荔枝花粉收集保存方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了荔枝花粉的收集保存方法，屬于果樹授粉【技術(shù)領(lǐng)域】。其采集保存方法步驟是：1、采集發(fā)育階段成熟未開裂的荔枝花藥，將采集到的花藥裝入玻璃培養(yǎng)皿中；2、將上述裝有花藥的玻璃培養(yǎng)皿放入干燥箱中，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)的花藥進(jìn)行干燥處理；3、將干燥結(jié)束的花藥和散出來(lái)的花粉倒入不銹鋼篩，過篩后裝入離心管；4、將上述裝入離心管的花粉密封，放入-86℃以下超低溫冰箱保存。本發(fā)明方法簡(jiǎn)便易行，不同天氣條件下均可進(jìn)行收集，獲得的花粉發(fā)芽率高，保存時(shí)間最長(zhǎng)。
【專利說(shuō)明】荔枝花粉收集保存方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于果樹授粉【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體涉及一種荔枝花粉的收集保存方法。
【背景技術(shù)】
[0002]荔枝是廣東、廣西、海南和福建等四省區(qū)最重要的水果。目前荔枝產(chǎn)業(yè)存在品種結(jié)構(gòu)不合理和成熟期非常集中二大難題，而品種創(chuàng)新是解決這二大難題不可缺的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。一直以來(lái)，主要通過實(shí)生選種實(shí)現(xiàn)荔枝品種的創(chuàng)新。由于長(zhǎng)期采取嫁接、圈枝的無(wú)性繁殖方法，單一品種的種植，以及因土地征收導(dǎo)致的許多種質(zhì)資源的丟失，產(chǎn)區(qū)荔枝的遺傳多樣性不斷喪失，通過實(shí)生選種實(shí)現(xiàn)荔枝品種的創(chuàng)新難以為繼。人工雜交育種將是荔枝品種創(chuàng)新的主要途徑，花粉的收集保存是荔枝人工雜交育種實(shí)現(xiàn)種質(zhì)創(chuàng)新的重要環(huán)節(jié)。
[0003]目前關(guān)于荔枝花粉的收集保存沒有成熟的技術(shù)。前人研究的荔枝花粉收集保存方法，僅適用于花粉即采即用和花期相遇的品種之間授粉，以及早熟品種的花粉授晚熟品種，最長(zhǎng)在_30°C冰箱內(nèi)貯藏150天，只能滿足當(dāng)年授粉需要，不能解決第二年授粉的問題。并且，前人的干燥方法多采用太陽(yáng)光自然晾曬，這種方法受限于天氣狀況，而且干燥效果不穩(wěn)定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種荔枝花粉的收集、干燥、保存方法，貯存一年發(fā)芽率不變可用于第二年的人工授粉，解決因自然環(huán)境不良等原因造成的荔枝品種授粉受精困難問題，滿足授粉的需要，特別是早熟品種的人工授粉，同時(shí)對(duì)荔枝種質(zhì)創(chuàng)新具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
[0005]經(jīng)長(zhǎng)期的調(diào)研發(fā)現(xiàn)，荔枝雄花發(fā)育可分為三個(gè)階段，第一階段，花藥剛伸出雄花花托，花絲不明顯；第二階段，花絲伸長(zhǎng)一半`；第三階段，花絲伸長(zhǎng)充分但花藥沒有開裂。在雄花發(fā)育第一階段提取花藥并干燥，沒有發(fā)現(xiàn)成熟的花粉；雄花發(fā)育第二階段和第三階段提取花藥并干燥，大量成熟的花粉存在。因此，成熟花藥定義為雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥。為此，本荔枝花粉(花藥)采摘的標(biāo)準(zhǔn)是:采摘成熟未開裂的花藥，即該花藥指雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥，即花絲伸長(zhǎng)一半或充分伸長(zhǎng)但花藥沒有開裂的。
[0006]采回來(lái)的花藥，如在陰雨天氣摘采時(shí)，可將花藥先放置在吸水紙上，利用吸水紙將花藥表面上的水吸干，再將花藥裝在玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)，裝入的花藥量以均勻鋪開以能均勻干燥為準(zhǔn)，優(yōu)選為均勻鋪開兩層內(nèi)的花藥厚度。花藥裝好后將其放入干燥箱內(nèi)，而花藥的干燥是花粉收集保存的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)荔枝花藥干燥的第I個(gè)小時(shí)，水分揮發(fā)最快，達(dá)到每小時(shí)水分相對(duì)揮發(fā)量42.65% ;干燥的第2個(gè)小時(shí)，每小時(shí)水分相對(duì)揮發(fā)量20.10% ;從第3個(gè)小時(shí)開始，水分揮發(fā)很少。