專利名稱:杜鵑紅山茶組培快繁方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種山茶組培快繁方法。具體涉及一種杜鵑紅山茶組培快繁方法。屬植物繁殖技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
杜鵑紅山茶原產(chǎn)中國，1986年在中國廣東省陽春縣鵝凰嶂省級自然保護區(qū)被發(fā)現(xiàn)，國家一級保護植物，栽培名為“四季杜鵑茶”或“杜鵑茶”，為山茶科山茶屬紅山茶組光果紅山茶亞組植物。
杜鵑紅山茶是一種十分珍稀的木本花卉，四季開花，葉片比普通的山茶更為光滑，沒有鋸齒，即使在氣溫38℃的條件下，依然滿樹紅花，具有很高的觀賞價值和作為種質(zhì)資源利用價值。由于其對生存的生態(tài)條件要求極高，自然存量較少，在原產(chǎn)地僅生長在一狹小區(qū)域，發(fā)現(xiàn)時有2000余株。目前不少企業(yè)和科研單位正在進行杜鵑紅山茶的引種繁育試驗?！稄V東林業(yè)科技》2003年03期報道了張燕等“杜鵑紅山茶扦插繁育試驗”，《廣東林業(yè)科技》2004年03期報道了黎運樞等“杜鵑紅山茶嫁接繁育試驗”，溫州市云峰山茶研究所、金華市花之海園藝有限公司等也進行了杜鵑紅山茶嫁接繁育研究。通過20年來的科研單位攻關(guān)，目前嫁接成活率可達90％以上，但扦插成活率僅40％左右。所以目前人工繁殖杜鵑紅山茶時，嫁接成了杜鵑紅山茶繁殖的主要途徑，而嫁接繁殖受接穗、操作水平和嫁接季節(jié)等諸多影響，繁殖的杜鵑紅山茶數(shù)量有限，又由于野生資源十分有限，還很難進行商業(yè)開發(fā)。只有解決了人工快繁，擴大杜鵑紅山茶的種植數(shù)量，建立商業(yè)開發(fā)種植基地，才能使這一寶貴資源得到最有效的保護和開發(fā)，實現(xiàn)其資源的真正價值。專利公開號85102805，2003124233.2公開了金花茶組培快繁培養(yǎng)基。而杜鵑紅山茶組培快繁方法還未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供一種杜鵑紅山茶組培快繁方法，以克服上述繁殖方法存在不足，既保護原產(chǎn)地資源，又源源不斷地生產(chǎn)杜鵑紅山茶種苗。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的一種杜鵑紅山茶組培快繁方法，其特征在于它包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取4月至5月，從母株上剪取杜鵑紅山茶剛抽出嫩梢不久的莖段；步驟二、外植體處理用70～75％的酒精溶液浸泡30～40秒，無菌水沖洗多次瀝干水，再放入0.1％～0.15％HgCl2溶液中消毒8～10分鐘，無菌水多次沖洗，再切取莖尖，備用；步驟三、初代培養(yǎng)將步驟二得的莖尖，接種在初代培養(yǎng)基上，進行初代培養(yǎng)，初代培養(yǎng)光照強度1000～15001x，培養(yǎng)溫度23±2℃，培養(yǎng)時間40±5天，這樣莖尖基部周圍逐漸形成叢生芽，當芽叢長至2～3cm時，將其切成單芽苗，備用；步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三切下的單芽苗移入裝有繼代培養(yǎng)基的密封容器中，進行繼代培養(yǎng)，擴繁試管苗，培養(yǎng)溫度21±2℃，光照時間14±1小時/天，培養(yǎng)基pH值5.8～6.0，培養(yǎng)40～45天，形成5～6cm長具有4～5個莖節(jié)的芽條，為增殖無性系，將其切成帶莖節(jié)的切段，每個芽條分割成2-3段，以后每40～45天如此繼代一次，擴繁試管苗。
步驟五、生根培養(yǎng)將步驟四擴繁的試管苗取出，移入裝有生根培養(yǎng)基的密閉容器中，進行生根培養(yǎng)，試管苗在生根培養(yǎng)基中光照強度1500～2000lx，培養(yǎng)溫度23±2℃至25～35天，試管苗在培養(yǎng)基中根長至0.3～0.5cm的新根時，出瓶移栽。
本發(fā)明杜鵑紅山茶的組培快繁方法，步驟三所述的初代培養(yǎng)基成分為MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+NAA0.5～1+PVP2～3g/l+2～3％蔗糖；步驟四所述的繼代培養(yǎng)基成分為MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+2ip1～2+IBA0.05～0.1+PVP2～3g/l+2～3％蔗糖；步驟五所述的生根培養(yǎng)基成分為1/2MS+NAA0.7+IBA05+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。
本發(fā)明的杜鵑紅山茶的組培快繁育苗方法解決了原來繁殖系數(shù)低，嫁接速度慢，且受嫁接季節(jié)影響的難題，使試管苗月增長系數(shù)達到2～3左右，一年從一個外植體增殖可達2～3株左右的試管苗。這樣既保護了母株，又可滿足杜鵑紅山茶的規(guī)?；a(chǎn)需求。
具體實施方式
本發(fā)明涉及一種杜鵑紅山茶組培快繁育苗方法，它包括外植體取材及處理、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)工藝步驟，其具體步驟如下步驟一、外植體的選取4月至5月連續(xù)晴天，從母株上剪取杜鵑紅山茶剛抽出嫩梢不久的莖段。
步驟二、外植體處理把步驟一中的選取的莖段先在1％的洗衣粉水中震蕩洗滌6～8分鐘，再在自來水龍頭下流水沖洗30分鐘，用潔凈的紗布吸干水，然后再在無菌超凈工作臺中放在70％的酒精溶液中浸泡消毒30秒，無菌水沖洗2～3次瀝干水，再轉(zhuǎn)入0.1％HgCl2溶液中消毒8～10分鐘，無菌水沖洗5～6次，每次3～5分鐘，用無菌紗布吸干表面的水分，再切取莖尖，備用。
步驟三、初代培養(yǎng)將步驟二得的莖尖，接種在MS+ZT0.5+BA2+NAA0.8+PVP3g/l+2％蔗糖的初代培養(yǎng)基上，進行初代培養(yǎng)，初代培養(yǎng)光照強度1000～1500lx，培養(yǎng)溫度23℃，培養(yǎng)時間40～45天，這樣莖尖基部周圍逐漸形成叢生芽，當芽叢長2～3cm時，將其切成單芽苗，備用。
步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三切下的單芽苗移入裝有繼代培養(yǎng)基的密封容器中，進行繼代培養(yǎng)，擴繁試管苗，擴繁試管苗繼代培養(yǎng)基是MS+ZT0.5+BA1+2ip2+IBA0.1+PVP3g/l+3％蔗糖，培養(yǎng)溫度21±2℃，光照時間14±1小時/天，培養(yǎng)基pH值5.8～6.0，培養(yǎng)40～45天，可形成5～6cm長具有4～5個左右莖節(jié)的芽條，為增殖無性系，可將其切成帶莖節(jié)的切段，每個芽條可分割成2-3段。以后每40～45天如此繼代一次，擴繁試管苗。
步驟五、生根培養(yǎng)待步驟四擴繁的試管苗增殖到一定數(shù)量后，選取1.5～2cm高的試管苗，移入裝有生根培養(yǎng)基的密閉容器中，進行生根培養(yǎng)。生根培養(yǎng)基成分是1/2MS+NAA0.7+IBA0.5+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。試管苗在生根培養(yǎng)基中光照強度1500～2000lx，培養(yǎng)溫度23℃，20天后小苗根部出現(xiàn)根原基突起，至35天左右，試管苗在培養(yǎng)基中根長至0.3-0.5cm的白色新根時，進行試管苗移栽。試管苗移栽管理技術(shù)與常規(guī)木本組培苗相同。
注ZT——玉米素BA——6-芐基腺嘌呤NAA——α-萘乙酸IBA——吲哚丁酸2ip——6-γ，γ-二甲基烯丙基腺嘌呤PVP——聚乙烯吡咯烷酮AC——活性炭ZT0.2～0.8表示ZT0.2~0.8mg/l。其余計量單位相同。
權(quán)利要求
1.一種杜鵑紅山茶組培快繁方法，其特征在于它包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取4月至5月，從母株上剪取杜鵑紅山茶剛抽出嫩梢不久的莖段；步驟二、外植體處理用70～75％的酒精溶液浸泡30～40秒，無菌水沖洗多次瀝干水，再放入0.1％～0.15％HgCl2溶液中消毒8～10分鐘，無菌水多次沖洗，再切取莖尖，備用；步驟三、初代培養(yǎng)將步驟二得的莖尖，接種在初代培養(yǎng)基上，進行初代培養(yǎng)，初代培養(yǎng)光照強度1000～1500lx，培養(yǎng)溫度23±2℃，培養(yǎng)時間40±5天，這樣莖尖基部周圍逐漸形成叢生芽，當芽叢長至2～3cm時，將其切成單芽苗，備用；步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三切下的單芽苗移入裝有繼代培養(yǎng)基的密封容器中，進行繼代培養(yǎng)，擴繁試管苗，培養(yǎng)溫度21±2℃，光照時間14±1小時/天，培養(yǎng)基pH值5.8～6.0，培養(yǎng)40～45天，形成5～6cm長具有4～5個莖節(jié)的芽條，為增殖無性系，將其切成帶莖節(jié)的切段，每個芽條分割成2-3段，以后每40～45天如此繼代一次，擴繁試管苗；步驟五、生根培養(yǎng)將步驟四擴繁的試管苗取出，移入裝有生根培養(yǎng)基的密閉容器中，進行生根培養(yǎng)，試管苗在生根培養(yǎng)基中光照強度1500～2000lx，培養(yǎng)溫度23±2℃至25～35天，試管苗在培養(yǎng)基中根長至0.3～0.5cm的新根時，出瓶移栽。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的一種杜鵑紅山茶組培快繁方法，其特征在于步驟三所述的初代培養(yǎng)基成分為MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+NAA0.5～1+PVP2～3g/1+2～3％蔗糖；步驟四所述的繼代培養(yǎng)基成分為MS+ZT0.2～0.8+BA1-2+2ip1～2+IBA0.05～0.1+PVP2～3g/1+2～3％蔗糖；步驟五所述的生根培養(yǎng)基成分為1/2MS+NAA0.7+IBA0.5+BA0.01+15％蔗糖+AC0.8g/l。
專利摘要
本發(fā)明涉及一種杜鵑紅山茶組培快繁方法，包括以下工藝步驟4月至5月，從母株上剪取杜鵑紅山茶剛抽出嫩梢不久的莖段；用酒精溶液浸泡，再放入HgCl
文檔編號A01G7/00GKCN1985580SQ200610161466
公開日2007年6月27日 申請日期2006年12月18日
發(fā)明者吳有光, 劉喚英, 方建民 申請人:江蘇陽光生態(tài)農(nóng)林開發(fā)股份有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan