對(duì)昆蟲害蟲具有抗性的植物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及使用干擾核糖核酸(RNA)分子對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_進(jìn)行的遺傳控制，特別是對(duì)植物害蟲侵?jǐn)_的預(yù)防和/或控制。本發(fā)明提供了(i)表達(dá)或能夠表達(dá)本發(fā)明的干擾RNA并且(ii)對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物。
【專利說(shuō)明】對(duì)昆蟲害蟲具有抗性的植物
發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明總體上涉及對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_的遺傳控制，特別是對(duì)植物的害蟲侵?jǐn)_的預(yù)防和/或控制。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及通過干擾核糖核酸(RNA)分子下調(diào)昆蟲害蟲物種中靶基因的表達(dá)。本發(fā)明還提供了(i)表達(dá)或能夠表達(dá)本發(fā)明的干擾RNA并且(ii)對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物。
_2] 發(fā)明背景
[0003]存在大量能夠侵染或侵?jǐn)_多種環(huán)境和宿主生物體的昆蟲害蟲物種。昆蟲害蟲包括以下昆蟲目中的多個(gè)物種:半翅目(Hemiptera)(蜷類昆蟲)、鞘翅目(Coleoptera)(甲蟲)、蚤目(Siphonaptera)(跳蚤)、網(wǎng)翅目(Dichyoptera)(蟑螂和蟲堂螂)、鱗翅目(Lepidoptera)(蛾和蝴蝶)、直翅目(Orthoptera)(例如蚱猛)以及雙翅目(Diptera)(蒼蠅)。害蟲侵?jǐn)_會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的損害。侵?jǐn)_植物物種的昆蟲害蟲在農(nóng)業(yè)上特別成問題，因?yàn)樗鼈儠?huì)對(duì)作物造成嚴(yán)重?fù)p害并且顯著降低植物產(chǎn)量。多種不同類型的植物都對(duì)害蟲侵?jǐn)_敏感，包括經(jīng)濟(jì)作物，如 水稻、棉花、大豆、馬鈴薯以及玉米。
[0004]傳統(tǒng)上，通過使用化學(xué)殺蟲劑來(lái)預(yù)防或控制昆蟲害蟲的侵?jǐn)_。然而，這些化學(xué)品不總是適用于處理作物，因?yàn)樗鼈兛赡軐?duì)其他物種有毒并且會(huì)造成顯著的環(huán)境損害。在最近幾十年中，研究者已經(jīng)開發(fā)出控制害蟲侵?jǐn)_的更環(huán)境友好的方法。舉例來(lái)說(shuō)，已經(jīng)使用了天然地表達(dá)對(duì)昆蟲害蟲有毒的蛋白質(zhì)的微生物，如蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)細(xì)菌?？茖W(xué)家還分離出編碼這些殺蟲蛋白的基因并使用它們來(lái)產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲具有抗性的轉(zhuǎn)基因作物，例如基因工程化為產(chǎn)生Cry家族蛋白質(zhì)的玉米和棉花植物。雖然細(xì)菌毒素在控制某些類型的害蟲方面一直非常成功，但是它們并非對(duì)所有的害蟲物種都有效。因此，研究者們已經(jīng)尋找到其他更有針對(duì)性的害蟲控制方法，特別是將RNA干擾或‘基因沉默’作為在遺傳水平上控制害蟲的手段的方法。
[0005]RNA干擾或‘RNAi’是用以在細(xì)胞或整個(gè)生物體環(huán)境下以序列特異性方式下調(diào)基因表達(dá)的ー種方法。RNAi是目前本領(lǐng)域中用于抑制或下調(diào)多種生物體(包括害蟲生物體，如真菌、線蟲以及昆蟲)中的基因表達(dá)的ー種成熟的技術(shù)。此外，之前的研究已經(jīng)顯示，下調(diào)昆蟲害蟲物種中的靶基因可以被用作控制害蟲侵?jǐn)_的ー種手段。
[0006]W02007/074405描述了抑制無(wú)脊椎動(dòng)物害蟲(包括科羅拉多馬鈴薯甲蟲)中靶基因的表達(dá)的方法。另外，W02009/091864描述了用于抑制昆蟲害蟲物種(包括來(lái)自草盲蝽(Lygus)屬的害蟲)中的靶基因的組合物和方法。
[0007]雖然使用RNAi來(lái)下調(diào)害蟲物種中的基因表達(dá)在本領(lǐng)域中是已知的，但是將這種技術(shù)用作害蟲控制措施的成功取決于選擇最適當(dāng)?shù)陌谢?，即功能缺失?dǎo)致必需生物過程嚴(yán)重破壞和/或生物體死亡的那些基因。因此，本發(fā)明針對(duì)將下調(diào)害蟲中的特定靶基因作為ー種手段來(lái)實(shí)現(xiàn)昆蟲害蟲侵?jǐn)_，特別是植物的昆蟲害蟲侵?jǐn)_的更有效預(yù)防和/或控制。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明人試圖使用遺傳方法來(lái)鑒定用于預(yù)防和/或控制昆蟲害蟲侵?jǐn)_的改良的手段。具體來(lái)說(shuō)，他們研究了使用RNAi按以下方式來(lái)下調(diào)基因:削弱昆蟲害蟲存活、生長(zhǎng)、進(jìn)展通過昆蟲生命周期的不同階段(例如從蛹變態(tài)成為成蟲)、定殖特定環(huán)境和/或侵?jǐn)_宿主生物體的能力并且由此限制由害蟲造成的損害。
[0009]因此，根據(jù)本發(fā)明的ー個(gè)方面，提供了ー種轉(zhuǎn)基因植物、或用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，它表達(dá)或能夠表達(dá)至少ー種干擾核糖核酸(RNA或雙鏈RNA)，該干擾核糖核酸在被一種昆蟲咅蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲咅蟲中的一種靶基因的表達(dá)的作用，其中該RNA包含至少ー個(gè)沉默元件，其中該沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的一個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈包含與該靶基因內(nèi)的ー個(gè)靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的ー個(gè)核苷酸序列或由其組成，并且其中該靶基因
[0010](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID 勵(lì)1、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310 到 313、401、3、`4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0011](ii)選自以下基因的組，這些基因具有由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、 133,218 到 221、146、125、134.222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)組成的一種核苷酸序列，或
[0012](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到
58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134.222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少 2 1、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99% —致，或
[0013](iv)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、 151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少 21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的ー種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、
17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、
142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、
147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任ー個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181,189,27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98%或99%—致，或
[0014](V)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、
180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、
139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、
15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到66、21、22、67 到 70、23、`24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0015](vi)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、
2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、
149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、
153,246到 249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258到261、160、161、262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173,278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少70%，優(yōu)選至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致。
[0016]在本發(fā)明的ー個(gè)具體方面，由本發(fā)明的植物表達(dá)的干擾RNA分子包含至少ー個(gè)雙鏈區(qū)，典型地是該干擾RNA的沉默元件，它包含通過與ー個(gè)反義RNA鏈互補(bǔ)堿基配對(duì)而退火的一個(gè)有義RNA鏈，其中dsRNA分子的有義鏈包含與位于該靶基因的RNA轉(zhuǎn)錄物內(nèi)的ー個(gè)核苷酸序列互補(bǔ)的ー個(gè)核苷酸序列。
[0017]在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及ー種轉(zhuǎn)基因植物、或用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，它表達(dá)或能夠表達(dá)一種干擾RNA分子，該干擾RNA分子包含至少ー個(gè)雙鏈區(qū)，典型地是該干擾RNA分子的沉默元件，它包含通過與ー個(gè)反義RNA鏈互補(bǔ)堿基配對(duì)而退火的一個(gè)有義RNA鏈，其中dsRNA分子的有義鏈包含一個(gè)至少17、18、19、
20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400,1500,2000或3000個(gè)連續(xù)核苷酸的序列，該序列與位于來(lái)自肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物的靶基因的RNA轉(zhuǎn)錄物內(nèi)的一個(gè)核苷酸序列至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98%、99% 或 100% 互補(bǔ)。
[0018]在一個(gè)實(shí)施例中，該革巴基因編碼ー種昆蟲wingsupA(肌鈣蛋白I)蛋白(例如CG7178Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID NOl和2表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N079具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該祀基因編碼ー種支持蛋白(upheld protein)(例如CG7107Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0121和130表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0330具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0123和132表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0332具有至少85%、90%、92%、94%、96%,98%,99%,100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌球蛋白重鏈(例如CG17927Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0122和131表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0331 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌球蛋白輕鏈細(xì)胞質(zhì)蛋白(例如CG3201Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0124和133表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0333 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼魚翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0125和134表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0334 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼拉鏈蛋白(例如CG15792Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0126和135表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0335 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌鈣蛋白C (例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CGl 2408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408或CG6514Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0127和136表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0336和 337 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。
[0019]根據(jù)另ー個(gè)實(shí)施例，本發(fā)明涉及ー種轉(zhuǎn)基因植物、或用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，它表達(dá)或能夠表達(dá)一種干擾RNA分子，該干擾RNA分子包含至少ー個(gè)雙鏈區(qū)，典型地是該干擾RNA分子的沉默元件，它包含通過與ー個(gè)反義RNA鏈互補(bǔ)堿基配對(duì)而退火的ー個(gè)有義RNA鏈，其中dsRNA分子的有義鏈包含一個(gè)至少17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000個(gè)連續(xù)核苷酸的序列，該序列與位于編碼ー種昆蟲核糖體蛋白的ー種靶基因的RNA轉(zhuǎn)錄物內(nèi)的一個(gè)核苷酸序列至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %、99%或100%互補(bǔ)。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S3A (例如CG2168Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID NOll和12表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N084具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N03和4表示。在ー個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N080具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%,99%,100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S3 (例如CG6779Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N07和8表示。在一個(gè)實(shí)施例中，由SEQ ID N09和10表示的靶基因編碼核糖體蛋白LlOAb(例如CG7283Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N083具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N013和14表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例 中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N085具有至少85%、90%、92%,94%,96%,98%,99%, 100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N05和6表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N081具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S27(例如CG10423Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N015和16表示。