一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法。包括無菌外植體的獲得，愈傷組織的誘導(dǎo)、植株再生、煉苗培養(yǎng)。本發(fā)明可以在短期內(nèi)獲得大量的愈傷組織和再生植株，有助于解決柄果槲寄生種質(zhì)資源的可持續(xù)生長，并且為柄果槲寄生藥用成分的開發(fā)利用提供新的途徑。
【專利說明】一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 柄果槲寄生，桑寄生科，灌木植物，K/scw? 又稱寄 生茶，刀葉槲寄生，油香藤寄生，生于海拔200-1200 (-1600)米的山地常綠闊葉林中，寄生 于錐栗屬、柯屬或樟樹等植物上。分布于云南南部和東南部、貴州西南部、廣西、廣東、江西 (尋烏)、福建、臺灣。泰國北部、越南北部也有分布。從中分離得到β-香樹脂醇，羽扇豆醇， 菜油甾醉，豆留醇，β-谷留醇，β-香樹脂酸乙酸酯，羽扇豆醇乙酸酯，β-香樹脂酮，羽扇 烯酮，白樺脂酸，齊墩果酸，菜油留醇葡萄糖甙，功效主治祛風(fēng)濕；補肝腎；活血止痛；安胎； 下乳。主治風(fēng)濕痹痛；腰腿痛；跌打損傷；高血壓；胎動不安；乳汁不下。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種柄果槲寄生的快速繁殖方法，由該方法所 制備得到的柄果槲寄生成活率高，品質(zhì)優(yōu)良，次生代謝物含量高，可以為大田大規(guī)模種植提 供種苗。
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的： 選用柄果槲寄生幼嫩的葉片，用肥皂水中浸泡三分鐘，自來水沖洗25分鐘，在超凈 工作臺上用1 %的碘化鉀消毒9分鐘，無菌水沖洗5次，接種入培養(yǎng)基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)的條件為溫度25°C，濕度60%，光 照強度8001x，光期5h/d，45天后，轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基MS+NAA0. 1?0· 3mg/L+KT0. 5-1. 5mg/ L+70-150mg/L氯化鈉上誘導(dǎo)愈傷組織分化，分化的條件為溫度27°C，濕度80%，光照強度 30001x，光期16h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，在室內(nèi)自然光下閉口煉苗一周，在移 栽前開蓋煉苗2d，然后移栽到高壓滅菌過的蛭石：珍珠巖=2:1的營養(yǎng)缽中，待長出新根后 進(jìn)行第二步移栽，移栽基質(zhì)為田園土 ：蛭石=2:1，濕度85%，光照強度50001x，光期16h/d。
[0005] 采用本發(fā)明制備的柄果槲寄生幼苗成活率高，周期短，次生代謝物含量高，能耗 少，利于大規(guī)模種植。
[0006] 下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不 局限于下列實施方式。

【具體實施方式】 [0007] 實施例1 選用柄果槲寄生幼嫩的葉片，用肥皂水中浸泡三分鐘，自來水沖洗25分鐘，在超凈 工作臺上用1 %的碘化鉀消毒9分鐘，無菌水沖洗5次，接種入培養(yǎng)基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)的條件為溫度25°C，濕度60%，光 照強度8001x，光期5h/d，45天后，轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基MS+NAAO. lmg/L+KTO. 5mg/L+70mg/L氯 化鈉上誘導(dǎo)愈傷組織分化，分化的條件為溫度27°C，濕度80%，光照強度30001x，光期16h/ d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，在室內(nèi)自然光下閉口煉苗一周，在移栽前開蓋煉苗2d， 然后移栽到高壓滅菌過的蛭石：珍珠巖=2:1的營養(yǎng)缽中，待長出新根后進(jìn)行第二步移栽， 移栽基質(zhì)為田園土 ：蛭石=2:1，濕度85%，光照強度50001x，光期16h/d，再生成活率86%。 [0008] 實施例2 選用柄果槲寄生幼嫩的葉片，用肥皂水中浸泡三分鐘，自來水沖洗25分鐘，在超凈 工作臺上用1 %的碘化鉀消毒9分鐘，無菌水沖洗5次，接種入培養(yǎng)基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)的條件為溫度25°C，濕度60%，光 照強度8001x，光期5h/d，45天后，轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基MS+NAAO. 2mg/L+KTl. 0mg/L+100mg/ L氯化鈉上誘導(dǎo)愈傷組織分化，分化的條件為溫度27 °C，濕度80%，光照強度30001x，光期 16h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，在室內(nèi)自然光下閉口煉苗一周，在移栽前開蓋煉 苗2d，然后移栽到高壓滅菌過的蛭石：珍珠巖=2:1的營養(yǎng)缽中，待長出新根后進(jìn)行第二步 移栽，移栽基質(zhì)為田園土 ：蛭石=2: 1，濕度85%，光照強度50001x，光期16h/d，再生成活率 90%。
[0009] 實施例3 選用柄果槲寄生幼嫩的葉片，用肥皂水中浸泡三分鐘，自來水沖洗25分鐘，在超凈 工作臺上用1 %的碘化鉀消毒9分鐘，無菌水沖洗5次，接種入培養(yǎng)基MS+6-BA2. 5mg/ L+NAAO. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，誘導(dǎo)的條件為溫度25°C，濕度60%，光 照強度8001x，光期5h/d，45天后，轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基MS+NAAO. 3mg/L+KTl. 5mg/L+150mg/ L氯化鈉上誘導(dǎo)愈傷組織分化，分化的條件為溫度27°C，濕度80%，光照強度30001x，光期 16h/d，待分化出來的幼苗長至2cm左右，在室內(nèi)自然光下閉口煉苗一周，在移栽前開蓋煉 苗2d，然后移栽到高壓滅菌過的蛭石：珍珠巖=2:1的營養(yǎng)缽中，待長出新根后進(jìn)行第二步 移栽，移栽基質(zhì)為田園土 ：蛭石=2: 1，濕度85%，光照強度50001x，光期16h/d，再生成活率 89%。
【權(quán)利要求】
1. 一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果槲寄生的葉片經(jīng)消毒處 理，接種入培養(yǎng)基MS+6-BA2. 5mg/L+NAA0. 25mg/L+IBA0. 5mg/L上進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)，45 天后，轉(zhuǎn)接入分化培養(yǎng)基MS+NAAO. 1?0· 3mg/L+KT0. 5-1. 5mg/L+70-150mg/L氯化鈉上誘導(dǎo) 愈傷組織分化，待分化出來的幼苗長至2cm左右，取出煉苗移栽，統(tǒng)計成活率。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：所述 的消毒處理為：選用柄果槲寄生幼嫩的葉片，用肥皂水中浸泡三分鐘，自來水沖洗25分鐘， 在超凈工作臺上用1 %的碘化鉀消毒9分鐘，無菌水沖洗5次。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：愈傷 組織誘導(dǎo)的條件為溫度25°C，濕度60%，光照強度8001x，光期5h/d。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果 槲寄生分化培養(yǎng)的培養(yǎng)基中加入了高濃度的氯化鈉，可以促進(jìn)細(xì)胞的分化和次生代謝物質(zhì) 的積累。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：愈傷 組織分化的條件為溫度27°C，濕度80%，光照強度30001x，光期16h/d。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柄果槲寄生再生植株的快速繁殖方法，其特征是：柄果 槲寄生煉苗移栽的方法為在室內(nèi)自然光下閉口煉苗一周，在移栽前開蓋煉苗2d，然后移栽 到高壓滅菌過的蛭石：珍珠巖=2:1的營養(yǎng)缽中，待長出新根后進(jìn)行第二步移栽，移栽基質(zhì) 為田園土 ：蛭石=2:1，濕度85%，光照強度50001x，光期16h/d。
【文檔編號】A01H4/00GK104186329SQ201410462989
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司