專利名稱：有益微生物無抗生物飼料及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵飼料領域，尤其涉及一種有益微生物無抗生物飼料及其制備方法。
背景技術：
現代化養(yǎng)殖業(yè)日益趨于規(guī)?；?、集約化，使用抗生素藥物成為保障畜牧業(yè)發(fā)展的關鍵環(huán)節(jié)。但是，在養(yǎng)殖業(yè)中由于不科學用藥、濫用藥物，導致在畜禽肉制品中藥物殘留超標，并誘發(fā)病原菌耐藥性的加劇，殘留的藥物通過食物鏈將影響消費者的健康；糞便中殘留的抗生素藥物會改變土壤固有微生物結構，破壞大自然生態(tài)平衡。近年來，隨著肉制品藥物殘留超標事件的頻繁曝光，畜牧業(yè)工作者開始考慮養(yǎng)殖安全、食品安全、生態(tài)安全的協(xié)調發(fā)展。顯然，有益微生物無抗生物飼料正符合發(fā)展健康畜牧養(yǎng)殖的需求。無抗生物飼料的生產是應用有益微生物在飼料合適環(huán)境中大量繁殖，降解飼料原料中抗營養(yǎng)因子，并將大分子營養(yǎng)物質降解為易消化的小分子物質，從而提高營養(yǎng)消化吸收率，同時拓寬飼料原料來源，緩解人畜爭糧的緊張局面。此外，有益微生物在代謝過程中，分泌的有機酸、維生素、脂多糖、活性小肽等可提高動物機體免疫抗病力，并提高生長速度。然而，目前無抗生物飼料生產還存在一些問題，如發(fā)酵關鍵工藝的優(yōu)化以及菌種的科學選擇復配。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題是提供一種配方安全合理、工藝科學簡單、成本低功效高的有益微生物 無抗生物飼料及其制備方法。為解決上述技術問題，本發(fā)明采用如下技術方案:有益微生物無抗生物飼料，主要由發(fā)酵棉籽柏、玉米粉、啤酒渣、預混料和復合菌液經發(fā)酵制成；復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液組成。上述有益微生物無抗生物飼料，主要由發(fā)酵棉籽柏7kg、玉米粉60kg、啤酒渣17kg、預混料4.0kg和復合菌液3 9kg經發(fā)酵制成；復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液按重量比I 3:1 3:1 3組成，嗜酸乳桿菌菌液活菌數彡1\10% ~1111、植物乳桿菌菌液活菌數彡6\10!^^/1111、釀酒酵母菌液活菌數彡 10X108CFU/ml。上述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，分別二級發(fā)酵培養(yǎng)制備嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液、釀酒酵母菌液和地衣芽孢桿菌菌液；然后，將地衣芽孢桿菌菌液與棉籽柏混合，進行好氧發(fā)酵；再將發(fā)酵棉籽柏、玉米粉、啤酒渣、預混料混合均勻，并加入由嗜酸乳桿菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液組成的復合菌液，混合均勻，恒溫發(fā)酵，即得。上述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，包括以下步驟:<1>有益微生物菌液的二級發(fā)酵制備嗜酸乳桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為2%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)24h，活菌數彡I X 109CFU/ml ；二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入IOOL無菌MRS培養(yǎng)基中，接種量為2%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基lmin，活菌數彡I X 109CFU/ml ；植物乳桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為3%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)36h，活菌數彡6X108CFU/ml ；二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌MRS培養(yǎng)基中，接種量為3%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基lmin，活菌數彡6X108CFU/ml ；釀酒酵母菌液的制備:一級菌液一將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌麥芽汁培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于30°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，轉速為200rpm，活菌數彡5X108CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌麥芽汁培養(yǎng)基中，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值彡35%，30°C恒溫好氧培養(yǎng)24h，活菌數彡10X108CFU/ml ；地衣芽孢桿菌菌液的制備:一級菌液一將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌DY培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于37°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22h，轉速為200rpm，活菌數彡2 