本發(fā)明屬于農業(yè)技術領域，涉及常見木本植物的無性繁殖方法，特別為一種彩葉桂花‘紫嫣公主’非試管快繁方法。
背景技術：
植物非試管快繁是介于常規(guī)扦插和組織培養(yǎng)之間的一種植物繁育方法，一般包括采穗圃構建、溫室建立、育苗方式，生根劑以及養(yǎng)分、殺菌劑使用等創(chuàng)新集成的技術體系。其特點是插穗用量小、繁殖速度快、擴繁成本低、再生苗健壯、表型穩(wěn)定，適于多數(shù)植物的繁殖。因此，對于再生苗扦插繁殖率較低、或質量不穩(wěn)定、或繁殖速度較慢的植物來說，植物非試管快繁技術能顯示其無可比擬的優(yōu)越性。然而，多數(shù)植物都需要組裝、集成和配套專門的非試管快繁技術體系，才能實現(xiàn)其快速繁殖。
在彩葉桂花‘紫嫣公主’非試管快繁技術中，通常因采穗母樹再生植株的能力、或者分生組織幼態(tài)程度等存在差異，很難保障其穩(wěn)定優(yōu)良的生根率和成活率。研究表明：木本植物的根是幼態(tài)的，培育和利用母樹的根萌條，可恢復其枝條的幼齡期；為了促進插穗生根，常補充ABT、NAA等特定生長素，以提高其生根率；為了確保插穗的正常生長發(fā)育，通常使用具有智能噴霧系統(tǒng)的大棚溫室等設施，以保證插穗生根成苗對溫度、濕度、營養(yǎng)、光照、CO2等再生環(huán)境的需求。生產實踐中，彩葉桂花‘紫嫣公主’非試管快繁也因受其自身特性、技術條件以及環(huán)境條件等因素的綜合影響，難以保證其快繁苗質量、生根率和成活率，以致繁殖系數(shù)低，繁殖成本高，推廣應用難。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對現(xiàn)有桂花非試管快繁技術的不成熟和缺陷，提供一種彩葉桂花‘紫嫣公主’的非試管快繁方法。該方法通過構建幼齡采穗圃，定植2代扦插苗(使用第1次扦插苗穗條再次扦插繁殖的苗木)，應用復幼技術培育幼齡穗條，提高插穗再生成為植株的能力；通過氣液混合泵制造碳酸水補充快繁苗所需的碳源，以滿足生根對能量的需求,達到插穗快速生根發(fā)育、解決因補充二氧化碳導致的溫室效應和氣體逃逸等問題；通過使用專用生根劑，提高插穗生根能力，促進根系發(fā)達，提高生根率；通過使用專用營養(yǎng)液，加快插穗生長發(fā)育，提高苗木質量，從而實現(xiàn)一種快繁周期短、擴繁系數(shù)高、生產成本低的非試管快繁技術。
本發(fā)明具體通過以下技術方案實現(xiàn)：
一種彩葉桂花‘紫嫣公主’的非試管快繁方法，具體包括以下步驟：
1)幼齡采穗圃構建。在建好的采穗圃定植1a生2代扦插苗，通過噴施專用營養(yǎng)液和生長素、修剪平茬等田間管理方法，刺激葉芽萌發(fā)，促進枝葉快速生長，培育供非試管快繁的幼齡穗條。
2)快繁苗床準備。在建好的智能大棚溫室內，利用現(xiàn)成的移動苗床或建成簡易苗床用于快繁。簡易苗床利用磚塊砌成高15cm、寬120cm的圍床，床底部鋪填5cm左右碎石，中部平鋪5～6cm的粗砂，上部作為容器快繁苗的育苗苗床。
3)快繁基質配制及使用。使用無土育苗基質配方，無土育苗基質經(jīng)消毒處理后，裝入無紡布育苗容器并移入快繁苗床。
4)快繁時間。宜選擇于2月上旬、4月下旬、6月下旬、9月上旬實施快繁。
5)碳酸水制備及使用。在現(xiàn)成的智能溫室或裝有智能育苗儀的溫室大棚基礎上，集成配套碳酸水生產工藝，即通過氣液混合泵制造碳酸水補充快繁苗所需的碳源。該泵的氣源吸入口與二氧化碳氣源連接，泵的進水口與水源連接。氣液混合泵工作時，將氣液吸引、混合并溶解成氣泡直徑為20～30μm的碳酸水輸送至溫室間隙噴霧系統(tǒng)，以補充碳源和維持85～95％環(huán)境相對濕度。
