一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的工藝，使用自制的育種培養(yǎng)基能夠?qū)λ姆N菌種同時進行育種培養(yǎng)，后將所得菌液對豆粕進行發(fā)酵，育種和發(fā)酵的流程少，易于操作和實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)，發(fā)酵后的豆粕含水量較低，松散不粘稠，干燥時間短，降低了生產(chǎn)成本，并且采用較低溫度烘干能使其中的益生菌保持生物活性。本發(fā)明使用產(chǎn)朊假絲酵母菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌混合菌種對豆粕進行發(fā)酵生產(chǎn)，發(fā)酵豆粕含有大量的益生菌群，并且胰蛋白酶抑制劑得到有效去除，發(fā)酵豆粕作為動物飼料能夠提高動物的免疫力，減少疾病的發(fā)生。采用本發(fā)明生產(chǎn)的發(fā)酵豆粕作為動物飼料，更易消化和吸收，可代替魚粉用于水產(chǎn)飼料和豬、雞飼料中。
【專利說明】
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物發(fā)酵【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的 工藝。 一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆粕的工藝

【背景技術(shù)】
[0002] 豆柏是大豆提取豆油后得到的一種副產(chǎn)品，是棉籽柏、花生柏、菜籽柏等12種動 植物油柏飼料產(chǎn)品中產(chǎn)量最大，用途最廣的一種，作為一種高蛋白質(zhì)，豆柏是制作牲畜與家 禽飼料的主要原料，廣泛用于禽類和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中。對豆柏進行生物發(fā)酵可除去豆柏中的 抗營養(yǎng)因子，并且發(fā)酵后的豆柏含有大量的益生菌成分，具有較高的生物活性，可以改善動 物腸道的微生物平衡，補充腸道大量的活性益生菌，抑制大腸桿菌、沙門氏菌等有害菌的生 長，提高畜禽的免疫力，減少疾病的發(fā)生。發(fā)酵豆柏的干燥是一個普遍存在的問題，采用高 溫干燥會使發(fā)酵豆柏中揮發(fā)性酸味物質(zhì)等熱敏性物質(zhì)損失嚴重，降低產(chǎn)品的營養(yǎng)；低溫干 燥又會增大發(fā)酵成本，不利于規(guī)?；a(chǎn)。
[0003] 專利CN103315143A公開了低溫干燥發(fā)酵豆柏的制備方法，混合菌種對濕豆柏和 糖蜜進行發(fā)酵，后采用低溫干燥處理發(fā)酵豆柏，由于發(fā)酵后的豆柏水分含量較大，采用低溫 干燥會大大提高發(fā)酵成本；專利CN102948614A公開了一種菌酶協(xié)同發(fā)酵豆柏制備活性飼 用肽的方法，采用復(fù)合酶和復(fù)合菌種對含水分的豆柏進行分階段控溫發(fā)酵，發(fā)酵中未涉及 菌種的培養(yǎng)，并且采用分階段控溫發(fā)酵，增加了發(fā)酵的工序。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明目的是為解決上述技術(shù)問題的不足，提供一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵 豆柏的工藝，本工藝采用固態(tài)發(fā)酵，干燥時間短，并且發(fā)酵豆柏中含有較多的粗蛋白、小分 子活性肽和益生菌。
[0005] 本發(fā)明為解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：用自制培養(yǎng)基對乳酸菌、雙歧 桿菌、枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母進行擴大培養(yǎng)，用所得培養(yǎng)液、擴大培養(yǎng)后的成熟菌液 與豆柏等原料混合后進行發(fā)酵生產(chǎn)，然后再經(jīng)烘干粉碎后包裝，步驟如下： (1)菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水 加入配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1fefe納：憐fe -氧鐘：硫 酸鎂：碳酸氫鈉：水=2. 0-3. 0 :1. 5-1. 8 :2· 0-3. 0 :0· 5-1. 0 :0· 3-0. 4 :0· 015-0. 020 : 0. 5-0. 8 :180-220,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至4. 5-5. 5后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入 9 X 105U-10 X 105 U的糖化酶，55-65°C保溫3-5小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱 器內(nèi)升溫至95-KKTC，保溫0. 5小時，后在5-10秒內(nèi)降溫至35-45°C，得到育種培養(yǎng)基，并 加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌3-5%、雙歧桿菌5-7%、枯草芽孢桿菌5-7%、產(chǎn)朊假絲酵母菌 6-8%，接種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，四個恒化器的培養(yǎng)溫度均為35-45°C，時間均為60-75小 時，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵培養(yǎng)，枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的 恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 7-1. 9L/min，對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進 行檢測，當活菌含量為9-11億/克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、 雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏65-75%、乳酸菌菌液1.8-2. 5%、雙歧桿菌菌液 1. 8-2. 5%、枯草芽孢桿菌菌液1. 8-2. 5%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液1. 8-2. 5%、水15-25%和育種培 養(yǎng)基2-3. 5%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度35-45°C，發(fā)酵 時間60-80小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度50-60°C烘干，用粉碎機 粉碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0006] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：將下述原料：大麥芽、蛋白 胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入配料罐中，所述原料的質(zhì)量比 為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：梓feffe納：憐ffe -鐘：硫ffe緩：碳IfeS納：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 : 0.8 :0.36 :0.019 :0.6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5.0后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加 入9. 6X 105U糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至 95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng)基，并加入四個恒化器中。
