本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領域，具體涉及一種中華沙鰍的人工繁殖方法。
背景技術(shù)：
中華沙鰍(學名：Botia superciliaris)南方俗稱“穿金妹”，為鰍科沙鰍屬的魚類，是中國的特有物種。小型魚類，體長9～18cm，體態(tài)纖細，體色艷麗，體表有美麗的斑紋；吻長而尖，須3對，頤下具1對鈕狀突起；眼后有倒刺，末端超過眼后緣；無鱗，腹鰭末端不達肛門，肛門靠近臀鰭起點，尾柄較低。中華沙鰍分布于溫州永嘉楠溪江、瀾滄江、四川東部盆地和盆周低山區(qū)江段，湖北宜昌、甘肅文縣亦有分布，觀賞價值高、食用價值高，肉質(zhì)細嫩、味道鮮美，營養(yǎng)價值和藥用價值兼?zhèn)洌皇袌鰞r格達到400～500元/千克，是長江中上游特產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的名貴珍稀鰍科魚類，也是中國的特有物種。
目前中華沙鰍在四川省內(nèi)有少量人工養(yǎng)殖，但規(guī)模不大，人工繁殖技術(shù)也很不成熟，尤其是循環(huán)水系統(tǒng)中培育成熟并人工催產(chǎn)繁殖成功的案例未見報道，主要原因在于雄魚精量很少，往往在人工授精前會先對雄魚進行擠精檢查，等到授精時雄魚往往只能擠出1-2滴精液或更本就擠不出精液，造成受精率很低或完全不受精，致使人工繁殖失敗，這是造成不能規(guī)?；a(chǎn)的重要原因之一。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種中華沙鰍人工繁殖方法，該方法簡單，操作方便，可以實現(xiàn)野生中華沙鰍的馴養(yǎng)和規(guī)?；娜斯し敝?，促進中華沙鰍養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，從而達到有效保護中華沙鰍野生資源的目的。
為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)措施：
一種中華沙鰍人工繁殖方法，其步驟是：
1)野生親魚的收集：
將收集的野生中華沙鰍連同氧氣袋一起放入養(yǎng)殖缸中先進行水溫過渡30分鐘，然后篩選體質(zhì)強壯、受傷較輕的親魚或后備親魚，先用青霉素和食鹽混合水溶液浸泡20-30分鐘，浸泡濃度為每千克水含青霉素20萬IU及食鹽20-30克，再轉(zhuǎn)入親魚培育缸中用20ppm的恩諾沙星或鹽酸土霉素浸泡24小時后換水，用0.5ppm的亞甲基藍溶液浸泡24小時，防止水霉滋生；
2)野生親魚的馴養(yǎng)：
2-3天后，開始投喂活鮮的水蚯蚓，日投喂量從魚體體重的0.3％逐漸增加到3％；此時開始進行轉(zhuǎn)食，最初的飼料比例為：水蚯蚓占日投喂量的80％，人工配合飼料占日投喂量的20％，人工飼料為蛋白含量在40％以上的甲魚料或鰻魚料；一周后逐漸減少水蚯蚓投喂量，增加人工飼料的投喂量，最后逐步變成人工配合飼料占日投喂量80％、水蚯蚓活餌占日投喂量20％的飼料比例，日投喂總量為魚體體重的2-3％；
3)親魚培育：
A、選擇體表無傷、體重40-100g、經(jīng)過馴化的野生中華沙鰍作為后備親魚；
B、將后備親魚投放到循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行培育，養(yǎng)殖密度≤3kg/m3，控制親魚池的進水量為0.2-0.9L/s，培育用水的pH為7.2-7.9、溶解氧為5-10mg/L、水溫為13-26℃，每日投喂量為親魚體重的1-3％，每天投喂二次，蛋白質(zhì)含量大于40％的甲魚料或鰻魚料占日投喂量的80％，水蚯蚓活餌占日投喂量的20％；
C、選擇無病、無傷、無畸形的中華沙鰍作為繁殖親魚，雌、雄魚體重大于50g/尾，將繁殖親魚投放到親魚培育缸中進行強化培育，初始養(yǎng)殖密度≤2kg/m3，親魚培育池的進水量為0.5-0.9L/s，強化培育用水的pH為7.5-7.9、溶解氧為5-10mg/L、水溫為17-23℃，每日投喂量為親魚體重的2-4％，每天投喂三次，水蚯蚓占日投喂量的50％，蛋白質(zhì)含量大于40％的人工配合飼料甲魚料或鰻魚料占日投喂量的50％；
4)人工催產(chǎn)：
