本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
西藏?fù)碛胸S富的水資源，是世界的水塔。據(jù)統(tǒng)計，西藏有大小不等湖泊2000多個，湖泊總面積24000多km2，約占全國湖泊總面積的30％。在西藏遼闊的高原上，流域面積大于10000km2的河流有20余條，大于2000km2的河流在100多條，包括金沙江、瀾滄江、怒江、雅魯藏布江、朋曲、森格藏布等河，均發(fā)源或流經(jīng)西藏。在眾多的河流和湖泊中分布的魚類有三大類群，分別是裂腹魚類、高原鰍和鮡科魚類。其中拉薩裸裂尻(Schizopygopsis younghusbandi)隸屬于鯉形目(Cypriniformes)，鯉科(Cyprinidae)，裂腹魚亞科(Schizothoracinae)，裸列尻魚屬(Schizopygopsis)，俗稱土魚，是西藏高原重要的土著經(jīng)濟魚類之一，屬于冷水性魚類，主要分布在雅魯藏布江中上游干、支流及其附屬水體，為我國特有種。自然界中拉薩裸列尻雌魚多于雄魚，屬于同步分批產(chǎn)卵類型，一年產(chǎn)卵1次，主要集中在3月～4月，繁殖期較短。近年來，隨著西藏經(jīng)濟社會快速發(fā)展，交通運輸網(wǎng)更加便捷，消費市場需求不斷增大，人為濫捕現(xiàn)象極為嚴(yán)重；另外，在雅魯藏布江干流和支流上建立了水電站，阻礙了魚類洄游通道，迫使拉薩裸列尻魚的資源量趨于下降。
發(fā)明專利CN201410142435.X公開了一種軟刺裸裂尻魚人工繁殖和魚卵孵化方法，發(fā)明專利CN201310449845.4公開了一種黃河裸裂尻魚人工繁殖方法，兩種催產(chǎn)方法中的催產(chǎn)組合藥物和劑量均不適用于拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了實現(xiàn)拉薩裂腹魚的全人工繁育技術(shù)，本發(fā)明開展了拉薩裸列尻人工繁殖技術(shù)研究，提供了一種適用于拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法，該方法簡單，可操作性強，實踐應(yīng)用性好，可以實現(xiàn)野生拉薩裸列尻魚的規(guī)模化和標(biāo)準(zhǔn)化人工催產(chǎn)。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法，包括以下步驟：
A、親魚選擇
選擇身體健壯、發(fā)育良好、無明顯外傷和無畸形的野生拉薩裸列尻親魚，選擇好親魚在入池前用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，然后按雌雄分開于親魚暫養(yǎng)池中暫養(yǎng)1天；暫養(yǎng)池提前用高錳酸鉀侵泡一周，之后用清水清洗干凈；所述親魚暫養(yǎng)池水溫為11～12℃，溶氧為6～8mg/L，pH為7.2～7.5。
通過多年雅魯藏布江漁業(yè)資源調(diào)查，發(fā)現(xiàn)拉薩裸列尻產(chǎn)卵場水溫為11℃左右，溶氧高于6mg/L，pH為7.1～7.6之間，盡量模擬其在自然條件下產(chǎn)卵的水質(zhì)環(huán)境。
優(yōu)選地，雌雄親魚的配比為1:1.2，由于自然界中拉薩裸列尻魚雌魚多于雄魚，所以在人工催產(chǎn)繁殖的時候，盡可能多的利用好雄魚，又能保證雌魚卵子較好地受精，保證其規(guī)?；弋a(chǎn)人工催產(chǎn)繁殖。
B、人工催產(chǎn)
采用胸鰭基部注射法，注射劑量為：5μg促黃體素釋放激素類似物(LRH-A2)/kg+2.5mg鯉魚腦垂體(PG)/kg+1ml魚用生理鹽水；
所述魚用生理鹽水的濃度為0.65﹪。
雌魚注射2次，第一次注射30％，間隔24小時后第二次注射70％；雄魚注射1次，與雌魚第二次注射同步進(jìn)行，注射劑量減半。第二次催產(chǎn)藥物注射結(jié)束后將雌雄魚一起放入玻璃鋼的產(chǎn)卵池中，每隔4小時對親魚進(jìn)行觀察，查看循環(huán)水系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)，同時開啟水泵，進(jìn)行20分鐘流水刺激；
優(yōu)選地，注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm，以免在規(guī)?；斯ご弋a(chǎn)時針頭插入太深，傷及親魚心臟等重要器官。
