本發(fā)明涉及一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法。
背景技術：
高體雅羅魚(Leuciscus baicalensis)屬鯉形目，鯉科，雅羅魚亞科，雅羅魚屬。又名圓腹雅羅魚。屬亞冷水魚類。多棲息在水流較緩慢的江河和湖泊中。在中國僅見于新疆額爾齊斯河水系，已被列入新疆二級保護魚類。高體雅羅魚的形態(tài)特征為：體長，側(cè)扁，腹圓，無腹棱，體頗高，體長為體高的3.2-3.7倍，尾部較細長；吻端圓鈍，口端位，呈馬蹄形，上下頜約等長。眼中等大；側(cè)線完全，前端微彎向腹方；鱗中等大，側(cè)線鱗為56-61個，腹鰭基部各有一長形腋鱗；體背部呈灰黑色，鱗周緣黑色，腹部白色，胸鰭、腹鰭及臀鰭淺黃色。幼魚以浮游動物為食，成魚則多以底棲水生昆蟲為主要食料，有時也吞食小魚。性成熟年齡多為3-5齡，產(chǎn)卵期在4月底至6月初，卵多產(chǎn)于底層砂石和水生植物的水域。常見個體體長23.5-36.0厘米，體重288-948克，最大個體可達60厘米，重4公斤左右。
高體雅羅魚在俄羅斯的西伯利亞地區(qū)為重要漁撈對象，也是當?shù)爻靥琉B(yǎng)殖的對象，也是我國新疆布爾津地區(qū)的重要經(jīng)濟魚類。在盡快保護與開發(fā)本地冷水魚資源，加快我區(qū)特有經(jīng)濟魚類的合理開發(fā)步伐，努力開闊歐洲和中亞市場，培植龍頭企業(yè)從而促進新疆漁業(yè)產(chǎn)業(yè)化發(fā)展進程中，魚苗供給數(shù)量以及質(zhì)量，還有大規(guī)格魚種培育技術，成為大力發(fā)展和推廣高體雅羅魚人工養(yǎng)殖中的關鍵問題。因為高體雅羅魚受精卵是粘性受精卵，所以存在受精卵易粘連的現(xiàn)象，從而導致受精卵長水霉、缺氧而死亡，魚苗孵化成活率較低，不能很好的滿足市場需求。假如用手輕柔受精卵使其分離，但是容易揉裂受精卵，導致受精卵死亡，因此高體雅羅魚的受精卵需要脫粘。
目前脫粘通常采用滑石粉溶液，脫粘后1-2粒狀態(tài)的受精卵占45％左右，該狀態(tài)下成活率僅僅為40％左右，剩余的受精卵粘連在一起，表面有一層白色膜，不透氣，使受精卵局部缺氧導致死亡。因此不能很好的解決受精卵易粘連的問題。
有鑒于此，有必要提出一種新的高體雅羅魚受精卵的脫粘方法。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，此方法脫粘效果好，可以大大提高受精卵成活率。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案為：
一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，包括：將受精卵混合液與粘土混合液按照質(zhì)量比為1:1-3混合，攪拌5-7分鐘，得脫粘混合液，再過濾脫粘混合液，得到脫粘后的受精卵，再用水洗干凈脫粘后的受精卵，得到受精卵；
其中，所述受精卵混合液為：將高體雅羅魚的魚卵和精液混合，攪拌0.5-1.5分鐘，再加入生理鹽水并攪拌0.5-1.5分鐘，得到受精卵混合液。
進一步的，所述受精卵混合液與粘土混合液的質(zhì)量比為1:2。
再進一步的，所述粘土混合液的質(zhì)量百分比濃度為15-25％。
再進一步的，所述粘土混合液的質(zhì)量百分比濃度為20％。
再進一步的，所述粘土為黃粘土。
進一步的，所述攪拌時間為5-7分鐘。
進一步的，所述過濾用40-60目的篩網(wǎng)過濾。
進一步的，所述魚卵的質(zhì)量與精液的體積比為1kg：1-2ml；
魚卵與生理鹽水的質(zhì)量比為100:20-33。
再進一步的，所述生理鹽水的質(zhì)量百分比濃度為0.6％-0.8％。
與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果在于：
