一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法，通過以海藻酸鈉為基本載體，配合殼聚糖、明膠、甘油、大米、泥炭、煤渣、麥芽根多種填充物混合得到混合物，混合物滅菌后，將菌劑包埋到混合物中得到菌劑混合物，將菌劑混合物通過物理擠壓方式滴入到氯化鈣溶液中制成球狀物，在球狀物固化清理后得到叢枝菌根真菌膠囊菌劑。在本發(fā)明中，內(nèi)球囊霉真菌的孢子、菌根及菌絲包埋在海藻酸鈉中，播種在未滅菌的土壤中時可以完成完整的侵染過程，隨侵染時間的延長，侵染率均有提升。本發(fā)明的制備方法簡單、成本低廉、毒性小，本發(fā)明的叢枝菌根真菌膠囊菌劑包埋材料易于被微生物分解，保存時間較長，同時可直接播種于大田中。
【專利說明】一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法
【技術(shù)領域】
[0001]本發(fā)明屬于膠囊菌劑制備【技術(shù)領域】，尤其涉及一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]叢枝菌根(Arbuscularmycorrhizalfungus,叢枝菌根真菌)真菌是廣泛存在于土壤中的內(nèi)生菌根真菌，它可以與地球上80%的植物形成共生體系。研究表明，叢枝菌根真菌可以改善植物體內(nèi)水分代謝，提高抗干旱、鹽堿能力；增強植物抗病能力；促進植物對各種礦質(zhì)元素的吸收與利用，從而促進生長，改善品質(zhì)。而叢枝菌根真菌則利用宿主植物提供的碳水化合物維持自身生長和繁殖。叢枝菌根真菌是專性共生真菌，自身不能合成DNA，因此至今還無法像外生真菌一樣進行純培養(yǎng)進而工業(yè)發(fā)酵，只能依存植物根部與其共同繁殖生長。
[0003]液體菌劑生產(chǎn)簡單，成本低廉，使用方便，但是運輸困難，不利于真菌的生長和繁殖，儲存時間不宜過長。固體菌劑是在液體菌劑基礎上，加入適當物質(zhì)和菌種生產(chǎn)而成，制作簡單，運輸及儲存方便，缺點是同等質(zhì)量和體積的菌劑含菌量低于液體菌劑。粉劑是將孢子混入填充料中制成的菌劑，儲存、運輸及使用較為方便，但菌劑中只有孢子，孢子發(fā)芽不好會影響菌劑的使用效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法，旨在解決的問題。
[0005]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的，一種叢枝`菌根真菌膠囊菌劑的制備方法，包括以下步驟:
[0006]( I)以海藻酸鈉為基本載體，往所述基本載體中加入填充物混合,將所述混合物滅菌，并將叢枝菌根液體菌劑均勻包埋到所述混合物中，得到菌劑混合物；其中，所述填充物為殼聚糖、明膠、甘油、泥炭、煤渣、麥芽根和大米粉其中至少一種；所述菌劑混合物中海藻酸鈉、填充物以及叢枝菌根的質(zhì)量百分比分別為2~3%、2~9%以及I~2% ；
[0007](2)將所述菌劑混合物通過物理擠壓方式滴入到質(zhì)量濃度比為1.5~4.5%氯化鈣溶液中，在攪拌狀態(tài)下，所述菌劑混合物的滴入物在氯化鈣溶液中形成球狀物，在所述球狀物固化后取出，并將表面氯化鈣用無菌水清洗后晾干，得到叢枝菌根真菌膠囊菌劑。
[0008]優(yōu)選地，在步驟(1)中，所述填充物為占菌劑混合物質(zhì)量百分比值為2%的殼聚糖、3%的明膠、5%的甘油、3~5%的泥炭、7~9%的煤渣、2~5%的麥芽根或2~5%的大米粉。
[0009]優(yōu)選地，在步驟(1)中，所述填充物在使用前研磨均勻；
[0010]在步驟(1)中，所述液體菌劑與滅菌后混合物的溫度均低于40°C，所述滅菌為在121°C、0.12MPa壓力下蒸汽滅菌20min ；
[0011]在步驟(1)中，所述包埋的溫度為20~40°C。
[0012]優(yōu)選地，在步驟(1)中，叢枝菌根液體菌劑通過以下步驟制備:[0013]A、將叢枝菌根用胡蘿卜離體根進行雙重培養(yǎng)，獲得叢枝菌根真菌培養(yǎng)物；
[0014]B、將所述叢枝菌根真菌培養(yǎng)物攪碎后，過400目篩并用無菌水篩除雜質(zhì)，留取含有菌絲、孢子及菌根的叢枝菌根液體菌劑。
[0015]優(yōu)選地,所述叢枝菌根為根內(nèi)球囊霉菌(Glomusintraradices)。
[0016]優(yōu)選地，在步驟(2)中，所述物理擠壓方式為將所述菌劑混合物用恒流泵或注射器進行擠壓；
[0017]在步驟(2)中，所述球狀物的直徑為3~6mm ;
[0018]在步驟(2)中，所述攪拌的速度不大于30rpm/min ；
[0019]在步驟(2)中，所述固化的時間為8~16h。
[0020]為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺點，在本發(fā)明中提供了一種叢枝菌根真菌膠囊菌劑的制備方法，通過以海藻酸鈉為基本載體，配合殼聚糖、明膠、甘油、大米、泥炭、煤渣、麥芽根多種填充物混合得到混合物，混合物滅菌后，將菌劑包埋到混合物中得到菌劑混合物，將菌劑混合物通過物理擠壓方式滴入到氯化鈣溶液中制成球狀物，在球狀物固化清理后得到叢枝菌根真菌膠囊菌劑。在本發(fā)明中，內(nèi)球囊霉真菌的孢子、菌根及菌絲包埋在海藻酸鈉中，播種在未滅菌的土壤中時可以完成完整的侵染過程，隨侵染時間的延長，侵染率均有提升。本發(fā)明的制備方法簡單、成本低廉、毒性小，本發(fā)明的叢枝菌根真菌膠囊菌劑包埋材料易于被微生物分解，保存時間較長，同時可直接播種于大田中。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1是本發(fā)明效果實`施例中叢枝菌根真菌膠囊菌劑I~8的外形觀察結(jié)果圖；
[0022]圖2是本發(fā)明效果實施例中不同菌劑25天后的侵染率的結(jié)果比較圖；
[0023]圖3是本發(fā)明效果實施例中不同菌劑隨著培養(yǎng)時間下侵染率變化示意圖；
[0024]圖4是本發(fā)明效果實施例中叢枝菌根真菌膠囊菌劑5儲存不同時間后對高粱的侵染率變化示意圖；
[0025]圖5是本發(fā)明效果實施例中叢枝菌根真菌膠囊菌劑1、2以及4冷凍干燥前后侵染率變化示意圖。
【具體實施方式】
[0026]為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實施例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。
[0027]實施例叢枝菌根真菌膠囊菌劑的生產(chǎn)
[0028](I)液體菌劑的制備
[0029]取R1-TDNA胡蘿卜根雙重培養(yǎng)獲得的根內(nèi)球囊霉菌(Glomusintraradices)固體菌劑(該菌劑的具體制備方法參見
【發(fā)明者】金海如 申請人:浙江師范大學