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N017和18表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQID N087 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100% 的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S13(例如CG13389Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N019和20表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ IDN088 具有至少 85 %、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %、100 % 的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L12(例如CG3195Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N021和22表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N089具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQID N0158和159表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0343具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L21 (例如CG12775Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ IDN0165U66以及167表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0347和348具有至少85 %、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %、100 %的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0156和157表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0342具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S28b(例如CG2998Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0160和161表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0344具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L13 (例如CG4651Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0154和155表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0341具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白LlO(例如CG17521Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由 SEQ ID N0163和164表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0345具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L5 (例如CG17489Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQID N0152和153表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0340具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S15Aa(例如CG2033Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQID N0150和151表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0339具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L19(例如CG2746Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)或核糖體蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼線粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞單位II蛋白(例如CG34069Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N025和26表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N091具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼ATP合酶-Y鏈(例如CG7610Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQID N0129和138表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0338具有至少85 %、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %、100 %的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼泛素-5E (例如CG32744Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼蛋白酶體P型亞單位(例如CG17331Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，該蛋白是CG13704Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物；和Rpnl2蛋白(例如CG4157Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。
[0020]根據(jù)本發(fā)明的另ー個(gè)方面，提供了一種分離的多核苷酸，該多核苷酸選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:
[0021](i)包含如由 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、 157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、
166,270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)所表示的一種核苷酸序列的至少21個(gè)，優(yōu)選至少22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的ー種多核苷酸，或
[0022](ii)由如 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到
297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)所表示的一種核苷酸序列的至少 21 個(gè)，優(yōu)選至少 22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000個(gè)連續(xù)核苷酸組成的ー種多核苷酸，或
[0023](iii)包含如在 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 `到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135,226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、
129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157,254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、
167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、
402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)中所表示的一種核苷酸序列的至少21個(gè)，優(yōu)選至少22、23或24、25、26、27、28、29、30、35、
40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的ー種多核苷酸，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩個(gè)序列時(shí)，所述多核苷酸與SEQ ID N01、174、180、
188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、
6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、
145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、
184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%一致，或
[0024](iv)包含如在 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、
166,270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、
186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)中所表示的一種核苷酸的一個(gè)至少21個(gè)，優(yōu)選至少22,23或24、25、26、27、28、29、30、35、40、
45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的ー種多核苷酸，并且其中所述片段或所述互補(bǔ)序列具有一種核苷酸序列，當(dāng)將所述片段與SEQ ID 勵(lì)1、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、
3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、
14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238到241、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、
22,67到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到
209,286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136,230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、
151,242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98% 或 99%—致，或
[0025](V)由如在 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到297、310 至Ij 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)中所表示的一種核苷酸的一個(gè)至少 21 個(gè)，優(yōu)選至少 22,23 或 24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的片段組成的ー種多核苷酸，并且其中所述片段或所述互補(bǔ)序列具有一種核苷酸序列，當(dāng)將所述片段與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、
14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238到241、150、151、242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，或
[0026](vi)編碼ー種氨 基酸序列的ー種多核苷酸，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、
141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、
130、177、183、206 到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、
138,238到 241、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、 186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少 70%，優(yōu)選至少 75%、80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，
[0027]并且
[0028]其中所述多核苷酸不長(zhǎng)于10000、9000、8000、7000、6000、5000、4000、3000、2000或1500個(gè)核苷酸。
[0029]由本發(fā)明的靶基因編碼的氨基酸序列是由SEQ ID N079、349、352、356、80、326、81、327、82、83、328、84、329、85、86、359、87 到 91、330、350、353、331、351、332 到 336、337、354,338 到 344、346、345、347、348、357、355、358、390 到 393 表示。
[0030]在本發(fā)明的ー個(gè)具體方面，該分離的多核苷酸是干擾RNA分子的一部分，典型地是沉默元件的一部分，它包含至少ー個(gè)雙鏈區(qū)，該雙鏈區(qū)包含通過與ー個(gè)反義RNA鏈互補(bǔ)堿基配對(duì)而退火的一個(gè)有義RNA鏈，其中dsRNA分子的有義鏈包含與位于該靶基因的RNA轉(zhuǎn)錄物內(nèi)的一個(gè)核苷酸序列互補(bǔ)的ー個(gè)核苷酸序列。更具體地說(shuō)，該分離的多核苷酸是在有義和反義方向克隆到ー種DNA構(gòu)建體中使得有義和反義多核苷酸轉(zhuǎn)錄后形成ー個(gè)dsRNA分子，該分子在被害蟲攝入后起到抑制或下調(diào)所述害蟲內(nèi)的靶基因的表達(dá)的作用。
[0031]在一個(gè)實(shí)施例中，本發(fā)明涉及一種分離的多核苷酸，該多核苷酸是在有義和反義方向克隆到ー種DNA構(gòu)建體中使得有義和反義多核苷酸轉(zhuǎn)錄后形成ー個(gè)dsRNA分子，該分子在被昆蟲攝入后起到抑制或下調(diào)肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物內(nèi)的靶基因的表達(dá)的作用。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼ー種昆蟲wings up A(肌鈣蛋白I)蛋白(例如CG7178Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)，所述祀基因是由SEQ ID NOl和2表不。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N079 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼ー種支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0121和130表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0330具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100% 的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)或原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0123和132表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0332具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌球蛋白重鏈(例如CG17927Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0122和131表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0331具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌球蛋白輕鏈細(xì)胞質(zhì)蛋白(例如CG3201Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0124和133表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0333具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼魚翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQID N0125和134表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0334具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼拉鏈蛋白(例如CG15792Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID NO 126和135表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0335具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼肌鈣蛋白 C (例如 CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408或CG6514Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0127和136表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N0336和337具有至少85%、90%、92%、94 %、96 %、98 %、99 %、100 % 的一致性。 [0032]根據(jù)其他實(shí)施例，本發(fā)明涉及一種分離的多核苷酸，該多核苷酸是在有義和反義方向克隆到ー種DNA構(gòu)建體中使得有義和反義多核苷酸轉(zhuǎn)錄后形成ー個(gè)dsRNA分子，該分子在被昆蟲攝入后起到抑制或下調(diào)ー種編碼昆蟲核糖體蛋白的靶基因的表達(dá)的作用。
