本發(fā)明屬于雜交育種領(lǐng)域，具體涉及一種“東野型”三系雜交水稻異交親和保持系的篩選方法。

背景技術(shù)：

雜交水稻在我國糧食生產(chǎn)中發(fā)揮了巨大作用，特別是三系雜交稻的選育和應(yīng)用促進(jìn)了水稻生產(chǎn)飛躍式的發(fā)展和產(chǎn)量的歷史性提高。

三系雜交稻種子的生產(chǎn)需要水稻細(xì)胞質(zhì)雄性不育系、保持系和恢復(fù)系三者的配套。自1973年實現(xiàn)野敗型三系配套以來，雜交稻制種技術(shù)不斷發(fā)展和提高，每畝產(chǎn)量由最初的幾十公斤提高到現(xiàn)在的三百公斤。制種產(chǎn)量的高低是決定雜交稻品種推廣應(yīng)用的一個重要因素，而制種產(chǎn)量主要取決于不育系的異交結(jié)實率。

我們利用東鄉(xiāng)野生稻作為細(xì)胞質(zhì)源培育出“東野型”新質(zhì)源雄性不育系，并發(fā)現(xiàn)該類型不育性的恢保遺傳關(guān)系與傳統(tǒng)的“野敗”、“紅蓮”及“包臺”等類型完全不同。“東野型”胞質(zhì)雄性不育性具有極為廣泛的保持譜，現(xiàn)有不同三系類型的保持系和恢復(fù)系以及絕大多數(shù)常規(guī)品種均為“東野型”不育性徹底的保持系。

然而，在“東野型”不育系培育過程中，我們發(fā)現(xiàn)，部分品種作為保持系轉(zhuǎn)育“東野型”不育系，回交一代以后結(jié)實率顯著下降，并且隨世代增加，最終表現(xiàn)出異交不親和性(回交結(jié)實率低于10％)，而有些品種轉(zhuǎn)育“東野型”不育系的回交結(jié)實率正常(高于75％)，說明保持系品種的遺傳背景對“東野型”不育系的異交結(jié)實率具有直接影響。因此，在“東野型”不育系培育過程中，首要任務(wù)是篩選異交親和的保持系。在具體實踐中，通過多代回交轉(zhuǎn)育的傳統(tǒng)方法能夠達(dá)到篩選目的，但勢必需要投入較多的人力物力財力以及較長的周期。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對因保持系品種遺傳差異造成轉(zhuǎn)育的“東野型”不育系異交結(jié)實率低、以及利用多代回交轉(zhuǎn)育來篩選保持系的傳統(tǒng)方法投入大周期長的不足，提供一種簡易篩選異交親和的“東野型”保持系的方法。以異交不親和(雜交結(jié)實率極低)的“東野型”不育系為母本，將待篩選的保持系品種分別跟它雜交，通過考察雜交當(dāng)代的結(jié)實率，即可判定該保持系品種是否異交親和。

即本發(fā)明的第一目的在于一種“東野型”三系雜交水稻異交親和保持系的快速篩選方法，包括以下步驟：

1)準(zhǔn)備異交不親和的“東野型”雄性不育系，以及待篩選的保持系品種；

2)以異交不親和的“東野型”雄性不育系為母本，將所述待篩選的保持系品種分別與所述異交不親和的“東野型”雄性不育系進(jìn)行雜交，充分授粉，成熟后考察結(jié)實率，結(jié)實率高于75％，即為異交親和保持系，反之淘汰。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述的“東野型”三系雜交水稻異交親和保持系的篩選方法中，所述異交不親和的“東野型”雄性不育系的結(jié)實率小于10％。

優(yōu)選地，本發(fā)明所述的“東野型”三系雜交水稻異交親和保持系的篩選方法中，所述異交不親和的“東野型”雄性不育系是以“東野型”敗育細(xì)胞質(zhì)培育成的雄性不育系，該細(xì)胞質(zhì)來源于東鄉(xiāng)野生稻，例如，含雄性不育細(xì)胞質(zhì)的東鄉(xiāng)野生稻的鑒定方法可參考cn201510896879.7。