6)插穗標準及處理。及時采集幼齡穗條，制作標準插穗，并使用殺菌劑和專用生根劑處理插穗。
7)營養(yǎng)液與消毒劑使用。定期使用專用營養(yǎng)液，直至煉苗階段；使用多菌靈和惡霉靈等殺菌劑預防病害，并結合營養(yǎng)液交替使用。
8)煉苗時間及方法。煉苗期10～15d，采用增加光照和通風、控制水肥、增施蕓苔素內酯(BR)等措施煉苗。
本發(fā)明所述的幼齡采穗圃通過以下方法構建：
1)圃地選擇。采穗圃應靠近生產用穗中心區(qū)，宜選擇地勢平緩、光照充足、排灌良好、土層深厚、PH值6.5左右的壤土作圃地。
2)圃地整地。整地包括翻耕、耙地和平整，要求“三犁三耙”，同時，施足基肥，并做成高25cm、床寬120cm的苗床。
3)苗木種植。按株行距40㎝×40㎝，定植1a生2代扦插苗。
所述的幼齡采穗圃田間管理方法為：采用灌叢式培育采穗母樹；每隔5～7d噴施專用營養(yǎng)液10倍液(另加入0.1mg/kg蕓苔素內脂)；當主枝生長到20㎝時進行摘心，并結合營養(yǎng)液使用加入10mg/㎏赤霉素(GA3)、5mg/㎏IBA、5mg/㎏NAA噴施，連續(xù)2次；當腋芽膨大且未萌發(fā)時，應及時采集穗條用于快繁。穗條采集后，繼續(xù)加強水肥管理和病蟲害防治，加速快繁穗條再生；當苗木進入休眠期時進行平茬，澆透水；當苗木密度過大時，宜采取隔株挖除植株，用于擴建采穗圃。
本發(fā)明所述的快繁基質通過以下方法制備：按泥炭：蛭石：珍珠巖體積比1～5：1～1.5：1～1.5充分混和后，使用有效成分惡霉靈600mg/kg滅菌處理，用薄膜覆蓋堆悶72小時。
本發(fā)明所述的插穗標準為：半木質化莖段，保留2個節(jié)間，長度4.0～6.0cm，插穗基部切面馬蹄形，切口距基部節(jié)0.5cm；上部帶1對完整葉，切口平切，距上部節(jié)0.7～0.8cm。
所述的插穗處理方法為：使用0.1％高錳酸鉀消毒30min，使用專用生根劑浸泡插穗基部2h。
所述的專用生根劑配方為：150～200mg/kg ABT1+100～150mg/kg NAA復配而成。
所述的專用營養(yǎng)液包括：大量元素(mg/kg)：KNO3 2300～2500，(NH4)2SO4 120～130，NaH2PO4·H2O 135～150，MgSO4·7H2O 230～250，CaCl2·2H2O130～150；微量元素(mg/kg)：KI 0.5～0.75，H3BO4 2.8～3.0，ZnSO4·7H2O 1.5～2.0，MnSO4·4H2O 9.0～10.0，Na2MoO4·2H2O 0.2～0.25，CuSO4·5H2O 0.025～0.03，CoCl2·6H2O0.025～0.03；鐵鹽(mg/kg)：Na2-EDTA 35.1～37.3，F(xiàn)eSO4·7H2O 26.0～28.0；有機物(mg/kg)：肌醇95～100，煙酸1.0～1.2，鹽酸吡哆醇1.0～1.2，鹽酸硫銨9～10。
所述的煉苗期間苗床控制條件為：基質相對濕度為65～70％、空氣相對濕度為75～80％；光照強度由10000LX逐步上升60000LX；在開始煉苗時噴施0.1mg/kg蕓苔素內脂(BR)1次，施液量10g/m2，并停止營養(yǎng)液供給。
本發(fā)明的有益效果為：
1)繁殖速度快。獲得再生植株速度快，春、夏季20d開始生根，30d生根率達到96％以上，成活率95％以上，50d可出圃移栽；秋季25～30d生根，60d生根率達到95％以上，成活率95％以上，春季可出圃移栽；