同時(shí)，干燥過程中花藥的開裂節(jié)奏較水分的揮發(fā)節(jié)奏慢，干燥的第I小時(shí)出粉率只有10%，第2小時(shí)出粉率62%，第3小時(shí)出粉率85%，第4小時(shí)出粉率達(dá)到93%。因此荔枝花藥干燥過程可分成二個(gè)階段，最初的2小時(shí)是水分揮發(fā)階段，第2-3小時(shí)是花藥開裂階段。干燥溫度45°C~50°C，會(huì)導(dǎo)致荔枝花粉發(fā)芽率明顯下降，花藥出粉率也低于70% ;干燥溫度30°C~35°C，不會(huì)導(dǎo)致花粉發(fā)芽率下降，但干燥時(shí)間影響花藥出粉率。因此本發(fā)明綜合提出了荔枝花藥干燥的適宜技術(shù)指標(biāo)，這種干燥技術(shù)不受天氣條件影響，任何天氣條件下均可采集荔枝花粉。這技術(shù)就是利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理，處理時(shí)分為花藥水分揮發(fā)階段和花藥開裂階段，其水分揮發(fā)階段在40°C下進(jìn)行，花藥開裂階段在30°C~35°C下進(jìn)行。
[0007]具體的干燥箱進(jìn)行對(duì) 玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理操作是:首先用40°C溫度去除花藥水分的50-60% ;然后下調(diào)溫度至35°C去除花藥的大部分水分；最后將溫度再次下調(diào)至27°C~28°C，將花藥干燥至開裂階段即可。其干燥時(shí)間，可視采摘回來(lái)的花藥干燥程度而定，當(dāng)晴好天氣時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥I小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥I~2小時(shí)；當(dāng)陰雨天時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥2小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥4~6小時(shí)。
[0008]將花藥干燥后，利用150目不銹鋼篩篩選出花粉，倒入2ml容量的離心管，密封后放置_86°C以下超低溫冰箱保存即可完成保存。
[0009]關(guān)于貯藏溫度，其它植物的花粉有報(bào)道在液氮中貯藏效果較好，但貯存液氮中存在貯存前預(yù)冷及使用前解凍的問題，在這些過程中對(duì)荔枝花粉發(fā)芽率影響較大，本發(fā)明采用-86°C以下超低溫冰箱貯存避免了以上的問題，取得了良好的保存效果。
[0010]經(jīng)上述調(diào)研發(fā)現(xiàn)得出，本發(fā)明的目的可以通過如下技術(shù)方案達(dá)到:
[0011]荔枝花粉的收集保存方法，其采集保存方法步驟是:
[0012]1、采集發(fā)育階段成熟未開裂的荔枝花藥，將采集到的花藥裝入玻璃培養(yǎng)皿中；
[0013]2、將上述裝有花藥的玻璃培養(yǎng)皿放入干燥箱中，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)的花藥進(jìn)行干燥處理；
[0014]3、將干燥結(jié)束的花藥和散出來(lái)的花粉倒入不銹鋼篩，過篩后裝入離心管；
[0015]4、將上述裝入離心管的花粉密封，放入_86°C以下超低溫冰箱保存。
[0016]本發(fā)明的目的還可以通過如下技術(shù)方案達(dá)到:
[0017]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:所述的花藥采摘的標(biāo)準(zhǔn):采摘成熟未開裂的花藥，該花藥指雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥，即花絲伸長(zhǎng)一半或充分伸長(zhǎng)但花藥沒有開裂的。
[0018]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:所述的花藥裝在玻璃培養(yǎng)皿的厚度以花藥2層以內(nèi)為且。
[0019]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:晴好天氣時(shí)，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度39-41°C干燥1.5-2.5小時(shí)，然后設(shè)定溫度34-36°C，干燥
0.5-1.5小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥I~2小時(shí)。