X 109CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌DY培養(yǎng)基中，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值彡35%，37°C恒溫好氧培養(yǎng)22h，活菌數彡8X109CFU/ml ；〈2>發(fā)酵棉籽柏的制備將地衣芽孢桿菌菌液0.5 3.5kg、棉籽柏100kg、水IOOkg混合均勻，于35°C恒溫條件下好氧發(fā)酵48h，即得發(fā)酵棉籽柏；〈3>無抗生物飼料的制備將發(fā)酵棉籽柏 7kg、花生柏5kg、玉米粉60kg、啤酒渣17kg、糖蜜5kg、磷酸氫鈣0.4kg、碳酸|丐1kg、食鹽0.2kg、預混料4.0kg、賴氨酸0.4kg投入混合機混合均勻,然后將復合菌液3 9kg溶于80kg的35°C水中，噴入混合機中再次混合均勻，在35°C恒溫條件下發(fā)酵2天，即得；復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液按重量比I 3:1 3:1 3組成。MRS培養(yǎng)基組成為胰蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、檸檬酸二銨2.0g/L、乙酸鈉5g/L、磷酸氫二鉀2g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、硫酸錳0.05g/L、吐溫801ml/L、葡萄糖20g/L、碳酸鈣10g/L，pH值為6.3 ;麥芽汁培養(yǎng)基由12波美度全麥芽汁中加入1.5%蛋白胨配制而成；DY培養(yǎng)基組成為蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、葡萄糖20g/L、磷酸氫二鉀lg/L、七水硫酸鎂0.5g/L、氯化鈉3g/L，pH值為6.8。預混料中每千克含維生素AlOO萬IU，維生素D20萬IU，維生素E2000IU，維生素K200mg,維生素B1200mg，維生素B2500mg，維生素B6200mg，維生素B121.5mg,泛酸鈣lg，煙酰胺 1.5g,葉酸 IIOmg,氯化膽堿 40g, Mn3g, Zn3g, Cu5g, FelOg,碘 40mg, Se50mg。針對目前養(yǎng)殖業(yè)用藥不科學及其帶來的藥物殘留超標和無抗生物飼料生產方面的問題，發(fā)明人建立本發(fā)明有益微生物無抗生物飼料及其制備方法。與現有技術相比，本發(fā)明具有以下突出優(yōu)點:1、本發(fā)明的有益微生物菌液分開單獨培養(yǎng)，活性強，在飼料發(fā)酵過程迅速繁殖成優(yōu)勢菌群并產生大量乳酸、活性小肽、維生素等，能有效抑制飼料中雜菌、有害菌的生長，發(fā)酵效果穩(wěn)定，可提高飼料養(yǎng)分的消化率。2、本發(fā)明選擇復配的有益微生物對飼料原料的抗營養(yǎng)因子降低能力強，可有效消除其對動物腸道的致敏反應或毒害，提高非常規(guī)飼料原料的使用效果。3、本發(fā)明采用生料固體發(fā)酵，節(jié)約能源，并有效保護飼料原料中生物活性成分，易于實現流水線操作，生產成本低。4、本發(fā)明制備的無抗發(fā)酵飼料，不添加抗生素藥物，有益微生物含量高，可有效穩(wěn)定動物腸道微生態(tài)系統(tǒng)，提高動物健康水平；飼料在發(fā)酵過程中產生菌體蛋白、細胞壁，富含生物活性小肽、酵母細胞，可以提高動物機體免疫抗病力；而且酸醇味濃，呈味氨基酸含量高，粗纖維軟化效果好，具有很好誘食性，適口性好，增加動物的采食量，營養(yǎng)消化吸收率高，促進動物生長，應用于無抗畜禽產品的養(yǎng)殖中，可降低養(yǎng)殖成本，提高經濟效益，推動養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。
具體實施例方式
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實施例1<1>有益微生物菌液的二級發(fā)酵制備嗜酸乳桿菌菌液的制備:一級菌液一將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為2%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)24h，活菌數彡I X 109CFU/ml ；二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌MRS培養(yǎng)基中(裝于發(fā)酵灌)，接種量為2%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基lmin，活菌數彡I X 109CFU/ml ；植物乳桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為3%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)36h，活菌數彡6X108CFU/ml ；二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌MRS培養(yǎng)基中(裝于發(fā)酵灌)，接種量為3%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基lmin，活菌數彡6X108CFU/ml ；其中，MRS培養(yǎng)基組成為胰蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、檸檬酸二銨
