一種櫚木的快速繁殖方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種櫚木的快速繁殖方法，包括無(wú)菌芽的獲得，叢生芽的誘導(dǎo)和四倍體的誘導(dǎo)，叢生芽的增殖，生根誘導(dǎo)，煉苗移栽。本發(fā)明方法建立了櫚木的快速微繁體系，可以在短期內(nèi)培育大量的櫚木幼苗，且莖葉粗大，并用于大田生產(chǎn)。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種櫚木的快速繁殖方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及櫚木組織培養(yǎng)的快繁方法，屬于植物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]櫚木，(0.mollis Dumm ；Fodorovia henryi (Prain) Yakov.)豆科，又名:花梨木，青皮樹(shù)、青豆風(fēng)柴、青龍捆地、相思樹(shù)等，生于海拔100-1300m的山坡、溪谷兩旁雜木林內(nèi)，分布于陜西、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、四川、貴州、云南等地。是一種重要的藥用植物，根皮莖葉均可藥用，可用于祛風(fēng)除濕；活血破瘀；解毒消腫。主要功能主治:風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；腰肌勞損；產(chǎn)后瘀血腹痛；赤白漏下；跌打損傷；骨折；感冒；毒蛇咬傷；無(wú)名腫毒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種鉤吻的組培微繁殖方法，由該方法所制備得到的櫚木幼苗莖干粗壯，成活率高，可控性好，可以規(guī)模化的進(jìn)行生產(chǎn)。
[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是通過(guò)以下方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:
將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4_5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT 0.3mg/L+IAA 0.2mg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)，所得的櫚木叢生芽接種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA 0.2mg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代，所得的櫚木叢生芽接種在WPM+NAA0.lmg/L+2mg/LIBA+40mg/LB9培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，組培幼苗長(zhǎng)約5cm時(shí)，首先在培養(yǎng)室內(nèi)，掀開(kāi)封口膜，敞口放置一周，然后 移栽入滅菌過(guò)的附加少量草炭的疏松肥沃土中，裝盆，晝夜光照，溫度25°C,30天后移栽入室外。
[0005]采用本發(fā)明培養(yǎng)出來(lái)的試管苗莖干粗壯，根系發(fā)達(dá)，成活率達(dá)95%，周期短，操作可控，可進(jìn)行工業(yè)擴(kuò)大化生產(chǎn)。
[0006]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
【具體實(shí)施方式】
[0007]實(shí)施例1
將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4_5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT0.2mg/L+IAA0.lmg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)，所得的櫚木叢生芽接種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.lmg/L+NAA0.lmg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代，所得的櫚木叢生芽接種在WPM+NAA0.lmg/L+211^/1184+4011^/1^9培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，組培幼苗長(zhǎng)約5cm時(shí)進(jìn)行室內(nèi)馴化煉苗，室外移栽，成活率達(dá)87%。
[0008]實(shí)施例2
將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4_5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT0.4mg/L+IAA0.2mg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)，所得的櫚木叢生芽接種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA0.3mg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代，所得的櫚木叢生芽接種在WPM+NAA0.lmg/L+211^/1184+4011^/1^9培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，組培幼苗長(zhǎng)約5cm時(shí)進(jìn)行室內(nèi)馴化煉苗，室外移栽，成活率達(dá)90%。
[0009]實(shí)施例3
將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4_5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT 0.3mg/L+IAA0.lmg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)，所得的櫚木叢生芽接種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.lmg/L+NAA0.3mg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代，所得的櫚木叢生芽接種在WPM+NAA0.lmg/L+211^/1184+4011^/1^9培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，組培幼苗長(zhǎng)約5cm時(shí)進(jìn)行室內(nèi)馴化煉苗，室外移栽，成活率達(dá)92%。
[0010]實(shí)施例4
將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4_5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分，接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT0.4mg/L+IAA0.lmg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)，所得的櫚木叢生芽接 種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.2mg/L+NAA 0.lmg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代，所得的櫚木叢生芽接種在WPM+NAA0.lmg/L+211^/1184+4011^/1^9培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo)，組培幼苗長(zhǎng)約5cm時(shí)進(jìn)行室內(nèi)馴化煉苗，室外移栽，成活率達(dá)93%。
【權(quán)利要求】
1.一種櫚木的快速繁殖方法，包括無(wú)菌芽的獲得，叢生芽的誘導(dǎo)和四倍體的誘導(dǎo)，叢生芽的增殖，生根誘導(dǎo)，煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)按照常規(guī)植物組織培養(yǎng)的消毒方法對(duì)櫚木帶芽莖段進(jìn)行消毒處理； (2)將步驟(I)所獲得的櫚木帶芽莖段接種到叢芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基WPM+KT0.2-0.4mg/L+IAA 0.1-0.2mg/L+秋水仙素中進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)； (3)將步驟(2)所得的櫚木叢生芽接種到WPM+GA33mg/L+TDZ0.1-0.2mg/L+NAA0.1-0.3mg/L+lg/L活性炭培養(yǎng)基中進(jìn)行叢生芽增殖培養(yǎng)，繼代培養(yǎng)3代； (4)將步驟(3)所得的櫚木叢生芽接種在下述培養(yǎng)基中進(jìn)行生根誘導(dǎo):WPM+NAA0.lmg/L +2mg/LIBA+40mg/LB9； (5)將步驟(4)生根后大約5cm的櫚木試管苗進(jìn)行煉苗培養(yǎng)，進(jìn)而進(jìn)行大田種植。
2.按照權(quán)利要求1所述的一種櫚木的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(I)中所述無(wú)菌的櫚木帶芽莖段按下列消毒方法得到:將櫚木莖段用毛刷洗去表面污垢，用漂白粉侵泡三分鐘，流水沖洗lh，超凈工作臺(tái)上70%酒精處理30s，氯化汞消毒處理12min，無(wú)菌水沖洗4-5次，然后用無(wú)菌的濾紙吸去莖段表面的水分。
3.按照權(quán)利要求1所述的一種櫚木的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(3)中加入適量的GA3對(duì)不定芽的生長(zhǎng)具有一定的促進(jìn)作用，加入適量的活性炭既可以防止玻璃化現(xiàn)象，又可以防止褐化現(xiàn)象的發(fā)生。
4.按照權(quán)利要求1所述的一種櫚木的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(4)中櫚木生根誘導(dǎo)加入了適量的B9，可以使小苗葉色深綠，根發(fā)育粗壯。
5.按照權(quán)利要求1所述的一種櫚木的快速繁殖方法，其特征在于:步驟(5)中對(duì)櫚木進(jìn)行煉苗培養(yǎng)中，首先在培養(yǎng)室內(nèi)，掀開(kāi)封口膜，敞口放置一周，然后移栽入滅菌過(guò)的附加少量草炭的疏松肥沃土中，裝盆，晝夜光照，溫度25 °C，30天后移栽入室外。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103461126SQ201310423739
【公開(kāi)日】2013年12月25日 申請(qǐng)日期:2013年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月17日
【發(fā)明者】楊存 申請(qǐng)人:南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司