1、本發(fā)明所述的高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，粘土的粒徑小于2μm，滑石粉的粒徑為0.074mm-20.3μm，粘土比滑石粉的粒徑更小，更加不會增加受精卵的比重，對受精卵的損害更小，可以提高受精卵成活率。
2、本發(fā)明所述的高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，粘土混合液具有較好的物理吸附性和表面活化性，可以起到較好的脫粘效果，使大多數(shù)的受精卵分散開來，從而提高受精卵成活率。
3、本發(fā)明所述的高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，方法簡便，成本低，還可以大大提高受精卵成活率。
具體實施方式
為了進一步闡述本發(fā)明一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，達到預期發(fā)明目的，以下結(jié)合較佳實施例，對依據(jù)本發(fā)明提出的一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，其具體實施方式、結(jié)構(gòu)、特征及功效，詳細說明如后。在下述說明中，不同的“一實施例”或“實施例”指的不一定是同一實施例。此外，一或多個實施例中的特定特征、結(jié)構(gòu)或特點可由任何合適形式組合。
在詳細闡述本發(fā)明一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法之前，有必要對本發(fā)明中提及的名詞和方法做進一步說明，以達到更好的效果。
親魚，指發(fā)育到性成熟階段，有繁殖能力的雄魚或雌魚，也叫種魚。
粘性受精卵，受精卵的比重大于水受精卵卵膜外層具有粘性物，產(chǎn)出后能粘附在水草等物體上，而不沉入水底。高體雅羅魚的魚卵粘連性不強，在成為受精卵后，具有很強的粘連性。
粘土是顆粒非常小的(<2μm)可塑的硅酸鋁鹽，是由地殼中含長石類巖石經(jīng)過長期風化和地質(zhì)的作用而生成的，在自然界中分成廣泛，種類繁多，粘土具有顆粒細、可塑性強、結(jié)合性好等優(yōu)點。粘土用水濕潤后具有可塑性，而且比表面積大，顆粒上帶有負電性，因此有很好的物理吸附性和表面化學活性，具有與其他陽離子交換的能力，非常容易與水、礦物質(zhì)和有機營養(yǎng)物質(zhì)相結(jié)合。粘土有超輕粘土、紙粘土、黃粘土等，本發(fā)明優(yōu)選的為黃粘土。
本發(fā)明采用的為體腔注射，注射部位為胸鰭基部。注射時，先把魚頭朝前，腹部向上擺好，然后將注射器指向頭的方向，與魚體成45-60度角，在胸鰭基部無鱗的凹陷處刺入。注射時應根據(jù)魚體大小掌握針頭刺入魚體的深度，避免過深傷及內(nèi)臟和骨骼，也應避免過淺，藥液反流體外。
促黃體生成激素釋放激素，又名LHRH-A2，為催產(chǎn)藥物，促黃體生成激素釋放激素是下丘腦分泌的一種肽類物質(zhì)，作用于垂體產(chǎn)生促性腺激素(LH)，也稱為促性腺激素釋放激素，對脊椎動物生殖的調(diào)控起重要作用。
馬來酸地歐酮，又名DOM，為多巴胺拮抗物，能阻斷多巴胺對促性腺激素(GTH)釋放的抑制作用，促進GTH釋放；是催產(chǎn)輔助藥，一般不單獨使用，與其他催產(chǎn)藥配合可提高催產(chǎn)率。
馬來酸地歐酮(DOM)與促黃體素釋放激素(LHRH-A2)聯(lián)合使用，可完全取代魚腦下垂體，能夠更好的促進性腺激素釋放和排卵，主要用于魚類的人工繁殖。
干法人工授精是魚類人工授精的一種，將親魚的卵和精液擠入無水容器中，使其接觸后加水漂洗的一種人工授精方法。
流水孵化：在有流水的裝置中使魚卵孵化的方法。即讓水緩慢的動起來，通過水體交換，保持水質(zhì)清潔。
在了解了本發(fā)明中提及的方法之后，下面將結(jié)合具體的實施例，對本發(fā)明一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法做進一步的詳細介紹：
實施例1.
