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一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法

文檔序號(hào):258061閱讀:187來源:國知局
一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,包括:1)將氧化石墨烯在水中超聲分散20~40分鐘;2)將硝酸銀加入氧化石墨烯溶液中,磁力攪拌并升溫至80℃,加入可溶性淀粉作為穩(wěn)定劑;3)將葡萄糖作為還原劑加入氧化石墨烯溶液中預(yù)熱至80℃;4)將兩種溶液混合,在80℃恒溫下混合攪拌,反應(yīng)4~6小時(shí),冷卻后進(jìn)行離心,洗滌,重新分散到水中,得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。本發(fā)明采用一步還原法制備了氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料,其工藝簡單,操作方便,反應(yīng)條件溫和,生產(chǎn)效率高,綠色、環(huán)境友好;制備的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料中,納米銀顆粒均勻地吸附在氧化石墨烯上,有效提高了氧化石墨烯的抑菌性能。
【專利說明】一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及復(fù)合材料【技術(shù)領(lǐng)域】,特別涉及一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]自2004年英國曼徹斯特大學(xué)安德烈K.海姆(Andre K.Geim)研究小組發(fā)現(xiàn)并成功制備石墨烯(graphene)以來,石墨烯因優(yōu)良的物理化學(xué)性質(zhì),在導(dǎo)電、催化、光吸收、醫(yī)藥、磁介質(zhì)及新材料等方面有廣闊的應(yīng)用前景。石墨烯是由單層碳原子緊密堆積成為的二維蜂窩狀晶格結(jié)構(gòu)。正是由于其獨(dú)特的蜂窩狀結(jié)構(gòu)以及其光通透性能,使其成為新型材料制備的新載體。氧化后的石墨烯,其表面存在的大量含氧基團(tuán),為其它顆粒的結(jié)合提供了有效位點(diǎn)。當(dāng)納米銀顆粒與氧化石墨烯復(fù)合時(shí),這些位點(diǎn)及這種吸附就能有效地阻止納米銀顆粒的團(tuán)聚。因此,以氧化石墨烯為基體負(fù)載納米銀顆粒得到的復(fù)合材料為多功能材料的發(fā)展開辟了新的領(lǐng)域。既可以拓寬了氧化石墨烯材料的研究領(lǐng)域,又使得氧化石墨烯材料向?qū)嶋H應(yīng)用方面更邁進(jìn)了一步。
[0003]納米銀顆粒具有強(qiáng)表面等離子體效應(yīng)、良好的抗菌及催化性能,故納米銀與氧化石墨烯復(fù)合材料的制備掀起了一個(gè)新的研究熱點(diǎn)。復(fù)合后的氧化石墨烯/銀復(fù)合材料擁有優(yōu)異的表面拉曼增強(qiáng)散射效應(yīng)、抗菌性能、催化活性和儲(chǔ)能等特性。在已有的研究報(bào)道中,石墨烯/納米銀復(fù)合材料的制備方法中有的采用化學(xué)有機(jī)試劑二甲基甲酰胺等作為還原劑,有的采用有毒的強(qiáng)還原劑硼氫化鈉等作為還原劑,有的是在強(qiáng)腐蝕性條件下進(jìn)行,危害人類健康和生態(tài)環(huán)境。因此,綠色、環(huán)境友好的氧化石墨烯復(fù)合材料制備方法的研究具有重要的意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]發(fā)明目的:針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足,本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡單,操作方便,反應(yīng)條件溫和,生產(chǎn)效率高,綠色、環(huán)境友好的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法。
[0005]技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,包括以下步驟:
1)取氧化石墨烯加入去離子水中,經(jīng)過20~40分鐘的超聲,得到氧化石墨烯濃度為0.02~0.04g/L的單層氧化石墨烯分散溶液;
2)取硝酸銀加入單層氧化石墨烯分散溶液中,獲得硝酸銀濃度為0.0002~0.002M的硝酸銀/氧化石墨烯混合液;取葡萄糖加入單層氧化石墨烯分散溶液中,獲得葡萄糖濃度為0.0001~0.0OlM的葡萄糖/氧化石墨烯混合液;
3)將硝酸銀/氧化石墨烯混合液加熱至80°C,加入可溶性淀粉,使溶液中可溶性淀粉的濃度為0.04~0.08g/L,攪拌均勻;將葡萄糖/氧化石墨烯混合液預(yù)熱至80°C,混合所得的兩種混合液,在80°C恒溫下攪拌,反應(yīng)4-6小時(shí);4)將步驟3)反應(yīng)得到的溶液冷卻后進(jìn)行離心,洗滌,再重新分散到水中,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。
[0006]所述的氧化石墨烯為微米級(jí),其直徑為0.5~2微米。
[0007]所述的單層氧化石墨烯分散溶液,優(yōu)先選取氧化石墨烯的濃度范圍為0.02~0.04g/L。
[0008]所述的硝酸銀/氧化石墨烯混合液,優(yōu)先選取硝酸銀的濃度范圍為0.0012~
0.002M。
[0009]所述的葡萄糖/氧化石墨烯混合液,優(yōu)先選取葡萄糖的濃度范圍為0.0006~
0.001M。
[0010]所述的可溶性淀粉,優(yōu)先選取的濃度范圍為0.04~0.08 g/L。
[0011 ] 一種由所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法所得到的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。
