一種狹葉竹葉參的快速繁殖方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,包括外植體的消毒、腋芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、生根誘導(dǎo)、苯丙氨酸的調(diào)控。本發(fā)明的狹葉竹節(jié)參組培方法操作簡(jiǎn)便易行,增殖系數(shù)高,繁殖率高,生長(zhǎng)速度快,次生代謝物含量高,可以短期內(nèi)獲得大量的狹葉竹節(jié)參幼苗,有助于狹葉竹節(jié)參資源的開(kāi)發(fā)和利用。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種狹葉竹葉參的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及組培條件下狹葉竹葉參的培養(yǎng),屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002] 狹葉竹節(jié)參,多年生草本,五加科,Mey. var.,又名竹根七、 野三七、雞頭七,分布于四川、貴州、云南、西藏等地。生于海拔2000-3000m的山中灌木叢 中。散瘀止血;活血定痛;解毒消腫。主治:咯血,吐血,衄血,尿血,便血,崩漏,產(chǎn)后出血過(guò) 多,瘀血腹痛,經(jīng)閉,跌打瘀腫,外傷出血,瘡瘍腫毒,蛇傷。目前主要采用野外采擷,繁殖主 要是自然繁殖,給狹葉竹節(jié)參的開(kāi)發(fā)利用帶來(lái)了局限性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,并采用苯丙氨酸 進(jìn)行調(diào)控,增殖率高,生長(zhǎng)速度快,操作簡(jiǎn)單,可以獲得大量狹葉竹節(jié)參幼苗,有利于狹葉竹 節(jié)參資源的開(kāi)發(fā)。
[0004] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題,本發(fā)明采用下列技術(shù)方案: 取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈 工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化汞處理lOmin,無(wú)菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過(guò)的狹葉竹 節(jié)參芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iP0. 8mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸鈉100mg/L培養(yǎng)基中培 養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照15001x,溫度22°C,生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹 節(jié)參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/ L,附加蔗糖25g/L,瓊脂5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照30001x,培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入 7mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量。
[0005] 采用本發(fā)明制備的狹葉竹節(jié)參繁殖率高,生根率96%,操作簡(jiǎn)單,能耗小。
[0006] 下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述,但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不 局限于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】 [0007] 實(shí)施例1 取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈 工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化汞處理10min,無(wú)菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過(guò)的狹葉竹 節(jié)參芽接入WPM+6-BA1. 0mg/L+2iP0. 5mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸鈉100mg/L培養(yǎng)基中培 養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照15001x,溫度22°C,生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹節(jié) 參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. Omg/L GA3附加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/ L,附加蔗糖25g/L,瓊脂5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照30001x,培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入 5mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量,生根率90%,。
[0008] 實(shí)施例2 取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈 工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理lOmin,無(wú)菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過(guò)的狹葉竹節(jié) 參芽接入 WPM+6-BA2. 0mg/L+2iPl. Omg/L+NAAO. lmg/L+ 硫代硫酸鈉 100 mg/L 培養(yǎng)基中培 養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照15001x,溫度22°C,生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹 節(jié)參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/ L,附加蔗糖25g/L,瓊脂5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照30001x,培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入 8 mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量,生根率92%,。
[0009] 實(shí)施例3 取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈 工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化汞處理lOmin,無(wú)菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過(guò)的狹葉竹 節(jié)參芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iP0. 5mg/L+NAA0. lmg/L+硫代硫酸鈉100mg/L培養(yǎng)基中培 養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照15001x,溫度22°C,生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹 節(jié)參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/ L,附加蔗糖25g/L,瓊脂5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照30001x,培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入 5mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量,生根率94%,。
[0010] 實(shí)施例4 取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡3min,流水沖洗45min,超凈 工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化汞處理lOmin,無(wú)菌水沖洗5-7遍,滅菌處理過(guò)的狹葉竹 節(jié)參芽接入WPM+6-BA1. 5mg/L+2iPl. Omg/L+NAAO. lmg/L+硫代硫酸鈉100mg/L培養(yǎng)基中培 養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照15001x,溫度22°C,生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹 節(jié)參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3B加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照20001x,增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/ L,附加蔗糖25g/L,瓊脂5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照30001x,培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入 8 mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量,生根率93%,。
【權(quán)利要求】
1. 一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,包括腋芽的消毒、叢生芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、 生根培養(yǎng)、苯丙氨酸的調(diào)控,其主要步驟如下: (1) 取狹葉竹節(jié)參地下部分塊莖芽,對(duì)其進(jìn)行消毒處理; (2) 將步驟(1)滅菌處理過(guò)的狹葉竹節(jié)參芽接入WPM+6-BA1. 0-2. Omg/ L+2iP0. 5-1. 0mg/L+NAA0· lmg/L+硫代硫酸鈉100mg/L培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加蔗糖30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照 15001x,溫度 22°C ; (3) 取步驟(2)生長(zhǎng)出來(lái)的狹葉竹節(jié)參腋芽,放入增殖培養(yǎng)基WPM+TDZO. lmg/ L+NAAO. lmg/L+2. 0mg/LGA3 附加蔗糖 30g/L,瓊脂 6-7g/L,PH5. 8-5. 9,光照 20001x ; (4) 取步驟(3)增殖培養(yǎng)出來(lái)的叢生芽放入生根培養(yǎng)基WPM+NAAO. 4mg/L,附加蔗糖 25g/L,瓊脂 5-6g/L,PH5. 8-5. 9,光照 30001x ; (5) 取步驟(4)培養(yǎng)出的狹葉竹節(jié)參試管苗加入5-8mg/L苯丙氨酸,調(diào)控其生長(zhǎng)及次生 代謝物質(zhì)的含量。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(1)中 所述狹葉竹節(jié)參芽的消毒處理為:取狹葉竹節(jié)參地下部分芽,清水中洗凈,在漂白粉中浸泡 3min,流水沖洗45min,超凈工作臺(tái)上75%酒精處理30s,氯化萊處理lOmin,無(wú)菌水沖洗5-7 遍。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(2)腋 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)中附加了硫代硫酸鈉 l〇〇mg/L,用來(lái)防止叢生芽誘導(dǎo)過(guò)程中的褐化現(xiàn)象。
4. 按照權(quán)利要求1所述的一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(3)中 的增殖培養(yǎng)基中附加了 2. 0mg/LGA3,可以促進(jìn)芽的生長(zhǎng)。
5. 按照權(quán)利要求1所述的一種狹葉竹節(jié)參的快速繁殖方法,其特征在于:步驟(5)中 加入了 5-8mg/L苯丙氨酸,可以調(diào)控其生長(zhǎng)及次生代謝物質(zhì)的含量,且采用過(guò)濾滅菌。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104186331SQ201410463011
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請(qǐng)人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司