具體操作步驟如下
(1)選擇親魚：對高體雅羅魚進行親本捕撈，從魚體的外部特征和用手觸摸判斷親魚性腺發(fā)育成熟度；性腺發(fā)育好的雌親魚，腹部松軟膨大，卵巢輪廓明顯，生殖孔紅突，身體兩側(cè)光滑，成熟的雄魚，頭部和身體兩側(cè)有粗糙感，頭部有珠星，輕壓腹部有白色精液流出，精液遇水散開；把選擇好的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:2或1：3進行配組，置于產(chǎn)卵池，準備人工催產(chǎn)；產(chǎn)卵池為水泥池，水深1米，面積為30平方米，水溫為18℃，4個產(chǎn)卵池分別放置25組、27組、30組和33組親魚，分別放置親魚數(shù)量為75條、84條、93條和101條。每條親魚的質(zhì)量在1kg左右，體重較輕的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:3配組。
(2)人工催產(chǎn)：將0.5mg的促黃體生成激素釋放激素與0.2g的馬來酸地歐酮，加入到100ml的質(zhì)量百分比濃度為0.7％的生理鹽水中，攪拌至溶解，得催產(chǎn)藥物；將催產(chǎn)藥物注射到每條親魚的胸鰭基部，雌魚每1公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物，雄魚每2公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物。催產(chǎn)藥物現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)人工授精：過了12小時后，每隔2小時檢查一次親魚的情況，當池壁見卵，雌魚的生殖孔益卵，產(chǎn)卵高峰開始，立即捕捉親魚；將白色瓷盆擦干，然后用毛巾將捕起的親魚擦干，將魚卵擠入盆中，并馬上擠入雄魚的精液，每1kg的魚卵加入1-2ml的精液，快速攪拌0.5分鐘，再加入300g的質(zhì)量百分比濃度為0.7％的生理鹽水，用鴨毛快速攪拌1分鐘，得到受精卵混合液。加入生理鹽水有利于授精；雄魚只去一次精液，因為第二次的精液質(zhì)量不如第一次的精液。
將取完魚卵和精液的親魚置于產(chǎn)后培育池，補充餌料，恢復親本體質(zhì)。
(4)脫粘：向混合均勻的受精卵混合液中加入質(zhì)量百分比濃度為20％的黃粘土混合液，每1kg的受精卵混合液加入2kg的黃粘土混合液，并用鴨毛攪拌7分鐘，得脫粘混合液，再用50目的篩網(wǎng)過濾脫粘混合液，得到脫粘后的受精卵，再用清水淘洗干凈脫粘后的受精卵，得到受精卵。
(5)人工孵化：把受精卵分別放入裝有250kg水的孵化桶中，每個孵化桶中放置48萬-51萬粒受精卵(即3kg左右的受精卵)，進行流水孵化，孵化水溫為18℃，溶氧量為8mg/L，10天后開始陸續(xù)出苗；待魚苗可以隨意游動時，進行開口投喂。
同時做了對比實驗，為對照組1，脫粘采用質(zhì)量百分比濃度為20％的滑石粉溶液，脫粘5分鐘，其他操作相同。
表1
從表1可以看出，對照組1中用滑石粉溶液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為45％，此狀態(tài)下受精卵成活率僅達40％，剩余絕大多數(shù)受精卵粘連在一起，表面有一層白色膜，不透氣，導致受精卵局部缺氧死亡，受精卵成活率較低；本實施例用粘土混合液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為85％，此狀態(tài)下受精卵成活率高達80％。經(jīng)比較可以得出，采用粘土混合液脫粘效果好，可以顯著提高受精卵成活率，增加魚苗供給量。
本實施例所述的一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，方法簡便效果好，成本不高；粘土混合液具有較好的物理吸附性和表面活化性，粘土的粒徑<2μm，比滑石粉的粒徑更小，不會增加受精卵的比重，對受精卵的損害更小，脫粘效果更好，可以減少受精卵粘連現(xiàn)象，大大提高受精卵成活率，增加魚苗供給量，更好的滿足市場需求，開闊高體雅羅魚的市場。
實施例2.