2)擴繁代數(shù)高。穗條復幼效果好，快繁生產受季節(jié)影響小，在快繁苗床不增加加熱設備的情況下，每年可快繁3～4代。
3)苗木質量好，出圃苗純度高、無病蟲、根系發(fā)達。
4)繁殖材料省，繁殖材料用量比常規(guī)扦插節(jié)省40～50％。
5)移植苗造林不受季節(jié)限制，造林成活率95％以上。
6)育苗成本低，操作簡便，適于工廠化生產，育苗成本比常規(guī)育苗節(jié)省30％以上。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明做進一步的說明，以下所述，僅是對本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明做其他形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術人員可能利用上述揭示的技術內容加以變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發(fā)明方案內容，依據(jù)本發(fā)明的技術實質對以下實施例所做的任何簡單修改或等同變化，均落在本發(fā)明的保護范圍內。具體實施方式通過以下步驟完成：
實施例1
1幼齡采穗圃創(chuàng)建
1.1圃地準備
幼齡采穗圃應靠近生產用穗中心區(qū)。選擇地勢平緩、光照充足、排灌良好、土層深厚、PH值6.5左右的壤土作圃地。但不宜選用前茬作物對苗木易感染有害生物的耕地。圃地整地包括翻耕、耙地和平整，要求“三犁三耙”。翻耕深度25cm，并清除雜灌草根、石塊。第1次犁耙，宜在種植前30d進行，撒施腐熟的餅肥500kg/667m2或腐熟的廄肥1000kg/667m2犁后即耙；第2次犁地在曬漚1周后進行,撒施過磷酸鈣100kg/667m2、硫酸鉀50kg/667m2。待殘存雜草、害蟲殺死后再耙；第3次犁耙宜在種植前3d內進行，并做成高25㎝、床寬120㎝的采穗圃苗床。
1.2苗木定植
2月上旬取1a生2代扦插苗開溝種植，初植密度為40㎝×40㎝。定植前，先在溝底撒施氮磷鉀(15—15—15)復混肥50g并覆土5㎝定植，定植后使用碎稻草或規(guī)格為20克/m2的無紡布覆蓋床土，并使用惡霉靈600mg/㎏(有效成分)噴濕苗床；使用專用營養(yǎng)液兌水10倍，并加入0.1mg/kg蕓苔素內脂進行葉面追肥，施液量10～15g/m2。
1.3田間管理
培育幼齡穗條：采用灌叢式培育采穗母樹，苗木高30㎝定干，當新梢生長至3～5厘米時，選留方向、分布均勻的4～6個新梢作為主枝培養(yǎng)，其余的新梢作抹芽處理。每隔5～7d噴施專用營養(yǎng)液10倍液(加入0.1mg/kg蕓苔素內脂)，施液量10～15g/m2；當主枝生長到20㎝時進行摘心，并結合營養(yǎng)液使用加入10mg/㎏赤霉素(GA3)、5mg/㎏IBA、5mg/㎏NAA噴施，連續(xù)2次，促進幼齡枝條健壯和提高穗條生長素含量；當腋芽膨大且未萌發(fā)時，應及時采集穗條，并對母樹采用抹芽、短截、回縮等修剪方法，抑制其高生長，促生幼齡化枝條?？旆彼霔l標準為半木質化，長度約20㎝。
穗條再生管理：每次穗條采集后，每行間追施有機肥300～500g和氮磷鉀三元復混肥50～70g，并繼續(xù)按上法進行葉面追肥，注意防治病蟲害，以促進幼齡枝條再生。當年定植苗木進入休眠期時，離地5～15cm平茬，苗木定植后的2～4a內，平茬高度逐年增加3～5cm。4a后應全面更新采穗圃，更新母樹可用于培養(yǎng)盆景。
