本發(fā)明涉及棕色蘑菇的培養(yǎng)方法，更具體的說是一種棕色蘑菇的栽培方法。2、
背景技術(shù)：
：棕色蘑菇（AgaricusbrunnescensPeck），是蘑菇中的珍稀類品種，屬于擔(dān)子菌綱(Basidiomycotina)、傘菌目(Agaritales)、蘑菇科(Agaricaceae)、蘑菇屬(garicus)。棕色蘑菇俗稱棕蘑，是波希美亞種。該菌株產(chǎn)量高、菇質(zhì)優(yōu)良、口感鮮嫩，其菇蓋為自然棕褐色，菌柄白色，肉質(zhì)致密緊實(shí)?，F(xiàn)在所有的白色雙孢蘑菇品種均為棕色蘑菇的白色變種，也就是說棕色蘑菇是白色雙孢蘑菇的野生祖先。棕色蘑菇,別名白蘑菇、洋菇,屬于擔(dān)子菌綱、傘菌目、蘑菇科、蘑菇屬。棕色蘑菇營養(yǎng)豐富、味道鮮美,據(jù)報(bào)導(dǎo)鮮蘑菇含蛋白質(zhì)3%—4%,脂肪0.2%—0.3%,碳水化合物2.4%—3.8%,可消化率達(dá)70%—90%,享有“植物肉”之稱。蘑菇的氨基質(zhì)酸組成較全面,尤其富含人體必需的賴氨酸等。棕色蘑菇還含有豐富的鐵、鉀、鈣等礦質(zhì)元素。還含有硫氨素、核黃素、煙酸、抗壞血酸等多種維生素及酶類。由于含有較高的不飽和脂肪酸,故多食用蘑菇對降低血脂有明顯作用,用蘑菇罐頭加工預(yù)煮液制成的藥物對醫(yī)治遷延性肝炎、慢性肝炎、肝腫大、早期肝硬化等均有顯著療效。隨著人們追求天然、返璞歸直潮流的到來，棕色蘑菇在市場上受到廣大消費(fèi)者的追捧，是一個(gè)很好的商業(yè)品種。目前，棕色蘑菇菌種培養(yǎng)主要采用固體培養(yǎng)方法，制作周期長，加上其制作時(shí)間正值高溫季節(jié)，導(dǎo)致生產(chǎn)成本上升。而液體培養(yǎng)是采用液體基質(zhì)質(zhì)發(fā)酵來進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)菌種的生產(chǎn)，其原理是：在發(fā)酵罐或三角瓶中，采用液體培養(yǎng)基質(zhì)，通入無菌空氣加以攪拌或振蕩，增加培養(yǎng)基質(zhì)中的溶氧含量，提供菌絲體呼吸代謝所需要的氧氣，并控制適宜的外界條件，使得菌體在液體深處繁殖發(fā)育，獲得大量的菌絲體或代謝產(chǎn)物。3、技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明公開一種蘑菇栽培種的培養(yǎng)方法，其特征在于按如下的步驟進(jìn)行：（1）供試菌株：蘑菇引自山東省蘑菇菌種研究推廣站；（2）供試栽培種配方：B、麥粒培養(yǎng)基Ⅱ(%)：麥粒97，碳酸鈣1.5，石膏1.5；C、麥粒培養(yǎng)基Ⅲ(%)：麥粒97，碳酸鈣2，石膏1；D、麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒95，石膏3，草炭土2；（3）麥粒原種的制作：1）煮麥：選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮25～30分鐘，煮至麥粒無白心時(shí)，立即?；饘Ⅺ溋瞥觯乐帘砻鏌o水跡；2）配料：將碳酸鈣、石膏和/或草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶；3）裝瓶滅菌：120℃，滅菌2.5～3小時(shí)；4）接種：將蘑菇母種按照無菌操作要求以17%接種量接于麥粒種中，30℃培養(yǎng)，觀察菌絲生長情況和滿瓶時(shí)間。本發(fā)明通過栽培種配方試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒95，石膏3，草炭土2最適合棕色蘑菇菌絲的生長，生長速度快，長勢好，菌絲濃密。