[0033]在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S3A (例如CG2168Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID NOll和12表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N084 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N03和4表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQID N080 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S3 (例如CG6779Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N07和8表示。在一個(gè)實(shí)施例中，由SEQ ID N09和10表示的靶基因編碼核糖體蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N083具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S18 (例如CG8900Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N013和14表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N085具有至少85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在ー個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L4 (例如CG5502Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N05和6表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQ ID N081具有至少85 %、90 %、92 %、94 %、96 %、98 %、99 %、100 %的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S27(例如CG10423Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N015和16表示。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L6 (例如CG11522Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N017和18表示。在ー個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與SEQlD N087具有至少85%,90%,92%,94%,96%,98%,99%,100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S13(例如CG13389Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N019和20表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N088 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L12(例如CG3195Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N021和22表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N089 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0158和159表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0343 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L21(例如CG12775Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0165U66以及167表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0347 和 348 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0156和157表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0342 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0160和161表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0344 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L13(例如CG4651Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0154和155表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0341 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白LlO(例如CG17521Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0163和164表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0345 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100% 的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L5(例如CG17489Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N015 2和153表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0340 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白S15Aa(例如CG2033Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)，所述靶基因是由SEQ ID N0150和151表示。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，該昆蟲直向同源物與 SEQ ID N0339 具有至少 85%、90%、92%、94%、96%、98%、99%、100%的一致性。在一個(gè)實(shí)施例中，該靶基因編碼核糖體蛋白L19(例如CG2746 Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)或核糖體蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。
[0034]優(yōu)選地，本發(fā)明的方法可實(shí)際應(yīng)用于預(yù)防和/或控制昆蟲害蟲侵?jǐn)_，特別是控制以下作物植物的害蟲侵?jǐn)_:例如(但不限干)棉花、馬鈴薯、水稻、草莓、苜蓿、大豆、番茄、卡諾拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、茄子、胡椒以及煙草。此外，可以通過常規(guī)遺傳工程技術(shù)將本發(fā)明的干擾RNA弓丨入到有待保護(hù)的植物中。
[0035]因此，根據(jù)本發(fā)明的另ー個(gè)方面，提供了一種用于產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括:[0036](a)用包含編碼ー種干擾核糖核酸(RNA)的ー種多核苷酸序列的ー種DNA構(gòu)建體轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞，該干擾核糖核酸在被昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲害蟲中的ー種靶基因的表達(dá)的作用，其中該靶基因
[0037](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、
143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、
131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0038](ii)選自以下基因的組，這些基因具有由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、 43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到
58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155,250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164,266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)組成的一種核苷酸序列，或[0039](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到
58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134.222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中任一個(gè)的ー個(gè)至少 20、21、22、23、24 、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、2000或3000個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列，當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134.222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189.27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、
7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134.222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、
155.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、
164.266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或
[0040](iv)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、35、40、45、50、55、60、70、80、90、100、110、125、150、175、200、225、250、300、350、400、450、500、550、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500,2000 或 3000 個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的ー種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、
17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、
142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、
147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、
[0041]153,246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、 159,258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ ID N01-26、121-205、386-389、394、400或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或
[0042](V)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、
180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、
15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、
187、203、306到309 、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0043](vi)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、 142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、
149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、
153,246到 249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173,278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少70%，優(yōu)選至少75%、80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致；
[0044](b)從該轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞再生ー種植物；并且
[0045](c)在適合從該重組DNA構(gòu)建體表達(dá)該干擾RNA的條件下使該轉(zhuǎn)化的植物生長(zhǎng)，因此與ー種未轉(zhuǎn)化的植物相比，所述植物對(duì)所述害蟲具有抗性。
[0046]在另ー個(gè)方面，在此提供的是ー種用于預(yù)防和/或控制作物植物田地中的昆蟲害蟲侵?jǐn)_的方法，所述方法包括在所述植物中表達(dá)ー種有效量的一種干擾核糖核酸(RNA),該干擾核糖核酸在被昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲害蟲物種中的ー種靶基因的表達(dá)的作用，其中該RNA包含至少ー個(gè)沉默元件，其中該沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的一個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈包含與該靶基因內(nèi)的ー種靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的ー種核苷酸序列或由其組成，并且其中該靶基因
[0047](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、
8、39 到 42、9、10、 43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到
297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75% —致，或
[0048](ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185.234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185、234 至Ij 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或
[0049](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、
140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、
144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、
125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、
185.234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、
162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、
20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、
177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到
30,282到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到
42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、
121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致,或
[0050](iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、
180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、
15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、
24,71到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、298 到 301、145、122、144、17 8、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、
133,218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到 297、310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、
158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203,306到309、318到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%—致，或
[0051](V)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、
26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、
122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、
146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%—致。
[0052]在本發(fā)明的所有方面，在優(yōu)選實(shí)施例中，該靶基因
[0053](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、
189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到
209,286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136,230到233或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0054](ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132.214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、
127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID NOU
174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、
176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226到229、127、148、136、230到233中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與 SEQ ID 勵(lì)1、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、
178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、
134,222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或
[0055](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、
181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、
132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、 126、135、226 到 229、
127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到
30,282到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 至Ij 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230到233中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ ID 勵(lì)1、174、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、
179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或
[0056](iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、
182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、
126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互補(bǔ)、序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30,282到 285、294 到 297、310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286到289、298 到 301、145、122、144、178、131、17`9、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233所表示的序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或
[0057](V)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、
