本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)育苗技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法。

背景技術(shù)：

捕蠅草（Dionaea muscipula），英文名稱為Venus Flytrap，是原產(chǎn)于北美洲的一種多年生草本植物，是一種非常有趣的食蟲植物。隨著人們生活水平日益改善，越來越多的花友開始種植捕蠅草。然而，在原產(chǎn)地的捕蠅草在生存上卻受到人類活動(dòng)的威脅。人口快速增加因而剝奪捕蠅草的生存空間，而且因?yàn)槿藶楦深A(yù)、自然野火的發(fā)生，使得這些原產(chǎn)地開始長(zhǎng)出一些小型灌木，遮蔽捕蠅草的陽光，造成一些捕蠅草品種的瀕臨滅絕。

捕蠅草的繁殖方式主要是播種繁殖和葉插繁殖。

采用播種繁殖存在的問題為：捕蠅草可以自花授粉，但通常得進(jìn)行人工授粉才確實(shí)會(huì)結(jié)果，捕蠅草因雌雄蕊不會(huì)一起成熟，人工授粉較難成功，捕蠅草的種子不耐保存，且種子非常細(xì)小直徑不到一毫米，不易保存，極易損壞。

采用葉插繁殖存在的問題為：采用葉插繁殖新芽形成很慢，并且不同品種對(duì)溫濕度，光照等要求不一樣，葉插繁殖難以成功。

采用傳統(tǒng)播種繁殖、葉插繁殖，有著成功率極低，繁殖效率緩慢等缺點(diǎn)，難以滿足捕蠅草市場(chǎng)需求。目前，關(guān)于捕蠅草的繁殖研究很少，國(guó)內(nèi)進(jìn)行工廠化生產(chǎn)捕蠅草的企業(yè)很少，還沒有一種關(guān)于捕蠅草組織培養(yǎng)育苗的方法，因此在一定程度上制約了捕蠅草的工廠化生產(chǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是：提供一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法，提高捕蠅草組培苗栽培的成活率，節(jié)約成本，為捕蠅草工廠化生產(chǎn)提供關(guān)鍵技術(shù)。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法，包括以下步驟：

（1）培養(yǎng)基制備：培養(yǎng)基包括誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；將配制好的誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基分別以每瓶80ml裝入培養(yǎng)瓶中，采用121℃、0.5MPa進(jìn)行滅菌25min后冷卻凝固備用；

（2）外植體制備：在春夏季節(jié)，選用成熟健壯4年以上的捕蠅草作為外植體母體，取新發(fā)出且鮮綠的芽頭作為外植體，并進(jìn)行消毒、清洗；

（3）誘導(dǎo)培養(yǎng)：接種器具進(jìn)行滅菌，雙手消毒后，將步驟（2）中制備得到的外植體在超凈工作臺(tái)內(nèi)，按無菌操作要求把外植體置于步驟（1）制備得到的誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基中，外植體傷口處接觸到誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基，蓋好培養(yǎng)瓶蓋后放置于消毒后的培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)30天，即可誘導(dǎo)培養(yǎng)出完整小植株；

（4）生根培養(yǎng)：將誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的完整小植株在超凈工作臺(tái)內(nèi)按無菌要求轉(zhuǎn)接入步驟（1）制備得到的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)2~3個(gè)月；

（5）套袋馴化：將生根培養(yǎng)得到幼苗取出，用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中，用透光的袋子罩住整株植株，放置在散光通風(fēng)處悶養(yǎng)20-30天后取走袋子即可。

優(yōu)選的，步驟（2）中外植體消毒、清洗步驟是：先用流水沖洗30min，之后用吸水紙吸干水份，然后于超凈工作臺(tái)上用75%的乙醇浸泡1~3min，期間不斷搖晃外植體，再用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min，期間不斷搖晃外植體，再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在無菌吸水紙上吸干水份，即可。

優(yōu)選的，步驟（3）中，進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)室溫度控制在25℃，濕度40~50%，光照4500Lux每天10小時(shí)。

優(yōu)選的，步驟（4）中，生根培養(yǎng)的溫度控制在25℃，光照5500Lux每天12小時(shí)。

優(yōu)選的，步驟（5）中，泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中泥炭土與珍珠巖的體積比為4:1。

本發(fā)明的有益效果：采用上述方法后，本發(fā)明解決了傳統(tǒng)播種繁殖、葉插繁殖成功率極低、繁殖效率緩慢等問題，運(yùn)用本發(fā)明進(jìn)行捕蠅草組織培養(yǎng)育苗，培養(yǎng)基繁殖系數(shù)達(dá)到4~5，繁殖一批僅需4~6個(gè)月的時(shí)間，具有繁殖系數(shù)高、繁殖速度快的特點(diǎn)，而且繁育出來的種苗具有與母體相同的植物特征，抗性好。大大解決了捕蠅草繁殖困難的問題，有利于捕蠅草進(jìn)行規(guī)?；?、工廠化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步介紹：

一種捕蠅草組織培養(yǎng)育苗方法，包括以下步驟：

（1）培養(yǎng)基制備：培養(yǎng)基包括誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基為2/3MS+6-BA01mg/L+IBA0.2mg/ml+蔗糖30g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+活性碳0.2g/L+瓊脂5g/L+ph5.9；將配制好的誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基分別以每瓶80ml裝入培養(yǎng)瓶中，采用121℃、0.5MPa進(jìn)行滅菌25min后冷卻凝固備用；

（2）外植體制備：在春夏季節(jié)，選用成熟健壯4年以上的捕蠅草作為外植體母體，取新發(fā)出且鮮綠的芽頭作為外植體，并進(jìn)行消毒、清洗；其中，外植體消毒、清洗步驟是：先用流水沖洗30min，之后用吸水紙吸干水份，然后于超凈工作臺(tái)上用75%的乙醇浸泡1~3min，期間不斷搖晃外植體，再用無菌水沖洗3~5遍后用無菌鑷子取出放置在濃度為0.1~0.2%升汞中浸泡3~5min，期間不斷搖晃外植體，再用無菌水沖洗5~8遍后用無菌鑷子取出放置在無菌吸水紙上吸干水份，即可；

（3）誘導(dǎo)培養(yǎng)：接種器具進(jìn)行滅菌，雙手消毒后，將步驟（2）中制備得到的外植體在超凈工作臺(tái)內(nèi)，按無菌操作要求把外植體置于步驟（1）制備得到的誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基中，外植體傷口處接觸到誘導(dǎo)增殖培養(yǎng)基，蓋好培養(yǎng)瓶蓋后放置于消毒后的培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)30天，培養(yǎng)室溫度控制在25℃，濕度40~50%，光照4500Lux每天10小時(shí)，即可誘導(dǎo)培養(yǎng)出完整小植株；

（4）生根培養(yǎng)：將誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的完整小植株在超凈工作臺(tái)內(nèi)按無菌要求轉(zhuǎn)接入步驟（1）制備得到的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)2~3個(gè)月，生根培養(yǎng)的溫度控制在25℃，光照5500Lux每天12小時(shí)；

（5）套袋馴化：將生根培養(yǎng)得到幼苗取出，用1000倍多菌靈浸泡10min后流水沖洗后種植于泥炭土與珍珠巖混合基質(zhì)中，泥炭土與珍珠巖的體積比為4:1，用透光的袋子罩住整株植株，放置在散光通風(fēng)處悶養(yǎng)20-30天后取走袋子即可。

以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說明。對(duì)于本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。