專利名稱：活菌生物農(nóng)藥微膠囊劑的制備的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥和生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
微生物農(nóng)藥的致命缺點是在自然狀況下對外界條件敏感，容易死亡，貨架期短?，F(xiàn)在很多微生物農(nóng)藥為了延長儲存期，通過發(fā)酵優(yōu)化，培養(yǎng)出芽孢、厚垣孢子等抗逆性強(qiáng)的生物體，然后制成可濕性粉劑、水分散粒劑等。這種方法在一定程度上增加了微生物農(nóng)藥自然條件下的抗性，但是貨架期仍然不長。為了解決貨架期的問題，現(xiàn)在的研究主要集中在微生物膠囊化，即將微生物作為囊心，通過化學(xué)法，物理化學(xué)法，物理機(jī)械法等包埋在囊壁內(nèi)，制成微膠囊。微膠囊技術(shù)的開發(fā)已歷時60多年，在食品和醫(yī)藥行業(yè)得到廣泛應(yīng)用，利用微膠囊 化技術(shù)，研制了很多微膠囊化產(chǎn)品。在農(nóng)藥行業(yè)，經(jīng)過多年研究，也已經(jīng)有少量的化學(xué)農(nóng)藥和肥料制成微膠囊劑的技術(shù)報告和專利申請，文獻(xiàn)發(fā)表的《生物農(nóng)藥微膠囊制備研究》(云南大學(xué)學(xué)報，2005，27 (I) :57 59)公開了生物農(nóng)藥微膠囊制備方法，該方法也僅是適用于非活體的生物化學(xué)成分的生物農(nóng)藥。因為發(fā)酵的微生物菌株是親水性的，將親水性的菌株直接包埋在囊壁內(nèi)，由于含有水分，常溫下長期存放時菌株仍然容易失活，因此，尚未見有關(guān)微膠囊化的微生物農(nóng)藥生產(chǎn)工藝技術(shù)報告。本發(fā)明相對于先前報道微膠囊技術(shù)的優(yōu)勢在于通過首先選用生物相容性優(yōu)良的吸附載體通過物理途徑吸附菌體制備成疏水性的囊芯，再通過壁材包埋制成的微膠囊解決了菌體長期存放，效果穩(wěn)定的問題。

發(fā)明內(nèi)容
選用的微生物菌株包括枯草芽孢桿菌，熒光假單孢菌，短小芽孢桿菌，蘇云金桿菌，蠟樣芽胞桿菌、多粘類芽孢桿菌，吸水鏈霉菌等放線菌，這些微生物菌株已經(jīng)登記進(jìn)入市場，均可以從市場買到。將分離純化的微生物菌株在50L發(fā)酵罐中培養(yǎng)2到3天，獲得微生物發(fā)酵液，再通過離心或過濾獲得高濃度的發(fā)酵濃縮液。本發(fā)明的核心技術(shù)是將親水性的微生物發(fā)酵培養(yǎng)液用吸附劑吸附形成疏水性的囊心，使載體和菌體結(jié)合成不溶于水的結(jié)合體，采用植物油作媒介，將載體和菌體均勻分散于油滴中，然后加入油水親和乳化劑將可溶于水的壁材乳化形成水包油型乳化體系。采用吸附劑吸附活菌制成囊芯再加工成的微膠囊，貯藏性能得到了提高，可以在常溫下長時間貯藏。由于吸附劑在貯藏期間對菌體的保護(hù)作用，吸附劑吸附菌體包埋后，在貯藏過程中，菌體與外界相對隔絕，從而遠(yuǎn)離空氣等環(huán)境對菌體的氧化分解作用，延長了貯藏時間。本發(fā)明解決的技術(shù)問題是活菌生物農(nóng)藥的穩(wěn)定性，使活菌生物農(nóng)藥可以長期貯藏，穩(wěn)定發(fā)揮功效。具體實施方案本發(fā)明根據(jù)下述實例做進(jìn)一步的描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員知道，下述實施例對本發(fā)明僅僅起到說明的作用。在不背離本發(fā)明精神的前提下，對本發(fā)明所做的任意改進(jìn)和替代均在本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)。實施方案一I、微生物菌種選用選用枯草芽孢桿菌接種于50mL/250mL的SDAY種子培養(yǎng)基中，35 °C，150r/min下培養(yǎng)18h左右(用紫外分光光度計測量0D_為6. O)，接種到優(yōu)化后的50L發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基中，在30°C培養(yǎng)48h得到發(fā)酵液液。2、配制油水親和乳化劑HLB值是衡量乳化劑親油-親水性大小的相對值，其值越大說明親水性越強(qiáng)。每個乳化體系都需要適宜的親油-親水基比例(HLB值)。乳化劑的HLB值決定不同的乳化效果，油-水體系最終如何選擇復(fù)合乳化劑的HLB值才能獲得最佳的乳狀液，這是乳化過程的關(guān)鍵。本發(fā)明取司盤80和吐溫80按2 8的比例配制成油水親和乳化劑，其HLB值達(dá)到13，油-水體系乳化最佳，噴霧干燥獲得了最高的菌含量。3、吸附劑的選擇不同的吸附劑對對枯草芽孢桿菌的吸菌率實驗結(jié)果如表I所示。表I不同吸附劑對枯草芽孢桿菌的吸菌率比較