175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183,206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、
123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到229、127、148、136、230到233中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%，優(yōu)選至少90%、95%、98%或 99%—致。
[0058]在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，靶基因編碼ー種選自肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物的昆蟲蛋白，該復(fù)合物選自下組，該組包括肌鈣蛋白I (例如CG7178Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、肌球蛋白重鏈(例如CG17927Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、肌球蛋白輕鏈細(xì)胞質(zhì)蛋白(例如CG3201Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、魚翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、拉鏈蛋白(例如CG15792Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、肌鈣蛋白 C (例如 CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或CG6514Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)。
[0059]在本發(fā)明的所有方面，在優(yōu)選實(shí)施例中，該靶基因
[0060](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0061](ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、
160,161,262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因`與SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、
163、162、164、266到269、165、167、166、270到273中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到
46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到269、165、167、166、270到273或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0062](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、
205.55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到58、322到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到273中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到66、21、22、67 到 70、150、151、242到245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166,270到273或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或 [0063](iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35到38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、
150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、
159.258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或
[0064](V)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、
16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、
160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任ー個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85 %，優(yōu)選至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
[0065]在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，靶基因編碼ー種昆蟲核糖體蛋白，該昆蟲核糖體蛋白選自下組，該組包括核糖體蛋白S3A (例如CG2168Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S3 (例如CG6779Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LlOAb (例如CG7283Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S27 (例如CG10423Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S13 (例如CG13389Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)以及核糖體蛋白L12 (例如CG3195Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白し26(例如CG6846Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L21 (例如CG12775Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L13(例如CG4651Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LlO (例如CG17521Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L5 (例如CG17489Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S15Aa (例如CG2033Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L19 (例如CG2746Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L27 (例如CG4759Dm蛋白的ー種昆蟲直向同源物)。
[0066]在本發(fā)明的所有方面，在優(yōu)選實(shí)施例中，該靶基因
[0067](i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189,27到30,282到285,294到297,310到313,401或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列吋，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401或其到補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99% —致，或[0068](ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313、401或其互補(bǔ)序列中任ー個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294至丨』297、310到313、401中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID NOU
174、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或
[0069](iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、
181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401或其互補(bǔ)序列中任ー個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ IDN01、174、180、188、
2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或
[0070](iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、
180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、
175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401所表示的序列中的任ー個(gè)至少 75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或
[0071](V)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%，優(yōu)選至少90%、95%、98%或99%—致。
[0072]表格和附圖的簡(jiǎn)要說(shuō)明
[0073]表1由第一次篩選鑒定的豆莢草盲蜷(Lygushesperus)新穎革巴。
[0074]表1B在Lh594途徑中的豆莢草盲蝽新穎靶。[0075]表1C由第二輪篩選鑒定的豆莢草盲蝽新穎靶。
[0076]表2在豆莢草盲蝽中鑒定的靶基因的多核苷酸序列。
[0077]表3在豆莢草盲蝽中鑒定的靶基因的氨基酸序列。
[0078]表4相應(yīng)于豆莢草盲蝽靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有義鏈)和用于產(chǎn)生這些dsRNA的引物。
[0079]表5根據(jù)劑量反應(yīng)曲線(DRC)并且與基準(zhǔn)靶Lh423和Lhl05相比較進(jìn)行分級(jí)的豆
莢草盲蝽靶。
[0080]表6來(lái)自第二輪篩選的豆莢草盲蝽靶-根據(jù)DRC并且與基準(zhǔn)靶Lh423和Lh594相比較進(jìn)行分級(jí)。
[0081]表7有關(guān)攜帶豆莢草盲蝽發(fā)夾的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的測(cè)試的綜述。
[0082]表8用于qRT-PCR的革E基因和兩種看豕基因的擴(kuò)增子的序列。
[0083]表9在科羅拉多馬鈴薯甲蟲(CPB)中鑒定的靶基因的多核苷酸序列。
[0084]表10在CPB中鑒定的靶基因的氨基酸序列。
[0085]表11相應(yīng)于CPB靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有義鏈)和用于產(chǎn)生這些dsRNA的引物。
[0086]表12在褐色飛虱(BPH)中鑒定的靶基因的多核苷酸序列。
[0087]表13在BPH中鑒定的靶基因的氨基酸序列。
[0088]表14相應(yīng)于BPH靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有義鏈)和用于產(chǎn)生這些dsRNA的引物。
[0089]表15基于豌豆蚜基因組序列而用于擴(kuò)增蚜蟲cDNA的引物。
[0090]表16在蚜蟲中鑒定的靶基因的多核苷酸序列。
[0091]表17在蚜蟲中鑒定的靶基因的氨基酸序列。
[0092]表18相應(yīng)于蚜蟲靶基因的dsRNA(由等效DNA序列表示的有義鏈)和用于產(chǎn)生這些dsRNA的引物。
[0093]表19用于擴(kuò)增CPB Ld594cDNA的簡(jiǎn)并引物
[0094]表20用于擴(kuò)增BPH cDNA的簡(jiǎn)并引物
[0095]表21:來(lái)自該篩選的馬鈴薯葉甲(Leptinotarsa decemlineata)新穎革巴。
[0096]表22:褐飛風(fēng)(Nilaparvatalugens)的新穎鑒定的革巴。
[0097]表23:豌豆姆(Acyrthosiphonpisum)的新穎鑒定的革巴。
[0098]圖1:板Lh001_009的第二次確認(rèn)測(cè)定。暗條:在第3天到第6天的死亡率；亮條:在第6天到第8天的死亡率。使用“Lygxxx”篩選代碼和“Lhxxx”靶命名代碼將候選克隆命名。
[0099]圖2:板Lh010_020的第二次確認(rèn)測(cè)定。暗條:在第3天到第6天的死亡率；亮條:在第6天到第8天的死亡率。使用“Lygxxx”篩選代碼和“Lhxxx”靶命名代碼將候選克隆命名。
[0100]圖3:來(lái)自板LhOOl到Lh009的草盲蝽新穎靶的死亡率分析，以在10天的時(shí)間段內(nèi)的死亡率％表示。對(duì)照以虛線表示。陽(yáng)性對(duì)照:Lh423dsRNA(RpL19)。陰性對(duì)照:GFP dsRNA和僅飼料(對(duì)照)。
[0101]圖4:來(lái)自板LhOlO到Lh020的草盲蝽新穎靶的死亡率分析，以在10天的時(shí)間段內(nèi)的死亡率％表示。對(duì)照以虛線表示。陽(yáng)性對(duì)照:Lh423(RpL19)。陰性對(duì)照:GFP和僅飼料(對(duì)照)。
[0102]圖5含有豆莢草盲蝽hpRNA盒的植物表達(dá)載體的示意性圖示。RB:右邊界；LB:左邊界；P35S:花椰菜花葉病毒35S啟動(dòng)子；T35S:花椰菜花葉病毒35S終止子；TN0S:胭脂堿合成酶終止子；GFP:綠色熒光報(bào)告基因；NPT I1:新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶II基因的編碼序列；KmR:卡那霉素抗性基因；pBR322ori:pBR322復(fù)制起點(diǎn)；pBR322bom:pBR322動(dòng)員；pVSlr印:pVSl復(fù)制子；pVSlsta:pVSl穩(wěn)定元件。
[0103]圖6馬鈴薯-草盲蝽植物體內(nèi)(inplanta)測(cè)定設(shè)置。白色箭頭表示昆蟲損害。
[0104]圖7到11豆莢草盲蝽新穎靶-在從0.4到0.025 ii g/ ill范圍內(nèi)的純化的合成dsRNA濃度下的劑量反應(yīng)曲線(在該圖中，單位“Ug/yl”未示出)。使用GFPdsRNA和millQ水作為陰性對(duì)照。靶的dsRNA是使用如實(shí)例部分1.1中所描述的引物產(chǎn)生。
[0105]圖12在從0.05到0.001 ii g/ ill范圍內(nèi)的dsRNA濃度下的Lh594劑量反應(yīng)曲線。使用GFP dsRNA和millQ水作為陰性對(duì)照。
[0106]圖13A在不存在tRNA的情況下在豆莢草盲蝽生物測(cè)定中的dsRNA活性:Lh594(5u g/u I);陽(yáng)性對(duì)照:Lh423(5u g/u I);陰性對(duì)照=GFPdsRNA (5 u g/u I)和 mi IIQ水使用遞減濃度的dsRNA(從5 ii g到0.25 u g)的Lh594活性極限的鑒定。陰性對(duì)照:GFP dsRNA (5 u g/u I)和 mi IIQ 水。
[0107]圖14第二次篩選靶的板LhOlO到Lh020的第二次確認(rèn)測(cè)定。暗條:在第4天到第8天的死亡率；亮條:在第 4天到第6天的死亡率。使用“Lygxxx”篩選代碼和“Lhxxx”靶命名代碼將候選克隆命名。
[0108]圖15在固定的0.g/yl下測(cè)試的草盲蝽肌鈣蛋白途徑靶的測(cè)定結(jié)果。
[0109]圖16A-B來(lái)自肌鈣蛋白途徑的豆莢草盲蝽新穎靶-在從0.4到0.025y g/yl范圍內(nèi)的純化的合成dsRNA濃度下的劑量反應(yīng)曲線(在該圖中，単位“ U g/ul”始終未示出)。使用GFP dsRNA和millQ水作為陰性對(duì)照。
[0110]圖17A-D第二次篩選靶的豆莢草盲蝽新穎靶-在從0.5到0.05 ii g/ ill范圍內(nèi)的純化的合成dsRNA濃度下的劑量反應(yīng)曲線。使用GFP dsRNA和millQ水作為陰性對(duì)照。
[0111]圖18A-B⑶S轉(zhuǎn)基因事件的測(cè)試和選擇。在豆莢草盲蝽單盆測(cè)定中測(cè)試⑶S發(fā)夾轉(zhuǎn)基因系(P001)的八個(gè)獨(dú)立事件并且與WT小植株相比較。所有小植株都經(jīng)歷相同的處理。將一日齡的豆莢草盲蝽若蟲添加到每ー個(gè)盆中并且檢查在9天內(nèi)的存活率。
[0112]圖19Lh423轉(zhuǎn)基因事件的測(cè)試:在豆莢草盲蝽單盆測(cè)定中測(cè)試28個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)基因事件(P006系)。將Lh423轉(zhuǎn)基因小植株與WT小植株并且與⑶S轉(zhuǎn)基因事件(P001系)相比較。將單個(gè)一日齡的豆莢草盲蝽若蟲添加到每ー個(gè)盆中并且檢查在9天內(nèi)的存活率。
[0113]圖20Lh423轉(zhuǎn)基因事件的測(cè)試:示出了導(dǎo)致>60 %的存活率的6個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)基因事件(P006)。將Lh423轉(zhuǎn)基因小植株與WT小植株并且與⑶S轉(zhuǎn)基因系(P001)相比較。將單個(gè)一日齡的豆莢草盲蝽若蟲添加到每ー個(gè)盆中并且檢查在9天內(nèi)的存活率。
[0114]圖21Lh594轉(zhuǎn)基因事件的測(cè)試:在豆莢草盲蝽單盆測(cè)定中測(cè)試25個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)基因事件(P007)。將Lh594轉(zhuǎn)基因小植株與WT小植株并且與⑶S轉(zhuǎn)基因事件(P001)相比較。將單個(gè)一日齡的豆莢草盲蝽若蟲添加到每ー個(gè)盆中并且檢查在11天內(nèi)的存活率。
[0115]圖22Lh594轉(zhuǎn)基因事件的測(cè)試:示出了導(dǎo)致60%的存活率的6個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)基因事件(P007)。將Lh594轉(zhuǎn)基因小植株與WT小植株并且與⑶S轉(zhuǎn)基因系(POOl)相比較。將單個(gè)一日齡的豆莢草盲蝽若蟲添加到每ー個(gè)盆中并且檢查在11天內(nèi)的存活率。
[0116]圖23在飼喂含有GUS發(fā)夾或Lh423發(fā)夾的轉(zhuǎn)基因植物5天之后的昆蟲中的Lh423mRNA水平的相對(duì)值。用擴(kuò)增Lh423的引物來(lái)分析樣品。使用GeNorm，用2種看家基因Lh425和Lh427使數(shù)據(jù)歸ー化。
[0117]圖24用I ii g的dsRNA Ld594、Ld619以及Ld620處理的CPB幼蟲的存活率分析。陽(yáng)性對(duì)照包括基準(zhǔn)靶Ld513和Ld049的I y g的dsRNA。陰性對(duì)照包括millQ水和FP。
[0118]圖25相比于未處理的對(duì)照(UTC)，Ld594、Ld619以及Ld620dsRNA對(duì)CPB4齡幼蟲化蛹的作用。向蟲子飼喂分配在馬鈴薯葉盤中的I U g的dsRNA，然后飼喂未處理的馬鈴薯葉(A)持續(xù)4天，然后放在蛭石上。為了評(píng)估dsRNA的作用，從蛭石中挖出死昆蟲(因?yàn)長(zhǎng)d594dsRNA所誘導(dǎo)的強(qiáng)烈作用，不能從蛭石中同收到蛹，并且因此，沒有獲得此靶dsRNA的圖像)⑶。
[0119]圖26CPB Ld594、619以及620dsRNA對(duì)CPB成蟲的存活率和健康的作用。在第4、6、7、8、11以及13天進(jìn)行評(píng)估。對(duì)照MQ:millQ水。
[0120]圖27來(lái)自N1594途徑的dsRNA在褐色飛虱中的活性。在0.1 %的CHAPSO存在下測(cè)試 0.5 ii g/ ill 的 DsRNA。陽(yáng)性對(duì)照:N1537dsRNA (0.5u g/u I);陰性對(duì)照:GFPdsRNA(0.5u g/u I)和僅飼料。
[0121]圖28來(lái)自Ap594、Ap423、Ap537以及Ap560的dsRNA對(duì)豌豆蚜的活性。在5 y g/U I 的 tRNA 存在下測(cè)試 0.5 ii g/ ill 的 DsRNA。陰性對(duì)照:GFPdsRNA (0.5u g/u I) ?
