本發(fā)明涉及一種長牡蠣育種技術及方法，具體是涉及利用高溫進行雜交育種得到一種適于北方生長的、耐高溫的長牡蠣新品系。
背景技術：
長牡蠣(Crassostrea gigas)，因其生長速度快、適應性強、肥滿度高、生產(chǎn)成本低、管理方便以及養(yǎng)殖效益高等特點，已成為我國最主要貝類養(yǎng)殖品種之一。由于長牡蠣在5-6月份進行繁殖，夏季長牡蠣因繁殖體內(nèi)糖原含量較低、口感差，并不適宜食用，因此通常養(yǎng)殖的長牡蠣食用期一般在冬季。
目前隨著互聯(lián)網(wǎng)和冷鏈物流的發(fā)展，長牡蠣是水產(chǎn)品中最合適冬季生吃和活體運輸?shù)乃a(chǎn)品,再加上營養(yǎng)豐富,味道鮮美，市場供不應求，價格飛漲，養(yǎng)殖面積也在不斷擴大。然而，長牡蠣自從人工育苗以來，缺乏系統(tǒng)有效的育種工作，育苗所用親本都是來源從未經(jīng)過遺傳改良的野生型群體。特別是大部分育苗場繁殖親體的遺傳背景和質量都未加選擇，采用的雄性親本極少，往往導致遺傳多樣性降低，種質退化，表現(xiàn)出養(yǎng)殖的長牡蠣出肉率低、形態(tài)不規(guī)則、不耐高溫、死亡率提高等問題，特別近年來北方長牡蠣的大量死亡已嚴重影響了長牡蠣的養(yǎng)殖積極性和產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。長牡蠣死亡主要發(fā)生在每年夏季高溫期的8-9月份，死亡率在30-80%，特別在9月份中旬溫度急劇變化時死亡率最高。
而巖牡蠣(Crassostrea nippona)是牡蠣類中個體較大型品種之一，是牡蠣中的貴族。巖牡蠣主要分布在日本鹽度、溫度較高深水海區(qū), 其具有體大、出肉率高以及耐高溫、耐高鹽、抗病能力強等特點，是最新開發(fā)的優(yōu)良牡蠣養(yǎng)殖種類。由于巖牡蠣在日本的繁殖季節(jié)在8-9月份的高溫期，巖牡蠣最佳食用期是在夏季，在日本又叫夏牡蠣。
為了解決北方近年來長牡蠣夏季高溫期的死亡問題，利用長牡蠣和巖牡蠣都屬于巨蠣屬，長牡蠣耐低溫、不耐高溫，而巖牡蠣耐高溫、不耐低溫的生物學特點，但二者繁殖是在春、夏二個不同季節(jié)，如何解決二者的發(fā)育同步性是其技術瓶頸，通過雜交培育一種耐高溫長牡蠣品系克服目前北方長牡蠣死亡問題，保證牡蠣養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展，是解決其技術難題的關鍵。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種利用不同耐溫品種之間雜交進行耐高溫長牡蠣培育的方法，得到的長牡蠣新品系耐高溫、且出肉率高，用以解決目前北方長牡蠣品質不佳、且死亡率較高的問題。
為達到上述目的，本發(fā)明采取的具體技術方案為：
一種北方耐高溫長牡蠣新品系的培育方法，包括以下步驟：
a、親本采集：采集經(jīng)分子標記確定北方長牡蠣和日本巖牡蠣作為純種親本；根據(jù)巖牡蠣生物學特點，挑選殼高在10-15cm的2-3齡巖牡蠣做親貝，挑選殼高在8-12cm的1-2齡的長牡蠣為親貝；
b、同步促熟培育：在室內(nèi)培育池進行升溫促熟培育，為使巖牡蠣和長牡蠣性腺發(fā)育同步，巖牡蠣要比長牡蠣提前30-45天入池培育，入池水溫應在巖牡蠣性腺發(fā)育的生物學最低溫度15℃以上，親貝穩(wěn)定生長2-3天后，每天升溫1℃，且保持在26-28℃溫度下培育親貝成熟待產(chǎn)，當15℃以上的有效積溫達到350-400℃時，即可準備產(chǎn)卵、排精；長牡蠣根據(jù)巖牡蠣升溫促熟性腺發(fā)育情況后，適時入池進行促熟培育，升溫至22-23℃時恒溫培育待產(chǎn)，通過控制不同溫度培育實現(xiàn)巖牡蠣和長牡蠣的同步發(fā)育成熟產(chǎn)卵；
c、剖取精、卵：當長牡蠣和巖牡蠣親貝性腺同步發(fā)育成熟以后，通過解剖、鏡檢區(qū)分雌雄貝，嚴格分離，獲取長牡蠣成熟卵子和巖牡蠣精子，進行兩物種間雜交受精，得到兩個親本的雜交子代；
d、雜交子代培育：當獲得了雜交組以后，進行雜交子代培育，按照牡蠣常規(guī)育苗方法進行培育管理，經(jīng)過幼蟲培育獲得雜交稚貝，稚貝經(jīng)過中間育成及養(yǎng)成獲得雜交子一代F1成體；
e、遺傳鑒定：將培育出長牡蠣和巖牡蠣的雜交后代，采用微衛(wèi)星分子標記技術方法，測出雜交后的遺傳連鎖圖譜，根據(jù)測量長牡蠣和巖牡蠣的遺傳連鎖圖譜，確認雜交子一代是長牡蠣和巖牡蠣雜交子一代；
