本發(fā)明涉及生物引誘技術領域，尤其是涉及一種韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑及其制備方法與應用。

背景技術：

韭菜遲眼蕈蚊bradysiaodoriphagayangetzhang，又名韭蛆，屬雙翅目(diptera)，眼蕈蚊科(sciaridae)，韭菜遲眼蕈蚊屬，在我國，東北、西北、華北和華東地區(qū)嚴重發(fā)生與危害，而在華中、華南和西南也有零星報道。據(jù)統(tǒng)計，韭菜遲眼蕈蚊可為害百合科、菊科、藜科、十字花科、葫蘆科和傘形科等7科30多種蔬菜。其中北方保護地韭菜受害最重，其次為大蒜、洋蔥、瓜類和萵苣，其還可為害食用菌。韭菜遲眼蕈蚊繁殖能力強，世代重疊嚴重，幼蟲群集蛀食寄主地下根莖或鱗莖導致地下部分腐爛，地上植株成墩萎蔫，干枯而死。韭菜遲眼蕈蚊蟲口密度大，危害嚴重時，每墩蟲量達千頭，造成韭菜減產(chǎn)，甚至絕收等嚴重經(jīng)濟損失。

目前，關于韭菜遲眼蕈蚊的防治方法目前主要集中依賴化學農藥灌根或利用引誘裝置引誘，如誘蟲板、引誘箱或照明箱等。其中，長期大量利用化學農藥導致韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)生抗藥性，菜農不得不加大藥劑施用量，甚至施用違禁農藥，導致嚴重的食品安全問題和破壞農田生態(tài)系統(tǒng)。而利用引誘裝置，其引誘的效率低下，不能有效解決韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)生嚴重危害的問題。

如何開發(fā)引誘效果明顯、成本低、使用方便和無污染的引誘劑誘殺韭菜遲眼蕈蚊成蟲，迄今為止，尚未見相關報道。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的第一個目的在于提供一種韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑，本發(fā)明的第二個目的在于提供上述韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑的制備方法，本發(fā)明的第三個目的在于提供上述韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑在引誘韭菜遲眼蕈蚊中的應用，本發(fā)明的第四個目的在于提供一種包括上述韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑的誘芯，本發(fā)明的第五個目的在于提供上述誘芯在引誘韭菜遲眼蕈蚊中的應用，以緩解現(xiàn)有技術中存在產(chǎn)品毒副作用大或效率低下，以及相關研究不足的技術問題。

本發(fā)明提供了一種韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑，所述引誘劑包括：

烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚；

所述烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為20:1-1:2。

進一步地，所述烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為15:1-2:3。

進一步地，所述烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為10:1-1:1。

本發(fā)明還提供了上述引誘劑的制備方法，所述制備方法包括：

取揮發(fā)性溶劑，分別稀釋所述烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚，得到烯丙基甲基二硫醚稀釋液和二烯丙基二硫醚稀釋液，將所述烯丙基甲基二硫醚稀釋液和二烯丙基二硫醚稀釋液混合，制得所述引誘劑。

進一步地，所述揮發(fā)性溶劑為甲醇、二氯甲烷、正庚烷、甲苯、正己烷、戊烷、苯、苯乙烯、丁基甲苯、乙烯基甲苯、三氯乙烯、二硫化碳、磷酸三鄰甲酚中的一種或兩種以上。

進一步地，所述烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.1-1.0mg/μl，所述二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.01-1.0mg/μl。

進一步地，所述烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.5mg/μl，所述二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.05-0.5mg/μl。

本發(fā)明還提供了上述引誘劑在引誘韭菜遲眼蕈蚊中的應用。

本發(fā)明還提供了一種誘芯，包括上述引誘劑。

另外，本發(fā)明還提供了上述誘芯在引誘韭菜遲眼蕈蚊中的應用。

本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑，包括烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚，對韭菜遲眼蕈蚊引誘作用明顯，并且無毒無害，對環(huán)境不會造成污染；本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊引誘劑制備方法，操作簡便，成本低廉；本發(fā)明提供的一種誘芯，包括本發(fā)明提供的引誘劑，能夠高效引誘韭菜遲眼蕈蚊，為建立韭菜遲眼蕈蚊綠色防控技術體系提供基礎。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明具體實施方式或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對具體實施方式或現(xiàn)有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖是本發(fā)明的一些實施方式，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發(fā)明實施例3提供的第一引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵粒數(shù)影響的結果圖；

圖2為本發(fā)明實施例3提供的第一引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵塊數(shù)影響的結果圖；

圖3為本發(fā)明實施例3提供的第二引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵粒數(shù)影響的結果圖；