[0122]圖29馬鈴薯葉甲幼蟲關(guān)于用 dsRNA處理的人工飼料的死亡率百分比.Ld583、Ld584、Ld586以及Ld588表示靶克隆。陽(yáng)性對(duì)照:Ld513 ;陰性對(duì)照=FP0
[0123]發(fā)明詳細(xì)說(shuō)明
[0124]本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，通過RNAi下調(diào)昆蟲害蟲物種中特定靶基因的表達(dá)可以用于有效地預(yù)防和/或控制所述昆蟲害蟲的侵?jǐn)_。使用RNAi下調(diào)昆蟲害蟲物種中靶基因的表達(dá)在此適用于產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲的侵?jǐn)_具有抗性的植物。
[0125]因此，在ー個(gè)第一方面，本發(fā)明提供了對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物。具體來(lái)說(shuō)，在此提供了表達(dá)或能夠表達(dá)至少ー種干擾核糖核酸(RNA)的轉(zhuǎn)基因植物，如在此其他地方所描述，該干擾核糖核酸在被昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述害蟲內(nèi)靶基因的表達(dá)的作用。該干擾RNA可以是如下文所披露的那些中的任ー個(gè)。優(yōu)選地，該干擾RNA包含至少ー個(gè)沉默元件或由其組成，并且所述沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的ー個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈(有義鏈)包含與靶基因內(nèi)的靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的核苷酸序列。下調(diào)害蟲靶基因可以用于破壞害蟲中的必需生物過程或功能，其中‘必需’是指以下事實(shí):該過程或功能是引發(fā)或維持害蟲侵?jǐn)_所必需的。
[0126]如在此所使用的，術(shù)語(yǔ)‘植物’可以包括植物的任何生殖或繁殖材料。提到植物還可以包括植物細(xì)胞、植物原生質(zhì)體、植物組織培養(yǎng)物、植物愈傷組織、植物叢以及在植物或植物的部分中完好的植物細(xì)胞(如胚、花粉、胚珠、種子、葉、花、枝、果實(shí)、核、穂、穗軸、外殼、莖、根、根尖等)。在此描述的任ー種轉(zhuǎn)基因植物的后代、變體以及突變體都在本發(fā)明的范圍內(nèi)。還包括由所述轉(zhuǎn)基因植物中的任ー種產(chǎn)生的種子。
[0127]如在此所使用的，術(shù)語(yǔ)“控制”害蟲侵?jǐn)_是指對(duì)害蟲產(chǎn)生的用來(lái)限制和/或減少害蟲生物體的數(shù)目和/或由害蟲引起的損害的任何作用。因此，優(yōu)選的靶基因是控制或調(diào)控昆蟲害蟲內(nèi)的ー種或多種必需生物功能的必需基因，這些生物功能為例如細(xì)胞分裂、生殖、能量代謝、消化、神經(jīng)功能等。通過RNAi技術(shù)下調(diào)這些必需基因可以導(dǎo)致昆蟲的死亡，或者以另外的方式顯著地延緩生長(zhǎng)和發(fā)育或者削弱害蟲在環(huán)境中定殖或侵?jǐn)_宿主生物體的能力。
[0128]諸位發(fā)明人現(xiàn)已鑒定出屬于草盲蝽屬、馬鈴薯葉甲屬、褐飛虱屬以及豌豆蚜屬的昆蟲害蟲物種的優(yōu)良靶基因，這些靶被設(shè)想單獨(dú)地或組合用作RNAi介導(dǎo)性控制農(nóng)藝學(xué)上重要作物的昆蟲侵?jǐn)_的ー種有效手段。這些新鑒定的靶基因的直向同源物可以用于其他昆蟲物種中以控制相應(yīng)的相關(guān)作物的害蟲侵?jǐn)_。
[0129]更具體來(lái)說(shuō)，諸位發(fā)明人在此描述了編碼肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物的蛋白質(zhì)的基因形成了供通過RNA抑制機(jī)構(gòu)進(jìn)行抑制的極佳靶基因。這些靶基因中的一種編碼昆蟲肌鈣蛋白I蛋白(wingsupA),它是果蠅CG7178蛋白的一種直向同源物。此蛋白質(zhì)涉及于肌肉收縮中并且屬于ー種生理途徑，該生理途徑并未針對(duì)通過RNA抑制進(jìn)行(昆蟲)害蟲控制而加以完全地探索。此外，因?yàn)檫@種蛋白質(zhì)復(fù)合物具有動(dòng)物特異性，并無(wú)已知的植物基因同源物或直向同源物，所以在植物中表達(dá)祀dsRNA時(shí)，降低了異型株(off-type plant)表型的風(fēng)險(xiǎn)。另外，在果蠅中，肌鈣蛋白I被描述為ー種單倍不足的基因，在雜合子狀態(tài)中呈現(xiàn)ー種突變體表型。這類基因?qū)RNA表達(dá)水平的降低特別敏感并且因此可以被視為理想的RNAi靶。
[0130]以下列出了這種肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物中其他感興趣的靶基因并且針對(duì)在豆莢草盲蝽和其他昆蟲害蟲物種中的RNAi控制進(jìn)行進(jìn)ー步研究:
[0131]
【權(quán)利要求】
1.一種轉(zhuǎn)基因植物、或用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，它表達(dá)或能夠表達(dá)至少一種干擾核糖核酸(RNA)，該干擾核糖核酸在被一種昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述害蟲內(nèi)的一種靶基因的表達(dá)的作用， 其中該RNA包含至少一個(gè)沉默元件，其中該沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的一個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈包含與該靶基因內(nèi)的一個(gè)靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的一個(gè)核苷酸序列或由其組成，并且 其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、`27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、`39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到`237、302 到 305、129、138、238到241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到`269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到`297、310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到`293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、`238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到`257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、
`278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、`387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或 (ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、`189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、`7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、`322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、`222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、.250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、.266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、.201,314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的一個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58,322 到.325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、143、.121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、.179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、.134、.222 到.225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 .237、.302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到.253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、.282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 .42、.9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 .325、.17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、121、.142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、.179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到.317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、.75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、.131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的一個(gè)至少21 個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、.3、.4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 .50、13、.14.51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、.21、22、.67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、.286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、.148、136、.230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、.151、.242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、.258 到.261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、.170、169、.274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 .309、.318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID NOl、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到.297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、.10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 .62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、.182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、.135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、.138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、.254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、.166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、.202、.187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致，或 (iv)為一種基因的一種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID NO 1、174、180、.188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、.139、5、.6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 .54、15、204、.16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、.24、71 到.74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、.145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到.221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、.128、149、.184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、.153、.246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、.262 到.265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、.172、173、.278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、.387、.388,389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的一種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、.3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、.12、47 到 50、13、14.51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、`67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、`286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到`217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、`230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到 257、158、159、258 到 261、`160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到`321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%—致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼一種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、`181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、`140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、`75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、`144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、`125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、`185,234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、`154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、`162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到`281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%—致。
2.如權(quán)利要求1所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該RNA的沉默元件包含與該靶基因內(nèi)的一個(gè)靶核苷酸序列互補(bǔ)或至少部分地互補(bǔ)的一個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的序列或由其組成。
3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該RNA包含至少兩個(gè)沉默元件，其中每一個(gè)沉默元件包含與一種祀基因內(nèi)的一個(gè)祀核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的一個(gè)核苷酸序列或由其組成。
4.如權(quán)利要求3所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中這些沉默元件各自包含與一個(gè)不同的靶核苷酸序列互補(bǔ)的一個(gè)不同的核苷酸序列或由其組成。
5.如權(quán)利要求4所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中這些不同的靶核苷酸序列來(lái)源于單一靶基因或不同的靶基因。
6.如權(quán)利要求5所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中這些不同的靶基因來(lái)源于相同的昆蟲害蟲物種或來(lái)源于不同的昆蟲害蟲物種。
7.如權(quán)利要求1到6中任一項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該昆蟲害蟲物種選自屬于以下目的昆蟲物種:鞘翅目、半翅目、鱗翅目、雙翅目、網(wǎng)翅目、直翅目以及蚤目。
8.如權(quán)利要求7所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該昆蟲害蟲物種選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:馬鈴薯葉甲屬(例如馬鈴薯葉甲(科羅拉多馬鈴薯甲蟲)、偽馬鈴薯葉甲(偽馬鈴薯甲蟲)或胡頹子葉茄葉甲(德克薩斯偽馬鈴薯甲蟲))；褐飛虱屬(例如褐飛虱(褐色飛虱))；草盲蝽屬(例如牧草盲蝽(無(wú)澤盲蝽)或豆莢草盲蝽(西方無(wú)澤盲蝽))；瘤蚜屬(例如桃蚜(綠桃蚜))；根螢葉甲屬(例如西方玉米根螢葉甲(西方玉米根蟲)、巴氏根螢葉甲(北方玉米根蟲)、黃瓜十一星葉甲食根亞種(南方玉米根蟲)、墨西哥玉米根螢葉甲(墨西哥玉米根蟲))。
9.如權(quán)利要求1到10中任一項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該靶基因編碼選自下組的一種昆蟲蛋白質(zhì)，該組包括(i)來(lái)自肌鈣蛋白/肌絲復(fù)合物的一種蛋白質(zhì)，該復(fù)合物選自下組，該組包括肌鈣蛋白I (例如CG7178Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、支持蛋白(例如CG7107Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、原肌球蛋白I蛋白(例如CG4898Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、原肌球蛋白2蛋白(例如CG4843Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、肌球蛋白重鏈(例如CG17927Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、肌球蛋白輕鏈細(xì)胞質(zhì)蛋白(例如CG3201Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、魚翅瓜蛋白(例如CG3595Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、拉鏈蛋白(例如CG15792Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、肌鈣蛋白C(例如CG2981、CG7930、CG9073、CG6514、CG12408、CG9073、CG7930、CG2981、CG12408 或 CG6514Dm 蛋白的一種昆蟲直向同源物)；(ii)選自下組的一種昆蟲核糖體蛋白，該組包括核糖體蛋白S3A(例如CG2168Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LPl (例如CG4087Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S3(例如CG6779Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LlOAb(例如CG7283Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S18(例如CG8900Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L4(例如CG5502Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S27(例如CG10423Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L6(例如CG11522Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S13(例如CG13389Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)以及核糖體蛋白L12(例如CG3195Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L26(例如CG6846Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L21 (例如CG12775Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S12(例如CG11271Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S28b (例如CG2998Dm蛋白的一種昆蟲直向同`源物)、核糖體蛋白L13(例如CG4651Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白LlO (例如CG17521Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L5(例如CG17489Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白S15Aa(例如CG2033Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L19(例如CG2746Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)、核糖體蛋白L27(例如CG4759Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)線粒體細(xì)胞色素c氧化酶亞單位II蛋白(例如CG34069Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)；(iv)ATP合酶-Y鏈(例如CG7610Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)；(v)泛素-5E(例如CG32744Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)；(vi)蛋白酶體P型亞單位(例如CG17331Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)；(vii)作為CG13704Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物的蛋白質(zhì)；以及(viii)Rpnl2蛋白(例如CG4157Dm蛋白的一種昆蟲直向同源物)。
