一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的增殖、生根誘導(dǎo)等步驟，本發(fā)明方法建立了云木香組培微繁體系，操作簡單易控，生產(chǎn)成本低，不受時(shí)間和空間的限制，產(chǎn)量大，污染小，便于大規(guī)模推廣種植。
【專利說明】一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及云木香組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]云木香，Saussurea costus,菊科,又名廣木香、木香、蜜香、青木香、五木香、南木香，多年生草本植物，生長于較高的山地。原產(chǎn)印度，分布于中國陜西、甘肅、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、云南、西藏等地有引種栽培，以云南西北部種植較多，產(chǎn)量較大。栽培于海拔2500-4000m的高山地區(qū)，在涼爽的平原和丘陵地區(qū)也可生長。喜冷涼濕潤，耐寒、耐旱，怕高溫和強(qiáng)光，幼苗期怕直射光。產(chǎn)區(qū)在海拔800-2500m山區(qū)的陰坡地，選朝北或東北坡向，坡向30°?35° ,以土層深厚、疏松肥沃、富含腐殖質(zhì)、排水良，pH6.5-7.0的砂質(zhì)壤土和壤土栽培為宜，低洼易澇地長期積水會(huì)引起爛根。幼苗期生長緩慢，可與玉米等作物套、間作，又可遮陽。用種子繁殖。可做藥用，具有抑菌護(hù)肝，行氣止痛，理氣疏肝，健脾消滯，抗菌消炎，降壓等作用，主要采用弓I種野外栽培。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種云木香組織培養(yǎng)的快繁方法，本發(fā)明方法建立了云木香組培微繁體系，操作簡單易控，生產(chǎn)成本低，不受時(shí)間和空間的限制，產(chǎn)量大，污染小，便于大規(guī)模推廣種植。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實(shí)現(xiàn)的:
取云木香幼嫩的葉片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水沖洗15min,超凈工作臺(tái)上2%溴水處理lOmin，無菌水沖洗5次，消毒處理過的云木香葉片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸銀2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中愈傷組織的誘導(dǎo)，ρΗ5.9，光照強(qiáng)度5001χ,光期6h/d，溫度25 °C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫蘇糖醇100_150mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中進(jìn)行愈傷組織的分化，PH5.9，光照 35001x，溫度 25°C，分化后的芽苗接入 1/2MS+PP3331-1.5mg/L+0.6%瓊脂+18g/L蔗糖中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，pH5.9，光照160001x，光期18h/d，溫度25°C，45天后統(tǒng)計(jì)生根率。
[0005]采用本發(fā)明制備的云木香生根率高，能耗少，品質(zhì)高。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。

【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
取云木香幼嫩的葉片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水沖洗15min,超凈工作臺(tái)上2%溴水處理lOmin，無菌水沖洗5次，消毒處理過的云木香葉片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸銀2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中愈傷組織的誘導(dǎo)，ρΗ5.9，光照強(qiáng)度5001χ,光期6h/d，溫度25 °C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫蘇糖醇100mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中進(jìn)行愈傷組織的分化，pH5.9，光照35001x，溫度25°C，分化后的芽苗接入l/2MS+PP3331mg/L+0.6%瓊脂+18g/L蔗糖中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，溫度25°C，45天后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率92%。
[0008]實(shí)施例2
取云木香幼嫩的葉片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水沖洗15min,超凈工作臺(tái)上2%溴水處理lOmin，無菌水沖洗5次，消毒處理過的云木香葉片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸銀2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中愈傷組織的誘導(dǎo)，ρΗ5.9，光照強(qiáng)度5001χ,光期6h/d，溫度25 °C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫蘇糖醇150mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中進(jìn)行愈傷組織的分化，pH5.9，光照35001x，溫度25°C，分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331.5mg/L+0.6%瓊脂+18g/L蔗糖中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，溫度25°C，45天后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率93%。
[0009]實(shí)施例3
取云木香幼嫩的葉片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水沖洗15min,超凈工作臺(tái)上2%溴水處理lOmin，無菌水沖洗5次，消毒處理過的云木香葉片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸銀2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中愈傷組織的誘導(dǎo)，ρΗ5.9，光照強(qiáng)度5001χ,光期6h/d，溫度25 °C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫蘇糖醇100mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中進(jìn)行愈傷組織的分化，pH5.9，光照35001x，溫度25°C，分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331.5mg/L+0.6%瓊脂+18g/L蔗糖中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，溫度25°C，45天后統(tǒng)計(jì)生根率，生根率95%。
【權(quán)利要求】
1.一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的增殖、生根誘導(dǎo)，其主要步驟如下: (1)取幼嫩的葉片進(jìn)行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的云木香葉片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸銀2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5.9，光照強(qiáng)度5001x，光期6h/d，溫度25 0C ； (3 )取步驟(2 )誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫蘇糖醇100-150mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖中進(jìn)行愈傷組織的分化，pH5.9，光照35001x，溫度 25 0C ； (4)取步驟(3)分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331-1.5mg/L+0.6%瓊脂+18g/L蔗糖中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，ρΗ5.9，光照160001χ，光期18h/d，溫度25。。。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述云木香無菌葉片的獲得為，取云木香幼嫩的葉片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min，流水沖洗15min，超凈工作臺(tái)上2%溴水處理lOmin，無菌水沖洗5次。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)中誘導(dǎo)愈傷組織的分化中加入了二硫蘇糖醇可以促進(jìn)細(xì)胞的分裂和分化。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種云木香組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)生根誘導(dǎo)加入了少量的PP333，對(duì)生根具有顯著的促進(jìn)作用。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104285795SQ201410540446
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年10月14日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月14日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農(nóng)業(yè)科技有限公司