A、選擇性成熟的繁殖親魚，雌、雄數(shù)量比例為1：2-3，雌、雄親魚放入不同的網(wǎng)箱中；
B、在性成熟的親魚胸鰭基部注射催產(chǎn)劑，每尾魚每次注射量為0.1-0.3mL，如果雌魚的催產(chǎn)劑A一次性注射，則雄魚的催產(chǎn)劑為A，注射量為雌魚的1/2；如果雌魚的催產(chǎn)劑分2次注射，兩次注射的間隔時間為8-10小時，第一針注射催產(chǎn)劑B、第二針注射催產(chǎn)劑C，B和C的成分部分相同，且所述的相同成分在C中的劑量為B中的2-5倍，雄魚注射催產(chǎn)劑C，注射量為雌魚第二針注射量的1/2，在雌魚注射第二針時一次性注射；所述催產(chǎn)劑A、B、C為催產(chǎn)劑1、催產(chǎn)劑2、絨毛膜促性腺激素中的任意二或三種混合，所述催產(chǎn)劑1為鯉魚腦垂體或馬來酸地歐酮中任意一種，所述催產(chǎn)劑2為促黃體素釋放激素類似物A2或A3中任意一種，雌魚催產(chǎn)劑總注射劑量為鯉魚腦垂體4-10mg/kg或馬來酸地歐酮5-10mg/kg，促黃體素釋放激素類似物A2或A3 6-20μg/kg，絨毛膜促性腺激素500-1200國際單位/kg；將注射了催產(chǎn)劑的親魚放入催產(chǎn)池中，雌雄同池，同時用流水刺激，觀察親魚的活動情況；
5)人工授精：
當發(fā)現(xiàn)雄魚追逐雌魚，雌魚有產(chǎn)卵現(xiàn)象時，捕撈親魚，先檢查雌魚排卵是否順暢，如果順暢，再將雌雄魚放入200ppm的MS222水溶液中進行麻醉，1-2分鐘后親魚完全被麻醉，此時先將雄魚撈出，擦去親魚體表和肛門部位的水分，輕輕擠壓腹部并用干燥的吸管吸取精液備用，按雌雄數(shù)量比為1：2-3進行配比，然后將麻醉好的雌魚撈出擦去體表水分，將魚卵和精液擠入盆中，用羽毛攪拌1-2分鐘使精卵充分混合，再加入2-3倍體積的質(zhì)量百分濃度為0.4-0.5％的生理鹽水攪拌1-2分鐘，并用清水漂洗2-3次，轉(zhuǎn)入孵化桶中孵化，孵化桶事先采用20ppm的高錳酸鉀消毒和清洗；
6)人工孵化：
受精卵在孵化桶中的孵化密度為30-40萬粒/m3，進水量為0.05-0.2L/s，進水量的大小以受精卵在孵化桶內(nèi)均勻翻滾為度，孵化期間保持孵化桶內(nèi)水體溶氧量大于6mg/L，pH值在7.5-7.9，孵化水溫為19-23℃，其他理化因子符合國家養(yǎng)殖用水標準；7-10天后鰾充氣，即可轉(zhuǎn)到魚苗培育缸或網(wǎng)箱內(nèi)用蛋黃或豐年蟲或輪蟲開口并進入魚苗培育階段。
作為優(yōu)選，所述步驟4)中，雌魚的催產(chǎn)劑一次性注射時，催產(chǎn)劑A為促黃體素類似物釋放激素A2或A3 8-16μg/kg，馬來酸地歐酮6-8mg/kg或鯉魚腦垂體6-10mg/kg、絨毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意兩種或三種藥物的混合物。
作為優(yōu)選，所述步驟4)中，雌魚的催產(chǎn)劑分2次注射時，第一次注射的催產(chǎn)劑B為促黃體素類似物釋放激素A2或A3 2-4μg/kg、馬來酸地歐酮或鯉魚腦垂體1-2mg/kg的混合物，第二次注射的催產(chǎn)劑C為促黃體素類似物釋放激素A2或A3 6-15μg/kg、鯉魚腦垂體或馬來酸地歐酮5-8mg/kg、絨毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意兩種或三種藥物的混合物。
作為優(yōu)選，人工授精后對產(chǎn)后中華沙鰍親魚進行康復培育，注射硫酸慶大霉素或青霉素1-2次，每次每公斤魚體注射劑量為硫酸慶大霉4000-5000國際單位或青霉素1-2萬國際單位；并再用0.2-0.3ppm的二氧化氯浸泡8-24小時，預防爛鰓病和腐皮病。
作為優(yōu)選，對人工受精后的中華沙鰍親魚用0.2-0.5ppm的水霉凈或2-4ppm的五倍子藥粉浸泡8-12小時。
作為優(yōu)選，所述步驟6)中，在受精卵在進入孵化器之前，將孵化器用濃度為10-20ppm的高錳酸鉀浸泡10-30分鐘。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點及有益效果：