圖4為本發(fā)明實施例3提供的第二引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵塊數(shù)影響的結果圖；

圖5為本發(fā)明實施例3提供的第三引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵粒數(shù)影響的結果圖；

圖6為本發(fā)明實施例3提供的第三引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵塊數(shù)影響的結果圖；

圖7為本發(fā)明實施例3提供的第四引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵粒數(shù)影響的結果圖；

圖8為本發(fā)明實施例3提供的第四引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵塊數(shù)影響的結果圖；

圖9為本發(fā)明實施例3提供的第五引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵粒數(shù)影響的結果圖；

圖10為本發(fā)明實施例3提供的第五引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊成蟲平均產(chǎn)卵塊數(shù)影響的結果圖；

圖11為本發(fā)明實施例4提供的第一引誘劑誘芯對天津地區(qū)田間的韭菜遲眼蕈蚊成蟲的吸引作用的結果圖；

圖12為本發(fā)明實施例4提供的第一引誘劑誘芯對遼寧地區(qū)田間的韭菜遲眼蕈蚊成蟲的吸引作用的結果圖。

具體實施方式

下面將結合附圖對本發(fā)明的技術方案進行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實施例是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

韭菜遲眼蕈蚊明顯嗜好或危害韭菜，并且繁殖能力強，世代重疊嚴重，幼蟲群集蛀食寄主地下根莖或鱗莖導致地下部分腐爛，地上植株成墩萎蔫，干枯而死。韭菜遲眼蕈蚊蟲口密度大，危害嚴重時，每墩蟲量達千頭，造成韭菜減產(chǎn)，甚至絕收等嚴重經(jīng)濟損失。

目前，關于韭菜遲眼蕈蚊的防治方法目前主要集中依賴化學農藥灌根或利用引誘裝置引誘，長期大量利用化學農藥導致韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)生抗藥性，菜農不得不加大藥劑施用量，甚至施用違禁農藥，導致嚴重的食品安全問題和破壞農田生態(tài)系統(tǒng)。而利用引誘裝置，其引誘的效率低下，不能有效解決韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)生嚴重危害的問題。

本發(fā)明在對韭菜遲眼蕈蚊生物學、行為學深入研究的基礎上，并參考國內外對雙翅目其它種類的研究，結果顯示韭菜遲眼蕈蚊成蟲對寄主植物韭菜具有顯著的產(chǎn)卵行為趨性，本發(fā)明在上述研究結果基礎上研制出一種針對韭菜遲眼蕈蚊成蟲、來源寄主植物的引誘劑配方，并開發(fā)出可與粘蟲板聯(lián)合使用的韭菜遲眼蕈蚊成蟲引誘劑。該引誘劑由人工合成的標準品制成，可結合粘蟲板對韭菜遲眼蕈蚊成蟲誘殺，該引誘劑效果明顯、成本低、使用方便和無污染等優(yōu)點。

本發(fā)明提供了一種韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑，包括：

烯丙基甲基二硫醚(amd)和二烯丙基二硫醚(dd)；

烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為20:1-1:2。

其中，烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比例如可以為，但不限于20:1，18:1，16:1，14:1，12:1，10:1，8:1，6:1，4:1，2:1，1:1或者1:2。

在一個優(yōu)選的實施方式中，烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為10:1-1:1。

在一個更優(yōu)選的實施方式中，烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為10:1或者1:1。

本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑，對韭菜遲眼蕈蚊成蟲的引誘作用明顯，并且無毒無害，對環(huán)境不會造成污染

本發(fā)明還提供了上述韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑的制備方法，包括：

取揮發(fā)性溶劑，分別稀釋烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚，得到烯丙基甲基二硫醚稀釋液和二烯丙基二硫醚稀釋液，將烯丙基甲基二硫醚稀釋液和二烯丙基二硫醚稀釋液混合，至烯丙基甲基二硫醚和二烯丙基二硫醚的質量比為20:1-1:2或15:1-2:3或10:1-1:1，制得引誘劑。

其中，揮發(fā)性溶劑為甲醇、二氯甲烷、正庚烷、甲苯、正己烷、戊烷、苯、苯乙烯、丁基甲苯、乙烯基甲苯、三氯乙烯、二硫化碳、磷酸三鄰甲酚中的一種或兩種以上。

在一個優(yōu)選的實施方式中，揮發(fā)性溶劑為正己烷。

在一個優(yōu)選的實施方式中，烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.1-1.0mg/μl，二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.01-1.0mg/μl。