10.如權(quán)利要求9所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中與暴露于一種靶向非必需基因的干擾RNA或一種不下調(diào)該害蟲物種內(nèi)的任何基因的干擾RNA的害蟲物種相比，該害蟲靶基因表達(dá)的下調(diào)引起該害蟲的生長(zhǎng)、發(fā)育、生殖或存活下降。
11.如權(quán)利要求1到10中任一項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該轉(zhuǎn)基因植物、由其得到的材料或植物細(xì)胞另外地包含一種異源基因。
12.如權(quán)利要求11所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該異源基因編碼對(duì)一種植物害蟲物種有毒的一種蛋白質(zhì)。
13.如權(quán)利要求12所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該蛋白質(zhì)選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:一種馬鈴薯塊莖特異蛋白、一種蘇云金芽孢桿菌殺蟲蛋白、一種致病桿菌殺蟲蛋白、一種光桿狀菌殺蟲蛋白、一種側(cè)孢芽孢桿菌殺蟲蛋白以及一種球形芽孢桿菌殺蟲蛋白。
14.如權(quán)利要求13所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中所述蘇云金芽孢桿菌殺蟲蛋白選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:CryU Cry3、TIC851、CryET170, Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元?dú)⑾x蛋白CryET80和CryEI76、二元?dú)⑾x蛋白TIC100和TIC101、殺蟲蛋白ET29或ET37與殺蟲蛋白TIC810或TIC812的組合、以及二元?dú)⑾x蛋白PS149B1。
15.如權(quán)利要求11所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該異源基因編碼一種賦予除草劑耐受性的蛋白質(zhì)。
16.如權(quán)利要求15所述的轉(zhuǎn)基因植物、用于轉(zhuǎn)基因植物的生殖或繁殖材料、或培養(yǎng)的轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞，其中該蛋白質(zhì)選自一種草甘膦不敏感型式的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSPS);能夠分解麥草畏的一種分解代謝酶，如麥草畏單加氧酶；或能夠使草銨膦分解代謝的一種草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶基因。
17.由如權(quán)利要求1到16中任一項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物產(chǎn)生的種子。
18.一種用于產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括: (a)用包含編碼一種干擾核糖核酸(RNA)的一種多核苷酸序列的一種DNA構(gòu)建體轉(zhuǎn)化植物細(xì)胞，該干擾核糖核酸在被一種昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲害蟲物種中的一種靶基因的表達(dá)的作用， 其中該RNA包含至少一個(gè)沉默元件，其中該沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的一個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈包含與該靶基因內(nèi)的一個(gè)靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的一個(gè)核苷酸序列或由其組成，并且 其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、.189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238到241、150、151、242 到 245、152、153、246 、到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162164、266 到，269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到，297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 ，46、141、，11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、，20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、，177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到，293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、，238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到，257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、，187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75% —致，或(ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、，189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、，7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 ，58、，322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 ，，78、，143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、，131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、，222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、，250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、，266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、，201,314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的一個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到，325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、，121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、，179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到，225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、，302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到，253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到，269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、`282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、`9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、`17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、`142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、`210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、`147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、`156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、`165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到`317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、`189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、`7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、`322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到`237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到`269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的一個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、`4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、`14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、`67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、`286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到`217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、`230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、`242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到`261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、`274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309、`318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到`297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致，或 (iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388,389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137,185,234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%—致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ IDN01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、.246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、.161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、.169、274 到 277、172、173、278 到281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、.306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%—致； (b)從該轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞再生ー種植物；并且 (c)在適合從該DNA構(gòu)建體表達(dá)該干擾RNA的條件下使該轉(zhuǎn)化的植物生長(zhǎng)，因此與ー種未轉(zhuǎn)化的植物相比，所述植物對(duì)所述害蟲具有抗性。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中該轉(zhuǎn)基因植物是如權(quán)利要求1到16中任ー項(xiàng)所定義的。
20.如權(quán)利要求18或權(quán)利要求19所述的方法，其中該方法另外地包括以下步驟-JM亥轉(zhuǎn)化的植物產(chǎn)生ー個(gè)或多個(gè)子代并且測(cè)試該后代對(duì)該昆蟲害蟲的抗性。
21.一種用于產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括: (i)使通過如權(quán)利要求18或權(quán)利要求19所述的方法獲得的ー種轉(zhuǎn)基因植物與ー種第二植物雜交， (ii)選擇對(duì)所述害蟲具有抗性的后代。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，另外包括以下步驟:使對(duì)ー種昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的后代植物與該第二植物回交，并且進(jìn)一步選擇對(duì)所述害蟲具有抗性的后代。
23.—種產(chǎn)生對(duì)昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括: (i)使通過如權(quán)利要求18或權(quán)利要求19所述的方法獲得的ー種轉(zhuǎn)基因植物與缺乏對(duì)昆蟲侵?jǐn)_的抗性的ー種第二植物有性雜交，從而產(chǎn)生多株后代植物； (ii)選擇對(duì)所述昆蟲害蟲物種具有抗性的一種第一后代植物； (iii)使所述第一后代植物自交，從而產(chǎn)生多株第二后代植物； (iv)使所述后代重復(fù)自交1、2、3、4、或5代以上；并且 (V)從這些后代植物的任ー個(gè)中選擇對(duì)ー種昆蟲害蟲物種的侵?jǐn)_具有抗性的一種植物。
24.如權(quán)利要求21到23中任一項(xiàng)所述的方法，其中該抗昆蟲的后代是通過檢測(cè)ー種編碼干擾核糖核酸(RNA)的多核苷酸序列或一種干擾RNA的存在而被鑒定的，其中該干擾RNA在被ー種昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲害蟲物種中的ー種靶基因的表達(dá)的作用，其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、.27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、.23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 .209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到237、302 到 305、129、138、238到241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、162、164、266 到`269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到`297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到`293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、`238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到`257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、`187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75% —致，或(ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、`189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、`7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、`322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、`222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、`250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、`266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、`201,314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到`325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、`121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、`179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到`225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237、`302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到`253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到`269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、.282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、.9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、.17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、.121、.142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到.317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、.131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、.4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 5013、.14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、.67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、.286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、.230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、.242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到.261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、..274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309、.318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到.297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、.187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致，或(iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQID N01、174、180、.188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、.6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、.204、.16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到.74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286 到 289、298 到 301、.145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到.221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、.184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、.246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到.265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、.278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、.388,389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、.4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、.14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、.22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209、.286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、.230 到 233、128、149、184、137,185,234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到.321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%—致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、.75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、.144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185,234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、.246 到 249、.154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 .265、163、.162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 .277、.172、.173、278 到.281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、.386、.387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%—致。
25.如權(quán)利要求21到24中任一項(xiàng)所述的方法，其中該第二植物另外地包含一種異源基因。
26.如權(quán)利要求2 5所述的方法，其中該異源基因編碼對(duì)ー種植物害蟲物種有毒的ー種蛋白質(zhì)。
27.如權(quán)利要求26所述的方法，其中該蛋白質(zhì)選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:ー種馬鈴薯塊莖特異蛋白、一種蘇云金芽孢桿菌殺蟲蛋白、一種致病桿菌殺蟲蛋白、ー種光桿狀菌殺蟲蛋白、一種側(cè)孢芽孢桿菌殺蟲蛋白以及ー種球形芽孢桿菌殺蟲蛋白。
