本發(fā)明涉及衛(wèi)生害蟲防治技術(shù)，具體屬于一種利用復(fù)方苦參注射液藥渣防治蚊蟲的方法。
背景技術(shù)：
：中草藥是祖先留給我們的巨大寶庫，有著悠久的應(yīng)用歷史。近年來，中草藥產(chǎn)品以其整體調(diào)節(jié)能力強(qiáng)和毒副作用小等特點(diǎn)越來越受到人們的青睞。中草藥產(chǎn)業(yè)也逐步由粗放型生產(chǎn)發(fā)展為規(guī)模化和現(xiàn)代化生產(chǎn)，帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益的同時也產(chǎn)生了大量藥渣。據(jù)統(tǒng)計我國中草藥產(chǎn)業(yè)每年產(chǎn)生藥渣己達(dá)3000萬噸。傳統(tǒng)的藥渣處理方法包括焚燒、填埋、固定區(qū)域堆放等，不僅帶來了極大的浪費(fèi)，還需要企業(yè)投入大量資金和人力，同時造成了嚴(yán)重的環(huán)境污染，危及公眾健康。落后的藥渣處理方法已不符合綠色生產(chǎn)和循環(huán)經(jīng)濟(jì)的理念。對中草藥藥渣的循環(huán)利用有著重要的現(xiàn)實(shí)意義：首先是廢物利用，節(jié)約生產(chǎn)成本；其次保護(hù)環(huán)境，實(shí)現(xiàn)綠色生產(chǎn)；此外還可獲得高附加值的產(chǎn)品，使得利潤最大化。因此，中藥企業(yè)和社會各界愈加重視中草藥藥渣的資源化利用，投入人力物力以拓寬藥渣的應(yīng)用，達(dá)到變廢為寶的目的。目前，中草藥藥渣已可用于制備飼料、肥料、活性炭等，但在利用藥渣防治害蟲的應(yīng)用研究尚處于空白階段?？鄥⒁蚱浜鄥A和黃酮類化學(xué)物，常被應(yīng)用于植物源殺蟲劑中。1999年，鄭永權(quán)等人首次報道苦參黃酮類化合物具有殺蟲活性。2005年，通過生物活性篩選研究，發(fā)現(xiàn)苦參中多種成分包括苦參堿、氧化苦參堿、槐果堿、野靛堿等，對多種害蟲都具有殺蟲活性。這為我們開發(fā)利用復(fù)方苦參注射液藥渣提供了理論依據(jù)。復(fù)方苦參注射液又名巖舒注射液，由山西振東制藥股份有限公司研發(fā)的專利產(chǎn)品(專利號：200510074841.8)，是該公司的拳頭產(chǎn)品。該藥具有清熱利濕，涼血解毒，散結(jié)止痛等功效，臨床上廣泛用于多種癌癥的輔助治療，銷售情況良好，發(fā)展?jié)摿^大。復(fù)方苦參注射液的藥渣主要為提取后的苦參的干燥根和白土苓的干燥根莖。由于植物細(xì)胞壁的阻隔和現(xiàn)有提取技術(shù)的局限，藥渣中殘留有大量的有效成分，具有開發(fā)成綠色殺蟲劑的潛力。蚊類作為一種病媒生物，可傳播瘧疾、登革熱、黃熱病、絲蟲病等，嚴(yán)重危害人類健康。長期以來，化學(xué)藥劑一直是防控蚊蟲的重要手段之一，但是不合理使用使得蚊蟲產(chǎn)生很強(qiáng)的抗藥性，同時也帶來環(huán)境污染、生態(tài)破壞及威脅人類健康等諸多問題。植物源殺蟲藥劑因其低毒、安全、環(huán)保等特點(diǎn)，越來越受到人們的青睞。由于蚊蟲的卵、幼蟲、蛹皆生活在水中，定期使用植物源殺蟲藥劑消滅或控制水體中蚊蟲孽生，既綠色環(huán)保又可有效杜絕疾病傳播。因此，利用復(fù)方苦參注射液藥渣研發(fā)蚊蟲防治的方法，既能達(dá)到廢物循環(huán)再利用的目的，又能產(chǎn)生相應(yīng)的經(jīng)濟(jì)效益，還可控制疾病傳播，具有一舉多得的特點(diǎn)，符合現(xiàn)代生產(chǎn)綠色和循環(huán)經(jīng)濟(jì)的理念。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種利用復(fù)方苦參注射液藥渣防治蚊蟲的方法，以達(dá)到藥渣資源化利用的同時還可防治蚊蟲，有效控制疾病傳播。該方法具有綠色安全、施用簡便、高效殺蟲和循環(huán)利用等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的另一目的是提供一種用于防治水中蚊蟲的提取物。本發(fā)明提供的一種利用復(fù)方苦參注射液藥渣防治蚊蟲的方法，具體步驟如下：1)將復(fù)方苦參注射液藥渣烘干后，放入粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；2)將藥渣粉置于圓底燒瓶中，加入7-9倍體積的乙醇溶液，100℃條件下回流提取1-2小時；提取2次后，合并濾液，并放入旋蒸瓶中旋干，即得到提取物；3)將步驟2)所得提取物直接施用于蚊蟲孳生的水中，使水中提取物濃度達(dá)到71.3mg/L～2280mg/L，48小時后獲得良好的殺蟲效率。