優(yōu)選地，所述的流水刺激的流速是0.1-0.2m/s，與自然界產(chǎn)卵場水流速度相同。
C、人工授精
第二次催產(chǎn)藥物注射的24h后，檢查人工催產(chǎn)親魚，采用干法授精；
首先用干毛巾擦干雌魚體表面水分，動作輕柔，防止擦傷皮膚，將卵擠入直徑為30cm的白色瓷盆中，同樣動作和方法將雄魚精液擠到卵上，用羽毛輕輕攪動10秒，用瓢沿瓷盆壁緩緩加少許清水，剛淹沒卵為好，再次用羽毛輕輕攪動20秒，之后加清水洗三遍；
D、人工孵化
將受精卵放入孵化框內(nèi)，進(jìn)行微流水孵化，控制水溫為11～12℃，溶氧為6～8mg/L，pH為7.2～7.5。
優(yōu)選地，所述孵化框為網(wǎng)孔為10目的木質(zhì)孵化框，適于魚卵的孵化。
優(yōu)選地，孵化框內(nèi)的放卵密度為4.17萬粒/㎡。
優(yōu)選地，所述微流水孵化是指水流量為1.5立方米/小時，孵化效果較好。
本發(fā)明所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。首先玻璃鋼圓形桶表面光滑，野生拉薩裂腹魚放入之后有一定的應(yīng)激效應(yīng)，防止因應(yīng)激而擦傷魚體體表，直徑為1.2m將拉薩裸列尻魚分開暫養(yǎng)，有利于操作，方便管理；第二針之后選擇2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池，是因為此時要將雌雄親魚放在一起，另外，產(chǎn)卵池有助推泵，可以對親魚進(jìn)行一定的水流刺激。所以為了達(dá)到更好效果和方便操作才選擇直徑1.2m暫養(yǎng)池和直徑2.5m的產(chǎn)卵池。
本發(fā)明的有益效果在于：
1、該方法簡單，可操作性強，實踐應(yīng)用性好，可以實現(xiàn)野生拉薩裸列尻魚的規(guī)?；蜆?biāo)準(zhǔn)化人工催產(chǎn)，促進(jìn)拉薩裸列尻魚的養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展，有效保護(hù)和利用拉薩裸列尻野生資源。拉薩裸列尻魚的人工平均催產(chǎn)率達(dá)到90.4﹪、平均受精率達(dá)到87﹪。
2、本發(fā)明將雌雄親魚分開在親魚池中暫養(yǎng)1天，以適應(yīng)人工催產(chǎn)環(huán)境，第二次注射以后，再將雌雄魚放在一起，有利于促進(jìn)親魚精子和卵子達(dá)到成熟。
3、本發(fā)明根據(jù)拉薩裸列尻魚的特性，選擇了適于拉薩裸列尻魚的特定的催產(chǎn)藥物組合和劑量，5μg促黃體素釋放激素類似物/kg+2.5mg鯉魚腦垂體/kg+1ml魚用生理鹽水，得到最好的催產(chǎn)效果。
4、將雌雄親魚的配比設(shè)置為1:1.2，是由于自然界中拉薩裸列尻魚雌魚多于雄魚，所以在人工催產(chǎn)繁殖的時候，盡可能多的利用好雄魚，又能保證雌魚卵子較好地受精，保證其規(guī)模化催產(chǎn)人工催產(chǎn)繁殖。
5、本發(fā)明的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。首先玻璃鋼圓形桶表面光滑，野生拉薩裂腹魚放入之后有一定的應(yīng)激效應(yīng)，防止因應(yīng)激而擦傷魚體體表，直徑為1.2m將拉薩裸列尻魚分開暫養(yǎng)，有利于操作，方便管理；第二針之后選擇2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池，是因為此時要將雌雄親魚放在一起，另外，產(chǎn)卵池有助推泵，可以對親魚進(jìn)行一定的水流刺激。所以為了達(dá)到更好效果和方便操作才選擇直徑1.2m暫養(yǎng)池和直徑2.5m的產(chǎn)卵池。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
實施例1
一種拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法，包括以下步驟：
A、親魚選擇
選擇身體健壯、發(fā)育良好、無明顯外傷和無畸形的野生拉薩裸列尻親魚，選擇好親魚在入池前用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，然后按雌雄分開于親魚暫養(yǎng)池中暫養(yǎng)1天；暫養(yǎng)池提前用高錳酸鉀侵泡一周，之后用清水清洗干凈；所述親魚暫養(yǎng)池水溫為11℃，溶氧為6mg/L，pH為7.2；
