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一種利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法與流程

文檔序號:11783973閱讀:1084來源:國知局
一種利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法與流程

本發(fā)明涉及農(nóng)作物種植技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法。



背景技術(shù):

根瘤菌劑是指以根瘤菌為生產(chǎn)菌種制成的微生物制劑產(chǎn)品,它能夠固定空氣中的氮元素,為宿主植物提供大量氮肥,從而達(dá)到增產(chǎn)的目的。根瘤菌產(chǎn)生的氨態(tài)氮沒有環(huán)境污染,吸收率相當(dāng)高,使用過程中沒有氮流失,而人工施用化學(xué)氮肥流失率往往大于50%,且氮肥為產(chǎn)酸肥料,施用后會造成土壤酸化問題。因此使用了根瘤菌后可以不施或大量減少化學(xué)氮肥的用量,在顯著提高畝產(chǎn)量的同時還能減少因使用化肥對土壤結(jié)構(gòu)造成的破壞和對水源的污染,節(jié)省能源、改良土壤、實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的目標(biāo)。中國人民很早把瓜類和豆類輪作種植以提高產(chǎn)量,其內(nèi)在的機(jī)理就是利用微生物的固氮作用來提高土壤肥效。而在歐美國家是在18世紀(jì)30年代之后采取輪作種植技術(shù)。近年來,人們把固氮的微生物進(jìn)行人工培養(yǎng)獲得大量的活菌體,然后用它們拌種或施播,發(fā)展成為細(xì)菌肥料。細(xì)菌肥料不僅能提高農(nóng)作物產(chǎn)量,而且因?yàn)榛畹木w能在土壤中繼續(xù)生長繁殖,一年施加多年有效。目前,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用的固氮微生物肥料主要有共生根瘤菌肥、自生固氮菌肥和固氮藍(lán)藻肥三類。而根瘤菌劑是種植豆科作物的主要菌性肥料,應(yīng)用于非豆科作物的菌肥還非常少。

伴隨著根瘤菌在表面消毒的非豆科植物組織中被分離和鑒定出來,以及隨后的大田和實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)反復(fù)證明,根瘤菌定殖并促生植物的現(xiàn)象十分廣泛,在美國、埃及、法國、意大利、肯尼亞、印度等的研究揭示了根瘤菌侵入非豆科植物根部,靠根系分泌物生存繁殖,部分可在皮層和維管束細(xì)胞及細(xì)胞間隙定殖。這種自由的弱共生,在根際不形成根瘤,也不參與固氮,主要表現(xiàn)出促生現(xiàn)象。根瘤菌還可以定殖在非豆科植物種子中,進(jìn)行垂直傳播。因此根瘤菌不僅可以與宿主豆科植物相互作用形成共生關(guān)系,將空氣中的氮?dú)廪D(zhuǎn)化為氨,為豆科植物提供氮源;根瘤菌還可以以內(nèi)生菌的形式定殖在非豆科植物體內(nèi),作為植物與微生物互作過程中高度進(jìn)化并對植物有益的內(nèi)生菌范疇。目前已有關(guān)于根瘤菌以內(nèi)生菌的形式與非豆科植物互作及促生機(jī)理的研究;但是還沒有關(guān)于如何使根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的相關(guān)報道。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法,將根瘤菌培養(yǎng)收集后,接種于非豆科作物根部,以顯著促進(jìn)非豆科植物的生長,提高非豆科植物的產(chǎn)量。

為解決上述問題,本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下:

一種利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法,該方法是通過對根瘤菌的菌液體進(jìn)行接種培養(yǎng)和離心處理等到的接種菌體稀釋,然后將稀釋的菌液接種于非豆科植物幼苗的根部。

作為具體的方案,本發(fā)明所述的利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法具體步驟如下:

1)接種菌培養(yǎng):將根瘤菌種于TY液體培養(yǎng)基,置于25-30℃得培養(yǎng)箱培養(yǎng)40-55h,離心后收集菌體,用PBS對收集到的菌體進(jìn)行懸浮,用分光光度計檢測值OD600=0.8是作為接種菌備用;

2)非豆科植物幼苗培育:將非豆科植物的種子置于內(nèi)含無菌濾紙和少量無菌水的滅菌培養(yǎng)皿中,于培養(yǎng)箱中催芽后已栽植含有蛭石和1/4濃度的木村營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至長出幼苗后移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)的桶中;