具體操作步驟如下
(1)選擇親魚：對高體雅羅魚進行親本捕撈，從魚體的外部特征和用手觸摸判斷親魚性腺發(fā)育成熟度；性腺發(fā)育好的雌親魚，腹部松軟膨大，卵巢輪廓明顯，生殖孔紅突，身體兩側(cè)光滑，成熟的雄魚，頭部和身體兩側(cè)有粗糙感，頭部有珠星，輕壓腹部有白色精液流出，精液遇水散開；把選擇好的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:2或1：3進行配組，置于產(chǎn)卵池，準備人工催產(chǎn)；產(chǎn)卵池為水泥池，水深1米，面積為30平方米，水溫為15℃，4個產(chǎn)卵池分別放置25組、28組、29組和30組親魚，分別放置親魚數(shù)量為76條、82條、86條和100條。每條親魚的質(zhì)量在1kg左右，體重較輕的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:3配組。
(2)人工催產(chǎn)：將0.4mg的促黃體生成激素釋放激素與0.2g的馬來酸地歐酮，加入到200ml的質(zhì)量百分比濃度為0.6％的生理鹽水中，攪拌至溶解，得催產(chǎn)藥物；將催產(chǎn)藥物注射到每條親魚的胸鰭基部，雌魚每1公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物，雄魚每2公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物。催產(chǎn)藥物現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)人工授精：過了12小時后，每隔2小時檢查一次親魚的情況，當池壁見卵，雌魚的生殖孔益卵，產(chǎn)卵高峰開始，立即捕捉親魚；將白色瓷盆擦干，然后用毛巾將捕起的親魚擦干，將魚卵擠入盆中，并馬上擠入雄魚的精液，每1kg的魚卵加入1-2ml的精液，快速攪拌1分鐘，再加入200g的質(zhì)量百分比濃度為0.6％的生理鹽水，用鴨毛快速攪拌0.5分鐘，得到受精卵混合液。加入生理鹽水有利于授精；雄魚只去一次精液，因為第二次的精液質(zhì)量不如第一次的精液。
(4)脫粘：向混合均勻的受精卵混合液中加入質(zhì)量百分比濃度為15％的黃粘土混合液，每1kg的受精卵混合液加入3kg的黃粘土混合液，并用鴨毛攪拌5分鐘，得脫粘混合液，再用40目的篩網(wǎng)過濾脫粘混合液，得到脫粘后的受精卵，再用清水洗干凈脫粘后的受精卵，得到受精卵。
(5)人工孵化：把受精卵分別放入裝有250kg水的孵化桶中，每個孵化桶中放置48萬-51萬粒受精卵(即3kg左右的受精卵)，進行流水孵化，孵化水溫為17℃，溶氧量為7mg/L，10天后開始陸續(xù)出苗；待魚苗可以隨意游動時，進行開口投喂。
同時做了對比實驗，為對照組2，脫粘采用質(zhì)量百分比濃度為15％的滑石粉溶液，脫粘5分鐘，其他操作相同。
表2
從表2知，對照組2中用滑石粉溶液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為46％，此狀態(tài)下受精卵成活率僅達39％，剩余絕大多數(shù)受精卵粘連在一起，表面有一層白色膜，不透氣，導致受精卵局部缺氧死亡，受精卵成活率較低；本實施例用粘土混合液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為81％，此狀態(tài)下受精卵成活率可以達到82％。經(jīng)比較可以得出，采用粘土混合液脫粘效果好，可以顯著提高受精卵成活率，增加魚苗供給量。
本實施例所述的一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，方法簡便效果好，成本不高；粘土混合液具有較好的物理吸附性和表面活化性，粘土的粒徑<2μm，比滑石粉的粒徑更小，不會增加受精卵的比重，對受精卵的損害更小，脫粘效果更好，可以減少受精卵粘連現(xiàn)象，大大提高受精卵成活率，增加魚苗供給量，更好的滿足市場需求，開闊高體雅羅魚的市場。
實施例3.