該方法簡單，可操作性強，實踐應用性好，可以實現(xiàn)一種中華沙鰍的規(guī)?；敝澈宛B(yǎng)殖，其馴養(yǎng)成活率大于80％、催產(chǎn)率大于70％、受精率和孵化率分別大于40％和75％。中華沙鰍雄魚的精液量很少，就1-2滴，我們在檢查雄魚發(fā)育狀況時都會擠壓雄魚腹部，看是否能擠出精液，到進行人工授精時往往都擠不出精液。所以在人工繁殖過程中選好雌魚后，挑選雄魚的時候?qū)⒈緛砭蜕俚木河酶稍镂芪轿芾锉４?，避免了浪費，保證了魚卵的受精率，防止了因雄魚無精液造成的人工繁殖失敗。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。
實施例1：
中華沙鰍人工繁殖方法，其步驟是：
1、中華沙鰍的馴養(yǎng)方法：
1)野生親魚馴化
A、2013年8-12月在四川攀枝花境內(nèi)金沙江水域以網(wǎng)捕的方式收集野生中華沙鰍親本500多尾，運往大唐觀音巖水電站魚類增殖站內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中進行暫養(yǎng)；
B、到站后先進行水溫過渡，即將收集的野生中華沙鰍連同氧氣袋一起放入養(yǎng)殖缸中，當時缸內(nèi)水溫22℃，裝魚的氧氣袋水溫15℃左右，在浸泡過渡30分鐘后氧氣袋內(nèi)水溫上升至21℃左右時，將魚從氧氣袋內(nèi)倒入一方形盒內(nèi)，篩選體質(zhì)強壯、受傷較輕的親魚，放入循環(huán)水系統(tǒng)親魚培育缸內(nèi)進行暫養(yǎng)并隔離治療，治療方法為先用2％質(zhì)量濃度的食鹽加200ppm的青霉素浸泡20-25分鐘，然后換水用20ppm的恩諾沙星溶液浸泡24小時后換水，再用0.5ppm的亞甲基藍溶液浸泡24小時，防止細菌感染和水霉滋生。
C、2-3天后，待魚體傷口和活動恢復正常后即可開始投餌，剛開始投喂活鮮的水蚯蚓，投喂量為魚體重的0.3％左右，投喂量逐漸增加到3％；待中華沙鰍攝食正常后開始進行轉(zhuǎn)食，同時添加投喂蛋白含量在40％以上的甲魚料或鰻魚料，投喂方法是先將飼料加水和成面團，搓成長條形投喂，投喂飼料比例為：水蚯蚓占日投喂量的80％，人工配合飼料占日投喂量的20％；一周后逐漸減少水蚯蚓投喂量，增加人工飼料的投喂量，最后逐步變成人工配合飼料占日投喂量80％，水蚯蚓活餌占日投喂量20％，日投喂量為魚體體重的2-3％；經(jīng)過15天左右的投喂，親魚全部轉(zhuǎn)食成功。
2)親魚培育
待魚體完全康復、轉(zhuǎn)食成功、攝食正常后即進入循環(huán)水系統(tǒng)中進行培育，循環(huán)水系統(tǒng)配備了2臺進水泵、2臺1次回水泵、2臺2次回水泵、2臺增氧風機、1套滾筒過濾機、1套生物過濾器、1臺紫外線消毒器和20口直徑3米的圓形培育缸和2套冷熱機組，實行封閉式內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖模式，系統(tǒng)水循環(huán)量為8次/日，補水量0.5m3/日，每口缸的進水量為0.3-0.5L/s，水溫穩(wěn)定在21℃左右，DO大于7mg/L，pH 6.9-7.8，NH4+小于0.2mg/L，NO2-0.1mg/L，其他各項理化指標符合國家養(yǎng)殖水標準。500條魚分2口3米直徑的圓形養(yǎng)殖缸內(nèi)培育，每口缸放養(yǎng)250尾，重15kg左右，養(yǎng)殖密度2.5kg/m3左右。每天投喂2次，投喂量為體重的1-4％。到2014年4月檢查，成活425尾，成活率達85％。
2、中華沙鰍的人工繁殖方法：
1)親魚培育
A、選擇體表無傷、體重40-100g的300尾經(jīng)過馴化的野生中華沙鰍作為后備親魚；
B、2014年2月將挑選的中華沙鰍后備親魚投放到循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)3米圓形親魚培育缸中進行培育，養(yǎng)殖密度≤3kg/m3，親魚池的進水流量為0.2-0.5L/s，培育用水的pH為7.2-7.9，溶解氧為5-10mg/L，水溫為13-23℃，每日投喂量為親魚體重的1-3％，每天投喂二次，分別為上午9點、下午5點，人工配合飼料為甲魚料或鰻魚料(蛋白質(zhì)含量大于40％，粉料揉成面團投喂)占日投喂量的80％，水蚯蚓活餌占日投喂量的20％，培育時間為1年；培育過程中除加強營養(yǎng)管理外，還要加強沖水、吸污排污管理，保證充足的溶氧，定期檢測水溫水質(zhì)，定期進行藥物預防疾病等日常管理。