液體菌種在該栽培種配方上生長遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于固體原種?？偨Y(jié)傳統(tǒng)固態(tài)法和新型液體-麥粒菌種制備三級菌種的總生產(chǎn)周期，后者所用時(shí)間較之前者縮短了38天。本發(fā)明選用的蘑菇MC441菌株主要特點(diǎn)是：1.該菌株菇蓋表面為自然棕褐色，菇柄、菌肉白色；菇質(zhì)優(yōu)，子實(shí)體圓整，菇蓋厚、結(jié)實(shí)，不凹頂；味道鮮美，感鮮嫩，保鮮期長。菌絲生長速度快。產(chǎn)量高，在相同條件下，比白色蘑菇品種提早2-3天出菇，菇潮整齊，產(chǎn)量達(dá)9-10公斤/平方。2.出菇溫度范圍廣，尤其是低溫結(jié)實(shí)能力比常規(guī)白色蘑菇強(qiáng)，在5℃-8℃下，產(chǎn)量比對照2796高65％。培養(yǎng)技術(shù)簡易、培養(yǎng)原料來源廣。其培養(yǎng)料配方以稻、麥草為主要原料，培養(yǎng)料及堆制發(fā)酵方法與常規(guī)蘑菇相同。下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。4、具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例說明本發(fā)明，這里所述實(shí)施例的方案，不限制本發(fā)明，本領(lǐng)域的專業(yè)人員按照本發(fā)明的精神可以對其進(jìn)行改進(jìn)和變化，所述的這些改進(jìn)和變化都應(yīng)視為在本發(fā)明的范圍內(nèi)，本發(fā)明的范圍和實(shí)質(zhì)由權(quán)利要求來限定。其中蘑菇MC441引自山東省，蘑菇菌種對外有售。實(shí)施例1（1）供試菌株：蘑菇MC441引自山東省蘑菇菌種研究推廣站，對外有售。（2）供試栽培種配方A、麥粒培養(yǎng)基Ⅰ(%)：麥粒98，碳酸鈣2；B、麥粒培養(yǎng)基Ⅱ(%)：麥粒97，碳酸鈣1.5，石膏1.5；C、麥粒培養(yǎng)基Ⅲ(%)：麥粒97，碳酸鈣2，石膏1；D、麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒95，石膏3，草炭土2（3）麥粒原種的制作1）煮麥。選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮20～25分鐘，在煮沸期間撈去疪麥等漂浮雜物，并不斷攪拌，煮至麥粒無白心時(shí)，立即?；饘Ⅺ溋瞥觯屑蓪Ⅺ溋１砥ぶ笃?。在水泥地面晾至表面無水跡。2）配料。將碳酸鈣、石膏、草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶。3）裝瓶滅菌。120℃，滅菌2.5～3小時(shí)。4）接種。將棕色蘑菇母種按照無菌操作要求進(jìn)行接種。5）菌種培養(yǎng)。將接種后的栽培種置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（4）麩皮液體原種的制作1）制備種子液。配制種子液培養(yǎng)基（g/L）：馬鈴薯200，葡萄糖20，蛋白胨2，磷酸二氫鉀2，硫酸鎂1，VB10.01，pH自然。滅菌后，取5塊0.5cm2新鮮斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基中，25℃，150rpm搖床培養(yǎng)7天。2）制備麩皮液體原種。配制發(fā)酵培養(yǎng)基，即麩皮發(fā)酵培養(yǎng)基為（g/L）：麩皮120，葡萄糖15，蛋白胨2，pH自然。將制備好的種子液以接種量8%移入裝有100mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，25℃，150rpm培養(yǎng)7天，即得棕色蘑菇液體原種。