步驟2)中加入8倍體積60％乙醇溶液為優(yōu)選；步驟2)所述的回流提取時間為1.5小時。步驟3)中優(yōu)選殺蟲濃度為193mg/L，48小時后即可達(dá)到98％以上的殺蟲效率。本發(fā)明提供的一種用于防治水中蚊蟲的提取物，通過包括如下步驟的方法制得：1)將復(fù)方苦參注射液藥渣烘干后，放入粉碎機(jī)中進(jìn)行粉碎；2)將藥渣粉置于圓底燒瓶中，加入7-9倍體積的乙醇溶液，100℃條件下回流提取1-2小時；提取2次后，合并濾液，并放入旋蒸瓶中旋干，即得到提取物。所述的步驟2)中乙醇溶液為60％乙醇溶液，加入量為藥渣粉體積的8倍。所述的步驟2)中的回流提取時間為1.5小時。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明一種利用復(fù)方苦參注射液藥渣防治蚊蟲的方法，提供了一種新的藥渣循環(huán)利用思路，拓寬了藥渣的應(yīng)用領(lǐng)域，減少企業(yè)額外費(fèi)用的同時增加了企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，符合國家提倡的循環(huán)經(jīng)濟(jì)理念。此外，藥渣所制得的提取物具有低毒、環(huán)保和安全等特點(diǎn)，可作為殺蟲劑直接施用于蚊蟲孳生的水體中，操作簡單且兼具綠色防控蚊蟲的特點(diǎn)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1.復(fù)方苦參注射液藥渣提取物的獲得以乙醇溶液為溶劑復(fù)方苦參注射液藥渣提取物的制備：將復(fù)方苦參注射液藥渣(取自山西振東制藥股份有限公司)盛于玻璃皿中，并在55℃烘箱中烘干，經(jīng)粉碎后稱取干粉200g一組。每組藥渣置于2000mL圓底燒瓶內(nèi)，并加入7-9倍體積不同濃度的乙醇溶液(10％-80％)，100℃回流提取1.5小時，共提取2次，合并濾液。將濾液放入旋蒸瓶中旋干，可得到復(fù)方苦參注射液藥渣的醇提取物。提取物質(zhì)量見表1。由表1可知，8倍體積60％的乙醇溶液提取量最高，為4.48g。表1不同體積濃度乙醇溶液條件下復(fù)方苦參注射液藥渣提取物的質(zhì)量以水為溶劑復(fù)方苦參注射液藥渣提取物的制備：100g藥渣干粉置于2000mL的圓底燒瓶中，加入7-12倍體積的去離子水，150℃回流提取1.5小時，共提取2次，合并濾液。將濾液放入旋蒸瓶中旋干，可得到苦參的水提取物。提取物質(zhì)量見表2。由表2可知，10倍體積水溶液提取量最高，為2.91g。表2不同體積水溶液條件下復(fù)方苦參注射液藥渣提取物的質(zhì)量體積7倍8倍9倍10倍11倍12倍質(zhì)量1.53g1.81g2.45g2.91g2.74g2.06g由表1可知，復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物優(yōu)選條件為8倍體積60％的乙醇溶液。由表2可知，復(fù)方苦參注射液藥渣水提取物優(yōu)選條件為10倍體積水溶液。實(shí)施例2.復(fù)方苦參注射液藥渣及其提取物對白紋伊蚊幼蟲的毒殺活性的測定。白紋伊蚊(Aedesalbopictus)是一種重要的媒介昆蟲，至少傳播26種與人類相關(guān)的病毒，引起登革熱、黃熱病、基孔肯雅熱及寨卡病毒病等傳染病。同時，它也是全球最具入侵能力的100種生物之一，在我國分布廣泛。供試白紋伊蚊由山西省疾病預(yù)防控制中心友情提供，在溫度26±1℃，相對濕度70％±10％，光周期為L/D：12h/12h的條件下培養(yǎng)。復(fù)方苦參注射液藥渣及其提取物對白紋伊蚊幼蟲的毒殺活性采用世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的藥液浸養(yǎng)法。操作如下：1)50ml燒杯中加入25mL的去氯水，然后引入20頭活力健壯、大小一致的3齡白紋伊蚊幼蟲。2)將粉碎后的藥渣干粉直接撒入25mL去氯水的小燒杯中，微微晃動燒杯使得藥渣干粉在水中均勻分布。每個濃度處理設(shè)3組重復(fù)。對照組未撒干粉。3)將提取物用無水乙醇溶解稀釋成不同濃度的母液，然后加入到25mL去氯水的小燒杯中，使無水乙醇終濃度為1％(v/v)，并微微晃動燒杯使得提取物在水中均勻分布。每個濃度處理設(shè)3組重復(fù)。加入相同體積無水乙醇的水溶液作為對照組。4)處理后的燒杯置于之前所述環(huán)境中培養(yǎng)24小時，此期間并不喂食。以幼蟲對鑷子觸碰沒有反應(yīng)作為死亡標(biāo)準(zhǔn)，統(tǒng)計實(shí)驗(yàn)結(jié)果，致死率為平均值±SD。5)數(shù)據(jù)處理。