2.0g/L、乙酸鈉5g/L、磷酸氫二鉀2g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、硫酸錳0.05g/L、吐溫801ml/L、葡萄糖20g/L、碳酸鈣10g/L，pH值為6.3。釀酒酵母菌液的制備:一級菌液一將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌麥芽汁培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于30°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，轉速為200rpm，活菌數彡5X108CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌麥芽汁培養(yǎng)基中(裝于發(fā)酵灌)，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值彡35%，30°C恒溫好氧培養(yǎng)24h，活菌數彡10X108CFU/ml ；其中，麥芽汁培養(yǎng)基由12波美度全麥芽汁中加入1.5%蛋白胨配制而成。地衣芽孢桿菌菌液的制備:一級菌液一將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌DY培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于37°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22h，轉速為200rpm,活菌數≥2 X 109CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌DY培養(yǎng)基中(裝于發(fā)酵灌)，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值≥35%，37°C恒溫好氧培養(yǎng)22h，活菌數≥8X109CFU/ml ；其中，DY培養(yǎng)基組成為蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、葡萄糖20g/L、磷酸氫二鉀Ig/L、七水硫酸鎂0.5g/L、氯化鈉3g/L，pH值為6.8。
〈2>發(fā)酵棉籽柏的制備將地衣芽孢桿菌菌液0.5kg、棉籽柏100kg、水IOOkg混合均勻，于35°C恒溫條件下好氧發(fā)酵48h，即得發(fā)酵棉籽柏，小肽含量為5% (以干基計算，采用三氯乙酸法檢測)；<3>無抗生物飼料的制備將發(fā)酵棉籽柏7kg (按含干物質88%計算，即干品約為6.16kg)、花生柏5kg、玉米粉60kg、啤酒洛17kg、糖蜜5kg、磷酸氫韓0.4kg、碳酸韓1kg、食鹽0.2kg、預混料4.0kg、賴氨酸0.4kg投入混合機混合均勻，然后將復合菌液(由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液按重量比1:1:1組成)3kg溶于80kg的35°C水中，噴入混合機中再次混合均勻，按每桶50kg包裝，桶蓋設有單向透氣閥，在35°C恒溫條件下發(fā)酵2天，即得無抗生物飼料，小肽含量為1.3% (以干基計算)，pH值為5.8。其中，預混料中每千克含維生素AlOO萬IU，維生素D20萬IU，維生素E2000IU，維生素K200mg，維生素B1200mg，維生素B2500mg，維生素B6200mg，維生素B121.5mg,泛酸鈣lg，煙酰胺 1.5g,葉酸 IIOmg,氯化膽堿 40g, Mn3g, Zn3g, Cu5g, FelOg,碘 40mg, Se50mg。飼養(yǎng)試驗:選用80頭瘦肉型豬，初體重45±0.85kg，分試驗組和對照組，試驗組飼喂實施例1制得的無抗生物飼料(飼料用量按干物質含量為88%折算)，對照組飼喂含抗生素藥物的常規(guī)日糧(未經發(fā)酵處理)，預飼期5天，正式試驗周期25天，結果見表I。表I實施例1無抗生物飼料飼養(yǎng)試驗結果
權利要求
1.一種有益微生物無抗生物飼料，其特征在于主要由發(fā)酵棉籽柏、玉米粉、啤酒渣、預混料和復合菌液經發(fā)酵制成；所述復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液組成。
2.根據權利要求1所述的有益微生物無抗生物飼料，其特征在于主要由發(fā)酵棉籽柏7kg、玉米粉60kg、啤酒洛17kg、預混料4.0kg和復合菌液3 9kg經發(fā)酵制成；所述復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液按重量比I 3:1 3:1 3組成，嗜酸乳桿菌菌液活菌數彡I X 109CFU/ml、植物乳桿菌菌液活菌數彡6X 108CFU/ml、釀酒酵母菌液活菌數彡10X108CFU/ml。
3.根據權利要求1所述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，其特征在于分別二級發(fā)酵培養(yǎng)制備嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液、釀酒酵母菌液和地衣芽孢桿菌菌液；然后，將地衣芽孢桿菌菌液與棉籽柏混合，進行好氧發(fā)酵；再將發(fā)酵棉籽柏、玉米粉、啤酒渣、預混料混合均勻，并加入由嗜酸乳桿菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液組成的復合菌液，混合均勻，恒溫發(fā)酵，即得。
