一種防治水稻稻瘟病的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟：種子處理：在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種處理；葉片降溫處理：在拔節(jié)期，每10-15天進(jìn)行葉片噴施體積百分比為20％-30％的乙醇溶液；施藥處理：于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向水稻噴灑含體積百分比為0.02％-0.1％的乙酸混合藥劑；除濕處理：于3葉期到移栽前，對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理；于灌漿期，在進(jìn)行施藥處理之后的第3天對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理；灌排水處理：在水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2-3天之后繼續(xù)灌淺水。依照本方法有效抑制水稻稻瘟病的發(fā)生，減少農(nóng)藥的使用。
【專利說明】一種防治水稻稻瘟病的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種防治水稻稻瘟病的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]各種病原菌引起的作物病害極大地影響著糧食生產(chǎn)，使作物減產(chǎn)、糧食品質(zhì)下降。水稻是我國重要的糧食作物，但每年我國有接近400萬公頃的水稻受到稻瘟病危害，年損失水稻產(chǎn)量達(dá)50萬噸，占水稻總產(chǎn)量的10-30%。
[0003]稻瘟病是我國水稻生產(chǎn)的主要病害，威脅著我國的糧食安全。稻瘟病是由稻瘟菌(Magnaporthe Oryzae)引起的水稻的主要病害之一,該病一年四季均可發(fā)生,可危害水稻的各個部位。
[0004]目前，用于防治稻瘟病菌的藥劑主要有:三環(huán)唑、富士一號、稻瘟凈、異稻瘟凈和克瘟散等，本研究將在前期研究的基礎(chǔ)上，研究乙酸對稻瘟菌菌絲生長的抑制作用，并研究其殺菌機(jī)理，為稻瘟病的有效防控提供新手段。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明目的 之一是提供一種利用物理和生化方法結(jié)合防治水稻稻瘟病的方法。
[0006]本發(fā)明的又一目的是減少水稻生長中農(nóng)藥的大量使用，提供綠色安全生長的水稻。
[0007]本發(fā)明的再一目的是提供一種價格低廉的抑制稻瘟菌的混合藥劑。
[0008]本發(fā)明提供的技術(shù)方案為:
[0009]一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0010]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種8~12h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.04%~0.09%，這種方法可以殺滅種子表面可能攜帶的稻瘟菌孢子，降低苗期染病幾率；
[0011]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每10-15天進(jìn)行葉片噴施體積百分比為20% -30%的乙醇溶液，使用乙醇溶液噴施可以降低葉面溫度，破壞稻瘟菌萌發(fā)條件(稻瘟菌孢子萌發(fā)需有水存在并持續(xù)6-8小時，適宜溫度才能形成附著胞并產(chǎn)生侵入絲，穿透稻株表皮)，減少染病幾率，使用乙醇降溫條件較溫和，不會對水稻葉片造成危害，不會影響其生長；
[0012]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.02%~0.1 %的乙酸混合藥劑溶液，已有研究表明，許多原核微生物和真核微生物不僅能利用葡萄糖、果糖和乳糖等各種糖類，而且也能利用乙酸等有機(jī)酸作為它們代謝的能源和碳源而得以生長，稻瘟菌可以利用低濃度的乙酸作為碳源，但是乙酸作為脅迫因子導(dǎo)致稻瘟菌中抗氧化物酶產(chǎn)量低，因此不能有效的消除活性氧的積累，抑制稻瘟菌的生長，從而使菌絲生長緩慢，無法入侵水稻細(xì)胞；[0013]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2~3次，每次處理10~20min，由于此時隨著種苗的逐漸長大，苗圃內(nèi)的濕度會逐漸增加，對苗圃吹冷風(fēng)處理能加強(qiáng)植株間的空氣流通，同時降低植株表體濕度，有效控制稻瘟菌菌絲萌發(fā)及生長；于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為20~30min，灌漿期田間要保持一定的濕度以保證水稻種子灌漿，因此這時田間濕度大，適宜稻瘟菌菌絲生長，吹冷風(fēng)處理能加大田間通風(fēng)，降低水稻葉片的濕度，破壞稻瘟菌菌絲生長的環(huán)境；
[0014]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2-3天之后繼續(xù)灌淺水，這樣做的目的是降低大田濕度，破壞稻瘟菌的生長繁殖條件。
[0015]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑中所述乙酸溶液的體積百分比為0.02%~0.06%。
[0016]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑中所述乙酸溶液的體積百分比為0.03%~0.05%。
[0017]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.2M~0.8M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.1M~0.3M的CaCl2、和體積百分比為0.005%~0.015%的SDS，NaCl和CaCl2在殺菌的同時也可作為植物的微量元
素來源。 [0018]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法，所述水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)。