本發(fā)明還提供了上述方法獲得的“東野型”三系雜交水稻異交親和保持系。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：按照本發(fā)明的“東野型”三系保持系篩選方法，在雜交當(dāng)代即可篩選到異交親和的“東野型”保持系。本發(fā)明方法步驟簡單，而且周期短，能夠有效提高“東野型”異交親和不育系的培育效率。

具體實施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明中的實施例，對本發(fā)明中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

實施例1

首先，以江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所東鄉(xiāng)野生稻異位保存圃里的東鄉(xiāng)野生稻(shenx,yans,huangr,zhus,xiongh,shenl.ricescience,2013,20(5):379-382.)為母本，早秈品種中早35(江西科源種業(yè)有限公司供種)為輪回父本育成“東野型”不育系(shen等,2013)，暫命名為東野1a，在每個回交世代，東野1a雜交授粉結(jié)實正常(>75％)。

接下來，以東野1a為母本、野敗型保持系金23b(江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所種質(zhì)資源庫)為輪回父本，當(dāng)天下午選擇剛抽葉鞘一半以上或抽出葉鞘的東野1a穗子，用剪刀剪去穗子上已開過的穎花，對剩余的穎花逐一剪去小花上部1/3左右的穎殼，剪完后套袋防止外來花粉的干擾，第二天上午待金23b開花時取花粉對東野1a進(jìn)行充分授粉，收獲雜交種種成f1代，跟金23b繼續(xù)回交，收獲種子種成bc1f1代，在該世代選擇8個不同單株進(jìn)行剪穎授粉，單株間的雜交結(jié)實率出現(xiàn)半正常(30～55％)和極低(<10％)兩種情況(表1)，隨著回交世代增加，核背景被逐漸置換，所有單株的回交結(jié)實率都降至10％以下，將回交5代后得到的結(jié)實率極低的不育系命名為東金a。

表1東野1a和金23b回交一代結(jié)實率(％)

**表示極顯著(p<0.01)

根據(jù)以上兩個品種培育“東野型”不育系的情況來看，“東野型”不育系的異交習(xí)性明顯存在核背景差異，因此在培育“東野型”不育系過程中需要特別注意篩選合適的保持系材料。

對比例

我們采取“以差驗好”的辦法來篩選“東野型”異交親和保持系，即，以東金a為母本，選用野敗型保持系天豐b、五豐b、榮豐b、印水型保持系ii-32b(下簡稱ii-32b)、野敗型恢復(fù)系r463(江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院水稻研究所種質(zhì)資源庫)五個品種為父本進(jìn)行雜交，在充分授粉的情況下，僅ii-32b跟東金a雜交的f0結(jié)實正常，達(dá)83.3％，其余四者跟東金a的f0的平均結(jié)實率分別為5.1％、4.7％、6.9％和3.3％。

繼續(xù)跟天豐b、五豐b、榮豐b、ii-32b及r463回交，充分授粉，到回交第5代對結(jié)實率進(jìn)行考察，依然只有ii-32b為輪回父本的雜交結(jié)實正常，結(jié)實率為81.2％，其余的雜交結(jié)實率都極低，跟雜交第一代相似，均不足10％，表現(xiàn)為異交不親和。說明利用結(jié)實率極低的不育系東金a作母本，待測品種跟它雜交一代即可完成篩選，不必回交增加工作量。對以上所有材料回交轉(zhuǎn)育5代的高世代不育系鏡檢，這些不育系的高世代花粉都完全敗育，其特征均為典敗且花粉稀少。表明這些品種都能很好地保持“東野型”不育性，但從異交結(jié)實率來看，除中早35外，僅ii-32b適合作“東野型”保持系。由上可見，以結(jié)實率好和差的不育系為母本，來篩選雜交親和保持系，用結(jié)實率好的不育系要回交1代以上才能判定，而本發(fā)明的方法用結(jié)實率差的不育系雜交當(dāng)代即可見效。

由此可見，以異交不親和(異交結(jié)實率極低)的“東野型”不育系為母本，將待鑒定的材料跟它雜交，根據(jù)當(dāng)代結(jié)實情況，即可初步篩選出異交親和、適合作“東野型”保持系的材料。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。