubrum )； 紅假單胞菌屬 Rhodopseudotnonas 為沼澤紅假單胞菌 QRhodopseudomonas palus tris )、 綠色紅假單胞菌{Rhodopseudomonas viridis)、綠硫紅假單胞菌{Rhodopseudomonas sulfoviridis)、海洋紅假單胞菌{Rhodopseudomonas fflariaa);紅細(xì)菌屬TPAot/oAacter為球形紅細(xì)菌(熱ot/oAac ter sphaeroides )
上述菌種文獻(xiàn)的出處姚竹云，張肇銘.幾株光合細(xì)菌的表型特征及其DNA-DNA 同源性分析.應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，1996，2(1) :84-89;張肇銘，楊素萍，趙春貴.沼澤紅假單胞菌的分離鑒定研究.山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，1992，(4) :379-385;楊素萍，張肇銘，趙春貴.緑色紅假單胞菌和綠硫紅假單胞菌的分離與鑒定.微生物學(xué)報(bào)，1995，35(2) :91-96 ;張肇銘，鄧松錄，趙良啟，等.紫色非硫光合細(xì)菌的研究A.球形紅假單胞菌的分離、鑒定和生理特性的研究.山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，1984，(4) :54-590
這些菌種均來(lái)自于山西省太原市山西大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院光合細(xì)菌研究室。[0018]所述適合光合細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，可以采用現(xiàn)有技術(shù)中的光合細(xì)菌培養(yǎng)基，本發(fā)明優(yōu)選以下培養(yǎng)基，其組成為[0019]こ酸鈉1000_2000mgCaCl2. 2H2050-100 mg[0020]MgSO4. 7 H2O100-300 mgEDTA10-30 mg[0021]酵母膏500-1500 mgK2HPO4500-1500 mg[0022](NH4)2SO41000-2000 mgKH2PO4400-1000 mg[0023]FeSO4. 7H205_15mg微量元素溶液1-5 ml[0024]去離子水1000-2000 mlpH6-8[0025]其中微量元素溶液組成為[0026]H3BO3200-300 mgNa2MoO4. 2H2050-100 mg[0027]CuSO42-10 mgMnSO4. 4H20150-250 mg[0028]ZnSO4. 7H20 20-30 mg去離子水100-200 ml
與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有如下有益效果
第一，將光合細(xì)菌培養(yǎng)液應(yīng)用于中藥材種植中，發(fā)揮光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化殘留農(nóng)藥、重金屬、促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育及防治病蟲(chóng)害的特性，提高中藥材質(zhì)量，為中藥材GAP的實(shí)施提供條件。
第二，不僅可以提高中藥材產(chǎn)量，降低中藥材農(nóng)藥殘留、重金屬含量，保證了中藥材的安全性；更重要的是提高了有效成分含量和中藥材普遍的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)浸出物含量， 充分發(fā)揮光合細(xì)菌培養(yǎng)液的效用。
第三，中藥材栽培技術(shù)上的創(chuàng)新。采用光合細(xì)菌菌劑改良土壌，消除土壌中農(nóng)藥殘留、重金屬殘留以及有害微生物對(duì)中藥材的危害和污染；采用光合細(xì)菌菌劑提高中藥材抗病、抗蟲(chóng)、抗逆境的能力，促進(jìn)中藥材生長(zhǎng)發(fā)育，提高產(chǎn)量；采用光合細(xì)菌菌劑提高中藥材有效成分含量和浸出物含量，全面提高其綜合品質(zhì)。改變了中藥材種植不能連作的問(wèn)題。在一定程度上體現(xiàn)了現(xiàn)代中藥“三效(高效、速效、長(zhǎng)效)、三小(劑量小、毒性小、副作用小)、三便(便于儲(chǔ)存、攜帯、服用)”的優(yōu)點(diǎn)。節(jié)省化肥1/3。
第四，有效成分的增加和浸出物的增加可以提高藥材的利用率，實(shí)現(xiàn)藥材的可持續(xù)利用，保護(hù)資源；可以促進(jìn)我國(guó)GAP的實(shí)施、大大提高經(jīng)濟(jì)效益。
第五，本發(fā)明的光合細(xì)菌培養(yǎng)液原料來(lái)源廣，價(jià)格便宜，生長(zhǎng)條件容易控制，可利用各種低分子有機(jī)物作為碳源和光合作用的供氫體，主要營(yíng)光能異養(yǎng)生活。可同化脂肪酸、 碳水化合物及芳香族化合物等多種有機(jī)物；在黑暗條件下可利用有機(jī)物作為呼吸基質(zhì)進(jìn)行好氧異養(yǎng)生長(zhǎng)。隨環(huán)境條件變化改變其獲得能量的方式，改變自身的代謝方式。適宜大規(guī)模エ業(yè)化實(shí)施。