[0007] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：菌種的接種量按菌種體積與 育種培養(yǎng)基體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵 母菌7%，培養(yǎng)溫度為40°C，并且當活菌含量為10億/克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)。
[0008] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：豆柏發(fā)酵生產(chǎn)中原料的重量 比例為：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢桿菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌 液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%。
[0009] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)中，發(fā)酵溫 度為40°C，發(fā)酵時間72小時。
[0010] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度 55°C烘干。
[0011] 進一步優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：步驟如下： (1)菌種發(fā)酵液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入 配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1橡酸納：憐酸-氧鐘：硫fe緩：碳 酸氫鈉：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 :0. 8 :0. 36 :0. 019 :0. 6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5. 0后轉(zhuǎn) 入糖化罐中，向糖化罐中加入9. 6 X 105U的糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化 液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng) 基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵母7%，接 種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為40°C，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵 培養(yǎng)，含枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 8L/min， 對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進行檢測，當活菌含量為10億/克時，停止該恒化器內(nèi) 菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌 液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢桿 菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固 體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度40°C，發(fā)酵時間72小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度55°C烘干，用粉碎機粉 碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0012] 本發(fā)明相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點： 本發(fā)明提供了一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，本發(fā)明制備的一種育種培 養(yǎng)基能夠?qū)λ姆N菌種同時進行培養(yǎng)，便于調(diào)節(jié)物料的投放、時間、溫度等工藝參數(shù)，有效保 證菌種菌液中的活菌含量，減少了育種的操作和時間，易于實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)；并且對育種培 養(yǎng)基進行滅菌處理后直接加入恒化器進行菌種的發(fā)酵培養(yǎng)，避免了育種培養(yǎng)基的污染，同 時簡化了發(fā)酵流程；在豆柏的發(fā)酵過程中添加育種培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)能促進菌種進一步增 殖，節(jié)約了發(fā)酵時間；發(fā)酵時采用的豆柏和其他物料的重量比，使發(fā)酵后豆柏的含水量較 低，松散，不粘稠，易于烘干處理；采用較低溫度烘干處理即可得到含水量較低的發(fā)酵豆柏， 干燥時間短，降低了生產(chǎn)成本，采用較低溫度烘干也保證了發(fā)酵豆柏中所含益生菌的生物 活性。
[0013] 本發(fā)明使用產(chǎn)朊假絲酵母菌、枯草芽孢桿菌、乳酸菌、雙歧桿菌混合菌種對豆柏進 行發(fā)酵生產(chǎn)，使發(fā)酵豆柏含有大量的益生菌群，并且胰蛋白酶抑制劑得到有效去除，發(fā)酵豆 柏作為動物飼料能夠提高動物的免疫力，減少疾病的發(fā)生。
[0014] 本發(fā)明采用混合菌種發(fā)酵，菌類的代謝產(chǎn)物如菌體蛋白和消化酶的加入可使粗蛋 白含量提高12%左右，并且可改善飼料的適口性；發(fā)酵過程將大多數(shù)的大分子多肽降解成 分子量小于1500Da的活性小肽，生物活性小肽的含量達到70%左右，能協(xié)調(diào)動物對各種養(yǎng) 分的利用，提高機體的免疫能力，促進礦物質(zhì)元素的吸收利用。
[0015] 采用本發(fā)明生產(chǎn)的發(fā)酵豆柏作為動物飼料，更易消化和吸收，在水產(chǎn)飼料中可以 等量替代50%魚粉，在豬、雞飼料中可全部替代魚粉，也可添加其他產(chǎn)品如乳糖全部替代乳 豬飼料中添加的乳清粉。

【具體實施方式】
[0016] 下面結(jié)合【具體實施方式】，對本發(fā)明做進一步的詳細說明，但不構(gòu)成對本發(fā)明的任 何限制。