[0019]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0020]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈，由于在陰雨連綿，日照不足或時晴時雨，或早晚有云霧或結(jié)露條件，稻瘟病病情容易迅速擴(kuò)展，補(bǔ)充照明可以破壞稻瘟病迅速擴(kuò)展的潮濕環(huán)境，利于水稻生長。
[0021]優(yōu)選的是，所述的防治水稻稻瘟病的方法中，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0022]本發(fā)明的有益效果如下:
[0023]本發(fā)明在水稻播種之前利用乙酸和強(qiáng)氯精殺滅水稻種子中可能存在的稻瘟菌孢子，從根本上杜絕稻瘟病的發(fā)生，在苗圃期水稻長出3葉后即對其進(jìn)行除濕處理，破壞稻瘟菌的生長環(huán)境，抑制稻瘟病的發(fā)生，在插秧到大田中后，結(jié)合使用葉片降溫處理、除濕處理、施藥處理和灌排水處理，防止稻瘟病的大范圍發(fā)生。本發(fā)明結(jié)合水稻的生長發(fā)育過程利用多種方法破壞水稻稻瘟菌的生長、繁殖環(huán)境，并且本發(fā)明采用的試劑如乙醇、乙酸、NaCl、CaCl2等試劑對環(huán)境和水稻都不會造成不良影響；依照本發(fā)明的方法能有效抑制水稻稻瘟病的大面積發(fā)生，提高水稻產(chǎn)量，并減少了水稻生產(chǎn)中的農(nóng)藥使用量，收獲到綠色安全的水稻。本方法簡單有效，適用于大面積推廣。
【專利附圖】

【附圖說明】[0024]圖1為本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法的示意圖；
[0025]圖2為稻瘟菌Guyll在含不同濃度乙酸的CM固體培養(yǎng)基中生長4天和7天后的菌落形態(tài)圖；
[0026]圖3為本發(fā)明所述的0.02%乙酸處理對稻瘟菌Guyll中防衛(wèi)基因表達(dá)的影響結(jié)果示意圖；
[0027]圖4 為本發(fā)明所述的 Guyll，AMoCTA3, ΛMoCTA3R 菌株在 CM、PDA、MM、0M、或 SDC培養(yǎng)基中生長7天后的菌落形態(tài)圖；
[0028]圖5為本發(fā)明所述的稻瘟菌侵染大麥表皮的顯微圖片；
[0029]圖6為本發(fā)明所述的MoCTA3基因編碼的蛋白的亞細(xì)胞定位的明場和暗場的電鏡圖；
[0030]圖7為本發(fā)明所述的稻瘟菌在含NaClXaCl2和SDS的CM培養(yǎng)基上生長4天的菌落形態(tài)圖；
[0031]圖8為本發(fā)明所述的稻瘟菌在含NaClXaCl2和SDS的CM培養(yǎng)基上生長4天的菌落直徑統(tǒng)計表。
【具體實施方式】 [0032]下面結(jié)合附圖對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實施。
[0033]實施例1:
[0034]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0035]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種8h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.04% ；
[0036]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，在6月中下旬的拔節(jié)期，每10天進(jìn)行葉片噴施30%的乙醇溶液；
[0037]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.02%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.5M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.2M的CaCl2、和體積百分比為0.01%的SDS ；
[0038]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2次，每次處理20min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為30min ；
[0039]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)3天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0040]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0041]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。[0042]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0043]實施例2:
[0044]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0045]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種12h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.09% ；
[0046]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每15天進(jìn)行葉片噴施20%的乙醇溶液；
[0047]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.04%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.2M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.3M的CaCl2、，和體積百分比為0.015%的SDS ；
[0048]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理3次，每次處理IOmin ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為20min ；[0049]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0050]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0051]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0052]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0053]實施例3:
[0054]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0055]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種9h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.05% ；
[0056]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每12天進(jìn)行葉片噴施25%的乙醇溶液；
[0057]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.05%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.SM的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.1M的CaCl2、和體積百分比為0.005%的SDS ；
[0058]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2次，每次處理15min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為25min ；
[0059]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)3天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0060]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0061]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0062]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0063]實施例4:
[0064]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0065]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種10h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.06% ；
[0066]葉片降溫 處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每13天進(jìn)行葉片噴施22%的乙醇溶液；
[0067]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.03%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.3M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.25M的CaCl2、和體積百分比為0.008%的SDS ；
[0068]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理3次，每次處理12min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為28min ；
[0069]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一偵牝進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0070]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0071]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0072]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0073]實施例5:
[0074]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0075]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種llh，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.07% ；
[0076]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每13天進(jìn)行葉片噴施23%的乙醇溶液；
[0077]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.06%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.4M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.15M的CaCl2、和體積百分比為0.012%的SDS ；
[0078]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2次，每次處理ISmin ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為23min ；
[0079]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0080]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0081]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0082]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0083]實施例6: [0084]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0085]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種8.5h，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.08% ；
[0086]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每11天進(jìn)行葉片噴施27%的乙醇溶液；
[0087]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑質(zhì)量百分濃度為0.07%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.7M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.28M的CaCl2、和體積百分比為0.07%的SDS ；
[0088]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理3次，每次處理14min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為26min ；
[0089]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0090]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0091]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0092]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0093]實施例7:
[0094]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0095]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種llh，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.055% ；
[0096]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每13天進(jìn)行葉片噴施23%的乙醇溶液；
[0097]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.08%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.4M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.15M的CaCl2、和體積百分比為0.012%的SDS ；
[0098]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2次，每次處理ISmin ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為2 Imin ；
[0099]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水 流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0100]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0101]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0102]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0103]實施例8:
[0104]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0105]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種llh，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為
0.075% ；
[0106]葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每11天進(jìn)行葉片噴施29%的乙醇溶液；
[0107]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為
0.09%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.65M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.15M的CaCl2、和體積百分比為0.009%的SDS ；
[0108]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理3次，每次處理19min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為29min ；[0109]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0110]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0111]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0112]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0113]實施例9:
[0114]如圖1所示，一種防治水稻稻瘟病的方法，包括如下步驟:
[0115]種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種llh，其中所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為
0.075% ；
[0116] 葉片降溫處理:河南省春稻一般在6月份完成插秧，插秧后在拔節(jié)期，每14天進(jìn)行葉片噴施26%的乙醇溶液；
[0117]施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑體積百分比為0.1%的乙酸混合藥劑溶液，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.45M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.18M的CaCl2、和體積百分比為0.011%的SDS ；
[0118]除濕處理:于3葉期到移栽前，使用鼓風(fēng)機(jī)對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理2次，每次處理17min ;移栽后的水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)，于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理I次，處理時間為24min ；