f、品系純化：以d步驟培育的雜交子一代F1成體作為親本，通過截頭選擇法篩選耐30-35℃高溫的5-10％長牡蠣雜交個體做為親本，再進行子代自繁通過若干代連續(xù)選育，即得到一種耐高溫的長牡蠣新品系。
本發(fā)明的有益效果：實踐證明，本發(fā)明采用北方養(yǎng)殖的長牡蠣雌貝和耐高溫的巖牡蠣雄貝雜交培育的雜交長牡蠣苗種在養(yǎng)殖中突出的優(yōu)點是耐高溫、成活率高、生長快速以及出肉率高；與普通品種的長牡蠣相比，本發(fā)明得到的長牡蠣新品系生長速度可提高20%以上，成活率提高了50%以上，耐受溫度提高了3-4℃，出肉率提高了35%以上，說明了此雜交長牡蠣新品種具有明顯的雜種優(yōu)勢。本發(fā)明得到的長牡蠣新品種適宜在國內(nèi)推廣養(yǎng)殖，改善目前國內(nèi)牡蠣養(yǎng)殖現(xiàn)狀。
具體實施方式
以下通過具體實施例對本發(fā)明進一步解釋和說明。
實施例1：
一種北方耐高溫長牡蠣新品系的培育方法，包括以下步驟：
a、親本采集：采集經(jīng)分子標記確定北方長牡蠣和日本巖牡蠣作為純種親本；根據(jù)巖牡蠣生物學特點，挑選殼高在10-15cm的2-3齡巖牡蠣做親貝，挑選殼高在8-12cm的1-2齡的長牡蠣為親貝；
b、同步促熟培育：在室內(nèi)培育池進行升溫促熟培育，為使巖牡蠣和長牡蠣性腺發(fā)育同步，巖牡蠣要比長牡蠣提前30-45天入池培育，入池水溫應在巖牡蠣性腺發(fā)育的生物學最低溫度15℃以上，親貝穩(wěn)定生長2-3天后，每天升溫1℃，且保持在26-28℃溫度下培育親貝成熟待產(chǎn)，當15℃以上的有效積溫達到350-400℃時，即可準備產(chǎn)卵、排精；長牡蠣根據(jù)巖牡蠣升溫促熟性腺發(fā)育情況后，適時入池進行促熟培育，升溫至22-23℃時恒溫培育待產(chǎn)，通過控制不同溫度培育實現(xiàn)巖牡蠣和長牡蠣的同步發(fā)育成熟產(chǎn)卵；
c、剖取精、卵：當長牡蠣和巖牡蠣親貝性腺同步發(fā)育成熟以后，通過解剖、鏡檢區(qū)分雌雄貝，嚴格分離，獲取長牡蠣成熟卵子和巖牡蠣精子，進行兩物種間雜交受精，得到兩個親本的雜交子代；
d、雜交子代培育：當獲得了雜交組以后，進行雜交子代培育，按照牡蠣常規(guī)育苗方法進行培育管理，經(jīng)過幼蟲培育獲得雜交稚貝，稚貝經(jīng)過中間育成及養(yǎng)成獲得雜交子一代F1；
e、遺傳鑒定：將培育出長牡蠣和巖牡蠣的雜交后代，采用微衛(wèi)星分子標記技術方法，測出雜交后的遺傳連鎖圖譜，根據(jù)測量長牡蠣和巖牡蠣的遺傳連鎖圖譜，確認雜交子一代是長牡蠣和巖牡蠣雜交子一代；
f、品系純化：以d步驟培育的雜交子一代F1作為親本，通過截頭選擇法篩選耐30-35℃高溫的5-10％長牡蠣雜交個體做為親本，再進行子代自繁通過若干代連續(xù)選育，即可以獲得耐高溫、成活率高、生長速度快、出肉率高的長牡蠣新品系，且能夠穩(wěn)定遺傳。
實施例2：利用實施例1得到的長牡蠣新品系進行養(yǎng)殖
煙臺芝罘灣養(yǎng)殖海區(qū)
采用淺海筏式夾繩吊養(yǎng)牡蠣的方式進行普通養(yǎng)殖，每畝養(yǎng)殖12-15萬粒牡蠣苗，經(jīng)1-2年即可達到商品規(guī)格進行出售和加工。
實施例3：利用實施例1得到的長牡蠣新品系進行養(yǎng)殖
威海乳山灣養(yǎng)殖海區(qū)
采用淺海筏式夾繩吊養(yǎng)牡蠣的方式進行普通養(yǎng)殖，每畝養(yǎng)殖12-15萬粒牡蠣苗，經(jīng)1-2年即可達到商品規(guī)格進行出售和加工。
由實施例1和3可得，與普通品種的長牡蠣相比，本發(fā)明提供的長牡蠣新品系生長速度可提高20%以上，成活率提高了50%以上，耐高溫度提高了3-4℃，出肉率提高了35%，此雜交長牡蠣新品種具有明顯的雜種優(yōu)勢；說明了采用北方養(yǎng)殖的長牡蠣雌貝和耐高溫的巖牡蠣雄貝雜交培育的雜交長牡蠣苗種在養(yǎng)殖中突出的優(yōu)點是耐高溫、成活率高、生長快速、出肉率高。
上述實施例只為說明本發(fā)明的技術構思及特點，并不能以此限制本發(fā)明的保護范圍。凡根據(jù)本發(fā)明精神實質所做的等效變換或修飾，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。