光合細(xì)菌培養(yǎng)液在提高藥材有效成分及浸出物含量中的應(yīng)用。提高有效成分及浸出物含量結(jié)合以下種植實(shí)驗(yàn)進(jìn)行說(shuō)明。
例一，板藍(lán)根的種植，葉為大青葉藥材，根為板藍(lán)根藥材。實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次，取3次的平均值。
大青葉中靛玉紅的含量測(cè)定照2010版中華人民共和國(guó)藥典大青葉中靛玉紅的含量測(cè)定方法進(jìn)行。
大青葉中浸出物的含量測(cè)定照醇溶性浸出物測(cè)定法(中國(guó)藥典附錄 X A)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用95%こ醇做溶剤。
板藍(lán)根中靛玉紅的含量測(cè)定照2010版中華人民共和國(guó)藥典大青葉中靛玉紅的含量測(cè)定方法進(jìn)行。
板藍(lán)根中浸出物的測(cè)定照醇溶性浸出物測(cè)定法(中國(guó)藥典附錄X A)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用45%こ醇做溶剤。
結(jié)果沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的大青葉中靛玉紅的含量為0. 11 mg/g，醇浸出物含量為12. 9% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的大青葉中靛玉紅的含量為0. 26 mg/g，醇浸出物含量為17. 3%。靛玉紅含量増加136. 4%，浸出物含量増加34. 1%。沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的板藍(lán)根中靛玉紅的含量為0. 0039 mg/g，醇浸出物含量為37. 4% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的板藍(lán)根中靛玉紅的含量為0. 0075 mg/g,醇浸出物含量為41. 9%。靛玉紅含量増加92. 3%，浸出物含量增加12. 0%。[0042]例ニ，黃芩的種植。其中黃芩苷照2010版中華人民共和國(guó)藥典黃芩中黃芩苷的含量測(cè)定方法進(jìn)行；浸出物含量測(cè)定采用2010版中華人民共和國(guó)藥典醇溶性浸出物測(cè)定法(中國(guó)藥典附錄X A)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用30%稀こ醇做溶剤。
結(jié)果沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黃芩中黃芩苷的含量為136. 47mg/g,醇浸出物含量為42. 6% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黃芩中黃芩苷的含量為150. 43mg/g，醇浸出物含量為47. 8%。黃芩苷含量增加10. 23%，浸出物含量增加12. 2%。
例三，黨參的種植。其中黨參炔苷的含量采用高效液相色譜測(cè)定法進(jìn)行，色譜條件為，流動(dòng)相こ腈-水(20:80)，流速1ml min _ /檢測(cè)波長(zhǎng)267nm，進(jìn)樣量IOyl，色譜柱C18高效液相色譜柱。浸出物的含量測(cè)定采用2010版中華人民共和國(guó)藥典醇溶性浸出物測(cè)定法(中國(guó)藥典附錄X A)項(xiàng)下的熱浸法測(cè)定，用45%こ醇做溶剤。
結(jié)果沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黨參中黨參炔苷的含量為0. 48 mg/g,醇浸出物含量為57. 4% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黨參中黨參炔苷的含量為0. 85 mg/g，醇浸出物含量為63. 8%。黨參炔苷含量增加77. 1%，浸出物含量增加8. 2%。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
板藍(lán)根、大青葉的種植
按下列組分配制培養(yǎng)基
乙酸鈉1000_2000mgCaCl2. 2H2050-100 mg
MgSO4. 7 H2O 100-300 mgEDTA10-30 mg
酵母膏500-1500 mgK2HPO4500-1500 mg
(NH4)2SO4 1000-2000 mgKH2PO4400—1000 mg
FeSO4. 7H20 5_15mg微量元素溶液 1_5 ml
去離子水1000-2000 mlpH6-8
其中微量元素溶液組成為
H3BO3200-300 mgNa2MoO4. 2H2050—100 mg
CuSO42-10 mgMnSO4.4H20150—250 mg
ZnSO4. 7H20 20-30 mg去離子水100-200 ml
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10份數(shù)的球形紅細(xì)菌種子培養(yǎng)液，在 2500し皿光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為108-101(lf/ml的光合細(xì)菌 球形紅細(xì)菌培養(yǎng)液。