[0119]灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2天之后繼續(xù)灌淺水。并且，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
[0120]所述的防治水稻稻瘟病的方法，還包括:
[0121]照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
[0122]依照本發(fā)明所述的防治水稻稻瘟病的方法后，水稻稻瘟病基本沒有大面積發(fā)生，水稻產(chǎn)量有所提高。
[0123]實施例10:
[0124]一、實驗材料:
[0125]CM培養(yǎng)基:0.6% yeast extract ;(λ 3%酶水解干酪素；(λ 3%酸水解干酪素；I %蔗糖；1.6%瓊脂。
[0126]實驗菌株:稻瘟菌野生型菌株GuylI。[0127]二、實驗方法:
[0128]1、稻瘟菌菌株Guyll活化
[0129]2、切取活化后的稻瘟菌菌絲塊于含不同濃度乙酸的CM固體培養(yǎng)基中，分別于4d后、7d后觀察菌落形態(tài)，十字交叉法測量菌落的直徑，乙酸濃度分別為0、0.01%、0.02%,
0.03%,0.04%,0.05%。
[0130]3、切取活化后的稻瘟菌菌絲塊于含0.02%乙酸的CM液體培養(yǎng)基中，28°C，150r /min培養(yǎng)48h，以不含乙酸的培養(yǎng)基為對照，然后提取其RNA，反轉(zhuǎn)錄成cDNA，進(jìn)行Real timePCR實驗，檢測乙酸處理后的稻瘟菌防位基因的表達(dá)量。
[0131]實驗結(jié)果和分析:
[0132]如圖2所示，稻瘟菌在含有不同濃度乙酸的CM固體培養(yǎng)基中生長4d時，0.01%乙酸即可對其菌絲生長產(chǎn)生明顯的抑制作用；當(dāng)乙酸濃度為0.05%時，稻瘟菌菌絲生長被完全抑制。濃度越高，抑制程度越強(qiáng)，當(dāng)乙酸濃度大于0.05%后稻瘟菌完全就不能長了。
[0133]當(dāng)?shù)疚辆诤胁煌瑵舛纫宜岬腃M固體培養(yǎng)基中生長7d時，菌落形態(tài)無明顯變化，但乙酸對稻瘟菌菌絲生長的抑制作用出現(xiàn)變化于4d時有明顯的不同之處:
[0134]0.01%乙酸處理組的菌落直徑大于對照組的菌落直徑；0.05%處理組中有菌落形成；其他處理組與4d相比無明顯變化。這可能是由于乙酸既可以作為抑制劑抑制菌絲生長又可以作為碳源被稻瘟 菌吸收利用。長時間的培養(yǎng)導(dǎo)致乙酸揮發(fā)而失去功效，同時乙酸作為脅迫因子能夠誘導(dǎo)菌絲體內(nèi)相關(guān)基因的高表達(dá)，導(dǎo)致7d后0.01%處理組的菌絲生長速率大于對照組而0.05%處理組中菌絲的重新生長。
[0135]稻瘟菌在含有不同濃度乙酸的CM固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，不僅利用了葡萄糖，也可能利用了乙酸作為碳源，4d時，由于稻瘟菌對乙酸的利用能力有限，0.01%的乙酸對稻瘟菌的抑制作用大于促進(jìn)作用，所以菌絲直徑小于對照組；7d時，當(dāng)?shù)疚辆m應(yīng)了脅迫的環(huán)境，利用乙酸的能力加強(qiáng)，0.01%的乙酸對稻瘟菌的抑制作用小于促進(jìn)作用，所以菌絲直徑大于對照組。稻瘟菌在含有0.05%乙酸的CM固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，4d時，菌絲不生長，7d時，由于乙酸揮發(fā)，抑制作用降低，菌絲生長。
[0136]如圖3所示，本實驗提取了在含有0.02%乙酸的CM液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)了 48h的稻瘟菌菌絲的RNA，然后進(jìn)行Real Time PCR實驗，Real Time PCR結(jié)果顯示含有0.02%乙酸的CM液體培養(yǎng)基中稻瘟菌的防衛(wèi)基因，如腺苷酸環(huán)化酶基因CaM(mgg_06884)，乙烯受體基因(mgg_06696),細(xì)胞色素C氧化酶基因CCO (mgg_04545),過氧化氫酶CAT基因(mgg_04337),超氧化物歧化酶基因S0D(mgg_02625)，外源鈣調(diào)蛋白激酶CaMPK基因(mgg_00925)的表達(dá)量均下調(diào)，其中乙烯受體基因、CAT基因、SOD基因、CaMPK基因與對照相比較表達(dá)量下調(diào)較明顯。
[0137]稻瘟菌中的SOD基因、CAT基因、乙烯受體基因、CaMPK基因與對照相比較表達(dá)量下調(diào)較明顯:表明在受到外界環(huán)境脅迫時稻瘟菌中抗氧化物酶產(chǎn)量低，因此不能有效的消除活性氧的積累。在植物與病原菌相互作用的過程中，植物體內(nèi)的活性氧進(jìn)發(fā)是植物防衛(wèi)反應(yīng)的最初表現(xiàn)之一?；钚匝踹M(jìn)發(fā)的作用之一是對入侵病原物直接表現(xiàn)毒性，從而限制或抑止病菌的入侵，已經(jīng)有許多研究表明活性氧能夠抑止真菌菌絲體生長。由于防衛(wèi)基因的表達(dá)量下調(diào)造成有關(guān)的抗氧化酶產(chǎn)量的降低導(dǎo)致的活性氧的積累，抑制了稻瘟菌的生長，從而造成菌絲生長緩慢的現(xiàn)象。[0138]本實驗證實乙酸可有效防治水稻稻瘟病，本發(fā)明據(jù)此設(shè)定出水稻稻田中使用乙酸抑制稻瘟病的發(fā)生。
[0139]實施例11:
[0140]本發(fā)明的研究人員克隆了稻瘟菌Guyll中一個基因MoCTA3，并進(jìn)一步研究了其功能。稻瘟菌侵染水稻葉片0h、48h、72h、96h四個不同時期的qRT-PCR檢測顯示，MoCTA3在菌絲生長階段的表達(dá)量很高，侵染過程中隨侵染時間延長表達(dá)量逐漸升高，72h時達(dá)到高峰，隨后降低，說明MoCTA3參與了稻瘟菌的侵染過程，在稻瘟菌的致病性方面可能具有重要作用。隨后根據(jù)同源重組原理構(gòu)建了該基因的敲除突變體和互補(bǔ)子。本發(fā)明中，Guyll代表稻瘟菌野生型菌株Guyl I，八100^3代表稻瘟菌野生型菌株6耶11的MoCTA3基因缺失突變體，AMoCTA3R代表稻瘟菌野生型菌株Guyll的MoCTA3基因缺失突變體的互補(bǔ)子。對突變體和野生型的表型觀察發(fā)現(xiàn)，如圖4所示，突變體無論在CM、PDA、RDC還是在OM培養(yǎng)基上的生長量都比野生型明顯減少，生長速率明顯降低。由于突變體喪失了產(chǎn)孢能力，因此用菌絲接種了大麥葉片，如圖5所示，剪取培養(yǎng)3周左右的大麥葉片于濕潤的濾紙片中，分別接種Guyll, AMoCTA3, AMoCTA3R的菌絲球，28°C黑暗培養(yǎng)，分別于接種后24h、48h撕取被侵染的大麥表皮，顯微鏡下觀察。24h時，接種Guyll和ΛMoCTA3R大麥表皮細(xì)胞內(nèi)均有少量侵染菌絲，48h時侵染菌絲已布滿整個細(xì)胞；而AMoCTA3無法侵染大麥表皮。因此突變體附著胞可能也存在某些缺陷。用菌絲侵染水稻葉片的實驗結(jié)果和大麥葉片的結(jié)果大致相似，對水稻葉片的致病能力也顯著下降。