28.如權(quán)利要求27所述的方法，其中蘇云金芽孢桿菌殺蟲蛋白選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成:CryU Cry3, TIC851、CryET170、Cry22、TIC901、TIC201、TIC407、TIC417、二元?dú)⑾x蛋白CryET80和CryEI76、二元?dú)⑾x蛋白TIC100和TIC101、殺蟲蛋白ET29或ET37與殺蟲蛋白TIC810或TIC812的組合、以及二元?dú)⑾x蛋白PS149B1。
29.如權(quán)利要求25所述的方法，其中該異源基因編碼ー種賦予除草劑耐受性的蛋白質(zhì)。
30.根據(jù)權(quán)利要求18到29中任一項(xiàng)所述的方法，其中對(duì)昆蟲害蟲的侵?jǐn)_具有抗性的該植物選自棉花、馬鈴薯、水稻、卡諾拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、草莓、大豆、苜蓿、番茄、茄子、胡椒以及煙草。
31.一種通過如權(quán)利要求18到30中任一項(xiàng)所述的方法產(chǎn)生的轉(zhuǎn)基因植物。
32.由如權(quán)利要求31所述的植物產(chǎn)生的種子。
33.通過使第一近交植物與第二不同近交植物雜交所產(chǎn)生的雜交種子，其中這些近交植物的至少之ー是如權(quán)利要求31所述的轉(zhuǎn)基因植物，并且其中該植物選自棉花、馬鈴薯、水稻、卡諾拉、向日葵、高粱、珍珠粟、玉米、草莓、大豆、苜蓿、番茄、茄子、胡椒以及煙草。
34.ー種用于產(chǎn)生如權(quán)利要求33所述的雜交種子的方法，其中雜交包括以下步驟: (i)種植第一和第二近交植物的種子； (ii)將所述第一和第二近交植物的種子培養(yǎng)成開花植物； (iii)防止該第一或該第二近交植物的至少之ー的自花授粉； (iv)允許該第一近交植物與該第二近交植物之間發(fā)生異花授粉；并且 (v)在該第一或該第二近交植物的至少之ー上收獲種子，所述種子由所述異花授粉產(chǎn)生。
35.一種用于預(yù)防和/或控制作物植物田地中的昆蟲害蟲侵?jǐn)_的方法，所述方法包括在所述植物中表達(dá)ー種有效量的一種干擾核糖核酸(RNA),該干擾核糖核酸在被ー種昆蟲害蟲物種攝入后起到下調(diào)所述昆蟲害蟲物種中的ー種靶基因的表達(dá)的作用， 其中該RNA包含至少ー個(gè)沉默元件，其中該沉默元件是包含退火的互補(bǔ)鏈的一個(gè)雙鏈RNA區(qū)域，其中一條鏈包含與該靶基因內(nèi)的ー個(gè)靶核苷酸序列至少部分地互補(bǔ)的ー個(gè)核苷酸序列或由其組成，并且其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、.27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、.39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、.154、.155、.250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 .297,310到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 .46、.141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、.121、.142、.176、.182、.130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、.187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75% —致，或 (ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 .78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、.201,314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、20555 到 58,322 到325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26、75 到 78、143、.121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、.179,210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222 到.225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、.234 到 237、.302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、.155、250 到.253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列 與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、.282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、.8、39 到 42、.9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 .58,322 到 325、.17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、.142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、.178、131、179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、.147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、.250 到 253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、.266 到 269、.165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、.201、314 到.317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、.7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、.16、205、55 到 58、.322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、.25、26、75 到 78、.143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、144、178、.131、179、210到213、290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、.125、134、222到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、.185、234 到.237、302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、.154、155、250到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、.164、266 到.269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、.200、201、314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、.401、3、.4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、.12、.47到 50、13、14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 .62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209、286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到.217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、.230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 `305、129、138、238 到 241、150、151、`242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、`156、157、254 到 257、158、159、258 到`261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、`165、167、166、270 到 273、168、170、169、`274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、`402、186、202、187、203、306 到 309、`318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、`189、27 到 30,282 到 285,294 到`297、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 `38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、`141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、`26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、`144、178、131、179、210 到 213,290 到`293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、`125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、`185、234 到 237,302 到 305、129、138、`238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、`154、155、250 到 253、156、157、254 到`257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、`162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、`200、201、314 到 317、402、186、202、`187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致，或(iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQ ID N01、174、180、`188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 `297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、`6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、`204、`16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、`63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到`74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、`183、206到209、286 到 289、298 到 301、`145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、`123、132、214 到 217、124、133、218 到`221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 `229、127、148、136、230 到 233、128、149、`184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 `241、150、151、242 到 245、152、153、`246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、`158、159、258 到 261、160、161、262 到`265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 `273、168、170、169、274 到 277、172、173、`278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、`203、306 到 309,318 到 321、386、387、`388,389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 `285,294 到 297,310 到 313、401、3、`4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、`10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、`14,51到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、`18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、`67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、`142、176、182、130、177、183、206 到 209、`286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到`217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、`147、126、135、226 到 229、127、148、136、`230 到 233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、`129、138、238 到 241、150、151、242到 245、152、153、246到 249、154、155,250 到 253、156、`157、254 到 257、158、159、258 到 261、`160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、`167、166、270 到 273、168、170、169、274到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、·402、186、202、187、203、306 到 309,318 到·321、386、387、388、389所表示的序列中的任一個(gè)至少75%—致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ IDN01、174、180、188、2、175、·181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、·140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、·47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、·21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、·75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、·206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、·144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、·214 到 217、124、133、218 到 221、146、·125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、·127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、·185,234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、·150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、·154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、·159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、·162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、·168、170、169、274 到 277、172、173、278 到·281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、·306 到 309,318 到 321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%—致。
36.一種選自下組的分離的多核苷酸，該組由以下各項(xiàng)組成:
(i)包含如由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、·181、189、27 到 30、282 到 285、294 至Ij·297、310 至Ij 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、·35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、·11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、·205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、·20.63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、·25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、·177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、·122、144、178、131、179、210 到 213,290 到·293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、·146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、·137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、·238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 ·249、154、155、250 到 253、156、157、254 到·257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、·163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 ·281、200、201、314 到 317、402、186、202、·187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)所表示的ー種核苷酸序列的至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的ー種多核苷酸,或
(ii)包含如SEQ ID N01、174、180、188、2、175、·181、189、27 到 30、282 到 285、294 至Ij·297、310 至Ij 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、·35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、·11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、·205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、·20.63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、·25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、·177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、·122、144、178、131、179、210 到 213,290 到·293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、·146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、·137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、·238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 ·249、154、155、250 到 253、156、157、254 到·257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、·163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 ·281、200、201、314 到 317、402、186、202、·187,203,306到309、318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)中所表示的一種核苷酸序列的至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的ー種多核苷酸，由此使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，所述多核苷酸與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到`285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、`43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、`59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、`176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、`126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到`305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、`156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、`165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到`317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%—致，或