[0012]本發(fā)明的制備原理是采用葡萄糖作為還原劑,將銀離子還原成為銀納米顆粒,從而生長在氧化石墨烯基底上;同時(shí)納米銀顆粒表面原位覆蓋有淀粉作為穩(wěn)定劑,來防止納米顆粒之間的相互團(tuán)聚。葡萄糖與淀粉都是廉價(jià)易得的物質(zhì),且不具有毒性。所制備的復(fù)合材料可以單獨(dú)使用,也可以作為添加劑與其他材料混合使用,是一種優(yōu)良的抑菌材料。
[0013]有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,溶劑為水,不需要避光,是一種由葡萄糖作為還原劑、可溶性淀粉作為穩(wěn)定劑的綠色、環(huán)境友好、簡便易得的制備方法。該方法可以制備出納米銀粒子,所生成的納米銀顆粒均勻負(fù)載在石墨烯上,有效地防止了納米銀離子在水溶液中的團(tuán)聚。所制備的載納米銀的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料,作用于含有金黃色葡萄糖球菌和大腸桿菌的菌液,搖床培養(yǎng)4-6小時(shí),抑菌率可分別達(dá)到95%和80%,抑菌效果顯著。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1是實(shí)施例1所制備的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯的紫外光譜吸收?qǐng)D;
圖2是實(shí)施例1所制備的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯的X射線光電子譜圖;
圖3是實(shí)施例1所制備的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料透射電鏡照片圖;
圖4是氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯對(duì)于革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌率結(jié)果;其中,a是氧化石墨烯對(duì)于革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌的抑菌率;b是實(shí)施例2中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;c是實(shí)施例3中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;(1是實(shí)施例4中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;e是實(shí)施例1中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;
圖5是氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯對(duì)于革蘭氏陰性菌大腸桿菌(Escherichia coli)的抑菌率結(jié)果;其中,a是氧化石墨烯對(duì)于革蘭氏陰性菌大腸桿菌的抑菌率;b是實(shí)施例2中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;c是實(shí)施例3中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;d是實(shí)施例4中抑菌復(fù)合材料的抑菌率;e是實(shí)施例1中抑菌復(fù)合材料的抑菌率。

【具體實(shí)施方式】
[0015]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明,但本發(fā)明不受這些實(shí)施例子的限制。
[0016]實(shí)施例1
將氧化石墨烯Img溶于50mL去離子水溶液中,超聲(50KHz,500W,下同)40分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取8.5mg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入Img可溶性淀粉,攪拌至溶解。4.5mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至800C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)4個(gè)小時(shí);在單層氧化石墨烯表面,葡萄糖將銀離子還原,使其在氧化石墨烯表面原位生長成為納米銀顆粒。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料,納米銀顆粒在氧化石墨烯片表面均勻覆蓋,并且由于是在反應(yīng)體系中,納米銀表面吸附有可溶性淀粉,作納米銀顆粒的穩(wěn)定劑,可以防止納米銀顆粒的團(tuán)聚。
[0017]對(duì)得到的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料進(jìn)行性能測(cè)試,具體如下:
I)紫外-可見光吸收光譜測(cè)試
氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯的紫外-可見光吸收光譜圖,如圖1所示。圖中,a為氧化石墨烯的紫外-可見光吸收光譜圖;b為制備的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的紫外-可見光吸收光譜圖。從圖中可以看到復(fù)合材料在波長為397nm時(shí)出現(xiàn)納米銀顆粒的最大吸收峰。
[0018]2) X-射線光電子能譜(XPS)測(cè)試
氧化石墨烯復(fù)合材料和氧化石墨烯的X-射線光電子能譜圖,如圖2所示。圖中,a為氧化石墨烯的X-射線光電子能譜圖;b為制備的氧化石墨烯復(fù)合材料的X-射線光電子能譜圖。從圖中可以看到Ag在3d區(qū)域的結(jié)合能為366.83eV (Ag3d5/2)和372.78eV (Ag3d3/2),與Ag的單質(zhì)狀態(tài)(Ag°)的標(biāo)準(zhǔn)結(jié)合能(368.25eV)相一致,表明負(fù)載在氧化石墨烯片表面的Ag顆粒以零價(jià)態(tài)的單質(zhì)銀的形式存在。
