一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，解決春蘿卜選育過(guò)程中自交系繁種難、易丟失育種材料、選育周期長(zhǎng)的問(wèn)題，可以大大加快春蘿卜的育種速度。包括以下步驟：(1)催芽，春化處理；(2)培養(yǎng)；(3)幼苗移植于溫室的種畦內(nèi)；(4)進(jìn)行抽薹性狀篩選，拔除已經(jīng)抽薹單株；(5)對(duì)留下的耐抽薹單株進(jìn)行自交授粉；(6)取各單株的部分種莢，剝?nèi)∨哌M(jìn)行培養(yǎng)；余下的種莢繼續(xù)授粉留種；(7)由胚培養(yǎng)獲得的幼苗移植到大田栽培，定植后覆膜；(8)收獲種子；(9)統(tǒng)計(jì)大田移植蘿卜的抽薹率及肉質(zhì)根的商品性狀，選取抽薹率在10%以下，肉質(zhì)根65天內(nèi)可以膨大達(dá)到收獲的標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)量在3500kg以上的株系，即為耐抽薹蘿卜自交系。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，屬于農(nóng)業(yè)新品種選育【技術(shù)領(lǐng)域】?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]蘿卜(Raphanus sativus L.)屬于十字花科蘿卜屬,食用部分為肥大的肉質(zhì)根,根內(nèi)所含的芥子油和膳食纖維可促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，含有的多種微量元素能誘導(dǎo)人體自身產(chǎn)生干擾素，對(duì)防癌，抗癌有重要意義，常吃蘿卜還可降低血脂、軟化血管、穩(wěn)定血壓，因此，歷來(lái)蘿
卜具有很高的食用和醫(yī)用價(jià)值。
[0003]目前，隨著生產(chǎn)的發(fā)展和生活水平的提高，人們對(duì)蘿卜產(chǎn)品質(zhì)量及供應(yīng)期的要求也隨之提高，需要更多類(lèi)型的品種來(lái)滿(mǎn)足周年市場(chǎng)的需求。在保持原來(lái)傳統(tǒng)秋播栽培的基礎(chǔ)上，積極發(fā)展春、夏播蘿卜生產(chǎn)，提高其周年均衡供應(yīng)水平己成為當(dāng)前蘿卜栽培的發(fā)展方向，并為當(dāng)前我國(guó)的農(nóng)業(yè)種植結(jié)構(gòu)調(diào)整、加快九億農(nóng)民盡快脫貧致富提供了新的思路。而實(shí)現(xiàn)蘿卜周年供應(yīng)的主要環(huán)節(jié)在于蘿卜春、夏品種的選育。
[0004]春蘿卜栽培成功最重要的特征是前期低溫條件下耐抽薹，后期高溫條件下肉質(zhì)根可以迅速膨大。耐抽薹性狀只有在春季低溫條件下才能篩選，秋天栽培無(wú)法滿(mǎn)足其通過(guò)春化的溫度條件。如果按照常規(guī)方法在春天進(jìn)行播種篩選，篩選出的單株收獲后已是5月底6月初，此時(shí)已經(jīng)不適合繼續(xù)在田間進(jìn)行留種繁殖，即使在冰箱或冷庫(kù)內(nèi)貯藏，也要經(jīng)過(guò)夏、秋兩季，因?yàn)橘A藏時(shí)間太長(zhǎng)，等秋末栽植到冬暖棚中留種生長(zhǎng)點(diǎn)容易腐爛，或生長(zhǎng)點(diǎn)雖能發(fā)芽，但大多不能堅(jiān)持到種子成熟就已經(jīng)死亡，容易造成很多材料無(wú)法收獲種子，不但使育種周期延長(zhǎng)，每年重復(fù)同樣的工作，更容易導(dǎo)致材料丟失。另一方面貯藏在冰箱中占空間太大，浪費(fèi)電，只能適合個(gè)別珍貴品種，許多育種單位也不一定有大型冷庫(kù)進(jìn)行貯藏。