其中，烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度例如可以為，但不限于0.1mg/μl、0.2mg/μl、0.3mg/μl、0.4mg/μl、0.5mg/μl、0.6mg/μl、0.7mg/μl、0.8mg/μl、0.9mg/μl或1.0mg/μl；二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度例如可以為，但不限于0.01mg/μl、0.05mg/μl、0.1mg/μl、0.15mg/μl、0.2mg/μl、0.25mg/μl、0.3mg/μl、0.35mg/μl、0.4mg/μl、0.45mg/μl、0.5mg/μl、0.55mg/μl、0.6mg/μl、0.65mg/μl、0.7mg/μl、0.75mg/μl、0.8mg/μl、0.85mg/μl、0.9mg/μl、0.95mg/μl或者1.0mg/μl。

在一個優(yōu)選的實施方式中，烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.5mg/μl，二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.05-0.5mg/μl。

在一個更優(yōu)選的實施方式中，烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.5mg/μl，所述二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.05mg/μl；或者，烯丙基甲基二硫醚稀釋液的濃度為0.5mg/μl，所述二烯丙基二硫醚稀釋液的濃度為0.5mg/μl。

本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊引誘劑的制備方法，操作簡便，成本低廉

本發(fā)明還提供了上述的引誘劑在引誘韭菜遲眼蕈蚊中的應用。

其中，韭菜遲眼蕈蚊優(yōu)選為韭菜遲眼蕈蚊成蟲。

本發(fā)明還提供了一種誘芯，包括上述的引誘劑。

在一個優(yōu)選的實施方案中，取100μl0.5mg/μl的烯丙基甲基二硫醚稀釋液和100μl0.05mg/μl的二烯丙基二硫醚稀釋液添加到誘芯上，制成amd：dd＝50:5的引誘劑誘芯；或者，取100μl0.5mg/μl的烯丙基甲基二硫醚稀釋液和100μl0.5mg/μl的二烯丙基二硫醚稀釋液添加到誘芯上，制成amd：dd＝50:50的引誘劑誘芯。

本發(fā)明提供的誘芯，包括本發(fā)明提供的引誘劑，能夠高效引誘韭菜遲眼蕈蚊，對建立韭菜遲眼蕈蚊綠色防控技術體系提供基礎。

為了有助于更清楚的理解本發(fā)明的內容，現(xiàn)結合具體的實施例詳細介紹如下。如未明確指出，以下實施例中采用的韭菜遲眼蕈蚊為浙江省農業(yè)科學植物保護研究所實驗室長期用韭菜alliumtuberosum飼養(yǎng)的韭菜遲眼蕈蚊bradysiaodoriphagayangetzhang實驗種群。

實施例1韭菜遲眼蕈蚊的飼養(yǎng)

飼養(yǎng)條件為溫度25℃，相對濕度70％±5。挑選發(fā)育正常且行為活躍的雌雄成蟲80至100頭，置于帶有透氣紗布的塑料盒內，自由配對，交尾產(chǎn)卵在濕潤濾紙上，然后將濾紙轉移到培養(yǎng)皿(直徑9cm)內。幼蟲孵化后選用新鮮的韭菜假莖作為食料。

實施例2韭菜主要揮發(fā)物及其不同比例引誘劑對韭蛆成蟲的吸引作用

誘芯制備：

用正己烷做溶劑，分別將烯丙基甲基二硫醚(amd)配成溶液濃度為0.5mg/μl的溶液，二烯丙基二硫醚(dd)配制成溶液濃度分別為0.5mg/μl和0.05mg/μl的溶液。