[0017] 本發(fā)明提供了一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，步驟如下： (1)菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水 加入配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1 fe fe納：憐fe -氧鐘：硫 酸鎂：碳酸氫鈉：水=2. 0-3. 0 :1. 5-1. 8 :2· 0-3. 0 :0· 5-1. 0 :0· 3-0. 4 :0· 015-0. 020 : 0. 5-0. 8 :180-220,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至4. 5-5. 5后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入 9 X 105U-10 X 105 U的糖化酶，55-65°C保溫3-5小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱 器內(nèi)升溫至95-KKTC，保溫0. 5小時，后在5-10秒內(nèi)降溫至35-45°C，得到育種培養(yǎng)基，并 加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌3-5%、雙歧桿菌5-7%、枯草芽孢桿菌5-7%、產(chǎn)朊假絲酵母菌 6-8%，接種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，四個恒化器的培養(yǎng)溫度均為35-45°C，時間均為60-75小 時，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵培養(yǎng)，枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的 恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 7-1. 9L/min，對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進 行檢測，當活菌含量為9-11億/克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、 雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏65-75%、乳酸菌菌液1.8-2. 5%、雙歧桿菌菌液 1. 8-2. 5%、枯草芽孢桿菌菌液1. 8-2. 5%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液1. 8-2. 5%、水15-25%和育種培 養(yǎng)基2-3. 5%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度35-45°C，發(fā)酵 時間60-80小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度50-60°C烘干，用粉碎機 粉碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0018] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：將下述原料：大麥芽、蛋白 胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入配料罐中，所述原料的質(zhì)量比 為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：梓feffe納：憐ffe -鐘：硫ffe緩：碳IfeS納：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 : 0.8 :0.36 :0.019 :0.6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5.0后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加 入9. 6X 105U糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至 95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng)基，并加入四個恒化器中。
[0019] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：菌種的接種量按菌種體積與 育種培養(yǎng)基體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵 母菌7%，培養(yǎng)溫度為40°C，并且當活菌含量為10億/克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)。
[0020] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：豆柏發(fā)酵生產(chǎn)中原料的重量 比例為：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢桿菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌 液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%。
[0021] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)中，發(fā)酵溫 度為40°C，發(fā)酵時間72小時。
[0022] 優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度 55°C烘干。
[0023] 進一步優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝：步驟如下： (1)菌種發(fā)酵液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入 配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1橡酸納：憐酸-氧鐘：硫fe緩：碳 酸氫鈉：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 :0. 8 :0. 36 :0. 019 :0. 6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5. 0后轉(zhuǎn) 入糖化罐中，向糖化罐中加入9. 6 X 105U的糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化 液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng) 基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵母7%，接 種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為40°C，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵 培養(yǎng)，含枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 8L/min， 對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進行檢測，當活菌含量為10億/克時，停止該恒化器內(nèi) 菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌 液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢桿 菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固 體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度40°C，發(fā)酵時間72小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度55°C烘干，用粉碎機粉 碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0024] 本發(fā)明進一步優(yōu)選的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，特定發(fā)酵物料 配比和工藝條件參數(shù)，能使發(fā)酵豆柏的粗蛋白含量提高12. 74%，分子量1500Da及以下的小 肽組分達到71. 14%，蛋白質(zhì)消化率達到99%，胰蛋白酶抑制劑降低至70U/g，復(fù)合菌種達到 430 億 /g。