人工春化處理進(jìn)行耐抽薹鑒定雖然不受季節(jié)的限制，但由于是進(jìn)行種子春化處理，在肉質(zhì)根膨大前就已經(jīng)抽薹開(kāi)花，無(wú)法 同時(shí)進(jìn)行肉質(zhì)根性狀的選擇，或選擇的結(jié)果不準(zhǔn)確。因此，目前耐抽薹蘿卜新品種的選育過(guò)程繁瑣，選育周期太長(zhǎng)，并且容易丟失珍貴的材料，給育種工作者造成重大損失。如何改進(jìn)育種方法，加快春蘿卜選育進(jìn)程是春蘿卜育種中的一大難題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的是建立一套加速耐抽薹蘿卜自交系選育的方法，解決春蘿卜選育過(guò)程中自交系繁種難、易丟失育種材料、選育周期長(zhǎng)的問(wèn)題，可以大大加快春蘿卜的育種速度。
[0006]本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
[0007]—種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，包括以下步驟:
[0008](I)第一年的11月15日左右(11月10日~11月20日)，將蘿卜種子于25°C催芽16~24小時(shí)，發(fā)芽后于2~4°C條件下進(jìn)行低溫春化處理15~20天；
[0009](2)上述春化好的種子于12月I日左右(11月28日~12月3日)播于營(yíng)養(yǎng)缽中，放于日光溫室或人工控溫培養(yǎng)室中進(jìn)行培養(yǎng)，保證溫室白天溫度在15~25°C,晚上溫度在5°C以上(實(shí)踐中，可在日光溫室內(nèi)再加蓋一層塑料薄膜進(jìn)行提溫)；
[0010](3)上述培養(yǎng)的幼苗長(zhǎng)至12月20日左右(12月18日~12月22日)，將培養(yǎng)好的幼苗移植于溫室的種B圭內(nèi)；
[0011](4)來(lái)年的I月中旬(I月10日~I月20日)，進(jìn)行抽薹性狀篩選，拔除已經(jīng)抽薹單株；
[0012](5) I月25日左右(I月24日~I月26日)，對(duì)留下的耐抽薹單株進(jìn)行自交授粉；
[0013](6)2月25日左右(2月23日~2月28日)，取各單株的部分種莢，剝?nèi)∨叻庞谂囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)得到幼苗；余下的種莢繼續(xù)授粉留種；
[0014](7)3月底左右(3月27日~4月2日)，步驟(6)培養(yǎng)的幼苗，當(dāng)2片真葉長(zhǎng)出后，移植到大田栽培，定植后覆膜；
[0015](8)5月中下旬(5月15日~5月25日)，將所有自交授粉的單株的種子收獲；
[0016](9) 5月底6月初(5月28日~6月3日)，統(tǒng)計(jì)大田移植蘿卜的抽薹率及肉質(zhì)根的商品性狀，選取抽薹率在10%以下，肉質(zhì)根65天內(nèi)可以膨大達(dá)到收獲的標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)量在3500kg以上(指畝產(chǎn)量)的株系，即為初步篩選出的低代耐抽薹蘿卜自交系，可以繼續(xù)進(jìn)行下一輪的篩選，以得到品質(zhì)性狀更為穩(wěn)定的高代優(yōu)良的品系。
[0017]所述步驟(6) 中，“取各單株的部分種莢，剝?nèi)∨叻庞谂囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)”的具體方式如下:
[0018]a.摘取授粉后20~30天的種莢，注意保持種莢的完整，利于滅菌；
[0019]b.種莢先用75%(體積百分?jǐn)?shù))酒精消毒30秒，然后用2%的次氯酸鈉溶液(質(zhì)量百分?jǐn)?shù))消毒15分鐘，無(wú)菌水清洗3次，每次2~3分鐘；
[0020]c.用解剖刀縱向輕輕劃開(kāi)種莢，注意不要?jiǎng)澠品N皮而傷到胚，用解剖針輕輕挑出胚，放于專(zhuān)用胚培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，整個(gè)剝?nèi)∨叩倪^(guò)程在無(wú)菌條件下進(jìn)行；