[0020]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥I小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C，干燥1.5小時(shí)。
[0021]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:陰雨天氣時(shí)，所述采摘回的花藥先放置在吸水紙上吸水，然后再及時(shí)干燥，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度39-41°C干燥1.5-2.5小時(shí)，然后設(shè)定溫度34-36°C，干燥0.5-1.5小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥4~6小時(shí)。[0022]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥2小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C，干燥5小時(shí)。
[0023]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:所述的不銹鋼篩為150目鋼篩。
[0024]本發(fā)明的一種實(shí)施方案是:所述的離心管為2ml容量的離心管。
[0025]本發(fā)明的有益效果
[0026]1、本發(fā)明通過試驗(yàn)得出荔枝花藥采集的最佳發(fā)育階段，比以前的收集方法更高效，獲得的花粉發(fā)芽率更高，保存時(shí)間最長(zhǎng)，可以第二年使用。
[0027]2、本方法收集的荔枝花粉采用離心管低溫貯藏，可保存一年發(fā)芽率不變，保存的時(shí)間長(zhǎng)，不僅滿足當(dāng)年授粉需求而且可實(shí)現(xiàn)第二年人工授粉，特別是解決了荔枝早熟品種的授粉問題，提高經(jīng)濟(jì)效益。
[0028]3、本發(fā)明根據(jù)不同氣候采摘回來(lái)不同的花粉，利用平鋪在玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)，使用不同的干燥時(shí)間，提高干燥花藥的干燥度和保存時(shí)間。
[0029]4、本發(fā)明為荔枝雜交育種研究，新組合的創(chuàng)制提供了可能，對(duì)荔枝新品種的選育具有重要應(yīng)用價(jià)值。如早熟品種授晚熟品種的花粉實(shí)現(xiàn)自然雜交不可能出現(xiàn)的組合；可以進(jìn)行荔枝和龍眼或者紅毛丹的遠(yuǎn)緣雜交；花期不遇的荔枝親本間雜交；本發(fā)明的應(yīng)用可以極大的豐富荔枝雜交育種的組合范圍，豐富荔枝資源的遺傳多樣性。
[0030]5、本方法簡(jiǎn)便易行，不同天氣條件下均可進(jìn)行收集，可實(shí)現(xiàn)荔枝花粉的大量收集貯藏。
【具體實(shí)施方式】
[0031]本發(fā)明下面將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步詳述
[0032]實(shí)施例1:晴天的收集保存方法
[0033](I)花藥的采集
[0034]花藥采摘的標(biāo)準(zhǔn):只采摘成熟未開裂的花藥，就是雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥，即花絲伸長(zhǎng)一半或充分伸長(zhǎng)但花藥沒有開裂的。采摘過程中手或者鑷子的使用要輕巧，盡量減少對(duì)花藥的機(jī)械傷。
[0035](2)花藥的干燥
[0036]將采摘的花藥裝入玻璃培養(yǎng)皿中放入干燥箱，首先，設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥I小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥I~2小時(shí)?；ㄋ幯b在玻璃培養(yǎng)皿的厚度以2層以內(nèi)為宜。
[0037](3)花粉的保存
[0038]把干燥結(jié)束的花藥和散出來(lái)的花粉從玻璃培養(yǎng)皿倒進(jìn)150目不銹鋼篩，不銹鋼篩放置在相應(yīng)的玻璃培養(yǎng)皿上面，承接過篩的花粉。把過篩后的花粉從玻璃培養(yǎng)皿倒在硫酸紙上，然后把硫酸紙卷成漏斗狀，把花粉倒進(jìn)2ml容量的離心管。再把裝有花粉的離心管放入離心管盒，然后將離心管盒放進(jìn)_86°C超低溫冰箱保存。
[0039]實(shí)施例2:陰雨天的收集保存方法
[0040](I)花藥的采集
[0041]花藥采摘的標(biāo)準(zhǔn):只采摘成熟未開裂的花藥，就是雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥，即花絲伸長(zhǎng)一半或充分伸長(zhǎng)但花藥沒有開裂的。