C、到2015年1月，從后備親魚中，選擇無病、無傷、無畸形的中華沙鰍作為繁殖親魚，雄魚體重為50-150g/尾、雌魚體重為50-120g/尾，將繁殖親魚投放到親魚培育缸中進行強化培育，養(yǎng)殖密度≤2kg/m3，親魚培育池的進水流量為0.5-0.9L/s，強化培育用水的pH為7.5-7.9，溶解氧為5-10mg/L，水溫為17-22℃，每日投喂量為親魚體重的2-4％，每天投喂三次，水蚯蚓占日投喂量的50％，蛋白質(zhì)含量大于40％的人工配合飼料甲魚料或鰻魚料占日投喂量的50％。
2)人工催產(chǎn)
A、2015年5月20日，開始檢查繁殖親魚的性成熟情況，每周檢查2次，檢查方法為：①性成熟雌魚：將雌魚魚體向上，稍露水面，兩側(cè)明顯看到卵巢輪廓，肛門突起，再用手輕壓腹部，柔軟富有彈性；②性成熟雄魚：腹部扁平，肛門無突起，輕壓腹部兩側(cè)，有少量乳白色的濃稠精液流出；5月28日挑選性成熟的親魚60尾，即雌魚20尾，雄魚40尾，雌雄比例為1:2，將雌魚和雄魚暫時分別放入兩個網(wǎng)箱中，同時將用于受精卵孵化的孵化桶用20ppm的高錳酸鉀藥水進行消毒處理10-20分鐘，然后用水清洗干凈，晾干。
B、在性成熟的雌魚胸鰭基部注射催產(chǎn)劑藥物，催產(chǎn)劑藥物分1次或者2次注射，每尾魚每次催產(chǎn)劑藥物的注射量為0.1-0.3mL，如果催產(chǎn)劑藥物采用1次注射，催產(chǎn)劑藥物為混合催產(chǎn)劑A藥液；如果催產(chǎn)劑藥物采用2次注射，第一次注射時催產(chǎn)劑藥物為混合催產(chǎn)劑B藥液，第二次注射時催產(chǎn)劑藥物為混合催產(chǎn)劑C藥液，混合催產(chǎn)劑C和混合催產(chǎn)劑B中的部分催產(chǎn)劑組分是相同的(催產(chǎn)劑B和C的組分至少有一種相同且至少有一種不相同)，對于各相同催產(chǎn)劑組分，其在混合催產(chǎn)劑C中的劑量為在混合催產(chǎn)劑B中的2-5倍，兩次注射時間間隔為8-10小時；
對選出性成熟的雄魚，在其胸鰭基部注射一次催產(chǎn)劑藥物，當雌魚采用一次注射催產(chǎn)劑藥物A時，催產(chǎn)劑采用混合催產(chǎn)劑A藥液，但注射劑量為雌魚的一半；當雌魚采用兩次注射催產(chǎn)劑藥物時，催產(chǎn)劑藥物采用混合催產(chǎn)劑B和C藥液，第一針雌魚用混合催產(chǎn)劑B，雄魚不注射，第二針雌雄魚都注射混合催產(chǎn)劑C，但雄魚注射劑量為雌魚的一半，兩針的時間間隔為8-10小時；
所述催產(chǎn)劑A、B、C為催產(chǎn)劑1、催產(chǎn)劑2、絨毛膜促性腺激素中任意二或三種混合，所述催產(chǎn)劑1為鯉魚腦垂體或馬來酸地歐酮中任意一種，所述催產(chǎn)劑2為促黃體素釋放激素類似物A2或A3中任意一種，雌魚催產(chǎn)劑總注射劑量為鯉魚腦垂體4-10mg/kg或馬來酸地歐酮5-10mg/kg，促黃體素釋放激素類似物A2或A3 6-20μg/kg，絨毛膜促性腺激素500-1200國際單位/kg，將注射了催產(chǎn)劑的親魚放入催產(chǎn)池中，雌雄同池，同時不停地用流水刺激，并觀察親魚的活動情況。
3)人工授精
當發(fā)現(xiàn)雄魚追逐雌魚，雌魚往前急游，突然停下，身體左右擺動，并且發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)卵現(xiàn)象時，立即捕撈雌魚進行檢查，輕壓雌魚腹部，看是否有魚卵流出。如有即進行全面篩選，選出能順利擠出卵粒的雌魚，同時按雌雄比為1：2的比例挑選雄魚。第一批選擇了10尾雌魚和20為雄魚，將它們放入準備好的200ppm的MS222水溶液中進行麻醉，1-2分鐘后親魚完全被麻醉，先將雄魚撈出，擦去親魚體表和肛門部位的水分，輕輕擠壓腹部慢慢擠出精液，用干燥的吸管吸取精液備用，1尾雌魚準備2尾雄魚的精液，然后將麻醉好的雌魚撈出擦去體表水分，將魚卵擠入盆中，然后將精液擠入盆中，用羽毛輕輕攪拌1-2分鐘，接著加入2-3倍質(zhì)量百分濃度為0.4％的魚用生理鹽水，再攪拌1-2分鐘后，用清水洗受精卵2-3次，加水，再將受精卵放到事前準備好的孵化桶中進行流水孵化。