[0019]3 )透射電鏡(TEM)測(cè)試
氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的TEM照片,如圖3所示,可以觀察到銀納米顆粒均勻地負(fù)載在氧化石墨烯上。
[0020]4)抑菌實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)采用液態(tài)培養(yǎng)體系,以加入等量的無菌水作為空白對(duì)照樣計(jì)算抑菌率,細(xì)菌計(jì)數(shù)采用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行。具體步驟為:a)菌液制備
培養(yǎng)大腸桿菌采用的固體培養(yǎng)基為胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA),培養(yǎng)基組成為:酪蛋白胰酶消化物15.0g/L,大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g/L,氯化鈉5.0g/L,瓊脂15.0g/L,pH值7.2,高壓蒸汽121°C滅菌20分鐘后,倒平板。用滅菌接種環(huán)取冷凍保存的金黃色葡萄糖球菌和大腸桿菌菌種分別接種到TSA培養(yǎng)板上,置于培養(yǎng)箱37°C恒溫培養(yǎng)24小時(shí),用滅菌接種環(huán)挑取菌落分別到盛有10mL滅菌的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)的無菌錐形瓶中,培養(yǎng)基組成為:酪蛋白胰酶消化物15.0g/L,大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g/L,氯化鈉5.0g/L, pH值7.2,高壓蒸汽121°C滅菌20分鐘。采用比濁法測(cè)量使其細(xì)菌濃度在IX 107CFU/mL左右,劇烈振蕩使其混合均勻。
[0021]b)搖床培養(yǎng)
向三只250mL錐形瓶中分別添加88mL的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB),再各添加1mL的步驟I)中的金黃色葡萄糖球菌菌液,使得錐形瓶內(nèi)菌液密度均為lX106CFU/mL,向其中一只錐形瓶中添加2mL無菌水,作為空白對(duì)照樣;向其中一只錐形瓶中添加2 mL
0.02g/L氧化石墨烯,向另一只錐形瓶中添加2 mL抑菌復(fù)合材料。將三只錐形瓶置于轉(zhuǎn)速為150rpm/min,溫度為37°C的搖床中培養(yǎng)4小時(shí)。
[0022]向三只250mL錐形瓶中分別添加88mL的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB),培養(yǎng)基組成為:胰蛋白胨17.0g/L,大豆蛋白胨3.0g/L,氯化鈉5.0g/L, pH值7.2,高壓蒸汽121 °C滅菌20分鐘。再添加1mL的步驟I)中的大腸桿菌菌液,使得錐形瓶內(nèi)菌液密度均為
IX 106CFU/mL,向其中一只錐形瓶中添加2mL無菌水,作為空白對(duì)照樣;向其中一只錐形瓶中添加2mL0.02g/L氧化石墨烯,向另一只錐形瓶中添加2mL抑菌復(fù)合材料。將三只錐形瓶置于轉(zhuǎn)速為150rpm/min,溫度為37°C的搖床中培養(yǎng)4小時(shí)。
[0023]c )抑菌率計(jì)算采用逐級(jí)稀釋涂平板的方法,分別對(duì)錐形瓶內(nèi)的存活細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),抑菌率由下列公式計(jì)算:R (%) = (N空白-N試樣)/N試樣X 100%,其中,N空白和N試樣分別為空白對(duì)照錐形瓶和添加氧化石墨烯或抑菌復(fù)合材料錐形瓶內(nèi)的菌落數(shù)。
[0024]氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料和氧化石墨烯的抑制金黃色葡萄糖球菌的抑菌率結(jié)果,如圖4所示。可以看出氧化石墨烯的抑菌率(圖4-a)為22%,實(shí)施例1中抑菌復(fù)合材料的抑菌率(圖4-e)為80%,氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料具有良好的抑制金黃色葡萄糖球菌效果。
[0025]氧化石墨烯復(fù)合材料和氧化石墨烯的抑制大腸桿菌的抑菌率結(jié)果,如圖5所示。可以看出氧化石墨烯的抑菌率(圖5-a)為24%,實(shí)施例1中抑菌復(fù)合材料的抑菌率(圖5-e)為95%,氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料具有優(yōu)越的抑制大腸桿菌效果。
[0026]實(shí)施例2
將氧化石墨烯Img溶于50mL去離子水溶液中,超聲40分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取3.4mg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入2mg可溶性淀粉,攪拌至溶解。1.8mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至80°C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)4個(gè)小時(shí)。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。性能測(cè)試方法同實(shí)施例1,其中,抑制金黃色葡萄糖球菌的抑菌率(圖4-b)為53%,抑制大腸桿菌的抑菌率(圖5-b)為52%。
[0027]實(shí)施例3