[0021]所述專(zhuān)用胚培養(yǎng)基的組成如下:
[0022]①大量元素:硝酸鉀315mg/L，硝酸鈣400mg/L，氯化鉀84mg/L，磷酸二氫鉀120mg/L，七水硫酸鎂252mg/L ；
[0023]②維生素:維生素B10.lmg/L,維生素B60.2mg/L,煙酸0.2mg/L ；
[0024]③蔗糖30g/L ；
[0025]④瓊脂7.0g/L ；
[0026]⑤余量為水，pH值5.8 ;
[0027]d.胚培養(yǎng)后8~12天，胚發(fā)育為成熟種子，此時(shí)種皮開(kāi)始變色，此時(shí)應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)入發(fā)
芽培養(yǎng)基中發(fā)芽；
[0028]所述發(fā)芽培養(yǎng)基的組成如下:
[0029]①大量元素:硝酸鉀126mg/L,硝酸韓334mg/L,氯化鉀55mg/L,磷酸二氫鉀60mg/L，七水硫酸鎂126mg/L ；
[0030]②蔗糖20g/L ；
[0031]③瓊脂7.0g/L;
[0032]④余量為水，pH值5.8 ;
[0033]e.種子發(fā)芽后，將發(fā)芽的種子播于育苗缽中，在人工控溫補(bǔ)光條件下培養(yǎng)。
[0034]本發(fā)明的耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，具有以下有益效果:[0035]1.傳統(tǒng)的春蘿卜育種材料的選育2年才能完成I個(gè)選育周期，本發(fā)明的方法可以使春蘿卜自交系的商品性狀選擇與留種同步進(jìn)行，I年內(nèi)即可完成，耐抽薹蘿卜自交系的選育速度比傳統(tǒng)選育方法加快了一倍。[0036]2.人工春化和田間自然春化2種方法連續(xù)進(jìn)行耐抽薹性狀的選擇，結(jié)合了兩種方法的優(yōu)點(diǎn)，即避免了田間篩選時(shí)異常天氣對(duì)抽薹性狀鑒定結(jié)果的影響，又解決了人工春化鑒定無(wú)法進(jìn)行肉質(zhì)根性狀選擇的問(wèn)題，選育出的自交系耐抽薹性狀更加穩(wěn)定、可靠，肉質(zhì)根的商品性狀更加優(yōu)良。[0037]3.經(jīng)過(guò)耐抽薹性狀和肉質(zhì)根商品性狀選擇后，留作種株的耐抽薹株系不用經(jīng)過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的跨季低溫貯藏直接留種，解決了原來(lái)耐抽薹材料經(jīng)過(guò)夏、秋貯藏后易腐爛，從而導(dǎo)致資源丟失的問(wèn)題。[0038]4.建立了蘿卜的胚培養(yǎng)體系，使其可以越過(guò)蘿卜種子正常的發(fā)育過(guò)程，促使其提前發(fā)育成幼苗，不但為縮短耐抽薹蘿卜育種進(jìn)程提供了技術(shù)支持，也可為建立一種新的蘿卜再生體系提供更加易誘導(dǎo)分化的材料。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】[0039]圖1:剛接種的離體胚。[0040]圖2:離體胚成熟后種皮變色。[0041]圖3:胚發(fā)芽圖片。[0042]圖4:幼苗移植到花盆生長(zhǎng)的圖片。[0043]圖5:溫室生長(zhǎng)圖片。