10月耕地，冬季結(jié)合澆地用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壤，用量為10公斤/畝。第二年4月中旬播種，播種前除普通浸種外，再用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種30分鐘。條播法播種，7-9天出苗，出苗后間苗定苗。定苗后，將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的200倍隨澆地灌根，用量為10公斤/畝。將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的100倍，苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，以每畝藥材每次5kg的使用量均勻噴施。10月下旬刨收板藍(lán)根?？梢苑乐顾共『透〉陌l(fā)生，可以連作。大青葉6月上旬、8月上旬收兩次,10月刨收板藍(lán)根前再收一次。收割前每次噴少量光合細(xì)菌培養(yǎng)液可防霉變。每畝產(chǎn)大青葉干葉205公斤，板藍(lán)根成品245公斤。其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為2/3。未使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的對(duì)照組每畝產(chǎn)大青葉干葉 190公斤，板藍(lán)根成品224公斤。大青葉產(chǎn)量增加7. 89%，板藍(lán)根產(chǎn)量增加9. 38%。
所產(chǎn)大青葉靛玉紅含量為0. 47 mg/g,醇浸出物含量為20. 1% ;未使用光合細(xì)菌的對(duì)照組大青葉靛玉紅含量為0. 24 mg/g,醇浸出物含量為17. 5%。靛玉紅含量増加了 95.8%、醇浸出物含量増加了 14.9%。所產(chǎn)板藍(lán)根靛玉紅含量為0. 0064 mg/g，醇浸出物含量為47. 2% ;未使用光合細(xì)菌的對(duì)照組板藍(lán)根靛玉紅含量為0. 0041 mg/g，醇浸出物含量為 42. 2%，靛玉紅含量增加了 56. 1%、醇浸出物含量增加了 11. 8%。
實(shí)施例2
板藍(lán)根、大青葉的種植
光合細(xì)菌培養(yǎng)基的制備方法同實(shí)施例I。
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10份數(shù)的深紅紅螺菌種子培養(yǎng)液，在 2500Lux光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOki個(gè)/ml的光合細(xì)菌深紅紅螺菌培養(yǎng)液。
10月份耕地，冬季結(jié)合澆水用稀釋至原體積10倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壤，用量為5公斤/畝，第二年4月中旬播種，播種前除普通浸種外，再用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種60分鐘。條播法播種，7-9天出苗，出苗后間苗定苗。定苗后，將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的150倍隨澆地灌根，用量為5公斤/畝。將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的70倍，苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，以每畝藥材每次IOkg的使用量均勻噴施。10月下旬刨收板藍(lán)根。可以防止霜霉病和根腐病的發(fā)生，可以連作。大青葉6月上旬、8月上旬收兩次，10月再收一次。收割前每次噴少量光合細(xì)菌培養(yǎng)液可防霉變，畝產(chǎn)干葉210公斤，板藍(lán)根成品260公斤。其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為2/3。未使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的對(duì)照組每畝產(chǎn)大青葉干葉189公斤，板藍(lán)根成品238 公斤。大青葉產(chǎn)量增加11. 11%，板藍(lán)根產(chǎn)量増加9. 24%。
沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的大青葉中靛玉紅的含量為0. 11 mg/g，醇浸出物含量為12. 9% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的大青葉中靛玉紅的含量為0. 26 mg/g，醇浸出物含量為 17. 3%。靛玉紅含量増加136. 4%，浸出物含量増加34. 1%。沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的板藍(lán)根中靛玉紅的含量為0. 0039 mg/g，醇浸出物含量為37. 4% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液液的板藍(lán)根中靛玉紅的含量為0. 0075 mg/g,醇浸出物含量為41. 9%。靛玉紅含量増加92. 3%，浸出物含量增加12. 0%。