將氧化石墨烯Img溶于50mL去離子水溶液中,超聲20分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取5.1mg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入Img可溶性淀粉,攪拌至溶解。2.7mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至80°C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)4個(gè)小時(shí)。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。性能測(cè)試方法同實(shí)施例1,其中,抑制金黃色葡萄糖球菌的抑菌率(圖4-C)為67%,抑制大腸桿菌的抑菌率(圖5-c)為69%。
[0028]實(shí)施例4
將氧化石墨烯Img溶于50mL去離子水溶液中,超聲20分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取6.Smg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入Img可溶性淀粉,攪拌至溶解。3.6mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至80°C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)4個(gè)小時(shí)。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。性能測(cè)試方法同實(shí)施例1,其中,抑制金黃色葡萄糖球菌的抑菌率(圖4-d)為75%,抑制大腸桿菌的抑菌率(圖5-d)為83%。
[0029]實(shí)施例5
將氧化石墨烯2mg溶于50mL去離子水溶液中,超聲20分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取1.7mg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入2mg可溶性淀粉,攪拌至溶解。0.9mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至80°C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)6個(gè)小時(shí)。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。性能測(cè)試同實(shí)施例1,結(jié)果顯示均具有較好的金黃色葡萄糖球菌和大腸桿菌的抑菌率。
[0030]實(shí)施例6
將氧化石墨烯1.5mg溶于50mL去離子水溶液中,超聲20分鐘,得到單層氧化石墨烯分散液。稱取2.55mg硝酸銀溶于25mL氧化石墨烯分散液中,加熱至80°C,加入1.5mg可溶性淀粉,攪拌至溶解。1.35mg葡萄糖溶于25mL氧化石墨烯分散液中,預(yù)熱至80°C。將硝酸銀/氧化石墨烯溶液加入到葡萄糖/氧化石墨烯溶液中,在80°C恒溫下混合攪拌,反應(yīng)6個(gè)小時(shí)。將所得的反應(yīng)物溶液,在10000轉(zhuǎn)/分的轉(zhuǎn)速下,離心分離,傾去上清液,用去離子水重新懸浮,重復(fù)該過程2~3遍,以洗去過量反應(yīng)試劑,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。性能測(cè)試同實(shí)施例1,結(jié)果顯示均具有較好的金黃色葡萄糖球菌和大腸桿菌的抑菌率。
【權(quán)利要求】
1.一種氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: 1)取氧化石墨烯加入去離子水中,經(jīng)過20~40分鐘的超聲,得到氧化石墨烯濃度為0.01~0.05g/L的單層氧化石墨烯分散溶液; 2)取硝酸銀加入單層氧化石墨烯分散溶液中,獲得硝酸銀濃度為0.0004~0.0024M的硝酸銀/氧化石墨烯混合液;取葡萄糖加入單層氧化石墨烯分散溶液中,獲得葡萄糖濃度為0.0002~0.0012M的葡萄糖/氧化石墨烯混合液; 3)將硝酸銀/氧化石墨烯混合液加熱至80°C,加入可溶性淀粉,使溶液中可溶性淀粉的濃度為0.02~0.lg/L,攪拌均勻;將葡萄糖/氧化石墨烯混合液預(yù)熱至80°C,混合所得的兩種混合液,在80°C恒溫下攪拌,反應(yīng)4-6小時(shí); 4)將步驟3)反應(yīng)得到的溶液冷卻后進(jìn)行離心,洗滌,再重新分散到水中,即得到氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于:所述的氧化石墨烯為微米級(jí),其直徑為0.5~2微米。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于:所述的單層氧化石墨烯分散溶液的濃度為0.02~0.04g/L。
4.根據(jù) 權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于:所述的硝酸銀/氧化石墨烯混合液的濃度為0.0012~0.002M。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于:所述的葡萄糖/氧化石墨烯混合液的濃度為0.0006~0.001M。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法,其特征在于:所述的可溶性淀粉的濃度為0.04~0.08 g/L。
7.一種由權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料的制備方法所得到的氧化石墨烯抑菌復(fù)合材料。
【文檔編號(hào)】A01N25/22GK104068058SQ201410306950
【公開日】2014年10月1日 申請(qǐng)日期:2014年7月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月1日
【發(fā)明者】邵偉, 左宋林 申請(qǐng)人:南京林業(yè)大學(xué)
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