（5）栽培種的制作1）煮麥。選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮20～25分鐘，在煮沸期間撈去疪麥等漂浮雜物，并不斷攪拌，煮至麥粒無白心時(shí)，立即?；饘Ⅺ溋瞥?，切忌將麥粒表皮煮破。在水泥地面晾至表面無水跡。2）配料。將碳酸鈣、石膏、草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶。3）裝瓶滅菌。120℃，滅菌2.5～3小時(shí)。4）接種。將棕色蘑菇原種，即麥粒原種、麩皮培養(yǎng)基制得的液體原種，按照無菌操作要求分別接種。5）菌種培養(yǎng)。將接種后的栽培種置于30℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（6）液體原種與固體原種的栽培種比較試驗(yàn)將所制得的麩皮液體原種，以15%接種量接于麥粒種中，25℃培養(yǎng)，觀察菌絲生長情況和滿瓶時(shí)間。每日觀察各瓶生長情況，并記錄滿瓶時(shí)間。實(shí)施例2（1）棕色蘑菇栽培種生長配方的篩選將棕色蘑菇麥粒原種接種于4種不同栽培種培養(yǎng)基中，25℃恒溫培養(yǎng)，觀察其生長情況，結(jié)果如下表所示：表1棕色蘑菇在4種栽培種培養(yǎng)基中生長性狀配方麥粒培養(yǎng)基Ⅰ麥粒培養(yǎng)基Ⅱ麥粒培養(yǎng)基Ⅲ配方麥粒培養(yǎng)基滿瓶天數(shù)（d）43404235菌絲平均生長速度（mm/d）2.602.752.703.26菌絲性質(zhì)+++++++++吐黃水易吐黃水不吐黃水一般不吐黃水注：“+++”菌絲生長良好，“++”菌絲生長一般，“+”菌絲生長較差。由上表所示，棕色蘑菇在麥粒培養(yǎng)基Ⅱ和麥粒土培養(yǎng)基中生長良好，生長速度快，并且菌絲濃白、細(xì)密，在麥粒土培養(yǎng)基中生長情況又要略好于麥粒培養(yǎng)基Ⅱ；棕色蘑菇在麥粒培養(yǎng)基Ⅲ上長勢一般；在麥粒培養(yǎng)基Ⅰ上長勢較差，生長速度慢，而且易吐黃水，成品率低。（2）液體原種與固體原種的栽培種生長對比試驗(yàn)分別將麩皮液體原種和麥粒原種接種于麥粒土栽培種中，25℃恒溫培養(yǎng)，觀察其生長情況，結(jié)果如下表所示：表2液體原種與固體原種的栽培種生長對比試驗(yàn)麩皮液體原種固體原種滿瓶天數(shù)（d）1835菌絲平均生長速度（mm/d）6.113.26菌絲性質(zhì)+++++++吐黃水不吐黃水不吐黃水注：“++++”菌絲生長最好，“+++”菌絲生長良好。由上表可見，以麩皮液體菌種為原種的栽培種，其滿瓶天數(shù)遠(yuǎn)快于以麥粒種為固體原種的栽培種，時(shí)間減少了近一半，且菌絲生長良好，菌絲濃白、濃密。（3）傳統(tǒng)三級菌種與液體-麥粒菌種擴(kuò)繁周期比較對采用傳統(tǒng)固態(tài)法和新型液體-麥粒菌種制備三級菌種的總生產(chǎn)周期進(jìn)行了總結(jié)，兩者母種均采用草炭土斜面培養(yǎng)基，原種分別采用麥粒菌種和麩皮液體原種，栽培種培養(yǎng)基均為麥粒土培養(yǎng)基，培養(yǎng)方法相同，結(jié)果如下表所示?？梢姡捎靡后w菌種后，制種時(shí)間縮短了38天：表3傳統(tǒng)三級菌種與液體-麥粒菌種生產(chǎn)周期比較（4）結(jié)論：通過栽培種配方試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒92，石膏5，草炭土3最適合棕色蘑菇菌絲的生長，生長速度快，長勢好，菌絲濃密。液體菌種在該栽培種配方上生長遠(yuǎn)遠(yuǎn)快于固體原種?？