具體操作步驟如下
(1)選擇親魚：對高體雅羅魚進行親本捕撈，從魚體的外部特征和用手觸摸判斷親魚性腺發(fā)育成熟度；性腺發(fā)育好的雌親魚，腹部松軟膨大，卵巢輪廓明顯，生殖孔紅突，身體兩側(cè)光滑，成熟的雄魚，頭部和身體兩側(cè)有粗糙感，頭部有珠星，輕壓腹部有白色精液流出，精液遇水散開；把選擇好的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:2或1：3進行配組，置于產(chǎn)卵池，準備人工催產(chǎn)；產(chǎn)卵池為水泥池，水深1米，面積為30平方米，水溫為18℃，4個產(chǎn)卵池分別放置25組、29組、32組和33組親魚，分別放置親魚數(shù)量為77條、88條、94條和101條。每條親魚的質(zhì)量在1kg左右，體重較輕的親魚按照雌雄數(shù)量比為1:3配組。
(2)人工催產(chǎn)：將0.5mg的促黃體生成激素釋放激素與0.3g的馬來酸地歐酮，加入到100ml的質(zhì)量百分比濃度為0.8％的生理鹽水中，攪拌至溶解，得催產(chǎn)藥物；將催產(chǎn)藥物注射到每條親魚的胸鰭基部，雌魚每1公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物，雄魚每2公斤體重注射1ml的催產(chǎn)藥物。催產(chǎn)藥物現(xiàn)配現(xiàn)用。
(3)人工授精：過了12小時后，每隔3小時檢查一次親魚的情況，當池壁見卵，雌魚的生殖孔益卵，產(chǎn)卵高峰開始，立即捕捉親魚；將白色瓷盆擦干，然后用毛巾將捕起的親魚擦干，將魚卵擠入盆中，將魚卵擠入盆中，并馬上擠入雄魚的精液，每1kg的魚卵加入1-2ml的精液，快速攪拌1.5分鐘，再加入330g的質(zhì)量百分比濃度為0.8％的生理鹽水，用鴨毛快速攪拌1.5分鐘，得到受精卵混合液。加入生理鹽水有利于授精；雄魚只去一次精液，因為第二次的精液質(zhì)量不如第一次的精液。
將取完魚卵和精液的親魚置于產(chǎn)后培育池，補充餌料，恢復親本體質(zhì)。
(4)脫粘：向混合均勻的受精卵混合液中加入質(zhì)量百分比濃度為25％的黃粘土混合液，每1kg的受精卵混合液加入1kg的黃粘土混合液，并用鴨毛攪拌6分鐘，得脫粘混合液，再用60目的篩網(wǎng)過濾脫粘混合液，得到脫粘后的受精卵，再用清水淘洗干凈脫粘后的受精卵，得到受精卵。
(5)人工孵化：把受精卵分別放入裝有250kg水的孵化桶中，每個孵化桶中放置48萬-51萬粒受精卵(即3kg左右的受精卵)，進行流水孵化，孵化水溫為16℃，溶氧量為6mg/L，10天后開始陸續(xù)出苗；待魚苗可以隨意游動時，進行開口投喂。
同時做了對比實驗，為對照組3，脫粘采用質(zhì)量百分比濃度為25％的滑石粉溶液，脫粘6分鐘，其他操作相同。
表3
從表3可以看出，對照組中用滑石粉溶液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為44％，此狀態(tài)下受精卵成活率僅達43％，剩余絕大多數(shù)受精卵粘連在一起，表面有一層白色膜，不透氣，導致受精卵局部缺氧死亡，受精卵成活率較低；本實施例采用粘土混合液脫粘，受精卵1-2粒狀態(tài)為83％，此狀態(tài)下受精卵成活率達81％。經(jīng)比較可以得出，采用粘土混合液脫粘效果好，可以顯著提高受精卵成活率，增加魚苗供給量。
本實施例所述的一種高體雅羅魚受精卵的脫粘方法，采用粘土混合液進行脫粘，方法簡便效果好，成本不高；粘土混合液具有較好的物理吸附性和表面活化性，粘土的粒徑<2μm，比滑石粉的粒徑更小，不會增加受精卵的比重，對受精卵的損害更小，脫粘效果更好，可以減少受精卵粘連現(xiàn)象，大大提高受精卵成活率，增加魚苗供給量，更好的滿足市場需求，開闊高體雅羅魚的市場。
以上所述，僅是本發(fā)明實施例的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明實施例作任何形式上的限制，依據(jù)本發(fā)明實施例的技術實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明實施例技術方案的范圍內(nèi)。