擴建幼齡采穗圃：當苗木密度過大或郁閉封行時，采取隔行(株)挖除植株，移入擴建的幼齡采穗圃?？旆彼霔l供給不足的，使用3代快繁苗繼續(xù)擴建幼齡采穗圃。
2非試管快繁育苗實施方式
2.1快繁基質配方及處理
快繁基質配方(體積比)為：泥炭：蛭石：珍珠巖＝1～5：1～1.5：1～1.5?？旆被|按配方充分混和后，使用惡霉靈600mg/㎏滅菌處理，用薄膜覆蓋堆悶72h,快繁基質以手抓成團微有水印為度。
快繁基質裝入無紡布育苗容器(口徑8cm×10cm)并移入快繁簡易苗床或現(xiàn)成移動苗床。容器快繁苗密度為100～120株/m2。
2.2快繁生產時間
快繁時間根據(jù)采穗圃幼齡采穗條產量大小，選擇2月上旬、4月下旬、6月下旬、9月上旬等4個時間段或選擇4月中旬、6月中旬、9月上旬等3個時間段。
2.3插穗標準及處理
選擇插穗的標準為半木質化莖段，保留2個節(jié)，長度4.0～6.0㎝；插穗基部切面馬蹄形，切口距基部節(jié)0.5㎝；上部帶1對完整葉，切口平切，距上部節(jié)0.7～0.8㎝。
標準插穗先用0.1％高錳酸鉀消毒30min后沖洗干凈，使用專用生根劑配方浸泡插穗基部2h后晾至30min，插入容器基質2cm。專用生根劑配方由150～200mg/kg ABT1+100～150mg/kg NAA復配而成。。
2.4碳源供給方式及方法
利用氣液混合泵制取的碳酸水(氣泡直徑為20～30μm)，濃度為1000～1500㎎/㎏。當葉片水膜面積僅有1/3時，啟動噴霧系統(tǒng)供給碳酸水。具體噴霧碳酸水時間為：插后20d內，于8：00～18：00，間隔期15min一次，每次15s；插后20d至70％生根，于8：00～18：00，間隔期30min一次，每次15s；70％生根至煉苗，8：00～18：00，間隔期60min一次，每次15s。
2.5營養(yǎng)液使用。
視葉片表現(xiàn)狀況，每隔3～5d的17：00～18：00，按營養(yǎng)液配方兌水10倍,并加入5㎎/㎏IBA、5㎎/㎏NAA后啟動噴霧系統(tǒng)噴霧，每平方米噴霧液10～15g，直至煉苗階段。專用營養(yǎng)液原液配方為：
大量元素(mg/kg)：KNO3 2300～2500，(NH4)2SO4 120～130，NaH2PO4·H2O 135～150，MgSO4·7H2O 230～250，CaCl2·2H2O130～150；
微量元素(mg/kg)：KI 0.5～0.75，H3BO4 2.8～3.0，ZnSO4·7H2O1.5～2.0，MnSO4·4H2O 9.0～10.0，Na2MoO4·2H2O 0.2～0.25，CuSO4·5H2O 0.025～0.03，CoCl2·6H2O 0.025～0.03；
鐵鹽(mg/kg)：Na2-EDTA 35.1～37.3，F(xiàn)eSO4·7H2O 26.0～28.0；
有機物(mg/kg)：肌醇95～100，煙酸1.0～1.2，鹽酸吡哆醇1.0～1.2，鹽酸硫銨9～10。
2.6有害生物防治
預防苗木病害使用50％多菌靈可濕性粉劑、30％惡霉靈可濕性粉劑兌水800倍，并結合營養(yǎng)液交替使用。害蟲使用殺蟲燈、毒餌(地下害蟲)、印楝素、煙堿等殺蟲劑防治。
2.7煉苗方法及時間
采取透光、通風、控水、控肥和使用蕓苔素內脂等措施煉苗，煉苗技術參數(shù)為：1)當插穗生根率95％以上，側根穿杯率達90％時開始煉苗，煉苗期10～15天。2)煉苗期的基質相對濕度為65～70％、空氣相對濕度為75～80％；光照強度由10000LX逐步上升60000LX；并在開始煉苗時噴施0.1mg/kg蕓苔素內脂一次，停止營養(yǎng)液供給。3)插穗長出3～5片變綠新葉、側根顏色變深時，煉苗結束。