實(shí)施例3
黃芩的種植。
光合細(xì)菌培養(yǎng)基的制備方法同實(shí)施例I。
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/5份數(shù)的沼澤紅假單胞菌種子培養(yǎng)液，在 2500Lux光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOki個(gè)/ml的光合細(xì)菌沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)液。
育苗田和移栽田均入冬前耕地，冬季結(jié)合澆水用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壤，用量為20公斤/畝。第二年4月上旬春播，采用條播，種子播種前用稀釋至原體積10倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種10分鐘。10天左右出苗。幼苗長(zhǎng)至6 8厘米高吋，選擇陰天把苗移栽到大田中去，定植行株距25 30 X 12 15厘米，育苗面積和移栽田移栽面積之比一般為1:5。移栽后，將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的200倍隨澆地灌根，用量為7公斤/畝。將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的40倍，苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，以每畝藥材每次7 kg的使用量均勻噴施。入冬前用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為10公斤/畝，第二年春季返青后，隨澆地用稀釋至原體積30倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌根一次，用量為I公斤/畝。用水稀釋至原體積150倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液均勻噴施，第二年返青后一次、生長(zhǎng)期兩次。光合細(xì)菌培養(yǎng)液用量為每次I公斤/畝。 其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液土地的 2/3。移栽次年采收。
平均畝產(chǎn)395公斤，有效成分黃芩苷的含量為146. 25mg/g，醇浸出物含量為 46. 2%。未使用光合細(xì)菌的對(duì)照組平均畝產(chǎn)352公斤，黃芩苷含量為124. 36 mg/g，醇浸出物含量為41. 4%。產(chǎn)量增加12. 22%，黃芩苷含量增加了 17. 6%，浸出物含量提高11. 6%。
實(shí)施例4
黃芩的種植
光合細(xì)菌培養(yǎng)基的制備方法同實(shí)施例I。
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10份數(shù)的球形紅細(xì)菌和沼澤紅假單胞菌混合種子培養(yǎng)液，在2500LUX光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOki 個(gè)/ml的細(xì)菌球形紅細(xì)菌、沼澤紅假單胞菌的混合細(xì)菌培養(yǎng)液。
育苗田和移栽田均入冬前耕地，冬季結(jié)合澆水用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壤，用量為15公斤/畝，第二年4月上旬春播，采用條播，種子播種前用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種50分鐘。10天左右出苗。幼苗長(zhǎng)至6 8厘米高吋，選擇陰天把苗移栽到移栽田中去，定植行株距25 30 X 12 15厘米，育苗面積和移栽田移栽面積之比一般為1:5。移栽后，將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的150倍隨澆地灌根，用量為5公斤/畝。將光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的150倍，苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，以每畝藥材每次8 kg的使用量均勻噴施。入冬前用稀釋至原體積200倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為7公斤/畝，第二年春季返青后，隨澆地用稀釋至原體積100 倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌根，用量為5公斤/畝。用水稀釋至原體積150倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液均勻噴施，第二年返青后一次、生長(zhǎng)期兩次。光合細(xì)菌培養(yǎng)液用量為每次5公斤/畝。其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的2/3。移栽次年采收。
沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黃芩對(duì)照組平均畝產(chǎn)348kg，黃芩苷的含量為 136. 47mg/g，醇浸出物含量為42. 6% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黃芩對(duì)照組平均畝產(chǎn)389kg， 黃芩苷的含量為150. 43mg/g，醇浸出物含量為47. 8%。產(chǎn)量增加11. 78%，黃芩苷含量増加 10. 23%，浸出物含量增加12. 2%。
實(shí)施例5
黨參的種植
光合細(xì)菌培養(yǎng)基的制備方法同實(shí)施例I。
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10份數(shù)的深紅紅螺菌、緑色紅假單胞菌和海洋紅假單胞菌混合種子培養(yǎng)液，在2500LUX光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOki個(gè)/ml的深紅紅螺菌、綠色紅假單胞菌和海洋紅假單胞菌的混合光合細(xì)菌培養(yǎng)液。
秋季10月份育苗，育苗播種前7天隨澆地用稀釋至原體積70倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壌，用量為10公斤/畝。種子播種前用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種30分鐘，入冬前用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為7公斤/畝。 第二年返青后用稀釋至原體積150倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為5公斤/畝。 第二年秋季移栽，移栽前6天隨澆水用稀釋至原體積70倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉移栽地土壤，用量為10公斤/畝。移栽前，將參苗挖起，剔除無(wú)芽頭、損傷斷根以及過(guò)于幼小的劣種， 捆成小把，隨栽隨取。每畝需參苗25-30公斤。移栽后用稀釋至原體積120倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為7公斤/畝。苗高9厘米左右方可松土鋤草。封行后停止鋤草。 當(dāng)苗高30厘米時(shí)，要用竹桿或樹(shù)枝搭設(shè)支架，使蔓莖攀緣向上生長(zhǎng)，既有利通風(fēng)透光，增強(qiáng)光合作用，又可防止田間濕度過(guò)大而有病蟲(chóng)危害，是黨參栽培的一項(xiàng)增產(chǎn)措施。第二年入冬前用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為10公斤/畝。光合細(xì)菌培養(yǎng)液稀釋至原體積200倍，均勻噴施，用量為每畝藥材每次5kg，當(dāng)年藥材苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，第二、第三年返青后一次、生長(zhǎng)期兩次。第三年收獲，黨參的產(chǎn)量為每畝255公斤。其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為2/3。易得根腐病和銹病，用光合細(xì)菌可減輕。未使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的對(duì)照組產(chǎn)量為每畝234公斤。產(chǎn)量增加8. 97%。
所產(chǎn)黨參黨參炔苷含量為0. 52 mg/g,醇浸出物含量為60. 7% ;未使用光合細(xì)菌的對(duì)照組黨參黨參炔苷含量為0. 37 mg/g,醇浸出物含量為56. 1%。黨參炔苷含量增加28. 8%、 醇浸出物含量增加8. 2%。
實(shí)施例6
黨參的種植
光合細(xì)菌培養(yǎng)基的制備方法同實(shí)施例I。
在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10份數(shù)的綠硫紅假單胞菌種子培養(yǎng)液， 在2500Lux光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3 — 15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOki個(gè)/ml的綠硫紅假單胞菌光合細(xì)菌培養(yǎng)液。
秋季10月份育苗，育苗播種前5天隨澆地用稀釋至原體積100倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壤，用量為10公斤/畝。種子播種前用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液浸種20分鐘，入冬前用稀釋至原體積150倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為3公斤 /畝。第二年返青用稀釋至原體積200倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為每次10公斤/畝。第二年秋季移栽，移栽田移栽前6天隨澆水用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液灌溉土壌，用量為20公斤/畝。