[0025] 實施例1 本實施例包括以下步驟： (1)菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽2. 5kg、蛋白胨1. 7kg、瓊脂2. 5kg、檸檬酸鈉0. 8kg、磷酸二氫鉀 〇. 3kg、硫酸鎂0. 018kg、碳酸氫鈉0. 7kg和水190kg加入配料罐中，加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值 至4. 8后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入9 X 105U的糖化酶，65°C保溫糖化3小時，得糖化 液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至l〇〇°C，保溫0. 5小時，后在6秒內(nèi)降溫至40°C， 得到育種培養(yǎng)基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌5%、雙歧桿菌7%、枯草芽孢桿菌7%、產(chǎn)朊假絲酵母8%，接種 后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為38°C，時間為65小時，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進 行密封發(fā)酵培養(yǎng)，含枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為 1. 8L/min，得到乳酸菌菌液：活菌含量為9. 5億/克，雙歧桿菌菌液：活菌含量為10. 2億/ 克，枯草芽孢桿菌菌液：活菌含量為9. 8億/克，產(chǎn)朊假絲酵母菌菌液：活菌含量為9. 5億/ 克； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下原料：豆柏650kg、乳酸菌菌液25kg、雙歧桿菌菌液25kg、枯草芽孢桿菌菌液 25kg、產(chǎn)朊假絲酵母菌液25kg、水220kg和育種培養(yǎng)基30kg，將上述稱取的原料混合均勻， 置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度45°C，發(fā)酵時間65小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏進入干燥機內(nèi)溫度50°C干燥至水分為 10%，用粉碎機粉碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0026] 實施例2 本實施例包括以下步驟： (1) 菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽2. 4kg、蛋白胨1. 6kg、瓊脂2. 4kg、檸檬酸鈉0. 8kg、磷酸二氫鉀 0. 36kg、硫酸鎂0. 019kg、碳酸氫鈉0. 6kg和水200kg加入配料罐中，加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值 至5. 0后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入9. 6 X 105U的糖化酶，60°C保溫糖化4小時，得糖化 液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C， 得到育種培養(yǎng)基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵母7%，接種 后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，其中乳酸菌和雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵培養(yǎng)，枯草芽孢桿菌、 產(chǎn)朊假絲酵母菌菌進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為40°C，得到乳酸菌菌液：活菌含量為10 億/克，雙歧桿菌菌液：活菌含量為10億/克，枯草芽孢桿菌菌液：活菌含量為10億/克， 產(chǎn)朊假絲酵母菌液：活菌含量為10億/克； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下原料：豆柏710kg、乳酸菌成熟菌液20kg、雙歧桿菌成熟菌液20kg、枯草芽孢 桿菌成熟菌液20kg、產(chǎn)朊假絲酵母成熟菌液20kg、水180kg和育種培養(yǎng)基30kg，將上述稱取 的原料混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度40°C，發(fā)酵時間72小 時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏進入干燥機內(nèi)溫度55°C干燥至水分為 9%，用粉碎機粉碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
[0027] 實施例3 本實施例包括以下步驟： (1)菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽3. 0kg、蛋白胨1. 5kg、瓊脂2. 0kg、朽1檬酸鈉0. 5kg、磷酸二氫鉀 〇. 4kg、硫酸鎂0. 020kg、碳酸氫鈉0. 5kg和水210kg加入配料罐中，加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值 至4. 5后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入10 X105U糖化酶，55°C保溫糖化4小時，得糖化液， 將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在10秒內(nèi)降溫至45°C，得 到育種培養(yǎng)基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基
【權(quán)利要求】