【具體實(shí)施方式】[0044]下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明。[0045]實(shí)施例1耐抽薹蘿卜自交系的選育[0046]步驟如下:[0047](1)在11月15日，平皿中墊上濾紙，加水使其濕潤(rùn)，將蘿卜種子放在上面，在25°C催芽16~24小時(shí)，催芽前的5小時(shí)吸水量較大，注意使濾紙始終處于濕潤(rùn)狀態(tài)。催芽完成后，有90%左右的種子發(fā)芽即可于2~4°C下進(jìn)行春化處理15~20天，為防止水分蒸發(fā)過(guò)快，用封口膜封口。[0048](2) 12月1日前后春化完畢，將蘿卜芽播于育苗缽中，放于日光溫室或人工控溫培養(yǎng)室內(nèi)集中管理。保證日光溫室白天溫度在15~25°C，晚上溫度在5°C以上元旦前后氣溫較低，為提高溫度，加快其生長(zhǎng)，再加扣一層塑料薄膜進(jìn)行提溫。[0049](3) 12月20日左右幼苗移植于溫室的種畦內(nèi)。種畦寬60cm，走道寬30cm，高10cm。雙壟種植，株距10cm。[0050](4)1月中旬前后進(jìn)行抽薹性狀篩選，拔除早抽薹株及雜株。[0051](5)篩選后余下的單株約I月25日前后開(kāi)花，為克服自交不親和性，各單株進(jìn)行剝蕾自交授粉。[0052](6)2月25日左右取各單株授粉后生長(zhǎng)20~30天的種莢，此時(shí)胚發(fā)育時(shí)期為馬蹄形胚時(shí)期。每個(gè)單株為一個(gè)株系，剝?nèi)∨叻庞谔}卜胚培養(yǎng)專(zhuān)用培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)(見(jiàn)圖I)。種株繼續(xù)自交授粉令其結(jié)莢留種。
[0053](7)種皮變色后顯示胚成熟(見(jiàn)圖2)，將成熟胚轉(zhuǎn)移至發(fā)芽專(zhuān)用培養(yǎng)基促其發(fā)芽。
[0054](8)種子發(fā)芽后(見(jiàn)圖3)，將發(fā)芽種子播于營(yíng)養(yǎng)土中培育幼苗。
[0055](9)3月底左右將各株系的幼苗移植到大田栽培(此時(shí)約2~3片真葉，見(jiàn)圖4)。平畦栽培，畦寬1.2m，種3行，株距25cm左右。為保溫保濕，定值后覆膜。栽培管理同春蘿
卜生產(chǎn)。
[0056](10) 5月中下旬溫室內(nèi)種株的種子成熟，將所有自交單株的種子分別收獲，每個(gè)單株為一個(gè)株系，編號(hào)裝袋。
[0057](11)4月下旬到5月上旬(具體時(shí)間根據(jù)當(dāng)年的氣溫決定)調(diào)查大田種植蘿卜現(xiàn)蕾時(shí)間。
[0058](12)5月底6月初大田中蘿卜肉質(zhì)根膨大成熟，調(diào)查抽薹率(抽薹的標(biāo)準(zhǔn)為薹高大于5cm)及肉質(zhì)根的單株重、根葉重、皮色、畝產(chǎn)量等性狀。
[0059](13)選取耐抽薹(抽薹率低于30%)，肉質(zhì)根膨大快(生長(zhǎng)期65天內(nèi))，產(chǎn)量高(畝產(chǎn)量高于3500kg)，品質(zhì)優(yōu)的株系進(jìn)行下一輪的篩選。5月I日前現(xiàn)蕾、抽薹率高于10%以上，產(chǎn)量低于3500kg，進(jìn)行淘汰。表1中09-024、09-065、09-094為按照上述標(biāo)準(zhǔn)篩選出的耐抽薹自交系。
[0060]表12012年春季蘿卜栽培性狀調(diào)查表
【權(quán)利要求】
1.一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)第一年的11月10日~11月20日，將蘿卜種子于25°C催芽16~24小時(shí),發(fā)芽后于2~4°C條件下進(jìn)行低溫春化處理15~20天； (2)上述春化好的種子于11月28日~12月3日播于營(yíng)養(yǎng)缽中，放于溫室中進(jìn)行培養(yǎng)，保證溫室白天溫度在15~25°C，晚上溫度在5°C以上； (3)上述培養(yǎng)的幼苗長(zhǎng)至12月18日~12月22日，將培養(yǎng)好的幼苗移植于溫室的種畦內(nèi)； (4)來(lái)年的I月10日~I月20日，進(jìn)行抽薹性狀篩選，拔除已經(jīng)抽薹單株； (5)1月24日~I月26日，對(duì)留下的耐抽薹單株進(jìn)行自交授粉； (6)2月23