一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法
【專利摘要】本發(fā)明研究了一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括大葉紫株無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)等步驟，本發(fā)明方法所制備的大葉紫株分化成活率高，生長周期短，為大葉紫株資源的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)。
【專利說明】一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及大葉紫珠組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 大葉紫珠，又名羊耳朵、止血草、趕風紫、賊子葉，馬鞭草科， 灌木，稀為小喬木，高3-5m，小枝近方形，密生灰白色粗糠狀分枝鸞毛。單葉 對生；葉柄粗壯，產(chǎn)廣東、廣西、貴州、云南。生于海拔100-2000米的疏林下和灌叢中。尼泊 爾、錫金、不丹、馬斯克林群島、留尼汪島、印度、孟加拉、緬甸、泰國、越南、馬來西亞和印度 尼西亞也有分布。以水分充足、土地肥沃、陽光充足的地方，生長為好。種植主要用扦插繁 殖。葉含谷留醇，木犀草素，芹菜素，木犀草素-7-0-葡萄糖醛酸甙，芹菜素-7-0-葡萄糖醛 酸式，β -谷留醇-β -D-葡萄糖式，熊果酸，2 α -羥基熊果酸，山楂酸，二十二烷酸，二十三 烷酸，二十四烷酸，二十三烷酸乙酯及3,7,3'-三甲氧基5,4'-二羥基黃酮。根、地上部 位及葉中均含有兩種四環(huán)雙萜：大葉紫珠萜酮和大葉紫珠萜酮單乙酸酯，葉或根可作內(nèi)外 傷止血藥，治跌打腫痛、創(chuàng)傷出血、腸道出血，咳血、鼻紐，種植技術(shù)主要采用自然繁殖，利用 組培技術(shù)可以縮短其培養(yǎng)周期，且操作簡單可控。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種大葉紫株的快速繁殖方法，由該方法所制 備的大葉紫株分化成活率高，生長周期短，為大葉紫株資源的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)。
[0004] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是通過以下方案來實現(xiàn)的： 取大葉紫株的葉片，用0. 1%的氯化汞浸泡15min，無菌水沖洗4次，在1%的檸檬酸溶液 中進行切割成〇. 5cmX0. 5cm的小塊，消毒處理過的大葉紫株的葉片，接入MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5.9,暗光 照，溫度23°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0. 1-0. 2mg/L+NAA0. 03-0. 05mg/ L+2, 4-D1. 5-2. 0mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂進行愈傷組織的分化培養(yǎng)，ρΗ5· 9,光照 30001χ，溫度25°C，光期14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS (大量、微量元素含量減半） 培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)，PH5. 9,光照120001X，溫度25°C，光期14h/d，試管苗長約4cm時取 出，洗去基部培養(yǎng)基，栽植于高溫消毒過的森林腐殖土 ：珍珠巖=2 :1鋪設(shè)的基質(zhì)中，一周后 噴施35%乙烯利，每周噴一次，共噴3次，覆蓋60%的遮蔭網(wǎng)，定時澆水除草，每隔兩周噴施 6000倍的樂果，溫度控制在25°C，濕度90%，三個月后觀察生長情況。
[0005] 采用本發(fā)明制備的大葉紫株生根率高，周期短，產(chǎn)量大，利于大規(guī)模種植。
[0006] 下面將結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明作進一步闡述，但本發(fā)明要求保護的范圍并不 局限于下列實施方式。

【具體實施方式】 [0007] 實施例1 取大葉紫株的葉片，用0. 1%的氯化汞浸泡15min，無菌水沖洗4次，在1%的檸檬酸溶液 中進行切割成〇. 5cmX0. 5cm的小塊，消毒處理過的大葉紫株的葉片，接入MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5. 9,暗光照， 溫度23°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0. lmg/L+NAAO. 03mg/L+2, 4-DL 5mg/ L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂進行愈傷組織的分化培養(yǎng)，pH5. 9,光照30001x，溫度25°C，光期 14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS (大量、微量元素含量減半）培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)， PH5. 9,光照120001X，溫度25°C，光期14h/d，試管苗長約4cm時取出，洗去基部培養(yǎng)基，栽植 于高溫消毒過的森林腐殖土 ：珍珠巖=2 :1鋪設(shè)的基質(zhì)中，一周后噴施35%乙烯利，每周噴 一次，共噴3次，覆蓋60%的遮蔭網(wǎng)，定時澆水除草，每隔兩周噴施6000倍的樂果，溫度控制 在25°C，濕度90%，三個月后觀察生長情況，成活率88%。