使用Abbott公式進(jìn)行死亡率校正。利用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算提取物半致死濃度(LC50)。不同濃度藥渣干粉24小時致死率統(tǒng)計結(jié)果見表3。不同濃度乙醇提取物24小時致死率統(tǒng)計結(jié)果見表4。經(jīng)計算藥渣乙醇提取物半致死濃度為193mg/L。不同濃度水提取物24小時致死率統(tǒng)計結(jié)果見表5。經(jīng)計算藥渣水提取物半致死濃度為55078mg/L。表33齡白紋伊蚊幼蟲不同濃度復(fù)方苦參注射液藥渣干粉24小時致死率濃度(g/L)102030405060致死率(％)000005±5表43齡白紋伊蚊幼蟲不同濃度復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物24小時致死率濃度(mg/L)35.6371.25142.528557011402280致死率(％)8.3±3.118.3±4.633.3±2.758.3±1.686.7±2.9100100表53齡白紋伊蚊幼蟲不同濃度復(fù)方苦參注射液藥渣水提取物24小時致死率濃度(mg/L)250050001000025000100000致死率(％)1.3±4.55.7±5.320.1±11.845.2±13.055.6±11.35)將復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物依照193mg/L使用劑量，加入到含25mL20頭3齡白紋伊蚊幼蟲的去氯水小燒杯中，設(shè)置3組重復(fù)，每隔8小時統(tǒng)計一次死亡率，以得到乙醇提取物毒殺活性的時間依賴性。時間依賴的致死率結(jié)果見表6。表6復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物對3齡白紋伊蚊幼蟲不同時間的致死率時間(小時)8162432404856致死率(％)12.3±4.930.8±5.251.4±3.774.6±2.188.3±5.898.3±4.1100由表3可知，將水體中復(fù)方苦參注射液藥渣干粉量加大到60g/L時其對3齡白紋伊蚊幼蟲的致死率僅為5％，且此時水體已經(jīng)渾濁，不僅達(dá)不到有效的防治蚊蟲的目的，而且還給水體造成一定的污染。表4、5可計算得到復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物24小時半致死濃度為193mg/L；水提取物24小時半致死濃度為55078mg/L。水提取物基本沒有殺蟲活性。由表6可知，乙醇提取物半致死濃度為193mg/L條件下，48小時后殺滅蚊蟲的效率可達(dá)98％以上。綜上所述，復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物對水中孑孓具有良好的殺蟲效果。實(shí)施例3.復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物對野外環(huán)境中蚊幼毒殺活性的測定。為了驗(yàn)證復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物是否對野外環(huán)境中蚊幼具有毒殺活性，從太原小店區(qū)水體中采集野生環(huán)境中蚊幼孑孓。蚊幼采集后，實(shí)驗(yàn)室條件下，溫度26±1℃，相對濕度70％±10％，光周期為L/D：12h/12h培養(yǎng)24小時后，用于乙醇提取物毒殺活性的測定。采集的蚊蟲經(jīng)鑒定后，淡色庫蚊(Culexpipienspallens)占蚊蟲95％以上，為優(yōu)勢種群。將復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物依照193mg/L使用劑量，加入到含25mL20頭活力健壯、大小一致的3齡野生蚊幼蟲的去氯水小燒杯中，設(shè)置3組重復(fù)，每隔8小時統(tǒng)計一次死亡率，以得到乙醇提取物對野外環(huán)境中蚊幼毒殺的效果。乙醇提取物對野外環(huán)境中蚊幼的致死率結(jié)果見表7。表7復(fù)方苦參注射液藥渣乙醇提取物對野生蚊幼蟲不同時間的致死率時間(小時)8162432404856致死率(％)9.3±4.225.6±7.349.3±5.869.8±8.684.3±4.898.1±3.7100由表7可知，乙醇提取物半致死濃度193mg/L條件下，48小時后對野外環(huán)境中蚊幼的致死效率也可達(dá)98％以上。通過實(shí)驗(yàn)，證明了本發(fā)明對蚊子幼蟲具有很強(qiáng)的毒殺作用，可用于蚊子幼蟲的防治。當(dāng)前第1頁1 2 3