3)根瘤菌菌液處理幼苗:將步驟1)所得到的用PBS懸浮的OD600=0.8的根瘤菌菌體接種于桶內(nèi)的幼苗根部。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明步驟2)非豆科植物幼苗培育過程中控制每天光照10-15小時;白天溫度控制為28±1℃,晚上溫度控制為25±1℃。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明步驟3)根瘤菌菌液處理幼時,每7天接種一次。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的TY固體培養(yǎng)基由以質(zhì)量濃計的以下組分組成:蛋白胨5.0g/L,酵母抽提物3.0g/L,CaCl2·2H2O 0.88g/L,瓊脂粉15.0g/L;TY固體培養(yǎng)基pH值為7.4。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的木村營養(yǎng)液由大量元素和微量元素組成,其pH值為6.0;其中大量元素包括以質(zhì)量濃度計的以下組分:(NH4)2SO448.20mg/L、KH2PO424.80mg/L、KNO318.50mg/L、K2SO415.90mg/L、Ca(NO3)259.90mg/L、MgSO465.90mg/L;所述微量元素包括以質(zhì)量濃度計的以下組分:ZNSO4·7H2O0.22mg、H3BO32.860mg、CuSO4·5H2O0.08mg、MnCl2·4H2O1.810mg、H2MOO·4H2O0.09mg、FeSO4·7H2O5.570mg、Na2EDTA7.450mg。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的PBS的pH值為7.4,其包括以重量濃度計的以下組分:NaCl8g/L、KCl0.2g/L、KH2PO40.24g/L、Na2HPO41.44g/L。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的非豆科作物為水稻、玉米、高粱、小麥、黍米中的一種。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的根瘤菌選自苜蓿根瘤菌、豌豆根瘤菌、菜豆根瘤菌、大豆根瘤菌、羽扇豆根瘤菌中的一種。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的土介質(zhì)由土和蛭石按照質(zhì)量比為1:1的比例混合而成。

相比現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的有益效果在于:

1.本發(fā)明所述的利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法,將根瘤菌培養(yǎng)收集后,接種于非豆科作物根部,可以以顯著促進(jìn)非豆科植物的生長,提高非豆科植物的產(chǎn)量;

2.本發(fā)明所述的利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法為根瘤菌作為微生物菌肥應(yīng)用于水稻大田生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。

附圖說明

圖1為水稻幼苗接種苜蓿中華根瘤菌1021六后天的生長狀況;其中A表示對比例中接種苜蓿中華根瘤菌1021死菌的水稻幼苗長勢,B表示實(shí)施例1接種苜蓿中華根瘤菌1021活菌的水稻幼苗的長勢;

圖2為接種苜蓿中華根瘤菌1021對水稻幼苗第4葉片第6、7、8天的生長狀況;其中A表示對比例中接種苜蓿中華根瘤菌1021死菌的第4葉片的生長狀況;B表示實(shí)施例1接種苜蓿中華根瘤菌1021活菌的第4葉片的生長狀況;

圖3為接種苜蓿中華根瘤菌1021對水稻幼苗第4葉片鮮重的影響;Control表示對比例的水稻幼苗第4葉片,Sm1021表示實(shí)施例1的水稻幼苗第4葉片;

圖4為接種苜蓿中華根瘤菌1021對水稻幼苗第4葉鞘6、7、8天的生長狀況生長狀況;其中A表示對比例中接種苜蓿中華根瘤菌1021死菌的第4葉鞘的生長狀況;B表示實(shí)施例1接種苜蓿中華根瘤菌1021活菌的第4葉鞘的生長狀況;

圖5為接種苜蓿中華根瘤菌1021對水稻幼苗第4葉鞘鮮重的影響;Control表示對比例的水稻幼苗第4葉鞘,Sm1021表示實(shí)施例1的水稻幼苗第4葉鞘;

圖6為接種不同根瘤菌的水稻生長狀況;Control表示對比例的水稻,Sm1021表示實(shí)施例1的水稻,E11表示實(shí)施例2接種三葉草根瘤菌E11活菌的水稻,ORS571表示實(shí)施例3的水稻;

圖7為接種不同根瘤菌對水稻分蘗數(shù)量的影響,Control表示對比例的水稻,Sm1021表示實(shí)施例1的水稻,E11表示實(shí)施例2接種三葉草根瘤菌E11活菌的水稻,ORS 571表示實(shí)施例3的水稻;

圖8為接種不同根瘤菌對水稻種子產(chǎn)量的影響,Control表示對比例的水稻,Sm1021表示實(shí)施例1的水稻,E11表示實(shí)施例2接種三葉草根瘤菌E11活菌的水稻,ORS 571表示實(shí)施例3的水稻。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所述的利用根瘤菌促進(jìn)非豆科作物生長的方法,該方法是通過對根瘤菌的菌液體進(jìn)行接種培養(yǎng)和離心處理等到的接種菌體稀釋,然后將稀釋的菌液接種于非豆科植物幼苗的根部。該方法具體步驟如下:

1)接種菌培養(yǎng):將根瘤菌種于TY液體培養(yǎng)基,置于25-30℃得培養(yǎng)箱培養(yǎng)40-55h,離心后收集菌體,用PBS對收集到的菌體進(jìn)行懸浮,用分光光度計檢測值OD600=0.8是作為接種菌備用;

2)非豆科植物幼苗培育:將非豆科植物的種子置于內(nèi)含無菌濾紙和少量無菌水的滅菌培養(yǎng)皿中,于培養(yǎng)箱中催芽后已栽植含有蛭石和1/4濃度的木村營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至長出幼苗后移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)的桶中;

3)根瘤菌菌液處理幼苗:將步驟1)所得到的用PBS懸浮的OD600=0.8的根瘤菌菌體接種于桶內(nèi)的幼苗根部。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明步驟2)非豆科植物幼苗培育過程中控制每天光照10-15小時;白天溫度控制為28±1℃,晚上溫度控制為25±1℃。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明步驟3)根瘤菌菌液處理幼時,每7天接種一次??煞謩e選擇在移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)的桶中后的第8天、第15天、第22天在桶內(nèi)的幼苗根部接種,以此類推。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的TY固體培養(yǎng)基由以質(zhì)量濃計的以下組分組成:蛋白胨5.0g/L,酵母抽提物3.0g/L,CaCl2·2H2O 0.88g/L,瓊脂粉15.0g/L;TY固體培養(yǎng)基pH值為7.4。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的木村營養(yǎng)液由大量元素和微量元素組成,其pH值為6.0;其中大量元素包括以質(zhì)量濃度計的以下組分:(NH4)2SO448.20mg/L、KH2PO424.80mg/L、KNO318.50mg/L、K2SO415.90mg/L、Ca(NO3)259.90mg/L、MgSO465.90mg/L;所述微量元素包括以質(zhì)量濃度計的以下組分:ZNSO4·7H2O0.22mg、H3BO32.860mg、CuSO4·5H2O0.08mg、MnCl2·4H2O1.810mg、H2MOO·4H2O0.09mg、FeSO4·7H2O5.570mg、Na2EDTA7.450mg。其中木村營養(yǎng)液在使用時需稀釋至原來濃度的1/4,所以在步驟2)中和是采用1/4濃度的木村營養(yǎng)液。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的PBS的pH值為7.4,其包括以重量濃度計的以下組分:NaCl8g/L、KCl0.2g/L、KH2PO40.24g/L、Na2HPO41.44g/L。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的非豆科作物為水稻、玉米、高粱、小麥、黍米等中的一種。當(dāng)然除了上述這些非都可作物,根瘤菌明顯可以促進(jìn)豆科植物例如大豆、菜豆等的生長和產(chǎn)量。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的根瘤菌選自苜蓿根瘤菌、三葉草根瘤菌、豌豆根瘤菌、菜豆根瘤菌、大豆根瘤菌、羽扇豆根瘤菌中的一種。在本發(fā)明的研究中發(fā)現(xiàn)苜蓿中華根瘤菌1021對非豆科作物的幼苗生長的影響具有持續(xù)累積的作用特點(diǎn),在旺盛生長的第3、4葉位響應(yīng)最強(qiáng)烈,接菌后第6天的促生效果達(dá)到顯著水平,尤其在分蘗期時,苜蓿中華根瘤菌1021的促生效果明顯。因此,在本發(fā)明中,優(yōu)選方案中采用的是苜蓿中華根瘤菌1021,該菌種為現(xiàn)有菌種,可以通過購買方式獲得。此外,本發(fā)明所述的根瘤菌具體還可以選用三葉草根瘤菌E11、田菁莖瘤根瘤菌ORS571中的一種。

作為進(jìn)一步的方案,本發(fā)明所述的土介質(zhì)由土和蛭石按照質(zhì)量比為1:1的比例混合而成。

以下是本發(fā)明具體的實(shí)施例,在下述實(shí)施例中所采用的原料、種子、菌種以及試劑除另有說明外均可以通過購買方式獲得。

實(shí)施例1

采用苜蓿中華根瘤菌促進(jìn)非豆科作物水稻的生長

原材料:粳稻日本晴(Oryza sativa L.japonica.cv.Nipponbare);苜蓿中華根瘤菌1021(Sinorhizobium meliloti 1021)以下簡寫為Sm1021;

