一種黃酮類化合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種黃酮類化合物及其制備方法和應(yīng)用，所述黃酮類化合物是從豆科山螞蝗屬植物尖葉山螞蝗(Desmodiumoxyphyllum)的全草中分離得到，命名為山螞蝗素B，英文名為oxyphyllumflavoneB，其分子式為C22H18O6，具有下述結(jié)構(gòu)：所述黃酮類化合物的制備方法，是以豆科山螞蝗屬植物尖葉山螞蝗的全草為原料，經(jīng)浸膏提取、有機(jī)溶劑提取、MCI脫色、硅膠柱層析、高壓液相色譜分離步驟。所述應(yīng)用為該黃酮類化合物在制備抗煙草花葉病毒藥物中的應(yīng)用。經(jīng)對(duì)抗煙草花葉病毒的實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明化合物對(duì)煙草花葉病毒的抑制率達(dá)56.5%，比陽性對(duì)照品南寧霉素的抑制率(29.6%)高，具有很好的抗煙草花葉病毒活性。本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)簡單活性好，可作為抗煙草花葉病毒藥物的先導(dǎo)性化合物，有良好的應(yīng)用前景。
【專利說明】一種黃酮類化合物及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物有效成分提取分離【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種黃酮類化合物及其制 備方法和應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 豆科山螞幢屬（學(xué)名Desv.)，約350種，多分布于亞熱帶和熱帶地區(qū)。 我國有27種5變種，大部分布于西南經(jīng)中南部至東南部，僅1種產(chǎn)陜、甘西南部。研究表明， 該屬植物富含黃酮類化合物，這類成分結(jié)構(gòu)新穎多樣，且具有廣泛的藥理活性，如抗腫瘤， 抗病毒，抗菌等活性。山螞幢(從?側(cè)〇￡//油？ )是一種高30厘米至1. 5米的半灌 木。在民間廣泛用于疏風(fēng)清熱，解毒消腫。主治溫病發(fā)熱、風(fēng)濕骨痛、咳嗽、咯血和瘡毒癰腫。 本發(fā)明從尖葉山螞幢)中分離得到一個(gè)新的黃酮類化合物，該化 合物具有顯著的抗煙草花葉病毒活性。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的第一目的是提供一種黃酮類化合物；第二目的在于提供所述黃酮類化合 物的制備方法；第三目的在于提供所述黃酮類化合物在制備抗煙草花葉病毒藥物中的應(yīng) 用。
[0004] 本發(fā)明的第一目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，所述黃酮類化合物是從豆科山螞蝗屬植物尖 葉山螞幢的全草中分離得到，命名為山螞幢素B，英文名為 oxyphyllumflavone B，其分子式為C22H1806,具有下述結(jié)構(gòu)：

【權(quán)利要求】
1. 一種黃酮類化合物，其特征在于所述化合物是從干燥的豆科山螞蝗屬植物尖 葉山螞幢的全草中分離得到，命名為山螞幢素 B，英文名為 oxyphyllumflavone B，其分子式為C22H1806,具有下述結(jié)構(gòu)：
2. -種權(quán)利要求1所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于以干燥的豆科植物山 螞幢屬尖葉山螞幢的全草為原料，經(jīng)浸膏提取、有機(jī)溶劑提取、 MCI脫色、硅膠柱層析、高壓液相色譜分離步驟而得到的，具體為： A、 浸膏提?。簩⒍箍浦参锷轿洿睂偌馊~山螞幢（ifeswot/iw? 的全草粉碎 到2(Γ40目，用有機(jī)溶劑超聲提取2飛次，每次3(Γ60分鐘，提取液合并，過濾，減壓濃縮提 取液，靜置，濾除沉淀物，濃縮成浸膏a ; B、 有機(jī)溶劑萃?。航郺中加入重量比1~2倍量的水，用與水等體積的有機(jī)溶劑萃取 3飛次，合并有機(jī)溶劑萃取相，減壓濃縮成浸膏b ; C、 MCI脫色：浸膏b用重量比：Γ5倍量的甲醇水溶解，上MCI柱，用80%-90%甲醇-水 洗脫，合并有機(jī)溶劑萃取相，減壓濃縮成浸膏c ; D、 硅膠柱一次層析：浸膏c用浸膏重量比6~10倍量的16(Γ200目硅膠裝柱進(jìn)行硅膠 柱層析；以體積配比為1: (Γ0:1的氯仿-甲醇溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集梯度洗脫液、濃縮，經(jīng) TLC監(jiān)測，合并相同的部分； E、 硅膠柱二次層析：D步驟洗脫液的9:1部分進(jìn)一步用重量比6~10倍量的16(Γ200目 硅膠裝柱進(jìn)行硅膠柱層析；以體積配比為1: (Γ0:1的石油醚-丙酮溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集 梯度洗脫液、濃縮，經(jīng)TLC監(jiān)測，合并相同的部分； F、 高壓液相色譜分離：E步驟洗脫液的8:2部分進(jìn)一步用高壓液相色譜分離純化即得 所述的黃酮類化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述A步驟中的有機(jī) 溶劑為7〇~1〇〇%的丙酮、乙醇、甲醇中的任意一種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述Β步驟中的有機(jī) 溶劑為乙酸乙酯、氯仿、乙醚、石油醚、苯中的任意一種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述C步驟中的甲 醇-水體積配比為8: 2、8. 5:1. 5和9:1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述D步驟中浸膏c 在經(jīng)硅膠柱層析前，用重量比1. 5~3倍量的甲醇或者丙酮溶解，用浸膏重量比0. 8~1. 2倍的 80?100目硅膠拌樣。
7. 據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述D步驟中氯仿-甲 醇溶液體積配比為 20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、5:5。
8. 據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述E步驟中石油 醚-丙酮溶液體積配比為9:1、8:2、7 :3、6:4、5:5。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類化合物的制備方法，其特征在于所述F步驟中高效 液相色譜分離純化是以3(Γ60%的甲醇為流動(dòng)相，流速l(Tl4ml/min，21.2 mm X 250 mm， 5μηι的Zorbax PrepHT GF反相制備柱為固定相，紫外檢測器檢測波長為254 nm，每次進(jìn)樣 45~60 μ L，收集2(T35min的色譜峰，多次累加后蒸干。
10. -種權(quán)利要求1所述黃酮類化合物在制備抗煙草花葉病毒藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A01P1/00GK104292202SQ201410467243
【公開日】2015年1月21日 申請(qǐng)日期:2014年9月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月15日
【發(fā)明者】周敏, 高雪梅, 胡秋芬, 杜剛, 李銀科, 葉艷清, 楊海英 申請(qǐng)人:云南民族大學(xué)