人工授精的整個過程應避免陽光和燈光直射；然后進行下一組的人工授精操作，方法同樣，2小時后再次進行篩選，看是否有成熟的雌魚，用同樣方法進行人工授精。到最后進行統(tǒng)計，共順產(chǎn)雌魚15尾，產(chǎn)卵量為30000粒左右，催產(chǎn)率達75％；人工授精后可以對產(chǎn)后中華沙鰍親魚進行康復護理，注射硫酸慶大霉素或青霉素1-2次，每次每公斤魚體注射劑量為硫酸慶大霉素4000-5000國際單位或青霉素1-2萬國際單位；再轉(zhuǎn)入親魚護理池用0.2-0.3ppm的二氧化氯浸泡8-24小時，預防爛鰓病和腐皮病。
4)人工孵化
先將孵化器用濃度為10-15ppm的高錳酸鉀浸泡消毒20-30分鐘，再用清水徹底清洗干凈加水，然后再將30000粒卵移入一口孵化桶內(nèi)孵化，孵化桶規(guī)格為高1.2m，上口直徑為80cm、錐形，孵化密度為30-35萬粒/m3，孵化桶從底部進水，流量控制在0.05-0.2L/s之間，大小可以受精卵能在桶內(nèi)均勻滾動程度作適當調(diào)整，孵化用水必需符合漁業(yè)水質(zhì)GB11607-89的規(guī)定，溶解氧大于6mg/L，pH值為7.1-7.9，孵化溫度為19-21℃，8小時后達到原腸中期，隨機撈取200粒左右魚卵進行受精率統(tǒng)計，受精率為41％；經(jīng)過30小時的孵化魚苗開始脫膜，再經(jīng)過6天左右的孵化魚苗腰點全部出齊，轉(zhuǎn)入水花培育階段，并計數(shù)，共出苗9220尾，孵化率為75％。
實驗結(jié)果為，中華沙鰍在循化水系統(tǒng)中馴養(yǎng)成活率尾85％、催產(chǎn)率達75％、受精率41％、孵化率75％。
實施例2：
中華沙鰍人工繁殖方法，其步驟是：
1、中華沙鰍的馴養(yǎng)方法：
A、2014年3-6月在四川攀枝花境內(nèi)金沙江水域以網(wǎng)捕的方式收集野生中華沙鰍親本200多尾，運往大唐觀音巖水電站魚類增殖站內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中進行暫養(yǎng)；
B、到站后先進行水溫過渡，即將收集的野生中華沙鰍連同氧氣袋一起放入養(yǎng)殖缸中，當時氧氣袋內(nèi)水溫12℃，養(yǎng)殖缸內(nèi)水溫16℃，進行水溫過渡30分鐘后，氧氣袋內(nèi)水溫升至15℃左右，此時將袋內(nèi)親魚倒入一方形塑料盒中，篩選體質(zhì)強壯、受傷較輕的親魚180尾，放入一口直徑為2米的親魚培育缸內(nèi)進行暫養(yǎng)并隔離治療，治療方法為先用2.5-3％質(zhì)量分數(shù)的食鹽加200ppm的青霉素浸泡25-30分鐘，然后換水并用20ppm的鹽酸土霉素浸泡24小時后換水，再用0.5ppm的亞甲基藍溶液浸泡24小時，防止水霉滋生；
C、2-3天后，魚體傷口和活動恢復正常后可開始投餌，剛開始每天投喂少量的活鮮的水蚯蚓，投喂量為魚體重的0.3％，投喂量逐漸增加到3％；待中華沙鰍攝食正常后開始進行轉(zhuǎn)食，并添加蛋白含量在40％以上的人工配合飼料甲魚料或鰻魚料，投喂方法為：先加水將其和成面團，再將其搓成長條形直接投喂，人工配合飼料投喂量占日總投喂量的20％，水蚯蚓占日總投喂量的80％；一周后逐漸減少水蚯蚓投喂量，增加人工飼料的投喂量，最后逐步變成人工配合飼料占日總投喂量80％，水蚯蚓活餌占日總投喂量20％，日投喂量為魚體體重的2-3％；
D、待魚體完全康復活動、攝食正常后即進入循環(huán)水系統(tǒng)中進行培育。循環(huán)水系統(tǒng)主要條件為：進水泵2臺、1次回水泵2臺、2次回水泵2臺、增氧風機2臺、滾筒過濾機1套、生物過濾器1套、紫外線消毒器1臺、直徑3米的圓形培育缸20口和冷熱機組2套。系統(tǒng)水循環(huán)量為8次/日，流量0.5L/s左右，水溫穩(wěn)定在21℃左右，DO大于7mg/L，pH6.9-7.8，NH4+小于0.2mg/L，NO2-0.1mg/L，其他各項理化指標符合國家養(yǎng)殖水標準。180尾魚在1口3米直徑的圓形養(yǎng)殖缸內(nèi)培育，養(yǎng)殖密度2kg/m3左右。每天投喂2次，早上8：00、晚上18:00各投喂一次，日投喂量為體重的2-4％。到2014年10月檢查，成活152尾，成活率達84.4％。