B、人工催產(chǎn)
采用胸鰭基部注射法，注射劑量為：5μg促黃體素釋放激素類似物/kg+2.5mg鯉魚腦垂體/kg+1ml魚用生理鹽水；
雌魚注射2次，第一次注射30％，間隔24小時后第二次注射70％；雄魚注射1次，與雌魚第二次注射同步進(jìn)行，注射劑量減半。第二次催產(chǎn)藥物注射結(jié)束后將雌雄魚一起放入玻璃鋼的產(chǎn)卵池中，每隔4小時對親魚進(jìn)行觀察，查看循環(huán)水系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)，同時開啟水泵，進(jìn)行20分鐘流水刺激；
C、人工授精
第二次催產(chǎn)藥物注射的24h后，檢查人工催產(chǎn)親魚，采用干法授精；
D、人工孵化
將受精卵放入孵化框內(nèi)，進(jìn)行微流水孵化，控制水溫為11℃，溶氧為6mg/L，pH為7.2。
實施例2
一種拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法，包括以下步驟：
A、親魚選擇
選擇身體健壯、發(fā)育良好、無明顯外傷和無畸形的野生拉薩裸列尻親魚，選擇好親魚在入池前用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，然后按雌雄分開于親魚暫養(yǎng)池中暫養(yǎng)1天；暫養(yǎng)池提前用高錳酸鉀侵泡一周，之后用清水清洗干凈；所述親魚暫養(yǎng)池水溫為12℃，溶氧為8mg/L，pH為7.5；
B、人工催產(chǎn)
采用胸鰭基部注射法，注射劑量為：5μg促黃體素釋放激素類似物/kg+2.5mg鯉魚腦垂體/kg+1ml魚用生理鹽水；
雌魚注射2次，第一次注射30％，間隔24小時后第二次注射70％；雄魚注射1次，與雌魚第二次注射同步進(jìn)行，注射劑量減半。第二次催產(chǎn)藥物注射結(jié)束后將雌雄魚一起放入玻璃鋼的產(chǎn)卵池中，每隔4小時對親魚進(jìn)行觀察，查看循環(huán)水系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)，同時開啟水泵，進(jìn)行20分鐘流水刺激；
C、人工授精
第二次催產(chǎn)藥物注射的24h后，檢查人工催產(chǎn)親魚，采用干法授精；
D、人工孵化
將受精卵放入孵化框內(nèi)，進(jìn)行微流水孵化，控制水溫為12℃，溶氧為8mg/L，pH為7.5。
實施例3
一種拉薩裸列尻魚的人工催產(chǎn)方法，包括以下步驟：
A、親魚選擇
選擇身體健壯、發(fā)育良好、無明顯外傷和無畸形的野生拉薩裸列尻親魚，選擇好親魚在入池前用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，然后按雌雄分開于親魚暫養(yǎng)池中暫養(yǎng)1天；暫養(yǎng)池提前用高錳酸鉀侵泡一周，之后用清水清洗干凈；所述親魚暫養(yǎng)池水溫為11.5℃，溶氧為7mg/L，pH為7.3；
B、人工催產(chǎn)
采用胸鰭基部注射法，注射劑量為：5μg促黃體素釋放激素類似物/kg+2.5mg鯉魚腦垂體/kg+1ml魚用生理鹽水；
雌魚注射2次，第一次注射30％，間隔24小時后第二次注射70％；雄魚注射1次，與雌魚第二次注射同步進(jìn)行，注射劑量減半。第二次催產(chǎn)藥物注射結(jié)束后將雌雄魚一起放入玻璃鋼的產(chǎn)卵池中，每隔4小時對親魚進(jìn)行觀察，查看循環(huán)水系統(tǒng)正常運轉(zhuǎn)，同時開啟水泵，進(jìn)行20分鐘流水刺激；
C、人工授精
第二次催產(chǎn)藥物注射的24h后，檢查人工催產(chǎn)親魚，采用干法授精；
D、人工孵化
將受精卵放入孵化框內(nèi)，進(jìn)行微流水孵化，控制水溫為11.5℃，溶氧為7mg/L，pH為7.3。
實施例4
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
實施例5
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
實施例6
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
