一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括莖段的消毒、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、野外生根誘導等步驟。本發(fā)明通過對掛苦繡球的誘導、增殖、生根等條件的研究，成功地建立了掛苦繡球的微繁體系。
【專利說明】 一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及掛苦繡球的組織培養(yǎng)，屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]掛苦繡球，辦xanthoncura虎耳草科,又名黃枝掛苦子樹、六蛾戲珠、黃脈繡球。灌木至小喬木，高1-7米，當年生小枝黑褐色或灰黃褐色，無毛或疏被柔毛，二年生小枝色較淡，常具明顯的淺色皮孔，有時一年生小枝亦具皮孔，樹皮稍厚，不易脫落或呈小塊狀剝落。生于山腰密林或疏林中或山頂灌叢中，海拔1600-2900米。掛苦繡球功效:化瘀療傷,主治:用于跌打損傷、瘀血腫痛、筋骨疼痛、骨折等。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，本發(fā)明通過對掛苦繡球的誘導、增殖、生根等條件的研究，成功地建立了掛苦繡球的微繁體系。
[0004]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案:
選擇生長健壯的植株，切取長約3cm的莖段，放入玻璃瓶中，三層紗布封口，流水沖洗lh，洗去附著表面的多數(shù)雜菌，浸泡于lg/L多菌靈+800mg/L的羧卞青霉素鈉，置于120r/min搖床上振蕩1.5h,超凈工作臺上70%酒精處理lmin, lg/L升萊處理15min,無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到BL+6-BA 1.0mg/L+NAA 2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度 22001x，光照 8h，誘導出來的芽苗接入 MS+6-BAL 5-2.0mg/L+1.5-2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L瓊脂+15-20g/L魔芋粉培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，溫度24±2°C，選取生長旺盛的芽苗，將其敞口置于溫室中煉苗3d后，取出，無菌水洗凈底部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的1/2園土+1/2河沙的基質(zhì)中，移栽后保持濕度85%以上，溫度30°C，30天后統(tǒng)計生根成活率。
[0005]采用本發(fā)明制備的掛苦繡球生根率高，培養(yǎng)周期短，利于大規(guī)模種植。
[0006]下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1
選擇生長健壯的植株，切取長約3cm的莖段，放入玻璃瓶中，三層紗布封口，流水沖洗lh，洗去附著表面的多數(shù)雜菌，浸泡于lg/L多菌靈+800mg/L的羧卞青霉素鈉，置于120r/min搖床上振蕩1.5h,超凈工作臺上70%酒精處理lmin, lg/L升萊處理15min,無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度22001x，光照 8h，誘導出來的芽苗接入 MS+6-BA1.5mg/L+l.5mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 瓊脂+15g/L魔芋粉培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，溫度24 ± 2°C，選取生長旺盛的芽苗，將其敞口置于溫室中煉苗3d后，取出，無菌水洗凈底部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的1/2園土 +1/2河沙的基質(zhì)中，移栽后保持濕度85%以上，溫度30°C，30天后統(tǒng)計生根成活率，成活率88%。
[0008]實施例2
選擇生長健壯的植株，切取長約3cm的莖段，放入玻璃瓶中，三層紗布封口，流水沖洗lh，洗去附著表面的多數(shù)雜菌，浸泡于lg/L多菌靈+800mg/L的羧卞青霉素鈉，置于120r/min搖床上振蕩1.5h,超凈工作臺上70%酒精處理lmin, lg/L升萊處理15min,無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度22001x，光照 8h，誘導出來的芽苗接入 MS+6-BA2.0mg/L+2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 瓊脂+20g/L魔芋粉培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，溫度24 ± 2°C，選取生長旺盛的芽苗，將其敞口置于溫室中煉苗3d后，取出，無菌水洗凈底部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的1/2園土 +1/2河沙的基質(zhì)中，移栽后保持濕度85%以上，溫度30°C，30天后統(tǒng)計生根成活率，成活率92%。
[0009]實施例3
選擇生長健壯的植株，切取長約3cm的莖段，放入玻璃瓶中，三層紗布封口，流水沖洗lh，洗去附著表面的多數(shù)雜菌，浸泡于lg/L多菌靈+800mg/L的羧卞青霉素鈉，置于120r/min搖床上振蕩1.5h,超凈工作臺上70%酒精處理lmin, lg/L升萊處理15min,無菌水沖洗干凈，消毒處理過的無菌莖段接種到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度22001x，光照 8h，誘導出來的芽苗接入 MS+6-BA2.0mg/L+1.5mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L 瓊脂+20g/L魔芋粉培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，光照50001x，光期13h/d，溫度24 ± 2°C，選取生長旺盛的芽苗，將其敞口置于溫室中煉苗3d后，取出，無菌水洗凈底部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的1/2園土 +1/2河沙的基質(zhì)中，移栽后保持濕度85%以上，溫度30°C，30天后統(tǒng)計生根成活率，成活率94%。
【權(quán)利要求】
1.一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括莖段的消毒、腋芽的誘導、叢生芽的增殖、野外生根誘導等，其主要步驟如下: (1)取掛苦繡球的莖段，進行消毒處理； (2)將步驟(I)消毒處理過的無菌莖段接種到BL+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+10%椰子汁+2g/LCH的培養(yǎng)基中進行腋芽的誘導，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，培養(yǎng)溫度24±2°C，光照強度22001x，光照8h ； (3)取步驟(2)誘導出來的芽苗接入MS+6-BA1.5-2.0mg/L+1.5-2.0mg/LKT+0.5mg/LNAA+4.0g/L瓊脂+15-20g/L魔芋粉培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng)，附加葡萄糖30g/L，瓊脂6.5g/L，光照 50001x，光期 13h/d，溫度 24±2°C ； (4)將步驟(3)增殖后的芽苗進行野外生根誘導。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述掛苦繡球無菌莖段的獲得為選擇生長健壯的植株，切取長約3cm的莖段，放入玻璃瓶中，三層紗布封口，流水沖洗lh，洗去附著表面的多數(shù)雜菌，浸泡于lg/L多菌靈+800mg/L的羧卞青霉素鈉，置于120r/min搖床上振蕩1.5h，超凈工作臺上70%酒精處理lmin, lg/L升萊處理15min,無菌水沖洗干凈。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種掛苦繡球組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中所述掛苦繡球野外生根誘導的方法為選取生長旺盛的芽苗，將其敞口置于溫室中煉苗3d后，取出，無菌水洗凈底部培養(yǎng)基，移栽到滅菌過的1/2園土 +1/2河沙的基質(zhì)中，移栽后保持濕度85%以上，溫度30°C，30天后統(tǒng)計生根成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104304019SQ201410550721
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月17日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司