1. 一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征在于：包含以下步驟： (1) 菌種菌液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水 加入配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1fefe納：憐fe -氧鐘：硫 酸鎂：碳酸氫鈉：水=2. 0-3. 0 :1. 5-1. 8 :2· 0-3. 0 :0· 5-1. 0 :0· 3-0. 4 :0· 015-0. 020 : 0. 5-0. 8 :180-220,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至4. 5-5. 5后轉(zhuǎn)入糖化罐中，向糖化罐中加入 9 X 105U-10 X 105 U的糖化酶，55-65°C保溫3-5小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入流體加熱 器內(nèi)升溫至95-KKTC，保溫0. 5小時，后在5-10秒內(nèi)降溫至35-45°C，得到育種培養(yǎng)基，并 加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌3-5%、雙歧桿菌5-7%、枯草芽孢桿菌5-7%、產(chǎn)朊假絲酵母菌 6-8%，接種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，四個恒化器的培養(yǎng)溫度均為35-45°C，時間均為60-75小 時，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵培養(yǎng)，枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的 恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 7-1. 9L/min，對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進 行檢測，當活菌含量為9-11億/克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、 雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏65-75%、乳酸菌菌液1. 8-2. 5%、雙歧桿菌菌液 1. 8-2. 5%、枯草芽孢桿菌菌液1. 8-2. 5%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液1. 8-2. 5%、水15-25%和育種培 養(yǎng)基2-3. 5%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度35-45°C，發(fā)酵 時間60-80小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度50-60°C烘干，用粉碎機 粉碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征在于： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入配料 罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽納：憐fe -氧鐘：硫fe緩：碳酸氧 鈉：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 :0. 8 :0. 36 :0. 019 :0. 6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5. 0后轉(zhuǎn)入糖 化罐中，向糖化罐中加入9. 6 X 105U糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化液轉(zhuǎn)入 流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng)基，并加 入四個恒化器中。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征 在于：菌種的接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿 菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵母菌7%，培養(yǎng)溫度為40°C，并且當活菌含量為10億/ 克時，停止該恒化器內(nèi)菌種的培養(yǎng)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征在于： 豆柏發(fā)酵生產(chǎn)中原料的重量比例為：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢 桿菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征在于： 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)中，發(fā)酵溫度為40°C，發(fā)酵時間72小時。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征 在于：發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度55°C烘干。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的所述的一種混合菌種固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)發(fā)酵豆柏的工藝，其特征 在于：步驟如下： (1) 菌種發(fā)酵液的制備： 將下述原料：大麥芽、蛋白胨、瓊脂、檸檬酸鈉、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、碳酸氫鈉和水加入 配料罐中，所述原料的質(zhì)量比為大麥牙：蛋白腺：瓊脂：朽1橡酸納：憐酸_氧鐘：硫fe緩：碳 酸氫鈉：水=2. 4 :1. 6 :2. 4 :0. 8 :0. 36 :0. 019 :0. 6 :200,加熱至沸騰，調(diào)節(jié)pH值至5. 0后轉(zhuǎn) 入糖化罐中，向糖化罐中加入9. 6 X 105U的糖化酶，60°C保溫4小時，得糖化液，將所得糖化 液轉(zhuǎn)入流體加熱器內(nèi)升溫至95°C，保溫0. 5小時，后在8秒內(nèi)降溫至40°C，得到育種培養(yǎng) 基，并加入四個恒化器中； 將實驗室培養(yǎng)好的乳酸菌、雙歧桿菌、枯草芽孢桿菌和產(chǎn)朊假絲酵母菌菌種用接種機 分別接入四個恒化器中，每個恒化器接種一種菌種，菌種接種量按菌種體積與育種培養(yǎng)基 體積的百分比計，分別為乳酸菌4%、雙歧桿菌6%、枯草芽孢桿菌6%、產(chǎn)朊假絲酵母7%，接 種后進行菌種發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為40°C，其中乳酸菌、雙歧桿菌的恒化器進行密封發(fā)酵 培養(yǎng)，含枯草芽孢桿菌、產(chǎn)朊假絲酵母菌的恒化器進行好氧發(fā)酵培養(yǎng)，通氧量為1. 8L/min， 對恒化器育種培養(yǎng)基中的活菌含量進行檢測，當活菌含量為10億/克時，停止該恒化器內(nèi) 菌種的培養(yǎng)，分別得到乳酸菌菌液、雙歧桿菌菌液、枯草芽孢桿菌菌液、產(chǎn)朊假絲酵母菌菌 液； (2) 豆柏的發(fā)酵生產(chǎn)： 稱取以下質(zhì)量百分比的原料：豆柏71%、乳酸菌菌液2%、雙歧桿菌菌液2%、枯草芽孢桿 菌菌液2%、產(chǎn)朊假絲酵母菌液2%、水18%、育種培養(yǎng)基3%，混合均勻，置于發(fā)酵裝置內(nèi)進行固 體密閉無氧發(fā)酵，發(fā)酵溫度40°C，發(fā)酵時間72小時，形成發(fā)酵豆柏； (3) 發(fā)酵豆柏的干燥、粉碎、包裝：將發(fā)酵豆柏于干燥機內(nèi)溫度55°C烘干，用粉碎機粉 碎，經(jīng)螺旋輸送機輸出后包裝。
【文檔編號】A23K1/14GK104054902SQ201410248441
【公開日】2014年9月24日 申請日期:2014年6月6日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月6日
【發(fā)明者】李曉葉 申請人:李曉葉