2、中華沙鰍的人工繁殖方法：
1)親魚培育
A、選擇體表無傷、體重40-100g的經(jīng)過馴化的野生中華沙鰍120尾作為后備親魚；
B、2014年10月將中華沙鰍后備親魚投放到循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行培育，養(yǎng)殖密度≤3kg/m3，親魚池的進水流量為0.5-0.9L/s，培育用水的pH為7.2-7.9，溶解氧為5-10mg/L，水溫為18-26℃，每日投喂量為親魚體重的1-3％，，每天投喂二次，分別為上午9點、下午5點，人工配合飼料為甲魚料或鰻魚料(蛋白質(zhì)含量為40％-45％，粉料揉成面團投喂)占日投喂量的80％，水蚯蚓活餌占日投喂量的20％，培育時間為15個月；培育過程中除加強營養(yǎng)管理外，還要加強沖水、吸污排污管理，保證充足的溶氧，定期檢測水溫水質(zhì)，定期進行藥物預防疾病等日常管理；
C、到2016年1月，從后備親魚中，選擇無病、無傷、無畸形的中華沙鰍作為繁殖親魚，且雄魚體重為50-150g/尾、雌魚體重為50-120g/尾，將繁殖親魚投放到親魚培育缸中進行強化培育，養(yǎng)殖密度≤2kg/m3，親魚培育池的進水流量為0.5-0.9L/s，強化培育用水的pH為7.5-7.9、溶解氧為5-10mg/L、水溫為20-23℃，每日投喂量為親魚體重的3-4％，每天投喂三次，水蚯蚓占日投喂量的50％，蛋白質(zhì)含量大于40％的人工配合飼料甲魚料或鰻魚料占日投喂量的50％；
2)人工催產(chǎn)
A、2016年5月26日，開始檢查繁殖親魚的性成熟情況，每周檢查2次，檢查方法為：①性成熟雌魚：將雌魚魚體向上，稍露水面，兩側(cè)明顯看到卵巢輪廓，肛門突起再用手輕壓腹部，柔軟富有彈性；②性成熟雄魚：腹部扁平，肛門無突起，輕壓腹部兩側(cè)，有少量乳白色的濃稠精液流出；5月28日將挑選的性成熟的親魚120尾，即雌魚30尾，雄魚90尾，雌雄數(shù)量比例為1:3，將雌魚和雄魚暫時分別放入兩個網(wǎng)箱中，同時準備供受精卵孵化的孵化桶用20ppm的高錳酸鉀藥水進行消毒處理10-20分鐘，然后用水清洗干凈，晾干；
B、上午10:00在性成熟的親魚胸鰭基部注射催產(chǎn)劑，每尾魚每次注射量為0.1-0.3mL，雌魚的催產(chǎn)劑分2次注射，第一次注射的催產(chǎn)劑B為促黃體素類似物釋放激素A2或A3(二選一)2-4μg/kg、馬來酸地歐酮或鯉魚腦垂體(二選一)1-2mg/kg的混合物，第二次注射的催產(chǎn)劑C為促黃體素類似物釋放激素A2或A3(二選一)6-15μg/kg、鯉魚腦垂體或馬來酸地歐酮(二選一)5-8mg/kg、絨毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意兩種或三種藥物的混合物，催產(chǎn)劑B和C的成分部分相同(催產(chǎn)劑B和C的成分至少有一種相同且至少有一種不同)，兩次注射時間間隔為8-10小時；雄魚僅在雌魚進行第二次注射時才進行注射，雄魚的注射劑量為雌魚第二針注射量的1/2。
3)人工授精
注射催產(chǎn)劑15小時后，發(fā)現(xiàn)雄魚追逐雌魚，雌魚往前急游，突然停下，身體左右擺動，并且發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)卵現(xiàn)象時，立即捕撈雌魚進行檢查，如果輕壓雌魚腹部，有魚卵流出，將雌雄魚放入200ppm的MS222水溶液中進行麻醉，1-2分鐘后親魚完全被麻醉。第一批選擇15尾雌魚和45為雄魚放入200ppm的MS222水溶液中進行麻醉，1-2分鐘后親魚完全被麻醉，此時先將雄魚撈出，擦去親魚體表和肛門部位的水分，輕輕擠壓腹部慢慢擠出精液，用干燥的吸管吸取精液備用，然后將麻醉好的雌魚逐條撈出擦去雌魚體表水分，將魚卵擠入盆中，然后將精液擠入盆中，用羽毛攪拌1-2分鐘進行人工授精，接著加入2-3倍質(zhì)量百分濃度為0.5％的魚用生理鹽水，攪拌1-2分鐘，用清水洗受精卵2-3次，加水，再將受精卵放到事先準備好的孵化桶中進行流水孵化，人工授精的整個過程應避免陽光和燈光直射。接著挑選第二批、第三批，用上述方法進行人工授精。此次催產(chǎn)的30尾雌魚，其中順產(chǎn)21尾，產(chǎn)卵量為40000粒左右，催產(chǎn)率達70％；
