一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法
【專利摘要】本發(fā)明專利涉及動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜆?gòu)建【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說是一種小鼠2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法。所述方法包括：取7-31日齡雄性昆明種小鼠，一次性腹腔注射50-75mg/Kg鏈脲佐菌素，從自由進(jìn)食時(shí)給予高脂高糖飼料連續(xù)喂養(yǎng)4-6周后，以同時(shí)滿足空腹血糖高于7.0mmol/L、糖耐量試驗(yàn)2h血糖高于11.1mmol/L、膽固醇高于5.7mmol/L、甘油三酯高于1.7mmol/L、高密度脂蛋白低于1.0mmol/L的小鼠定義為2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。本模型能夠模擬人類2型糖尿病的特征，并且采用多項(xiàng)指標(biāo)檢測能準(zhǔn)確定義2型糖尿病，低齡動物體重輕，所用鏈脲佐菌素劑量小，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。
【專利說明】一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法
[0001]

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜆?gòu)建【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說是一種小鼠2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法。

【背景技術(shù)】
[0003]糖尿病已嚴(yán)重威脅人類的生命和健康，是繼腫瘤、心血管疾病之后對人類健康危害最嚴(yán)重的慢性非傳染性疾病。隨著我國社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的變化，我國糖尿病發(fā)病率高達(dá)9.7%。2010年的調(diào)查研究表明，中國目前有超過9240萬糖尿病患者，已成為全球糖尿病第一大國。在眾多糖尿病患者中，90%以上為2型糖尿病。建立穩(wěn)定、可靠、高效的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ褪茄芯?型糖尿病發(fā)生機(jī)制及治療干預(yù)措施的先決條件。高脂高糖飼料喂養(yǎng)聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素誘導(dǎo)是一種常用造模方法，但是對于實(shí)驗(yàn)小鼠的品系、年齡，高脂高糖飼料飼養(yǎng)時(shí)間、鏈脲佐菌素注射劑量與方法、糖尿病小鼠成模標(biāo)準(zhǔn)等，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道不一。建立一種穩(wěn)定、操作簡便、經(jīng)濟(jì)高效、符合2型糖尿病特征的糖尿病實(shí)驗(yàn)動物模型將有助于2型糖尿病的相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明專利提供了一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其通過下述技術(shù)予以實(shí)現(xiàn):取7-31日齡雄性昆明種小鼠，一次性腹腔注射50-75 mg/Kg鏈脲佐菌素，從自由進(jìn)食時(shí)給予高脂高糖飼料連續(xù)喂養(yǎng)4-6周后，采用全自動血糖儀檢測空腹血糖和糖耐量試驗(yàn)2h血糖，全自動血脂儀檢測膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白，以同時(shí)滿足空腹血糖高于7.0mmol/L、糖耐量試驗(yàn)2h血糖高于11.1 mmol/L (糖耐量試驗(yàn)給予2.5g/Kg的葡萄糖)、膽固醇高于5.7 mmol/L、甘油三酯高于1.7 mmol/L、高密度脂蛋白低于1.0 mmol/L的小鼠定義為2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀１景l(fā)明專利中的高脂高糖飼料自制，采用質(zhì)量為8-12%豬油、2.2-2.8%膽固醇、0.8-1.2%膽酸鈉、17-25%蔗糖和62-72%市售基礎(chǔ)飼料，經(jīng)粉碎后加蒸餾水混勻，壓制成Φ 1mmX40mm圓柱狀,低溫真空干燥制成。
[0005]本發(fā)明專利從一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法與現(xiàn)有的2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法相比較具有如下有益效果:所述的2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蜆?gòu)建方法的成模率高，以同時(shí)滿足空腹血糖高于7.0 mmol/L、糖耐量試驗(yàn)2h血糖高于11.1 mmol/L (糖耐量試驗(yàn)給予2.5g/Kg的葡萄糖)、膽固醇高于5.7 mmol/L、甘油三酯高于1.7 mmol/L、高密度脂蛋白低于1.0 mmol/L的小鼠定義為2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，成模率?3.3%。本發(fā)明專利中的2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ湍軌蚰M人類2型糖尿病的發(fā)展進(jìn)程及全身機(jī)能變化的特征。采用空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)2h血糖、膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白等多項(xiàng)指標(biāo)檢測能準(zhǔn)確定義2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，并且低齡動物體重輕，所用鏈脲佐菌素劑量小，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0006]圖1是本發(fā)明專利一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法流程圖。