[0008] 實施例2 取大葉紫株的葉片，用〇. 1%的氯化汞浸泡15min，無菌水沖洗4次，在1%的檸檬酸溶液 中進行切割成〇. 5cmX0. 5cm的小塊，消毒處理過的大葉紫株的葉片，接入MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5. 9,暗光照， 溫度23°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. 05mg/L+2, 4-D2. Omg/ L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂進行愈傷組織的分化培養(yǎng)，pH5. 9,光照30001x，溫度25°C，光期 14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS (大量、微量元素含量減半）培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)， PH5. 9,光照120001X，溫度25°C，光期14h/d，試管苗長約4cm時取出，洗去基部培養(yǎng)基，栽植 于高溫消毒過的森林腐殖土 ：珍珠巖=2 :1鋪設(shè)的基質(zhì)中，一周后噴施35%乙烯利，每周噴 一次，共噴3次，覆蓋60%的遮蔭網(wǎng)，定時澆水除草，每隔兩周噴施6000倍的樂果，溫度控制 在25°C，濕度90%，三個月后觀察生長情況，成活率89%。
[0009] 實施例3 取大葉紫株的葉片，用〇. 1%的氯化汞浸泡15min，無菌水沖洗4次，在1%的檸檬酸溶液 中進行切割成〇. 5cmX0. 5cm的小塊，消毒處理過的大葉紫株的葉片，接入MS+6-BA2. Omg/ L+IBAO. 15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5. 9,暗光照， 溫度23°C，誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. 04mg/L+2, 4-D2. Omg/ L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂進行愈傷組織的分化培養(yǎng)，pH5. 9,光照30001x，溫度25°C，光期 14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS (大量、微量元素含量減半）培養(yǎng)基中進行生根誘導(dǎo)， PH5. 9,光照120001X，溫度25°C，光期14h/d，試管苗長約4cm時取出，洗去基部培養(yǎng)基，栽植 于高溫消毒過的森林腐殖土 ：珍珠巖=2 :1鋪設(shè)的基質(zhì)中，一周后噴施35%乙烯利，每周噴 一次，共噴3次，覆蓋60%的遮蔭網(wǎng)，定時澆水除草，每隔兩周噴施6000倍的樂果，溫度控制 在25°C，濕度90%，三個月后觀察生長情況，成活率90%。
【權(quán)利要求】
1. 一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，包括大葉紫株無菌葉片的獲得、愈傷組織 的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化、生根誘導(dǎo)、煉苗移栽，其主要步驟如下： (1)取大葉紫株的葉片，對其進行消毒處理； (2 )取步驟（1)消毒處理過的大葉紫株的葉片，接入MS+6-BA2. Omg/L+IBAO. 15mg/ L+30g/L蔗糖+7g/L瓊脂的培養(yǎng)基中進行愈傷組織的誘導(dǎo)，pH5. 9,暗光照，溫度23°C ; (3) 取步驟（2)誘導(dǎo)出來的愈傷組織放入培養(yǎng)基MS+6-BA0. 1-0. 2mg/ L+NAA0. 03-0. 05mg/L+2, 4-D1. 5-2. 0mg/L+30g/L 蔗糖 +7g/L 瓊脂進行愈傷組織的分化培 養(yǎng)，ρΗ5· 9,光照 30001x，溫度 25°C，光期 14h/d ; (4) 取步驟（3)分化后的芽苗接入改良1/2MS (大量、微量元素含量減半）培養(yǎng)基中進 行生根誘導(dǎo)，PH5. 9,光照120001x，溫度25°C，光期14h/d ; (5) 取步驟（4)生根誘導(dǎo)后的試管苗進行野外煉苗移栽。
2. 按照權(quán)利要求1所述的一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于：步驟 (1)中所述大葉紫株無菌葉片的獲得為，取大葉紫株的葉片，用〇. 1%的氯化汞浸泡15min， 無菌水沖洗4次，在1%的檸檬酸溶液中進行切割成0. 5cmX 0. 5cm的小塊。
3. 按照權(quán)利要求1所述的一種大葉紫株組織培養(yǎng)的快速繁殖方法，其特征在于：步驟 (5)中大葉紫株煉苗的方法為試管苗長約4cm時取出，洗去基部培養(yǎng)基，栽植于高溫消毒過 的森林腐殖土 ：珍珠巖=2 :1鋪設(shè)的基質(zhì)中，一周后噴施35%乙烯利，每周噴一次，共噴3次， 覆蓋60%的遮蔭網(wǎng)，定時澆水除草，每隔兩周噴施6000倍的樂果，溫度控制在25 °C，濕度 90%，三個月后觀察生長情況。
【文檔編號】A01H4/00GK104186327SQ201410462955
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月12日
【發(fā)明者】楊存 申請人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司