(iii)包含如 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30、282 到 285、294 到`2`97、310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、`11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、`20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、`177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到`293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、`238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到`257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、`187,203,306到309,318到321、386、387、388、389或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)中所表示的一種核苷酸序列的至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的ー種多核苷酸，并且其中所述片段或所述互補(bǔ)序列具有一種核苷酸序列，當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、`189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、`7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、`322 到 325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、`143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、`131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、`222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246到 249、154、155、`250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、`266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、`201,314到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、`175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到`38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、.26,75到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、.122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、.146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、.137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到.249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、.163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、.389或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%—致，或 (iv)編碼ー種氨基酸序列的ー種多核苷酸，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列 時(shí)，該氨基酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到.297、310 到 313、401、3、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、.177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到.293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129、138、.238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到.257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、402、186、202、.187,203,306到309,318到321、386、387、388、389中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少.85%—致， 并且 其中所述多核苷酸不長(zhǎng)于10000個(gè)核苷酸。
37.如權(quán)利要求36所述的多核苷酸,該多核苷酸被包含在ー種DNA構(gòu)建體中。
38.如權(quán)利要求37所述的DNA構(gòu)建體，該DNA構(gòu)建體是ー種表達(dá)構(gòu)建體，其中該多核苷酸序列被可操作地連接到至少ー個(gè)能夠驅(qū)動(dòng)該多核苷酸序列的表達(dá)的調(diào)控序列。
39.ー種宿主細(xì)胞,包含如權(quán)利要求36所述的多核苷酸或如權(quán)利要求37或38所述的DNA構(gòu)建體。
40.如權(quán)利要求39所述的宿主細(xì)胞，其中該宿主細(xì)胞是ー種原核細(xì)胞或ー種真核細(xì)胞。
41.如權(quán)利要求40所述的宿主細(xì)胞，其中該宿主細(xì)胞是ー種細(xì)菌細(xì)胞或ー種植物細(xì)胞。
42.如權(quán)利要求1到16中任ー項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物，如權(quán)利要求17或權(quán)利要求32所述的種子，如權(quán)利要求18到30或34到35中任一項(xiàng)所述的方法，如權(quán)利要求33所述的雜交種子，如權(quán)利要求36或權(quán)利要求37所述的分離的多核苷酸，如權(quán)利要求38所述的DNA構(gòu)建體，或如權(quán)利要求39到41中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞，其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、.27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到.209.286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、.132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、.127、148、136,230到233或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列時(shí)，該核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、.148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、.95%、98%或 99%—致，或(ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、.189、27到30、282到285、294到297、310到313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到.209.286到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、290 到 293、123、132、214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、.136,230到233或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與SEQ ID N01、174、180、.188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、.130、177、183、206到 209、286 到 289、298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、.290到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、.226到229、127、148、136、230到233中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、.401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、.131、179、210到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、.222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)至少 75%，優(yōu)選至少 80%、85%、90%、95%、98%或 99%—致，或(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、.189,27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、.214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、.148,136,230到233或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30,282到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289、.298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、.133、218 到 221、146、125、134、222到225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ IDN01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、.142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、.210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、.147、126、135、226到229、127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或(iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQID N01、174、180、.188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、.130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213、.290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、.135,226到229、127、148、136、230到233或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、.294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到.301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233 所表示的序列中的任一個(gè)至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、401、121、142、176、182、130、177、183、.206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、.132,214到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、.127、148、136、230到233中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%，優(yōu)選至少90%、95%、.98%或 99%—致。
43.如權(quán)利要求1到16中任ー項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物，如權(quán)利要求17或權(quán)利要求32所述的種子，如權(quán)利要求18到30或34到35中任一項(xiàng)所述的方法，如權(quán)利要求33所述的雜交種子，如權(quán)利要求36或權(quán)利要求37所述的分離的多核苷酸，如權(quán)利要求38所述的DNA構(gòu)建體，或如權(quán)利要求39到41中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞，其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到.58.322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、.153.246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262到265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列吋，該核苷酸序列與 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、.11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、.20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、.156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、.165、167、166、270到273或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、.95%、98%或 99%—致，或 (ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35到38、.140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到.58.322到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、.153.246到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262到265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273或其互補(bǔ)序列中任ー個(gè)的ー個(gè)至.少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)包含所述片段的所述基因與 SEQ ID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 .42、.9、10、43到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 .249、154、155、.250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 .265、.163、.162、164、266至Ij 269、165、167、166、270到273中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQID N03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 .46、.141、.11、12、47 到.50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 .62、.19、.20、63 到 66、.21、22、67 到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、157、.254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 .269、.165、167166、270到273或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或 .(iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N03、4、31到34、139、5、6、35到.38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 .54、.15、204、16、205、.55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 .70、.150、.151、242 到 245、.152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 .261、160、.161,262到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中任ー個(gè)的一個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ IDN03、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 .46、.141、.11、12、47 到 50、.13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 .62、.19、.20、.63 到 66、21、.22,67到 70、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、.156、157、254到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、.165、.167、166、.270到273中的任一個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與 SEQ ID N03、4、31到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39到 42、9、10、43 到.46、.141、11、12、.47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 .62、19、20、63到.66、21、22、67 到 70、150、151、242到245152、153、246 到 249、154、155、250 到 .253、156、157、.254 到 257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到.269、.165、167、.166,270到273或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、.90%、95%、98%或 99%—致，或 (iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQlDN03、4、31到34、.139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 .50、.13、14、51 到 54、.15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 .66、.21、.22、.67 到 70、150、.151.242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 .257、158、159258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQ ID N03、4、31到34、.139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47到 .50、.13、14、51 到 54、.15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 .1、.22、.67 到 70、150、.151.242到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 .257、158、159、258到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 所表示的序列中的任一個(gè)至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N03、4、31到34、139、5、6、35到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、.204、16、.205,55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、150、151、.242 到.245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254 到 257、158、159、258 到 .261、.160、161、262 到 265、163、162、164、266 到 269、165、167、166、270 到 273 中的任ー個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85 %，優(yōu)選至少90 %、95 %、98 %或99 % —致。
44.如權(quán)利要求1到16中任ー項(xiàng)所述的轉(zhuǎn)基因植物，如權(quán)利要求17或權(quán)利要求32所述的種子，如權(quán)利要求18到30或34到35中任一項(xiàng)所述的方法，如權(quán)利要求33所述的雜交種子，如權(quán)利要求36或權(quán)利要求37所述的分離的多核苷酸，如權(quán)利要求38所述的DNA構(gòu)建體，或如權(quán)利要求39到41中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞，其中該靶基因 (i)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27到30、.282到285、294到297、310到313、401或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種序列吋，該核苷酸序列與SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285、294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或 (ii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189,27到.30,282到285,294到297,310到313,401或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，或具有一種核苷酸序列以使得當(dāng)將包含所述片段的所述基因與 SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297、.310到313、401中的任一個(gè)最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、.175、181、189、27到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少80%、85%、90%、95%、98%或99%—致，或 (iii)選自以下基因的組，這些基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、181、189,27到.30,282到285,294到297,310到313,401或其互補(bǔ)序列中任一個(gè)的ー個(gè)至少21個(gè)連續(xù)核苷酸的片段的一種核苷酸序列，并且其中當(dāng)將所述片段與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 中的任ー個(gè)中的相應(yīng)片段最佳地比對(duì)并且比較時(shí)，所述片段的所述核苷酸序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、.189、27到30,282到285,294到297,310到313,401或其互補(bǔ)序列中的任ー個(gè)的所述相應(yīng)片段至少75 %，優(yōu)選至少80 %、85 %、90 %、95 %、98 %或99 % —致，或 (iv)為ー種基因的ー種昆蟲害蟲直向同源物，該基因具有包含SEQID N01、174、180、188、2、175、.181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313,401 或其互補(bǔ)序列中的任一個(gè)的ー種核苷酸序列，其中兩種直向同源基因在序列方面的相似程度使得當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較這兩種基因時(shí)，該直向同源物所具有的序列與SEQ ID N01、174、180、188、2、175、181、189、.27到30,282到285,294到297,310到313,401所表示的序列中的任一個(gè)至少75%，優(yōu)選至少 80%、.85%、90%、95%、98%或 99%—致，或 (v)選自以下基因的組，這些基因具有編碼ー種氨基酸序列的一種核苷酸序列，當(dāng)最佳地比對(duì)并且比較兩種氨基酸序列時(shí)，該氨基酸序列與由SEQ ID N01、174、180、188、2、175、·181、189、27到30,282到285,294到297,310到313,401中的任一個(gè)所編碼的氨基酸序列至少85%，優(yōu)選至少90%、95%、98%或99%—致。
【文檔編號(hào)】A01H5/00GK103562395SQ201280024284
【公開日】2014年2月5日 申請(qǐng)日期:2012年4月20日 優(yōu)先權(quán)日:2011年4月20日
【發(fā)明者】米里昂·貝吉恩, 蒂埃里·博蓋爾特, 帕斯卡萊·費(fèi)爾德曼, 羅曼·雷馬克斯 申請(qǐng)人:德福根有限公司