【具體實(shí)施方式】
[0007]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明專利一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法的優(yōu)選技術(shù)方案作進(jìn)一步描述。
[0008]主要技術(shù)方案:原料及輔料:雄性昆明種小鼠、蒸餾水、鏈脲佐菌素、膽固醇、膽酸鈉等。主要設(shè)備:血糖儀、血糖試紙、血脂儀、膽固醇試紙、甘油三酯試紙、高密度脂蛋白試紙、一次性注射器等。
[0009]本發(fā)明專利一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法實(shí)施方案如下:取10-20日齡雄性昆明種小鼠，優(yōu)選一次性腹腔注射65 mg/Kg鏈脲佐菌素，從自由進(jìn)食時(shí)給予高脂高糖飼料連續(xù)喂養(yǎng)5周后，采用全自動血糖儀檢測空腹血糖，全自動血脂儀檢測膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白，優(yōu)選同時(shí)滿足空腹血糖高于7.0 mol/L、糖耐量試驗(yàn)2h血糖高于11.1mmol/L (糖耐量試驗(yàn)給予2.5g/Kg的葡萄糖)、膽固醇高于5.7mmol/L、甘油三酯高于1.7mmol/L、高密度脂蛋白低于1.0 mmol/L的小鼠定義為2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。本發(fā)明專利中的高脂高糖飼料自制，優(yōu)選質(zhì)量為10%豬油、2.5%膽固醇、1%膽酸鈉、20%蔗糖和66.5%市售基礎(chǔ)飼料經(jīng)粉碎后加蒸懼水混勻，壓制成Φ10ι?πιΧ40πιπι圓柱狀,低溫真空干燥制成。
[0010]本發(fā)明專利中2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ湍軌蚰M人類糖尿病的發(fā)展進(jìn)程及全身機(jī)能變化的特征。采用空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)2h血糖、膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白等多項(xiàng)指標(biāo)檢測能準(zhǔn)確定義2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，并且低齡動物體重輕，所用鏈脲佐菌素劑量小，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。本發(fā)明專利可用于建立穩(wěn)定、可靠、高效的動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停茄芯?型糖尿病發(fā)生機(jī)制及干預(yù)治療措施的實(shí)驗(yàn)材料，具有重大科研意義。
【權(quán)利要求】
1.一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟:(1)選取雄性昆明種小鼠，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素，從自由進(jìn)食時(shí)給予高脂高糖飼料連續(xù)喂養(yǎng)4-6周；(2)采用全自動血糖儀檢測空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)2h血糖，全自動血脂儀檢測膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其特征在于，所述高脂高糖飼料采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8-12%豬油、2.2-2.8%膽固醇、0.8-1.2%膽酸鈉、17-25%蔗糖和62-72%市售基礎(chǔ)飼料經(jīng)粉碎后加蒸懼水混勻,壓制成Φ 1mmX40mm圓柱狀,低溫真空干燥制成。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其特征在于，低溫真空干燥的條件是溫度為5-20°C，壓強(qiáng)為15-22 kPa。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其特征在于，所選擇的實(shí)驗(yàn)小鼠為昆明種7-31日齡的雄性低齡小鼠。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法,其特征在于,一次性腹腔注射50-75 mg/Kg鏈脲佐菌素。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷臉?gòu)建方法，其特征在于，在判斷成模動物時(shí)，需同時(shí)檢測空腹血糖、糖耐量試驗(yàn)2h血糖、膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白，以空腹血糖高于7.0 mmol/L、糖耐量試驗(yàn)2h血糖高于11.1 mmol/L、膽固醇高于5.7mmol/L、甘油三酯高于1.7 mmol/L、高密度脂蛋白低于1.0 mmol/L的小鼠定義為2型糖尿病動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br> 【文檔編號】A01K67/02GK104257671SQ201410560547
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月21日
【發(fā)明者】曾陽, 唐勛, 尚軍, 喬楓, 馬秀梅, 宋永朋, 張倩茹, 余濤, 孫玉俠, 王永萍 申請人:青海師范大學(xué)