[0141]研究人員進(jìn)一步研究了 MoCTA3基因編碼的蛋白的亞細(xì)胞定位，切取小塊活化后的AMoCTA3R菌株于SRC培養(yǎng)基中，28 °C黑暗培養(yǎng)7d后，刮去菌絲，置于黑光燈下誘導(dǎo)2-3d，無菌水沖洗孢子，熒光觀察。如圖5所示，GFP熒光標(biāo)記定位:顯示該基因編碼的蛋白位于孢子的隔膜上。 這個結(jié)果可能預(yù)示著MoCTA3基因的缺失可能導(dǎo)致了稻瘟菌菌絲的隔膜不能正常形成而影響菌絲的生長。
[0142]研究人員克隆的稻瘟菌MoCTA3基因影響稻瘟菌附著胞的發(fā)育，降低稻瘟菌的致病力，使稻瘟菌無法侵染水稻葉片，可以作為殺菌劑的靶標(biāo)位點(diǎn)?；诖嘶虺霭l(fā)，研究人員認(rèn)為可以將抑制菌絲生長作為一種殺滅稻瘟菌的方法。研究人員將活化后的稻瘟菌菌絲塊分別于含0.5M NaCU0.2M CaCl2、0.02M MnCl2 (由于Mn為重金屬離子，本發(fā)明乙酸混合藥劑中未使用)或0.01% SDS的CM固體培養(yǎng)基中，4d后觀察菌落并測量稻瘟菌菌株的菌落直徑，如圖7和圖8顯示，結(jié)果表明，NaCl, CaCl2, MnCl2和SDS都能一定程度地抑制野生稻瘟菌Guyll的生長，其中SDS抑制效果最明顯。
[0143]所以本發(fā)明中采用了 NaCl、CaCl2、和SDS作為殺滅稻瘟菌的幾種試劑。
[0144]盡管本發(fā)明的實施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。
【權(quán)利要求】
1.一種防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，包括如下步驟: 種子處理:在播種前，使用乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種處理； 葉片降溫處理:在拔節(jié)期，每10-15天進(jìn)行葉片噴施體積百分比為20%-30%的乙醇溶液； 施藥處理:于分蘗期、灌漿期以及成熟期內(nèi)，向所述水稻噴灑含體積百分比為0.02%~0.1 %的乙酸混合藥劑； 除濕處理:于3葉期到移栽前，對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理；于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天對水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)處理； 灌排水處理:在所述水稻的分蘗期、拔節(jié)期和抽穗開花期分別對水稻稻田進(jìn)行排水曬田處理，將稻田內(nèi)的水排干進(jìn)行曬田，持續(xù)2-3天之后繼續(xù)灌淺水。
2.如權(quán)利要求1所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液中所述乙酸的體積百分比為0.01%，所述強(qiáng)氯精的質(zhì)量百分比為0.04%~0.09%，使用所述乙酸和強(qiáng)氯精混合溶液進(jìn)行浸種8~12h。
3.如權(quán)利要求1所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑中所述乙酸溶液的體積百分比為0.02%~0.06%。
4.如權(quán)利要求3所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑中所述乙酸溶液的體積百分比為0.03%~0.05%。
5.如權(quán)利要求1所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述施藥處理中，所用乙酸混合藥劑還包括:質(zhì)量體積濃度為0.2M~0.8M的NaCl、質(zhì)量體積濃度為0.1M~0.3M的CaCl2、和體積百分比為0.005%~0.015%的SDS。
6.如權(quán)利要求1所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述水稻稻田被分割為多個區(qū)域，每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置一個鼓風(fēng)機(jī)。
7.如權(quán)利要求6所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，還包括: 照明處理:使用照明燈對水稻進(jìn)行照射，所述每個區(qū)域內(nèi)設(shè)置有多個照明燈。
8.如權(quán)利要求1或2所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，于3葉期到移栽前，對苗圃水稻進(jìn)行吹冷風(fēng)2~3次，每次處理10~20min ;于灌漿期，在進(jìn)行所述施藥處理之后的第3天使用所述鼓風(fēng)機(jī)對水稻進(jìn)行I次20~30min的吹冷風(fēng)處理。
9.如權(quán)利要求1所述的防治水稻稻瘟病的方法，其特征在于，所述水稻稻田為相對于水平面傾斜設(shè)置的斜面，以使所述水稻稻田的高度由一側(cè)向另一側(cè)逐漸增加，灌淺水時限定水流的方向為從所述水稻稻田高度最高的一側(cè)向所述水稻稻田高度最低的一側(cè)，進(jìn)行所述排水曬田處理時將排水與所述水稻稻田的連通位置設(shè)置在所述水稻稻田的高度最低的一側(cè)。
【文檔編號】A01N47/38GK103907426SQ201410134608
【公開日】2014年7月9日 申請日期:2014年4月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月3日
【發(fā)明者】李萬昌, 馬利萍, 王丹, 王靜, 師學(xué)珍, 姬生棟 申請人:河南師范大學(xué)