具體方法如下:

1)接種菌培養(yǎng):將Sm1021接種于TY液體培養(yǎng)基,置于28℃培養(yǎng)箱,180g,培養(yǎng)48h;通過4500g,離心20min收集菌體;用PBS對收集到的菌體進(jìn)行懸浮,并用分光光度計檢測OD600=0.8(約等于108個菌體)作為接種菌體備用;

2)水稻幼苗的培養(yǎng):水稻種子置于內(nèi)含無菌濾紙和少量無菌水的滅菌培養(yǎng)皿中,28℃培養(yǎng)箱中催芽兩天后移栽至到含有175cm3蛭石和100mL 1/4木村營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng);光周期為14h光照,10h黑暗;白天溫度為28℃,晚上溫度為25℃;在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過程中,根據(jù)蒸發(fā)情況補(bǔ)充1/4木村B營養(yǎng)液,保持幼苗正常生長;待水稻長至第13天時,將水稻秧苗移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)(土與蛭石為1:1)的桶中;

3)根瘤菌菌液處理幼苗:將水稻秧苗移種后的8天、15天和22天,分別用120mL OD600值為0.8的菌液,接種每桶內(nèi)的水稻幼苗根部,避免污染地上部分;每種處理的水稻為5桶,作為5個重復(fù),每桶種水稻幼苗5株;盆栽水稻在室外生長,水稻生長至第152天時收獲。

實(shí)施例2

采用三葉草根瘤菌E11促進(jìn)非豆科作物水稻的生長

原材料:粳稻日本晴(Oryza sativa L.japonica.cv.Nipponbare);三葉草根瘤菌(Rhizobium leguminosarumbv.trifolii)E11,以下簡寫為E11;

具體方法如下:

1)接種菌培養(yǎng):將E11接種于TY液體培養(yǎng)基,置于28℃培養(yǎng)箱,180g,培養(yǎng)48h;通過4500g,離心20min收集菌體;用PBS對收集到的菌體進(jìn)行懸浮,并用分光光度計檢測OD600=0.8(約等于108個菌體)作為接種菌體備用;

2)水稻幼苗的培養(yǎng):水稻種子置于內(nèi)含無菌濾紙和少量無菌水的滅菌培養(yǎng)皿中,28℃培養(yǎng)箱中催芽兩天后移栽至到含有175cm3蛭石和100mL 1/4木村營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng);光周期為14h光照,10h黑暗;白天溫度為28℃,晚上溫度為25℃;在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過程中,根據(jù)蒸發(fā)情況補(bǔ)充1/4木村B營養(yǎng)液,保持幼苗正常生長;待水稻長至第13天時,將水稻秧苗移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)(土與蛭石為1:1)的桶中;

3)根瘤菌菌液處理幼苗:將水稻秧苗移種后的8天、15天和22天,分別用120mL OD600值為0.8的菌液,接種每桶內(nèi)的水稻幼苗根部,避免污染地上部分;每種處理的水稻為5桶,作為5個重復(fù),每桶種水稻幼苗5株;盆栽水稻在室外生長,水稻生長至第152天時收獲。

實(shí)施例3

采用田菁莖瘤根瘤菌ORS571促進(jìn)非豆科作物水稻的生長

原材料:粳稻日本晴(Oryza sativa L.japonica.cv.Nipponbare);菁莖瘤根瘤菌(Azorhizobiumcaulinodans)ORS571,以下簡寫為ORS571;

具體方法如下:

1)接種菌培養(yǎng):將ORS571接種于TY液體培養(yǎng)基,置于28℃培養(yǎng)箱,180g,培養(yǎng)48h;通過4500g,離心20min收集菌體;用PBS對收集到的菌體進(jìn)行懸浮,并用分光光度計檢測OD600=0.8(約等于108個菌體)作為接種菌體備用;

2)水稻幼苗的培養(yǎng):水稻種子置于內(nèi)含無菌濾紙和少量無菌水的滅菌培養(yǎng)皿中,28℃培養(yǎng)箱中催芽兩天后移栽至到含有175cm3蛭石和100mL 1/4木村營養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中,置于光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng);光周期為14h光照,10h黑暗;白天溫度為28℃,晚上溫度為25℃;在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)過程中,根據(jù)蒸發(fā)情況補(bǔ)充1/4木村B營養(yǎng)液,保持幼苗正常生長;待水稻長至第13天時,將水稻秧苗移種至盛有已滅菌消毒的含水培養(yǎng)土介質(zhì)(土與蛭石為1:1)的桶中;