權(quán)利要求
1.一種活菌生物農(nóng)藥微膠囊劑，其特征在于所述微膠囊是將發(fā)酵生產(chǎn)的活體微生物菌劑以吸附材料吸附制成囊芯，在油浴中與壁材和油水親和乳化劑互作，直接制成懸浮劑或經(jīng)過干燥制成粉劑和顆粒劑的微膠囊活體生物農(nóng)藥。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的吸附劑，其特征在于所述的吸附材料包括但不局限于活性炭，白炭黑，硅藻土，白炭黑，麥飯石，高嶺土，麩皮，糠殼，淀粉，多孔淀粉，可溶性淀粉和大孔吸附劑等材料或這些材料的組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的油浴成分，其特征在于所述的油浴成分包括但不局限于植物油如大豆油，菜籽油，蓖麻油，胚芽油，棕櫚油和玉米油等及其衍生物或礦物油如白油及其衍生物。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述油水親和乳化劑，其特征在于 所述的油水親和乳化劑的HLB值為11-14，更為優(yōu)選的HLB值為13。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的壁材，其特征在于所述的壁材為生物相容性好的材料包括但不局限于β -環(huán)糊精，麥芽糊精，明膠，阿拉伯膠，糊精，淀粉，海藻酸鈉，海藻酸鈣等。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的粉劑微膠囊，其特征在于產(chǎn)品組合為囊芯含量O. 01-5%,壁材含量1-20%，油水親和乳化劑O. 1-10%，油浴含油量1-20%，經(jīng)噴霧干燥制成粉劑，制劑菌含量達(dá)到109cfu/g以上，細(xì)膩，粒徑主要分布在50-100微米，顯微鏡下呈近似圓球形，顆粒大小分布均勻。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的顆粒劑微膠囊，其特征在于產(chǎn)品組合為囊芯含量O. 1-10 %，油水親和乳化劑O. 1-2 %，壁材含量O. 1-20 %，油浴含油量1-50 %，經(jīng)干燥制成顆粒劑，制劑菌含量達(dá)到108cfu/g以上，細(xì)膩，粒徑主要分布在100-500微米。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的微膠囊劑，其中所述的懸浮劑微膠囊，其特征在于產(chǎn)品組合為囊芯含量O. 01-5%，壁材含量1-20%，油浴含油量O. 1_5%，油水親和乳化劑O. 1-10%,增稠劑O. 1_5%，制劑菌含量達(dá)到107cfu/ml以上，粒徑主要分布在50-100微米。
全文摘要
本發(fā)明涉及將活體微生物如假單胞桿菌、芽孢桿菌及類芽孢桿菌的菌體等為主要有效成分制備的微膠囊制劑，屬于微生物和生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域?；铙w微生物農(nóng)藥微膠囊制備的方法是通過吸附作用將微生物發(fā)酵培養(yǎng)液吸附制成囊心固化，然后加入壁材，制成微膠囊制劑。所獲得的微膠囊制劑的活菌含量高，耐貯性和抗高溫及紫外線能力強(qiáng)，對病蟲害具有穩(wěn)定良好的防治效果。
文檔編號A01N25/28GK102870816SQ20121041923
公開日2013年1月16日 申請日期2012年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月29日
發(fā)明者黃永 申請人:黃永