專利名稱：一種雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種種質(zhì)鑒定方法，具體涉及一種雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法。
背景技術(shù)：
石斑魚屬于鱸形目酯科石斑魚亞科，全世界已命名的有約100多種，我國約40多種。石斑魚個體大、營養(yǎng)豐富、肉質(zhì)鮮美，具有很高的經(jīng)濟價值，是我國沿海地區(qū)重要的養(yǎng)殖魚類之一。但石斑魚具有生長緩慢、成熟期晚、存在性逆轉(zhuǎn)等特點，加上近年來面臨的過度捕撈，導致自然魚類資源數(shù)量急劇減少。但近年的人工繁殖石斑魚后代存在個體變小、抗病 力減弱等種質(zhì)退化現(xiàn)象。雜交為解決該問題提供了一個新的研究方向。由于雜交涉及不同類型的親本遺傳物質(zhì)的重新組合，后代可能會出現(xiàn)具有經(jīng)濟價值的新品種，因而在魚類繁育方面應用比較廣泛。隨著養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的蓬勃發(fā)展，雜交種的推廣以及同時面臨雜交種可能逃逸的環(huán)境生態(tài)壓力的加大，對雜交種的鑒定和鑒別顯得尤為重要。目前的魚類種質(zhì)鑒定方法主要有兩大類，形態(tài)學方法、生化與分子遺傳學方法，各有其優(yōu)缺點。分子遺傳學方法能從根本上去揭示其遺傳物質(zhì)特征，進行物種鑒定和親緣關(guān)系分析。但操作技術(shù)較復雜，對儀器設備要求高，整個過程較耗時。比如應用RAro技術(shù)分析，容易出現(xiàn)非特異性擴增；AFLP技術(shù)在魚類種質(zhì)檢測中多用于mtDNA多態(tài)性研究，而mtDNA具有一定的遺傳局限性；而微衛(wèi)星技術(shù)需要大量篩選分子標記。相對而言，形態(tài)學方法更為直觀、簡便易行。對操作人員要求低，推廣起來比較容易。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種簡便易行并準確有效的雜交石斑魚種質(zhì)鑒定方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過以下的技術(shù)方案來實現(xiàn)，一種雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，包括步驟(I)獲取待測樣本石斑魚形態(tài)學參數(shù)，其中包括傳統(tǒng)可量性狀參數(shù)全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距；以及框架測量參數(shù)下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離D1-4、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8 ；(2)對上述獲取的參數(shù)進行初步處理，獲得以下特征參數(shù)值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距;(3)將以上獲得的下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距七個數(shù)據(jù)依次用Xf X7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ；(4)根據(jù)所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍
帶石斑魚、Y2代表棕點石斑魚、Y3代表虎龍斑。本發(fā)明上述步驟(I)中，對所述的傳統(tǒng)可量性狀參數(shù)和框架測量參數(shù)通過傳統(tǒng)測量法或紙板測量法獲取。本發(fā)明所述紙板測量法，用針在紙板上比照魚體的框架結(jié)構(gòu)點依次扎孔。本發(fā)明待測樣本石斑魚在測量前用冰浴處理5分鐘，以麻醉和舒展魚體。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用基于傳統(tǒng)可量性狀和框架數(shù)據(jù)的綜合判別，只需要測定9項形態(tài)指標，以獲得7個形態(tài)學參數(shù)代入判別模型進行判別即可；更加快速、經(jīng)濟、簡便；而且準確有效。



圖I為石斑魚框架數(shù)據(jù)測量圖。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例來進一步解釋本發(fā)明，但實施例并不對本發(fā)明做任何形式的限定。獲取數(shù)據(jù)前，待測魚體均冰浴處理5分鐘，以起到麻醉和魚體舒展的作用，以獲得更真實的數(shù)據(jù)。待測魚經(jīng)天平稱量后進行形態(tài)學參數(shù)的測定，具體包括傳統(tǒng)可量性狀測定和框架測量參數(shù)測定。傳統(tǒng)可量性狀有全長、體長、體高、體寬、頭長、吻長、眼徑、眼間距、尾柄長、尾柄高、肛前體長、眼后頭長，共12項參數(shù)；本發(fā)明只需獲取全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距7項參數(shù)?？蚣軠y量所取定位點參照附圖1，數(shù)據(jù)為兩個坐標點之間的直線距離長度，可精確到O. 1cm。選取10個坐標點,其中坐標點I為下頜骨最后端；坐標點2為吻前端；坐標點3為腹鰭起點；坐標點4為頭背部末端；坐標點5為臀鰭起點；坐標點6為背鰭起點；坐標點7為臀鰭末端；坐標點8為背鰭末端；坐標點9為尾鰭腹部起點；坐標點10為尾鰭背部起點。