日~2月28日，取各單株的部分種莢,剝?nèi)∨叻庞谂囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)得到幼苗；余下的種莢繼續(xù)授粉留種； (7)3月27日~4月2日，步驟(6)培養(yǎng)的幼苗，當(dāng)2片真葉長(zhǎng)出后，移植到大田栽培，定植后覆I]吳； (8)5月15日~5月25日，將所有自交授粉的單株的種子收獲； (9)5月28日~6月3日，統(tǒng)計(jì)大田移植蘿卜的抽薹率及肉質(zhì)根的商品性狀，選取抽薹率在10%以下，肉質(zhì)根65天內(nèi)可以膨大達(dá)到收獲的標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)量在3500kg以上的株系，即為初步選出的低代耐抽薹蘿卜自交系；或者:進(jìn)入下一輪繼續(xù)篩選，直到耐抽薹性狀和肉質(zhì)根性狀穩(wěn)定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，其特征在于:所述步驟(6)中，“取各單株的部分種莢，剝?nèi)∨叻庞谂囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)”的具體方式如下: a.摘取授粉后20~30天的種莢，注意保持種莢的完整，利于滅菌； b.種莢先用75%酒精消毒30秒，然后用2%的次氯酸鈉溶液消毒15分鐘，無(wú)菌水清洗3次，每次2~3分鐘； c.用解剖刀縱向輕輕劃開(kāi)種莢，注意不要?jiǎng)澠品N皮而傷到胚，用解剖針輕輕挑出胚，放于專(zhuān)用胚培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，整個(gè)剝?nèi)∨叩倪^(guò)程在無(wú)菌條件下進(jìn)行； d.胚培養(yǎng)后8~12天，胚發(fā)育為成熟種子，此時(shí)種皮開(kāi)始變色，此時(shí)應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)入發(fā)芽培養(yǎng)基中發(fā)芽； e.種子發(fā)芽后，將發(fā)芽的種子播于育苗缽中，在人工控溫補(bǔ)光條件下培養(yǎng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，其特征在于:所述專(zhuān)用胚培養(yǎng)基的組成如下: ①大量元素:硝酸鉀315mg/L,硝酸I11HOOmgZL,氯化鉀84mg/L,磷酸二氫鉀120mg/L,七水硫酸鎂252mg/L ； ②維生素:維生素B10.lmg/L，維生素B60.2mg/L，煙酸0.2mg/L ； ③蔗糖30g/L； ④瓊脂7.0g/L ； ⑤余量為水，pH值5.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種耐抽薹蘿卜自交系的選育方法，其特征在于:所述發(fā)芽培養(yǎng)基的組成如下: ①大量元素:硝酸鉀126mg/L,硝酸韓334mg/L,氯化鉀55mg/L,磷酸二氫鉀60mg/L,七水硫酸鎂126mg/L ； ②蔗糖20g/L； ③瓊脂7.0g/L ； ④余量為水，pH值5.8。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103609433SQ201310534522
【公開(kāi)日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月1日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月1日
【發(fā)明者】王淑芬, 徐文玲, 劉賢嫻, 付衛(wèi)民, 趙智中, 李巧云, 張志剛, 劉栓桃 申請(qǐng)人:山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所