4.根據權利要求3所述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，其特征在于包括以下步驟: <1>有益微生物菌液的二級發(fā)酵制備 嗜酸乳桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為2%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)24h，活菌數彡I X 109CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌MRS培養(yǎng)基中，接種量為2%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基lmin，活菌數彡I X 109CFU/ml ； 植物乳桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化菌種接種于500ml無菌MRS培養(yǎng)基中，按體積比計接種量為3%，在厭氧培養(yǎng)箱中37°C恒溫培養(yǎng)36h，活菌數彡6X108CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100`L無菌MRS培養(yǎng)基中，接種量為3%，37°C恒溫厭氧培養(yǎng)24h，每2h攪拌培養(yǎng)基Imin，活菌數彡6X108CFU/ml ； 釀酒酵母菌液的制備:一級菌液一將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌麥芽汁培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于30°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，轉速為200rpm，活菌數彡5X108CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌麥芽汁培養(yǎng)基中，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值彡35%，30°C恒溫好氧培養(yǎng)24h，活菌數彡10X108CFU/ml ； 地衣芽孢桿菌菌液的制備:一級菌液——將活化斜面菌種接種于裝有IOOml無菌DY培養(yǎng)基的錐形瓶中，錐形瓶容積為1000ml，放于37°C恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22h，轉速為200rpm，活菌數彡2X109CFU/ml ;二級菌液——將一級菌液按無菌操作接入100L無菌DY培養(yǎng)基中，接種量為1%，裝料系數0.65，攪拌轉速300rpm，調節(jié)通氣量維持培養(yǎng)液的溶氧值彡35%，37°C恒溫好氧培養(yǎng)22h，活菌數彡8X109CFU/ml ； <2>發(fā)酵棉籽柏的制備 將地衣芽孢桿菌菌液0.5 3.5kg、棉籽柏100kg、水IOOkg混合均勻，于35°C恒溫條件下好氧發(fā)酵48h，即得發(fā)酵棉籽柏； <3>無抗生物飼料的制備 將發(fā)酵棉籽柏7kg、花生柏5kg、玉米粉60kg、啤酒渣17kg、糖蜜5kg、磷酸氫鈣0.4kg、碳酸鈣1kg、食鹽0.2kg、預混料4.0kg、賴氨酸0.4kg投入混合機混合均勻，然后將復合菌液3 9kg溶于80kg的35°C水中，噴入混合機中再次混合均勻，在35°C恒溫條件下發(fā)酵2天，即得；所述復合菌液由嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液按重量比I 3:1 3:1 3組成。
5.根據權利要求4所述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，其特征在于:所述MRS培養(yǎng)基組成為胰蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、酵母膏5g/L、檸檬酸二銨2.0g/L、乙酸鈉5g/L、磷酸氫二鉀2g/L、七水硫酸鎂0.2g/L、硫酸錳0.05g/L、吐溫801ml/L、葡萄糖20g/L、碳酸鈣10g/L，pH值為6.3 ;所述麥芽汁培養(yǎng)基由12波美度全麥芽汁中加入1.5%蛋白胨配制而成；所述DY培養(yǎng)基組成為蛋白胨10g/L、牛肉膏5g/L、葡萄糖20g/L、磷酸氫二鉀lg/L、七水硫酸鎂0.5g/L、氯化鈉3g/L，pH值為6.8。
6.根據權利要求5所述有益微生物無抗生物飼料的制備方法，其特征在于:所述預混料中每千克含維生素AlOO萬IU，維生素D20萬IU，維生素E2000IU，維生素K200mg，維生素B1200mg,維生素B2500mg，維生素B6200mg，維生素B121.5mg,泛酸鈣lg，煙酰胺1.5g，葉酸IIOmg,氯化膽 堿 40g, Mn3g, Zn3g, Cu5g, FelOg,碘 40mg, Se50mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種有益微生物無抗生物飼料及其制備方法，分別二級發(fā)酵培養(yǎng)制備嗜酸乳桿菌菌液、植物乳桿菌菌液、釀酒酵母菌液和地衣芽孢桿菌菌液；然后，將地衣芽孢桿菌菌液與棉籽粕混合，進行好氧發(fā)酵；再將發(fā)酵棉籽粕、玉米粉、啤酒渣、預混料混合均勻，并加入由嗜酸乳桿菌液、植物乳桿菌菌液和釀酒酵母菌液組成的復合菌液，混合均勻，恒溫發(fā)酵，即得。本發(fā)明的無抗生物飼料，不添加抗生素藥物，有益微生物含量高，具有很好誘食性，適口性好，增加動物的采食量，營養(yǎng)消化吸收率高，促進動物生長，提高動物健康水平，改善動物機體免疫抗病力。應用本發(fā)明于無抗畜禽產品的養(yǎng)殖中，可降低養(yǎng)殖成本，提高經濟效益，推動養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。
文檔編號A23K1/14GK103098986SQ201310035859
公開日2013年5月15日 申請日期2013年1月30日 優(yōu)先權日2013年1月30日
發(fā)明者夏寧, 莫武威 申請人:廣西富來康飼料有限公司