[0042]陰雨天采摘花藥，需要提前搖花，盡量抖落花穗的水滴。采摘過程中手或者鑷子的使用要輕巧，盡量減少對(duì)花藥的機(jī)械傷。采摘回的花藥先倒在吸水紙上面吸水，利用吸水紙將花藥表面的水吸掉，然后再放置干燥箱及時(shí)干燥。
[0043](2)花藥的干燥
[0044]將采摘的花藥裝入玻璃培養(yǎng)皿中放入干燥箱，首先，設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥2小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C干燥4~6小時(shí)。花藥裝在玻璃培養(yǎng)皿的厚度以2層以內(nèi)為宜。
[0045](3)花粉的保存[0046]把干燥結(jié)束的花藥和散出來(lái)的花粉從玻璃培養(yǎng)皿倒進(jìn)150目不銹鋼篩，不銹鋼篩放置在相應(yīng)的玻璃培養(yǎng)皿上面，承接過篩的花粉。把過篩后的花粉從玻璃培養(yǎng)皿倒在硫酸紙上，然后把硫酸紙卷成漏斗狀，把花粉倒進(jìn)2ml容量的離心管，把裝有花粉的離心管放入離心管盒，然后將離心管盒放進(jìn)_86°C超低溫冰箱保存。
【權(quán)利要求】
1.荔枝花粉的收集保存方法，其特征在于:其采集保存方法步驟是: ①采集發(fā)育階段成熟未開裂的荔枝花藥，將采集到的花藥裝入玻璃培養(yǎng)皿中； ②將上述裝有花藥的玻璃培養(yǎng)皿放入干燥箱中，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿內(nèi)的花藥進(jìn)行干燥處理； ③將干燥結(jié)束的花藥和散出來(lái)的花粉倒入不銹鋼篩，過篩后裝入離心管； ④將上述裝入離心管的花粉密封，放入-86°C以下超低溫冰箱保存。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:所述的花藥采摘的標(biāo)準(zhǔn):采摘成熟未開裂的花藥，該花藥指雄花發(fā)育第二階段至第三階段的花藥，即花絲伸長(zhǎng)一半或充分伸長(zhǎng)但花藥沒有開裂的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:所述的花藥裝在玻璃培養(yǎng)皿的厚度以花藥2層以內(nèi)為宜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:晴好天氣時(shí)，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度39-41°C干燥1.5-2.5小時(shí)，然后設(shè)定溫度34-36°C，干燥0.5-1.5小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥I~2小時(shí)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥I小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C，干燥1.5小時(shí)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:陰雨天氣時(shí)，所述采摘回的花藥先放置在吸 水紙上吸水，然后再及時(shí)干燥，利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度39-41 °C干燥1.5-2.5小時(shí)，然后設(shè)定溫度34_36°C，干燥0.5-1.5小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C~28°C，干燥4~6小時(shí)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:利用干燥箱進(jìn)行對(duì)玻璃培養(yǎng)皿中的花藥進(jìn)行干燥處理時(shí)，首先設(shè)定溫度40°C干燥2小時(shí)，然后設(shè)定溫度35°C，干燥2小時(shí)，最后設(shè)定溫度27°C，干燥5小時(shí)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:所述的不銹鋼篩為150目鋼篩。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荔枝花粉收集保存方法，其特征在于:所述的離心管為2ml容量的離心管。
【文檔編號(hào)】A01H1/02GK103719076SQ201310729121
【公開日】2014年4月16日 申請(qǐng)日期:2013年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月25日
【發(fā)明者】歐良喜, 王麗敏, 陳潔珍, 蔡長(zhǎng)河, 付丹文, 張春陽(yáng), 王曉容 申請(qǐng)人:廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所