本發(fā)明屬于植物育種
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法。
背景技術(shù)：
：大蔥（alliumfistulosuml.var.giganteummakino)為蔥科蔥屬二年生或多年生草本植物，起源于中國華北，現(xiàn)在中國、日本、朝鮮和韓國普遍栽培。由于大蔥富含營養(yǎng)物質(zhì)，尤其含有特殊的硫化物，可生食或熟食，是我國重要的調(diào)味品。大蔥還具有刺激發(fā)汗，刺激消化，殺滅多種病菌等醫(yī)療作用，深受人民的喜愛。大蔥的辣味因不同品種而異。市場上甜味較大的大蔥適合于生食，而辣味較濃的大蔥較適合于熟食。一般而言，中國大蔥地方品種較甜，但假莖較軟，不利于儲藏，而日本大蔥品種辣味較濃，而且假莖較緊實(shí)，利于儲存和抗風(fēng)。市場上缺乏假莖緊實(shí)而且甜味較大，辣味較輕的大蔥種質(zhì)材料。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的發(fā)明目的是提供了一種低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法。利用本發(fā)明的技術(shù)方案，可以選育出低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)，具有良好的市場應(yīng)用前景。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：本發(fā)明提供了一種低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法，它包括以下步驟：1）親本選擇：選用可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%-9%和丙酮酸含量為0.07-0.08mg/gfw的大蔥品種為父本，選用可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11%-12%和丙酮酸含量為0.01-0.03mg/gfw的大蔥品種為母本；2）人工雜交：所述母本和所述父本雜交，獲得f1代雜種；3)f1代自交：春天播種收獲的f1代雜種種子，秋季收獲成株，重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹開花后人工自交，獲得f2代種子；4)f2代精確選擇：大量播種f2代種子，栽培，秋季收獲時(shí)單株測定可溶性固形物和丙酮酸含量；選擇可溶性固形物含量高、丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)、蔥白長的單株移栽于大棚中，等春天抽薹開花時(shí)混合授粉；5)f3至f5代連續(xù)自交鑒定：f3代重復(fù)f2工作，選擇出可溶性固形物含量高、丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)，蔥白長的單株移栽于大棚，混合授粉，直至f5代結(jié)束選擇，獲得所述低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)。進(jìn)一步的：所述步驟（1）中選用山東大蔥掖選一號大蔥為母本，以日本引進(jìn)大蔥東京夏黑為父本。進(jìn)一步的：所述掖選一號大蔥的可溶性固形物是11.4%，丙酮酸含量是0.016mg/gfw；所述日本引進(jìn)大蔥東京夏黑的可溶性固形物含量是8.3%，丙酮酸含量是0.07mg/gfw。進(jìn)一步的：所述步驟（3）中將f1代雜種種子播種在由泥炭-珍珠巖-蛭石組成的培養(yǎng)基質(zhì)中，定植于大田中。進(jìn)一步的：按行距80cm,株距5cm定植于大田中。進(jìn)一步的：所述步驟（4）中可溶性固形物含量用手持糖量計(jì)測定，丙酮酸含量測定采用蒜氨酶法進(jìn)行。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和技術(shù)效果是：本發(fā)明提供的低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法是在進(jìn)行大蔥廣泛引種和種質(zhì)資源鑒定基礎(chǔ)上，建立的一套包括品種選擇、人工雜交、f1代自交、f2代精確選擇、f3至f5代連續(xù)自交鑒定的雜交育種方法。本發(fā)明提出的技術(shù)方案，通過選用中國地方品種萊州大蔥與日本進(jìn)口大蔥東京夏黑雜交，然后連續(xù)多代自交和選擇，創(chuàng)制出假莖緊實(shí)而且辣味較輕的大蔥新種質(zhì)。本發(fā)明的育種方法育成的種質(zhì)材料，集中了雙親的優(yōu)點(diǎn)，豐富了大蔥育種材料，具有較簡便有效的特點(diǎn)。具有良好的市場應(yīng)用前景。附圖說明圖1為選出的f5代中選單株；圖2為f5代中選單株，其中按由左至右順序依次為中選單株、萊州掖選一號、日本東京夏黑。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步詳細(xì)的說明。實(shí)施例1一、本實(shí)施例提供的低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法具體包括以下步驟：1）親本選擇：在廣泛引種試驗(yàn)中，對引進(jìn)的大蔥品種測定可溶性固形物含量和丙酮酸含量作為育種指標(biāo)，用以分別代表其甜味和辣味的程度。山東地方大蔥“掖選一號大蔥”的可溶性固形物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)是11.4%，丙酮酸含量是0.016mg/gfw；日本引進(jìn)大蔥“東京夏黑”的可溶性固形物含量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)是8.3%，丙酮酸含量是0.07mg/gfw。2）人工雜交：以所述掖選一號（市售品種）大蔥做母本，以所述東京夏黑（市售品種）做父本雜交，獲得掖選一號大蔥×東京夏黑f1代雜種。3)f1代自交：春天3-4月份將收獲的掖選一號大蔥×東京夏黑f1代雜種種子播種于72孔塑料穴盤中，穴盤中裝填泥炭-珍珠巖-蛭石（質(zhì)量比為6:2:2）培養(yǎng)基質(zhì)，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季收獲成株，按行距80cm，株距5cm重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹開花后人工自交，獲得f2代種子。4)f2代精確選擇：春季3-4月大量播種f2代種子，于72孔塑料穴盤中，穴盤中裝填泥炭-珍珠巖-蛭石培養(yǎng)基質(zhì)，7月上旬按行距80cm，株距5cm定植于大田中。秋季11月初收獲時(shí)單株測定可溶性固形物和丙酮酸含量?？扇苄怨绦挝锖坑檬殖痔橇坑?jì)測定，丙酮酸含量測定采用蒜氨酶法進(jìn)行。選擇可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)，蔥白長的單株移栽于大棚中，等春天抽薹開花時(shí)混合授粉。5)f3至f5代連續(xù)自交鑒定：f3代重復(fù)f2工作，選擇出可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)，蔥白長的單株移栽于大棚，混合授粉。直至f5代結(jié)束選擇，獲得所述低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)。如圖1和2所示。二、指標(biāo)的測定方法1、可溶性固形物含量的測定采用手持糖量計(jì)測定大蔥葉鞘（蔥白）中可溶性固形物含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）。測定時(shí)，將大蔥外葉去掉，用刀取大蔥白中間部位，用夾蒜器擠壓出汁液，滴到手持糖量計(jì)中讀數(shù)，用蒸餾水做對照。表1掖選一號大蔥×東京夏黑f2單株可溶性固形物含量株號可溶性固形物含量丙酮酸含量（um）假莖緊實(shí)度18.400.056緊實(shí)27.600.075較緊實(shí)39.000.032較緊實(shí)48.900.077較緊實(shí)57.000.068較緊實(shí)68.180.052較緊實(shí)78.500.053較緊實(shí)85.600.07較緊實(shí)98.300.023較緊實(shí)106.200.032較緊實(shí)118.500.036緊實(shí)127.420.021較緊實(shí)138.500.017較緊實(shí)149.000.035較緊實(shí)1510.200.018較緊實(shí)167.500.055較緊實(shí)178.900.053較緊實(shí)188.820.141軟1910.500.019較緊實(shí)206.900.124較緊實(shí)219.700.16較緊實(shí)228.000.063較緊實(shí)237.600.023較緊實(shí)248.540.041較緊實(shí)2511.000.034較緊實(shí)2611.30.017緊實(shí)2711.60.016緊實(shí)2810.30.021較緊實(shí)2911.30.035較緊實(shí)2、大蔥辣味的測定--丙酮酸含量的測定2.1準(zhǔn)確稱取丙酮酸鈉，配制成0至0.9um的溶液，在420nm波長下測定其吸光度值。表2丙酮酸濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線丙酮酸鈉濃度（um)吸光度（abs)丙酮酸鈉濃度（um)吸光度（abs)000.30.3210.010.050.40.3920.031250.0470.50.4860.06250.1410.60.5350.1250.1560.70.5910.20.2160.80.6580.250.3130.90.679根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出回歸方程：y=1.17911abs-0.05425。2.2用夾蒜器榨取大蔥汁液，準(zhǔn)確用移液器取0.1ml汁液加入10ml試管中，加入4.0ml蒸餾水，混勻后，取0.5ml溶液加入新試管中，加入0.5mldnph,（0.1%2,4-二硝基苯腈）再加入0.5ml蒸餾水，混勻后，加入2.5mlnaoh（1.5m），10分鐘后，在分光光度計(jì)上于420nm測定吸光度。將測得的吸光度值代入回歸方程，即可計(jì)算出丙酮酸含量。3、假莖緊實(shí)度的測定：采用人工用大拇指與食指捏大蔥出葉孔的假莖，依據(jù)用力的大小，判斷假莖的緊實(shí)度。分為三級，即緊實(shí)，較緊實(shí)，和軟三級。3.采用本發(fā)明方法，可改良中國大蔥地方品種的假莖緊實(shí)度，提高耐貯藏和抗倒伏能力，也可改良引進(jìn)的日本大蔥的辣味，使之增加甜味，降低辣味，更適于鮮食。實(shí)施例2本實(shí)施例提供的低辣味且假莖緊實(shí)的大蔥種質(zhì)的育種方法具體包括以下步驟：1、親本選擇：山東地方大蔥“章丘大蔥”的可溶性固形物是13.9%，丙酮酸含量是0.009mg/gfw；日本引進(jìn)大蔥“十國一本太”的可溶性固形物含量是8.8%，丙酮酸含量是0.078mg/gfw?？扇苄怨绦挝锖?、丙酮酸含量及假莖緊實(shí)度的測定同實(shí)施例1。2、人工雜交：以所述章丘大蔥（市售品種）大蔥做母本，以所述十國一本太（市售品種）做父本雜交，獲得章丘大蔥×十國一本太f1代雜種。3、f1代自交：春天3-4月份將收獲的章丘大蔥×十國一本太f1代雜種種子播種于72孔塑料穴盤中，穴盤中裝填泥炭-珍珠巖-蛭石（6:2:2）培養(yǎng)基質(zhì)，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季收獲成株，按行距80cm,株距5cm重新定植于塑料大棚中越冬；第二年春季抽薹開花后人工自交，獲得f2代種子。4、f2代精確選擇：春季3-4月大量播種f2代種子，于72孔塑料穴盤中，穴盤中裝填泥炭-珍珠巖-蛭石培養(yǎng)基質(zhì)，7月上旬按行距80cm,株距5cm定植于大田中。秋季11月初收獲時(shí)單株測定可溶性固形物和丙酮酸含量。可溶性固形物含量用手持糖量計(jì)測定，丙酮酸含量測定采用蒜氨酶法進(jìn)行。選擇可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)，蔥白長的單株移栽于大棚中，等春天抽薹開花時(shí)混合授粉。5、f3至f5代連續(xù)自交鑒定：f3代重復(fù)f2工作，選擇出可溶性固形物含量高而丙酮酸含量低而且假莖緊實(shí)，蔥白長的單株移栽于大棚，混合授粉。直至f5代結(jié)束選擇。以上實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案，而非對其進(jìn)行限制；盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，依然可以對前述實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換；而這些修改或替換，并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本發(fā)明所要求保護(hù)的技術(shù)方案的精神和范圍。當(dāng)前第1頁12