各坐標點之間的距離為21個框架數(shù)據(jù)，例如，Dp2為坐標點I和坐標點2之間的直線距離。本發(fā)明只需獲取下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離D1-4、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8。上述傳統(tǒng)可量數(shù)據(jù)和框架數(shù)據(jù)的采集可根據(jù)實際需要選用以下其中一種方法進行操作(I)傳統(tǒng)測量法選用直尺或卷尺等測量工具進行逐一測量。(2)紙板測量法把試驗魚放置在硬紙板或質(zhì)量較好的白紙上，人工選取標志點(參照附圖1)，用大頭針在紙上扎孔作為標記，事后再測量紙板上兩點間的距離，得到所需數(shù)據(jù)。兩者相比，第一種操作較簡便，第二種操作時間較短，對魚體的損傷相對較小。但相比較的樣本組間同一類數(shù)據(jù)只能采取同一種測量方法，以減少誤差，提高結(jié)果準確度。對上述獲取的參數(shù)進行初步處理，獲得以下特征參數(shù)值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距;將以上獲得的下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離D1-4/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離D5-8/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距七個數(shù)據(jù)依次用Xf X7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ；根據(jù)所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍帶石斑魚、Υ2代表棕點石斑魚、Υ3代表虎龍斑。用已知的魚種對上述方法進行驗證實驗如下，待測雜交石斑魚均取自廣東省大亞灣水產(chǎn)實驗中心，鞍帶石斑魚、棕點石斑魚、虎龍斑各30尾。體重，體長(范圍)如下表 表I觀測樣本的數(shù)量和規(guī)格
權(quán)利要求
1.一種雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，其特征在于，包括步驟 (1)獲取待測樣本石斑魚形態(tài)學參數(shù)，其中包括傳統(tǒng)可量性狀參數(shù)全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距；以及框架測量參數(shù)下頜骨最后端與頭背部末端的之間直線距離、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離； (2)對上述獲取的參數(shù)進行初步處理，獲得以下特征參數(shù)值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距； (3)將以上步驟2獲得的七個數(shù)據(jù)依次用XfX7代替，并分別代入下列判定模型Yl=-1183+3099X1+2184X2+604. 432X3+37. 99X4+17. 807X5-10. 972X6+10. 687X7 ；Υ2=-1245+3413Χ1+1967Χ2+584. 208X3+37. 597X4+19. 98X5-6. 528X6+16. 487X7 ；Y3=-l103+3094X1+1895X2+572. 099X3+34. 5X4+17. 904X5-3. 031X6+11. 634X7 ； (4)根據(jù)所得最大的Y值來判別該樣本所屬類別，其中Yl代表鞍帶石斑魚、Υ2代表棕點石斑魚、Υ3代表虎龍斑。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，其特征在于步驟(I)中，對所述的傳統(tǒng)可量性狀參數(shù)和框架測量參數(shù)通過傳統(tǒng)測量法或紙板測量法獲取。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，其特征是所述紙板測量法，用針在紙板上比照魚體的框架結(jié)構(gòu)點依次扎孔。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，其特征在于待測樣本石斑魚在測量前用冰浴處理5分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種雜交石斑魚的種質(zhì)鑒定方法，基本步驟如下對待測樣本進行形態(tài)學參數(shù)測定，包括傳統(tǒng)可量性狀全長、體長、頭長、尾柄長、吻長、眼徑、眼間距，以及框架測量數(shù)據(jù)D1-4、D5-8；對上述獲取的參數(shù)進行初步處理，獲得以下特征參數(shù)值下頜骨最后端與頭背部末端之間直線距離/體長、臀鰭起點與背鰭末端之間直線距離/體長、全長/體長、頭長/吻長、體長/尾柄長、頭長/眼徑、頭長/眼間距；將以上參數(shù)值處理后代入相應判別函數(shù)模型，根據(jù)最大Y值判斷該樣本所屬類別。本發(fā)明方法簡便易行并準確有效。
文檔編號A01K61/00GK102939915SQ20121039617
公開日2013年2月27日 申請日期2012年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月17日
發(fā)明者張勇, 王燕, 張海發(fā), 李水生, 黃文 , 劉瓊瑜, 蒙子寧, 劉曉春, 林浩然 申請人:中山大學