偨Y(jié)傳統(tǒng)固態(tài)法和新型液體-麥粒菌種制備三級菌種的總生產(chǎn)周期，后者所用時(shí)間較之前者縮短了38天。實(shí)施例3（1）供試菌株：棕色蘑菇MC441引自山東省蘑菇菌種研究推廣站。（2）供試栽培種配方B、麥粒培養(yǎng)基Ⅱ(%)：麥粒98，碳酸鈣1，石膏1；或D、麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒92，石膏5，草炭土3。（3）麥粒原種的制作1）煮麥。選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮25分鐘，在煮沸期間撈去疪麥等漂浮雜物，并不斷攪拌，煮至麥粒無白心時(shí)，立即停火將麥粒撈出，切忌將麥粒表皮煮破。在水泥地面晾至表面無水跡。2）配料。將碳酸鈣、石膏、草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶。3）裝瓶滅菌。121℃，滅菌2.5小時(shí)。4）接種。將棕色蘑菇母種按照無菌操作要求進(jìn)行接種。5）菌種培養(yǎng)。將接種后的栽培種置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（4）麩皮液體原種的制作1）制備種子液。配制種子液培養(yǎng)基（g/L）：馬鈴薯200，葡萄糖20，蛋白胨2，磷酸二氫鉀2，硫酸鎂1，VB10.01，pH自然。滅菌后，取5塊0.5cm2新鮮斜面菌種接種于種子培養(yǎng)基中，25℃，150rpm搖床培養(yǎng)7天。2）制備麩皮液體原種。配制發(fā)酵培養(yǎng)基，即麩皮發(fā)酵培養(yǎng)基為（g/L）：麩皮120，葡萄糖15，蛋白胨2，pH自然。將制備好的種子液以接種量8%移入裝有100mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，25℃，150rpm培養(yǎng)7天，即得棕色蘑菇液體原種。（5）栽培種的制作1）煮麥。選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮20～25分鐘，在煮沸期間撈去疪麥等漂浮雜物，并不斷攪拌，煮至麥粒無白心時(shí)，立即停火將麥粒撈出，切忌將麥粒表皮煮破。在水泥地面晾至表面無水跡。2）配料。將碳酸鈣、石膏、草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶。3）裝瓶滅菌。120℃，滅菌2.5～3小時(shí)。4）接種。將棕色蘑菇原種，即麥粒原種、麩皮培養(yǎng)基制得的液體原種，按照無菌操作要求分別接種。5）菌種培養(yǎng)。將接種（15%接種量接于麥粒種中后的栽培種）置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（6）液體原種與固體原種的栽培種比較試驗(yàn)將所制得的麩皮液體原種，以15%接種量接于麥粒種中，25℃培養(yǎng)，觀察菌絲生長情況和滿瓶時(shí)間。實(shí)施例4（1）供試菌株：棕色蘑菇MC441引自山東省蘑菇菌種研究推廣站；（2）供試栽培種配方：C、麥粒培養(yǎng)基Ⅲ(%)：麥粒98，碳酸鈣1.5，石膏0.5或D、麥粒土培養(yǎng)基(%)：麥粒92，石膏5，草炭土3；（3）麥粒原種的制作：1）煮麥：選擇無蟲蛀的小麥，倒入沸水中煮20分鐘，煮至麥粒無白心時(shí)，立即停火將麥粒撈出，晾至表面無水跡；2）配料：將碳酸鈣、石膏和/或草炭土按比例加入，并將其翻拌均勻，即可裝瓶；3）裝瓶滅菌：120℃，滅菌2.5小時(shí)；4）接種：將棕色蘑菇母種按照無菌操作要求以15%接種量接于麥粒種中，25℃培養(yǎng)，觀察菌絲生長情況和滿瓶時(shí)間。當(dāng)前第1頁1 2 3