在進行人工取精的過程中發(fā)現(xiàn)有很多雄魚根本就擠不出精液或者就1滴精液，如果采取直接擠精卵的盆內(nèi)進行授精的話可能受精率會很低或受精失敗。所以這種授精方法在中華沙鰍的人工授精過程中尤為重要。
人工授精后對產(chǎn)后的中華沙鰍親魚用0.2-0.5ppm的水霉凈或2-4ppm的五倍子藥粉浸泡8-12小時。
4)人工孵化
孵化器用濃度為15-20ppm的高錳酸鉀浸泡10-20分鐘，并徹底清洗再加入清水。將40000粒卵移入經(jīng)過消毒的兩口高1.2m，上口直徑為80cm的錐形孵化桶內(nèi)孵化，孵化密度為35-40萬粒/m3，打開孵化桶底進水閥并調(diào)節(jié)進水量，流速控制在0.05-0.5L/s的范圍，流水量以受精卵能在桶內(nèi)均勻滾動為度，孵化用水必需符合漁業(yè)水質(zhì)GB11607-89的規(guī)定，溶解氧大于6mg/L，pH值為7.2-7.9，孵化溫度為20-23℃，8小時后達到原腸中期，隨機撈取200粒左右魚卵進行受精率統(tǒng)計，受精率為50％；經(jīng)過40小時左右的孵化，受精卵就開始破膜孵出魚苗，魚苗孵出后3-4天，仔魚發(fā)育至鰾一室期，鰾充氣后一天，將魚苗撈出進行計數(shù)，共出苗15200尾，孵化率為76％，計數(shù)完成后將魚苗轉(zhuǎn)入培苗池中設置的網(wǎng)箱中開口，進入苗種培育階段。
實驗結(jié)果為，中華沙鰍在循化水系統(tǒng)中馴養(yǎng)成活率尾84.4％、催產(chǎn)率達70％、受精率50％、孵化率76％。
實施例3：
中華沙鰍人工繁殖方法，其步驟是：
1)野生親魚馴化
A、2015年8-11月在云南麗江境內(nèi)金沙江水域以網(wǎng)捕的方式收集野生親本100多尾，運往漢能金安橋水電站魚類增殖站內(nèi)循環(huán)水系統(tǒng)中進行暫養(yǎng)。
B、到站后現(xiàn)進行水溫過渡，然后篩選，將體質(zhì)強壯、受傷較輕的個體挑選出來，放到一口親魚培育缸內(nèi)進行暫養(yǎng)并隔離治療。治療方法為先用2-3％的食鹽加200ppm的青霉素洗浴20-30分鐘，然后換水使用20ppm的恩諾沙星溶液浸泡24小時后換水，再用0.5ppm的亞甲基藍溶液浸泡24小時防止水霉滋生。
C、待魚體傷口和活動開始恢復正常后開始投餌。剛開始每天投喂少量的活鮮的水蚯蚓，投喂量為魚體重的0.3％，之后逐漸將投喂量增加到3％；待中華沙鰍攝食正常后開始增加飼料投喂量，并添加蛋白含量在40％以上的人工配合飼料甲魚料或鰻魚料，投喂方法為：先加水將人工飼料和成面團，再將其搓成長條形直接投喂，人工飼料投喂量占日總投喂量的20％，水蚯蚓占日總投喂量的80％；一周后逐漸減少水蚯蚓投喂量，增加人工飼料的投喂量，最后逐步變成人工配合飼料占日總投喂量80％，水蚯蚓活餌占日總投喂量20％，日投喂量為魚體體重的2-3％；最后完全投喂人工飼料，這一方面是因為水蚯蚓太臟，會帶進許多有害病菌和寄生蟲，另一方面人工飼料來源簡單，操作方便，并能添加一些藥物可進行有效的預防疾病。
D、待魚體完全康復、攝食正常后即進入循環(huán)水系統(tǒng)中進行培育，完成馴養(yǎng)過程。到2016年2月檢查，成活81尾，成活率達81％。
2)親魚培育
A、選擇體表無傷、體重40-100g、經(jīng)過馴養(yǎng)的野生中華沙鰍作1200尾作為后備親魚；
B、將選擇好的中華沙鰍后備親魚投放到車間循環(huán)水系統(tǒng)中進行培育，養(yǎng)殖密度≤4kg/m3，親魚池的進排水流量為0.2-0.9L/s，培育用水的pH為7.2-7.9，溶解氧為5-10mg/L，水溫為13-26℃，培育飼料為甲魚料或鰻魚料(粉料揉成面團投喂)，培育飼料中蛋白質(zhì)的質(zhì)量百分含量大于40％，培育飼料的每日投喂量為所有親魚體重的1-3％，每天投喂二次，分別為上午9點、下午5點，培育時間為1個月；培育過程中除加強營養(yǎng)管理外，還要加強沖水、吸污排污管理，保證充足的溶氧，定期檢測水溫水質(zhì)，定期進行藥物預防疾病等日常管理。