分別添加100μl的0.5mg/μl烯丙基甲基二硫醚(amd)和0.05mg/μl二烯丙基二硫醚(dd)到誘芯上，制成amd:dd＝50:5的第一引誘劑誘芯；

分別添加100μl的0.5mg/μl烯丙基甲基二硫醚(amd)和0.5mg/μl二烯丙基二硫醚(dd)到誘芯上制成amd:dd＝50:50的第二引誘劑誘芯；

添加100μl的0.5mg/μl烯丙基甲基二硫醚(amd)到誘芯上制成amd＝50的第三引誘劑誘芯；

添加100μl的0.05mg/μl二烯丙基二硫醚(dd)到誘芯上制成dd＝5的第四引誘劑誘芯；

添加100μl的0.5mg/μl二烯丙基二硫醚(dd)到誘芯上制成dd＝50的第五引誘劑誘芯。

行為實驗：

取干凈且濕度、粘度適宜的黑土分別置于直徑10cm的兩個塑料花盆內。其中一個花盆中央放置一枚配置好的第一引誘劑誘芯當作味源，為處理組。另一花盆則不放誘芯，為對照組。將實驗組花盆和對照組花盆分別放置于養(yǎng)蟲籠(長×寬×高：50cm×50cm×50cm)對角線位置。然后將養(yǎng)蟲籠放入實驗室內，溫度26℃，室內黑暗避光。取當日羽化的雌、雄成蟲分別分裝各1盒，每盒150頭放入養(yǎng)蟲籠內，使其在籠內自由交配并產(chǎn)卵。在24h、48h和72h后，分別調查塑料花盆內卵塊和卵粒數(shù)，并進行記錄，以處理組和對照組花盆內卵塊和卵粒數(shù)評價成蟲的產(chǎn)卵行為趨性。每個處理重復6次；

在相同實驗條件下設置以第二引誘劑誘芯作為實驗組進行行為實驗，每個處理重復6次；

在相同實驗條件下設置以第三引誘劑誘芯作為實驗組進行行為實驗，每個處理重復6次；

在相同實驗條件下設置以第四引誘劑誘芯作為實驗組進行行為實驗，每個處理重復6次。

數(shù)據(jù)處理：

使用spss數(shù)據(jù)處理軟件，選擇威爾科克森符號秩檢驗方法(wilcoxon'ssignranktest)，對數(shù)據(jù)進行分析，p<0.05差異顯著。

應用第一引誘劑誘芯作為實驗組的實驗結果如圖1和圖2所示，從圖1和圖2中可以看出，與對照組相比，第一引誘劑誘芯能夠吸引更多的雌性韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)卵，說明amd:dd＝50:5的第一引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊具有吸引作用。

應用第二引誘劑誘芯作為實驗組的實驗結果如圖3和圖4所示，從圖3和圖4中可以看出，與對照組相比，第二引誘劑誘芯能夠吸引更多的雌性韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)卵，說明amd:dd＝50:50的第二引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊具有吸引作用，但吸引作用相比于amd:dd＝50:5的第一引誘劑誘芯稍弱。

應用第三引誘劑誘芯作為實驗組的實驗結果如圖5和圖6所示，從圖5和圖6中可以看出，與對照組相比，第三引誘劑誘芯能夠吸引更多的雌性韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)卵，說明amd＝50的第三引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊具有吸引作用，但吸引作用相比于amd:dd＝50:5的第一引誘劑誘芯和amd:dd＝50:50的第二引誘劑誘芯較弱。

應用第四引誘劑誘芯作為實驗組的實驗結果如圖7和圖8所示，從圖7和圖8中可以看出，與對照組相比，第四引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)卵的吸引作用并不明顯，說明dd＝5的第四引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊基本不具有吸引作用。

應用第五引誘劑誘芯作為實驗組的實驗結果如圖9和圖10所示，從圖9和圖10中可以看出，與對照組相比，第五引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊產(chǎn)卵的吸引作用并不明顯，說明dd＝50的第五引誘劑誘芯對雌性韭菜遲眼蕈蚊基本不具有吸引作用。

實施例3基于韭菜揮發(fā)物的引誘劑田間效果試驗

為評估人工合成韭菜揮發(fā)物組分amd:dd＝50：5在田間對韭蛆成蟲的引誘活性。

以amd:dd＝50：5第一引誘劑誘芯+黑板為處理組，不掛誘芯的黑板為對照組。板與板間距5米以上，處理組與對照組隨機分散懸掛，掛板后1、3、5天調查懸掛誘芯和不掛誘芯板上的成蟲數(shù)。重復6次。結果如圖11和12所示，懸掛誘芯對黑板誘殺成蟲效果增加30％以上。其中，圖11為在天津地區(qū)田間進行的實驗，圖12為在遼寧地區(qū)田間進行的實驗。

以上各組實驗說明，本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑對韭菜遲眼蕈蚊的引誘作用明顯，并且無毒無害，對環(huán)境不會造成污染；本發(fā)明提供的韭菜遲眼蕈蚊的引誘劑的制備方法，操作簡便，成本低廉；本發(fā)明提供的包括本發(fā)明提供的引誘劑的誘芯，能夠高效引誘韭菜遲眼蕈蚊，對建立綠色防控技術體系提供基礎。

最后應說明的是：以上各實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案，而非對其限制；盡管參照前述各實施例對本發(fā)明進行了詳細的說明，本領域的普通技術人員應當理解：其依然可以對前述各實施例所記載的技術方案進行修改，或者對其中部分或者全部技術特征進行等同替換；而這些修改或者替換，并不使相應技術方案的本質脫離本發(fā)明各實施例技術方案的范圍。