實施例7
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
所述的B步驟，流水刺激的流速是0.1m/s。
實施例8
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
所述的B步驟，流水刺激的流速是0.2m/s。
所述干法授精是指，首先用干毛巾擦干雌魚體表面水分，動作輕柔，防止擦傷皮膚，將卵擠入直徑為30cm的白色瓷盆中，同樣動作和方法將雄魚精液擠到卵上，用羽毛輕輕攪動10秒，用瓢沿瓷盆壁緩緩加少許清水，剛淹沒卵為好，再次用羽毛輕輕攪動20秒，之后加清水洗三遍。
實施例9
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
所述的B步驟，流水刺激的流速是0.15m/s。
所述干法授精是指，首先用干毛巾擦干雌魚體表面水分，動作輕柔，防止擦傷皮膚，將卵擠入直徑為30cm的白色瓷盆中，同樣動作和方法將雄魚精液擠到卵上，用羽毛輕輕攪動10秒，用瓢沿瓷盆壁緩緩加少許清水，剛淹沒卵為好，再次用羽毛輕輕攪動20秒，之后加清水洗三遍。
所述的D步驟，孵化框內(nèi)的放卵密度為4.1萬粒/㎡。
實施例10
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
所述的B步驟，流水刺激的流速是0.16m/s。
所述干法授精是指，首先用干毛巾擦干雌魚體表面水分，動作輕柔，防止擦傷皮膚，將卵擠入直徑為30cm的白色瓷盆中，同樣動作和方法將雄魚精液擠到卵上，用羽毛輕輕攪動10秒，用瓢沿瓷盆壁緩緩加少許清水，剛淹沒卵為好，再次用羽毛輕輕攪動20秒，之后加清水洗三遍。
所述的D步驟，孵化框內(nèi)的放卵密度為4.2萬粒/㎡。
所述D步驟的微流水孵化是指水流量為1.5立方米/小時。
實施例11
本實施例在實施例1的基礎(chǔ)上：
雌雄親魚的配比為1:1.2。
所述A步驟的親魚暫養(yǎng)池為1.2m玻璃鋼圓形桶，B步驟的產(chǎn)卵池為直徑為2.5m的玻璃鋼圓形產(chǎn)卵池。
所述B步驟在注射催產(chǎn)藥物時，針頭上面包裹阻擋物，暴露針頭長度為0.5cm。
所述的B步驟，流水刺激的流速是0.12m/s。
所述干法授精是指，首先用干毛巾擦干雌魚體表面水分，動作輕柔，防止擦傷皮膚，將卵擠入直徑為30cm的白色瓷盆中，同樣動作和方法將雄魚精液擠到卵上，用羽毛輕輕攪動10秒，用瓢沿瓷盆壁緩緩加少許清水，剛淹沒卵為好，再次用羽毛輕輕攪動20秒，之后加清水洗三遍。
所述的D步驟，孵化框內(nèi)的放卵密度為4.17萬粒/㎡。
所述D步驟的微流水孵化是指水流量為1.5立方米/小時。
所述D步驟的孵化框為網(wǎng)孔為10目的木質(zhì)孵化框。
本發(fā)明親魚的選擇
選擇身體健壯、發(fā)育良好、無明顯外傷和無畸形的親魚，挑選規(guī)格0.25～0.65kg，平均為0.42kg；雄魚230尾，規(guī)格0.25～0.56kg，平均為0.31kg，雌雄配比為1:1.2；將選擇好的野生拉薩裸列尻親魚入池前用高錳酸鉀進(jìn)行消毒，使用濃度為20g/m3侵泡10分鐘，然后按雌雄分開暫養(yǎng)于直徑為1.2m玻璃鋼圓形桶中，暫養(yǎng)池提前用高錳酸鉀(20g/m3)侵泡一周，之后用清水清洗干凈，親魚暫養(yǎng)池水溫為11～12℃，溶氧為6～8mg/L，pH為7.2～7.5。
本發(fā)明親魚雌雄鑒別
雌魚:雌魚個體相對較大，手摸身體光滑，腹部明顯膨大、松軟、有彈性、生殖孔明顯突出圓潤，臀鰭最末端鰭條不分叉。
雄魚：雄魚個體相對較小，腹部扁平，手摸身體粗糙，胸鰭至尾鰭軀干上布有追星，臀鰭鰭條發(fā)達(dá)，具有明顯的鋸齒狀，輕輕擠壓腹部有乳白色精液流出，并能在水中很快散開。
2016年4月2日，4月8日，4月12日，分三批進(jìn)行催產(chǎn)。第一次選擇發(fā)育較好的雌魚51尾，雄魚68尾；第二次選擇雌魚82尾，雄魚90尾；第三次選擇雌魚59尾，雄魚72。
其中催產(chǎn)雌魚共計174尾，平均催產(chǎn)率達(dá)到90.4﹪，共獲得受精卵70萬粒，平均受精率達(dá)到87﹪。
表1.拉薩裸列尻催產(chǎn)率
表2.拉薩裸列尻受精率
以上所述實施例僅表達(dá)了本發(fā)明的具體實施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。