C、到2016年2月，從經(jīng)過后備培育的中華沙鰍后備親魚中，選擇無病、無傷、無畸形的中華沙鰍作為繁殖親魚100尾，雄魚體重為50-150g/尾、雌魚體重為50-120g/尾，將繁殖親魚投放到親魚培育缸中進行強化培育，初始養(yǎng)殖密度≤2kg/m3，親魚培育池的進排水流量為0.5-0.9L/s，強化培育用水的pH為6.8-7.9、溶解氧為5-10mg/L、水溫為17-23℃，強化培育飼料為甲魚料或鰻魚料和水蚯蚓，甲魚料和水蚯蚓的投喂比例為1:1，強化培育飼料中蛋白質(zhì)的質(zhì)量百分含量為42-45％，強化培育飼料每日投喂量為親魚體重的2-4％，每天投喂二次，分別為上午9點、下午5點；
3)人工催產(chǎn)
A、2016年5月18日，開始檢查繁殖親魚的性成熟情況，每周檢查2次，檢查方法為：①性成熟雌魚：將雌魚魚體向上，稍露水面，兩側(cè)明顯看到卵巢輪廓，肛門突起再用手輕壓腹部，柔軟富有彈性；②性成熟雄魚：腹部扁平，肛門無突起，輕壓腹部兩側(cè)，有少量乳白色的濃稠精液流出。5月28日將挑選的性成熟的親魚80尾，即雌魚22尾，雄魚58尾。選擇好的雌魚和雄魚暫時分別放入兩個網(wǎng)箱中，同時準備供受精卵孵化的孵化桶用重量百分濃度為20ppm的高錳酸鉀藥水進行消毒處理10-20分鐘，然后用水清洗干凈，晾干。
B、性成熟繁殖親魚全部選擇完畢后，上午10:00在性成熟的親魚胸鰭基部注射催產(chǎn)劑，每尾魚每次注射量為0.1-0.3mL，雌魚的催產(chǎn)劑一次性注射，催產(chǎn)劑A為促黃體素類似物釋放激素A2或A3(二選一)8-16μg/kg、馬來酸地歐酮6-8mg/kg或鯉魚腦垂體6-10mg/kg(二選一)、絨毛膜促性腺激素500-1200IU/kg中任意二種或三種的混合物，雄魚的催產(chǎn)劑同樣為A，但是雄魚的注射量僅為雌魚注射劑量的1/2。
4)人工授精
注射催產(chǎn)劑20小時后，發(fā)現(xiàn)雄魚追逐雌魚，雌魚往前急游，突然停下，身體左右擺動，并且發(fā)現(xiàn)有產(chǎn)卵現(xiàn)象時，立即捕撈雌魚進行檢查，輕壓雌魚腹部，如有魚卵流出，就放到一方形盒中暫養(yǎng)準備做人工授精。第一批我們挑選了5尾雌魚、10尾雄魚。具體操作方法為：將挑好的15尾親魚(雌魚5尾、雌魚10尾)放入200ppm的MS222水溶液中進行麻醉，1-2分鐘后親魚完全被麻醉，這時先將雄魚逐條撈出，擦去親魚體表和肛門部位的水分，輕輕擠壓腹部慢慢擠出精液，用準備好的干燥的吸管吸取備用。10尾雄魚中只有6尾能吸出很少量的精液，每尾只有1-2滴精液，其余4尾擠不出精液；接著將雌魚逐條撈出，擦去雌魚體表水分，將魚卵擠入盆中，然后迅速將精液擠入盆中，用羽毛攪拌1-2分鐘，加入2-3倍質(zhì)量百分濃度為0.4-0.5％的魚用生理鹽水，再攪拌1-2分鐘，然后用清水洗卵2-3次，加入少量清水，最后倒入事先準備好的孵化桶中進行流水孵化，人工授精的整個過程應避免陽光和燈光直射；2小時后進行第二次挑選，共挑選了雌魚10尾、雄魚20尾，用同樣的方法進行人工授精。又過2小時進行第三次篩選，只挑選了1尾雌魚、3尾雄魚，用同樣的方法進行了人工授精。此次催產(chǎn)雌魚22尾，順產(chǎn)16尾，產(chǎn)卵量為30000粒左右，催產(chǎn)率達72.7％。
5)人工孵化
將30000粒卵移入一口高1.2m，上口直徑為80cm的錐形孵化桶內(nèi)孵化，孵化桶從底部進水，流量0.2-0.5L/s，以受精卵能在桶內(nèi)均勻滾動為度，孵化用水必需符合漁業(yè)水質(zhì)GB11607-89的規(guī)定，溶解氧應在6mg/L以上，pH值為7.5-7.9，孵化溫度為20-23℃，8小時后達到原腸中期，隨機撈取200粒左右魚卵進行受精率統(tǒng)計，受精率為41％，即獲受精卵12300粒左右。
經(jīng)過40小時左右的孵化，受精卵開始破膜孵出魚苗，在魚苗孵出后1-5天的早期培育期間，溶解氧應為6mg/L以上，魚苗孵出后3-4天，仔魚發(fā)育至鰾一室期，鰾充氣后一天，將魚苗撈出進行計數(shù)，共出苗8850尾，孵化率為72％。計數(shù)后將水花轉(zhuǎn)入培苗池中，進入水花魚苗培育階段。
實驗結(jié)果為，中華沙鰍在循化水系統(tǒng)中馴養(yǎng)成活率尾81％、催產(chǎn)率達72.7％、受精率41％、孵化率72％。