3)根瘤菌菌液處理幼苗:將水稻秧苗移種后的8天、15天和22天,分別用120mL OD600值為0.8的菌液,接種每桶內(nèi)的水稻幼苗根部,避免污染地上部分;每種處理的水稻為5桶,作為5個重復(fù),每桶種水稻幼苗5株;盆栽水稻在室外生長,水稻生長至第152天時收獲。

對比例

按照實(shí)施例1的方法,與實(shí)施例1相比,差別僅僅在于以等量苜蓿中華根瘤菌SM1021死菌(無菌水重新懸浮的菌體于微波爐高溫煮沸3次)處理的水稻為對照(control)。

效果檢驗(yàn)

1.中苜蓿中華根瘤菌對水稻幼苗生長的分析

苜蓿中華根瘤菌1021處理水稻幼苗6天后,用蒸餾水沖洗幼苗,洗凈后用吸水紙吸干表面水分,分別稱量地上部分和根的鮮重和長度。每種處理水稻幼苗為3瓶,作為3個重復(fù),每瓶6株水稻幼苗。為進(jìn)一步分析苜蓿中華根瘤菌1021促進(jìn)水稻幼苗生長的機(jī)制,接種根瘤菌后對水稻幼苗的葉鞘和葉片進(jìn)行了分析。具體操作為:根瘤菌處理水稻幼苗3、4、5、6、7、8天后,取水稻地上部分,用蒸餾水沖洗干凈,吸水紙吸干表面水分,分別測定第3葉鞘和葉片、第4葉鞘和葉片重量和長度。水稻接種根瘤菌后第68天時水稻處于分蘗期,測定分蘗數(shù)。水稻生長到152天時成熟,收獲,測量水稻種子產(chǎn)量。利用SPSS 16.0軟件和Excel軟件(Microsoft Office Excel 2003,Microsoft Corporation)進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。應(yīng)用t檢驗(yàn)(Student’s t test)分析數(shù)據(jù)之間的差異顯著性(P<0.01為極顯著差異,0.01<P<0.05為顯著性差異,P>0.05差異不顯著)。

與對比例1的比較結(jié)果顯示:接種苜蓿中華根瘤菌1021水稻幼苗6天后,就顯示了對水稻的促生作用,地上部分高度及鮮重增加十分顯著(圖1和表1)。通過對接種根瘤菌后的水稻幼苗外部特征進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)了水稻葉片和葉鞘的變化。第1、2和3葉片和葉鞘的長度促生現(xiàn)象不明顯,但是第4葉片和葉鞘有明顯差別。同對照相比,接種苜蓿中華根瘤菌1021的水稻幼苗接菌后第6、7、8天時,第4葉片鮮重分別提高21.0%、14.5%、11.4%(參見圖2和圖3);葉鞘鮮重提高量更加顯著,第6、7、8天時分別提高240.6%、92.2%、63.7%(圖4和他5)。

表1:水稻幼苗接種苜蓿中華根瘤菌1021六天后的生長變化

2.不同根瘤菌對水稻生長及產(chǎn)量的影響

對生長至第68天(分蘗期)、152天(成熟期)時水稻的整體生長狀況進(jìn)行了觀察和檢測,結(jié)果表明接種根瘤菌的水稻比未接種的對照生長狀況好(圖6)。接種苜蓿中華根瘤菌1021、三葉草根瘤菌E11、田菁莖瘤根瘤菌ORS571的水稻同對照相比,有效分蘗數(shù)分別提高64.6%、31.7%和42.7%(圖7)。分蘗數(shù)的增加進(jìn)一步會提高水稻產(chǎn)量,測定水稻種子產(chǎn)量的結(jié)果表明,不同根瘤菌對水稻產(chǎn)量的影響不同(圖8),同對照相比,苜蓿中華根瘤菌1021、三葉草根瘤菌E11、田菁莖瘤根瘤菌ORS571接種的水稻的產(chǎn)量分別提高17.6%、14.9%、13.0%。由此可見,苜蓿中華根瘤菌1021、三葉草根瘤菌E11、田菁莖瘤根瘤菌ORS571等根瘤菌均能夠促進(jìn)非豆科作物水稻的生長并提高水稻的產(chǎn)量;其中以苜蓿中華根瘤菌1021的效果最好。

上述實(shí)施方式僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式,不能以此來限定本發(fā)明保護(hù)的范圍,本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明的基礎(chǔ)上所做的任何非實(shí)質(zhì)性的變化及替換均屬于本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍。

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