移栽前，將參苗挖起，剔除無(wú)芽頭、損傷斷根以及過(guò)于幼小的劣種，捆成小把，隨栽隨取。姆畝需參苗25-30公斤。苗高9厘米左右方可松土鋤草。 封行后停止鋤草。當(dāng)苗高30厘米吋，要用竹桿或樹(shù)枝搭設(shè)支架，使蔓莖攀緣向上生長(zhǎng)，既有利通風(fēng)透光，增強(qiáng)光合作用，又可防止田間濕度過(guò)大而有病蟲(chóng)危害，是黨參栽培的一項(xiàng)增產(chǎn)措施。第二年入冬前用稀釋至原體積50倍的光合細(xì)菌培養(yǎng)液隨澆地灌根，用量為5公斤/ 畝。將光合細(xì)菌培養(yǎng)液稀釋至原體積的30倍，均勻噴施，用量為每畝藥材每次3kg，當(dāng)年藥材苗期I次、生長(zhǎng)期兩次，第二、第三年返青后一次、生長(zhǎng)期兩次。第三年收獲，黨參的產(chǎn)量為每畝275公斤。其余同未使用光合細(xì)菌的對(duì)照種植組，只是所施各種肥料降為2/3。易得根腐病和銹病，用光合細(xì)菌培養(yǎng)液可減輕。未使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的對(duì)照組產(chǎn)量為姆畝229公斤。產(chǎn)量增加20. I %。
沒(méi)有使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黨參中黨參炔苷的含量為為57. 4% ;使用光合細(xì)菌培養(yǎng)液的黨參中黨參炔苷的含量為0. 63. 8%。黨參炔苷含量增加77. 1%，浸出物含量增加8. 2%。
0.48 mg/g，醇浸出物含量 85 mg/g，醇浸出物含量為
權(quán)利要求
1.一種光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法，其特征是包括以下種植步驟在經(jīng)過(guò)滅菌的光合細(xì)菌培養(yǎng)基中接入1/10-1/5的光合細(xì)菌種子培養(yǎng)液，在2500LUX光照條件下，室溫、厭氧培養(yǎng)3-15天，得到活菌數(shù)為IO8-IOltl個(gè)/ml的光合細(xì)菌培養(yǎng)液；光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的10-100倍，以每畝5-20kg的使用量結(jié)合澆水均勻灌溉施于將要種植藥材的土壤中；光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的10 — 100倍，播種前浸種10-60分鐘；光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的30-200倍，定苗或移栽后、入冬前、第二年返青后，以每畝藥材I-IOkg的使用量隨澆水灌根；光合細(xì)菌培養(yǎng)液用水稀釋至原體積的30-200倍，以每畝藥材每次I-IOkg的使用量均勻噴施，當(dāng)年藥材苗期I次、生長(zhǎng)期2次，或第二年返青后I次、生長(zhǎng)期2次；所述的光合細(xì)菌培養(yǎng)液中光合細(xì)菌為紅螺菌屬Rhodospirillium、紅假單胞菌屬 Rhodopseudomonas、紅細(xì)菌屬Rhodobacter中的任意一株菌或它們的任意組合；所述的紅螺菌屬RhodospiriIlium為深紅紅螺菌iRhodospiriIlium rubrum );紅假單胞菌屬 Rhodopseudomonas 為沼澤紅假單胞菌 iRhodopseudomonas palus tri51)、綠色紅假單胞 1 {Rhodopseudomonas viridis) ^ M{Rhodopseudomonas sulfoviridis) > 海洋紅假單胞菌{Rhodopseudomonas marina );紅細(xì)菌屬Rhodobacter為球形紅細(xì)菌 i^Rhoaobac ter spnaeroides )。
2.光合細(xì)菌培養(yǎng)液在提高植物性藥材有效成分及浸出物含量中的應(yīng)用。
專(zhuān)利摘要
本發(fā)明提供了一種光合細(xì)菌培養(yǎng)液用于藥材種植的方法及應(yīng)用，該方法是將光合細(xì)菌培養(yǎng)液稀釋后，均勻灌溉土壤、浸種、灌根和噴施。本方法可以促進(jìn)藥材生長(zhǎng)、防治各種病害發(fā)生；可改善由人工栽培使用化肥和農(nóng)藥引起的品質(zhì)下降問(wèn)題；可增加中藥浸出物含量、增加中藥材有效成分含量、減少重金屬含量；提高藥材的利用率，實(shí)現(xiàn)藥材的可持續(xù)利用，保護(hù)資源；可以促進(jìn)我國(guó)GAP的實(shí)施、提高經(jīng)濟(jì)效益，并可以解決中藥材種植中不能輪作的問(wèn)題，節(jié)省化肥1/3的量。
文檔編號(hào)A01G7/06GKCN102224786 B發(fā)布類(lèi)型授權(quán) 專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)朇N 201110107465
公開(kāi)日2012年7月25日 申請(qǐng)日期2011年4月28日
發(fā)明者侯曉峰, 宋國(guó)華, 張肇銘, 李軍, 楊官娥, 漆小梅, 鄭慶紅 申請(qǐng)人:山西醫(yī)科大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan