本技術(shù)涉及玻璃化冷凍，具體為一種胚胎玻璃化冷凍皿。

背景技術(shù)：

1、如圖1，現(xiàn)有技術(shù)中玻璃化冷凍載桿包括把手1、內(nèi)桿2、載桿3、胚胎標記點4所述把手1與內(nèi)桿2一端連接，內(nèi)桿2另一端連接載桿3,載桿3頂端設(shè)有胚胎標記點4?，F(xiàn)有技術(shù)中，玻璃化冷凍時，在皮式培養(yǎng)皿的倒置蓋上，無菌分別各分配1滴ws和es液滴將胚胎從培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)移到ws液滴，在ws液滴中慢慢平衡幾分鐘；然后用培養(yǎng)基將樣品從ws液滴中小心地轉(zhuǎn)移到es液滴中，在es的平衡時間內(nèi)，無菌分別各分配1滴vs液滴，然后將樣品吸取至移液管尖端，轉(zhuǎn)移至vs液滴中，放置一段時間。然后在顯微鏡下吸取胚胎，把皮式培養(yǎng)皿移走，把玻璃化載桿拿到顯微鏡下，把胚胎裝載到玻璃化載桿上，放到液氮中快速冷凍，密封玻璃化載桿。將裝載了胚胎的玻璃化載桿放入充滿液氮的凍存管或者冷凍套管中，完成這個胚胎的玻璃化冷凍。然后重復(fù)下一個胚胎的玻璃化冷凍。從上述現(xiàn)有技術(shù)中可知，實驗室中胚胎的玻璃化冷凍是在皮式培養(yǎng)皿進行的倒置蓋上進行的，并沒有相關(guān)專利用的工具，載桿需要操作人員用手拿，并不能很好的固定，影響工作效率。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本實用新型的目的在于提供一種胚胎玻璃化冷凍皿，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

2、所述玻璃化冷凍皿，包括冷凍皿本體，冷凍皿本體的底部前端設(shè)置有裝載槽，裝載槽后端設(shè)置有冷凍槽，冷凍皿本體左側(cè)面和右側(cè)面上對應(yīng)于裝載槽位置設(shè)置有缺口，缺口的尺寸與玻璃化冷凍載桿的內(nèi)桿尺寸相適應(yīng)，內(nèi)桿放入缺口后，可以把玻璃化冷凍載桿固定，防止晃動，當(dāng)進行述玻璃化冷凍時，不需要用手拿著固定，節(jié)省體力，提高工作效率。

3、進一步的，所述裝載槽為長條形，且裝載槽的左端與冷凍皿本體左側(cè)面的內(nèi)壁齊平，裝載槽的右端與冷凍皿本體右側(cè)面的內(nèi)壁齊平，當(dāng)玻璃化冷凍載桿在缺口中固定好后，胚胎標記點的位置與冷凍槽在同一個顯微鏡的焦平面上，當(dāng)把胚胎從冷凍槽轉(zhuǎn)移到胚胎標記點時，只需要簡單的平移胚胎玻璃化冷凍皿就可以。

4、進一步的，冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽。

5、進一步的，ws洗滌溶液槽列的前端標記有ws，es平衡溶液槽列的前端標記有es，vs玻璃化溶液槽列的前端標記有vs。

6、進一步的，裝載槽包括左裝載槽和右裝載槽，且左裝載槽和右裝載槽中間隔開。

7、進一步的，左裝載槽和右裝載槽中間隔開相互錯開，冷凍皿本體左側(cè)面的缺口與左裝載槽相對應(yīng)，冷凍皿本體右側(cè)面的缺口與右裝載槽相對應(yīng)。

8、進一步的，冷凍槽包括左冷凍槽和右冷凍槽，左冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽，右冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽。進一步的，冷凍槽可以設(shè)置多行，優(yōu)選10行，這樣一個胚胎玻璃化冷凍皿可以比培養(yǎng)皿冷凍更多的胚胎。

9、進一步的，裝載槽與冷凍槽的深度相同，或裝載槽的深度比冷凍槽深，裝載槽與冷凍槽的深度之差為載桿頂端的厚度，這樣，當(dāng)載桿固定在缺口處時，冷凍槽與載桿前端上表面在同一個顯微鏡焦平面或幾乎在同一個焦平面，進行胚胎裝載時，并不需要反復(fù)調(diào)焦，提高工作效率。

10、進一步的，裝載槽用于放置玻璃化冷凍載桿；每個冷凍槽的容量不小于50μl。

11、進一步的，裝載槽中設(shè)置有裝載桿的固定卡扣。玻璃化冷凍皿還設(shè)置有上蓋，防止細菌污染。

12、使用本裝置的玻璃化冷凍方法如下：

13、s1:在裝載槽中不滴液體，將玻璃化冷凍載桿通過缺口固定在裝載槽中，玻璃化冷凍載桿的把手在缺口處固定好；

14、s2:ws洗滌溶液槽中滴入50-100μl的ws洗滌溶液，在培養(yǎng)箱中取出含胚胎的培養(yǎng)皿，并在顯微鏡下選擇質(zhì)量最好的胚胎進行玻璃化,用培養(yǎng)基將胚胎從培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)移到ws洗滌溶液槽中，并啟動計時器。胚胎應(yīng)該在ws洗滌溶液槽中慢慢平衡1-3min；在此期間，es平衡溶液槽滴入50-100μl的es平衡溶液；

15、s3:用培養(yǎng)基將胚胎從ws液滴中小心地轉(zhuǎn)移到es平衡溶液槽中，并啟動計時器，胚胎應(yīng)該在es平衡溶液槽中慢慢的平衡6-10min，在此期間，vs玻璃化溶液槽中滴入50-100μlvs玻璃化溶液。

16、s4:將胚胎吸取至移液管尖端，轉(zhuǎn)移至vs玻璃化溶液槽中，放置至少30秒。

17、s5:將胚胎轉(zhuǎn)移到玻璃化載桿上；然后拿起玻璃化載桿在液氮中封裝；

18、s6:玻璃化載桿放入充滿液氮的凍存管或者冷凍套管中，完成胚胎的冷凍，進行下一個胚胎的冷凍。

19、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型的有益效果是：本實用新型的玻璃化冷凍皿在使用時，通過缺口固定載桿，減輕工作量，提高工作效率，進行胚胎裝載時，vs玻璃化溶液槽與載桿頂端上表面位于同一個顯微鏡焦平面上，轉(zhuǎn)移胚胎并不需要反復(fù)調(diào)焦，提高工作效率；同時，玻璃化冷凍皿的冷凍槽設(shè)置數(shù)量多，一批次可以冷凍更多的胚胎。

技術(shù)特征：

1.一種胚胎玻璃化冷凍皿，包括冷凍皿本體，其特征在于，冷凍皿本體的底部前端設(shè)置有裝載槽，裝載槽后端設(shè)置有冷凍槽，冷凍皿本體左側(cè)面和右側(cè)面上對應(yīng)于裝載槽位置設(shè)置有缺口。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，所述裝載槽為長條形，且裝載槽的左端與冷凍皿本體左側(cè)面的內(nèi)壁齊平，裝載槽的右端與冷凍皿本體右側(cè)面的內(nèi)壁齊平。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，ws洗滌溶液槽列的前端標記有ws，es平衡溶液槽列的前端標記有es，vs玻璃化溶液槽列的前端標記有vs。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，裝載槽包括左裝載槽和右裝載槽，且左裝載槽和右裝載槽中間隔開。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，左裝載槽和右裝載槽中間隔開相互錯開，冷凍皿本體左側(cè)面的缺口與左裝載槽相對應(yīng)，冷凍皿本體右側(cè)面的缺口與右裝載槽相對應(yīng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，冷凍槽包括左冷凍槽和右冷凍槽，左冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽，右冷凍槽至少有三列，一列用于裝ws洗滌溶液的ws洗滌溶液槽、一列用于裝es平衡溶液的es平衡溶液槽，一列用于裝vs玻璃化溶液的vs玻璃化溶液槽。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，裝載槽與冷凍槽的深度相同或裝載槽的深度比冷凍槽深，裝載槽與冷凍槽的深度之差為載桿頂端的厚度。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，裝載槽的容量不小于1ml；每個冷凍槽的容量不小于50μl。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的玻璃化冷凍皿，其特征在于，裝載槽中設(shè)置有裝載桿的固定卡扣，玻璃化冷凍皿還設(shè)置有上蓋。

技術(shù)總結(jié)
本技術(shù)涉及玻璃化冷凍技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種胚胎玻璃化冷凍皿，所述玻璃化冷凍皿，包括冷凍皿本體，冷凍皿本體的底部前端設(shè)置有裝載槽，裝載槽后端設(shè)置有冷凍槽，冷凍皿本體左側(cè)面和右側(cè)面上對應(yīng)于裝載槽位置設(shè)置有缺口，所述裝載槽為長條形，且裝載槽的左端與冷凍皿本體左側(cè)面的內(nèi)壁齊平，裝載槽的右端與冷凍皿本體右側(cè)面的內(nèi)壁齊平，冷凍槽至少有三列，一列用于裝WS洗滌溶液的WS洗滌溶液槽、一列用于裝ES平衡溶液的ES平衡溶液槽，一列用于裝VS玻璃化溶液的VS玻璃化溶液槽。本技術(shù)的玻璃化冷凍皿在使用時，通過缺口固定載桿，減輕工作量，提高工作效率。

技術(shù)研發(fā)人員：劉紅波,呂培茹
受保護的技術(shù)使用者：河南創(chuàng)源生物技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：20240328
技術(shù)公布日：2024/12/19