專利名稱：一種黃精的組織培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)方法，具體地說是黃精的組織培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
黃精(Polygonaturm sibiricum Redoute)別名雞頭黃精、雞頭參，屬于百合科(Liliaceae)黃精屬(Polygonatum)多年生草本植物。中藥以黃精根莖入藥,具有補(bǔ)脾潤(rùn)肺、益氣養(yǎng)陰、強(qiáng)壯筋骨等功效，能治療體虛乏力、心悸氣短、肺燥干咳、病后體虛、風(fēng)濕痛疼、糖尿病等疾病，其活性成分主要為黃精多糖及皂甙等。地藏黃精是安徽九華山地區(qū)特有的野生黃精品種，有著極高的藥用和經(jīng)濟(jì)價(jià)值， 隨著黃精藥用價(jià)值和保健價(jià)值越來越被人們認(rèn)識(shí)，黃精原料的需求量也越來越大，致使野生黃精的無計(jì)劃采集加劇，導(dǎo)致其資源枯竭加速，影響可持續(xù)開發(fā)利用。因此，為了保證黃精原料來源、實(shí)行產(chǎn)業(yè)化種植將成為必然趨勢(shì)。近年來雖然有些地方開始人工種植黃精，但由于生產(chǎn)上多采用分根繁殖，其繁殖系數(shù)低，質(zhì)量不穩(wěn)定，故黃精種苗問題成了人工大面積種植的瓶頸。植物的離體快速繁殖，是目前植物組織培養(yǎng)中應(yīng)用最廣泛、最有效的技術(shù)，尤其對(duì)于新引進(jìn)品種、脫毒苗、優(yōu)良單株、瀕危植物和基因工程植株等可實(shí)現(xiàn)離體快速增殖，且不受地區(qū)、氣候影響，繁殖速度比常規(guī)生產(chǎn)快數(shù)百萬(wàn)倍，能迅速提供大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗。目前，人們對(duì)黃精的研究主要集中在其成分測(cè)定、藥理作用以及人工栽培等方面，而關(guān)于組織培養(yǎng)方面的研究?jī)?nèi)容較少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種黃精的組織培養(yǎng)方法，通過該方法可以對(duì)黃精進(jìn)行快速繁殖，并實(shí)現(xiàn)大面積工業(yè)化種植，以解決野生地藏黃精產(chǎn)量低、供應(yīng)少和自然栽培周期長(zhǎng)的問題。本發(fā)明解決技術(shù)問題采用如下方案( I)外植體的選擇與滅菌選擇當(dāng)年生地下莖上的幼芽或當(dāng)年生帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖部分，所述塊莖將其切成小塊，且每塊都帶有至少一個(gè)隱藏的芽點(diǎn)；將所述幼芽或塊莖用自來水快速?zèng)_去泥沙，并用洗滌劑液浸泡30min以除去表面污垢，然后自來水沖洗3h，再置于超凈工作臺(tái)用體積濃度75%酒精滅菌15s，無菌水沖洗3遍，再將其放入體積濃度0. 2%Hgcl2溶液中浸泡12-14min，所述Hgcl2溶液中包含有體積濃度0. 15%-02%的吐溫20，之后無菌水沖洗5遍，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中吸干水分，等待接入培養(yǎng)基；(2)幼芽叢生芽的誘導(dǎo)、塊莖叢生芽愈傷組織培養(yǎng)和增殖培養(yǎng)A、將經(jīng)過步驟(I)處理的幼芽轉(zhuǎn)入?yún)采空T導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA 4. Omg/L+NAAO. 2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23±1°C、光照1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為20-30天；然后直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)；B、①將經(jīng)過步驟(I)處理的帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖接種MS+6-BA 4. Omg/L+NAA0. 2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8 培養(yǎng)基上，23± 1°C、光照 1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為20-30天；中間剔除污染的塊莖外植體；②在塊莖組織分化形成愈傷組織后，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基為MS+6-BA 3. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L，pH 5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23±1°C、光照1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為10-20天；愈傷組織進(jìn)行增殖，將增殖后的愈傷組織切成I. 0cm*I. 0cm*I. Ocm大小然后轉(zhuǎn)入原先的誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA 4. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5. 8培養(yǎng)基上，23±1°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為15-25天;(3)生根的培養(yǎng)將經(jīng)過步驟(2)處理的外植體轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述生根培養(yǎng)基的配方為 l/2-l/3MS、NAA 0. 2-0. 5mg/L、瓊脂 6_8g/L、蔗糖 20_30g/L ;培養(yǎng)條件為溫度 23±1°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為35-50天；(4)煉苗和移栽將經(jīng)過煉苗的黃精根莖從接種瓶中取出，用清水洗掉培養(yǎng)基，在質(zhì)量濃度0. 1%高錳酸鉀溶液中消毒lmin，用清水沖洗干凈后，假植在腐殖質(zhì)土 沙子=1:1 (v :v)的基質(zhì)上，保持空氣濕度95%以上，用遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭；根據(jù)成苗的時(shí)間安排栽植，在春季以后成苗則選擇秋栽即9-10月下旬，在春季之前成苗則選擇春栽即3月下旬，將假植的黃精根莖栽種到整好的露地畦內(nèi)，將根莖段芽眼向上，每隔10 15cm平放I個(gè)根莖，行距20 25cm，覆土 4 6cm，澆足水；在土壤封凍前，畦面上蓋一層有機(jī)肥或薄膜，以利保暖越冬。本發(fā)明方法中，采用不同營(yíng)養(yǎng)體作為材料，既保證了遺傳的穩(wěn)定性，又增加了原材料利用的可能性。利用芽直接分化成葉片，然后進(jìn)行成苗階段，縮短了原先用芽經(jīng)過誘導(dǎo)愈傷組織再分化成苗階段的時(shí)間，同時(shí)利用塊莖分化并增殖，大大提高繁殖的效率和數(shù)量，而對(duì)于不同部位消毒方法的不同，不僅降低了污染率也保證了較高的成活率，從而滿足大規(guī)模推廣和工廠化生產(chǎn)的要求。本發(fā)明方法具有如下優(yōu)點(diǎn)或效果I.本方法采用的黃精材料是安徽特有的野生品種，有極高的藥用價(jià)值，而本方法可以適合工廠化使用，解決野生產(chǎn)量較少的問題，同時(shí)通過不同部位不同的培養(yǎng)方式多方面的對(duì)材料進(jìn)行擴(kuò)大和快速培養(yǎng)，提高材料的利用率的同時(shí)縮短培育時(shí)間，而且保證了較高的成活率。2.本方法改進(jìn)了常用的繁殖方法如選擇和常用方法不一樣的取材部位，針對(duì)不同的取材部位采取不同的滅菌方式。針對(duì)不同部位的質(zhì)地不同采用不同濃度的表面活性劑吐溫20，使得消毒溶液Hgcl2能有效的滲透表層，改善之前的消毒效果不佳的狀況，提高消毒的效率，從而大大提高無菌率和成活率。在此過程中因?yàn)榍o段芽選取的是去除外層較厚苞片的最內(nèi)層幼芽(一般成乳白色)，所以需要表面活性劑的加入，提高滅菌效果，但是由于芽的組織選取的比較幼嫩，所以活性劑的量減少，達(dá)到即加強(qiáng)滲透效果又不損傷幼芽，而對(duì)于塊莖組織，為堅(jiān)硬的肉質(zhì)結(jié)構(gòu)，為了達(dá)到好的滅菌效果，所以增加吐溫20的濃度，兩種不同的取材選擇不同的滅菌方式是為了在不傷害組織本身都能到達(dá)理想的滅菌效果。3.本方法采用的誘導(dǎo)培養(yǎng)基對(duì)于莖段芽組織進(jìn)行直接誘導(dǎo)分化形成葉片，而不需要通過先誘導(dǎo)愈傷組織再進(jìn)行分化的長(zhǎng)時(shí)間過程，大大縮短了成苗時(shí)間，對(duì)于野生黃精的資源利用，快速繁殖有極大的作用。4.本方法在對(duì)于塊莖培養(yǎng)的過程中采用了與前人不同的循環(huán)路徑，即先將塊莖在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，快速誘導(dǎo)出愈傷組織后立即轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基進(jìn)行增殖，將增殖后的材料再切分成I. 0cm*l. 0cm*l. Ocm的大小接入原先的誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行接下來的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，在兩次誘導(dǎo)培養(yǎng)中間加入增殖的部分，這樣做可以大大提高最終誘導(dǎo)產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)苗的數(shù)量，從而獲得較大量的成苗，也可以一定程度上縮短常規(guī)成苗的時(shí)間。5.本方法在前期誘導(dǎo)的過程中采用一種培養(yǎng)基對(duì)不同材料產(chǎn)生兩種不同的誘導(dǎo)結(jié)果，可以節(jié)約配置不同實(shí)驗(yàn)材料所需的時(shí)間，能提高材料的利用率。6.本方法中的組培苗營(yíng)養(yǎng)充足、溫光合理，長(zhǎng)勢(shì)旺盛。
具體實(shí)施方式

以下通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做進(jìn)一步說明。以下實(shí)施例MS培養(yǎng)基配方每升培養(yǎng)基中含KN03( 1900mg/L), NH4NO3C 1650mg/L),MgSO4 *7H20 (370mg/L),KH2PO4 (170mg/L),CaCl2 (330mg/L)，KI (0. 83mg/L), H3BO3 (6. 2mg/L), MnSO4 .H2O (16. 9mg/L), ZnSO4 *4H20 (8. 6mg/L), CuSO4 *5H20 (0. 025mg/L) , CoCl2 *6H20(0. 025mg/L)，Na2MoO4 2H20 (0. 25mg/L)，F(xiàn)eSO4 7H20(27. 85mg/L)，Na2EDTA (37. 25mg/L)，甘氨酸(2. Omg/L),煙酸B3 (0. 5mg/L)，鹽酸硫胺素BI (0. 4mg/L)，鹽酸批卩多醇B6 (0. 5mg/L),肌醇(lOOmg/L) o實(shí)施例I( I)外植體的選擇與滅菌選擇地藏黃精的當(dāng)年生地下莖上的幼芽，將幼芽從土中挖出切取幼芽，自來水快速?zèng)_去泥沙，可用牙刷輔助沖洗，洗滌劑液(市售常規(guī)洗衣粉)浸泡30min并用軟刷輕輕刷去表面污垢，將外層苞片去除，留下最內(nèi)層乳白色幼芽，自來水沖洗3h，置于超凈工作臺(tái)上體積濃度75%酒精溶液滅菌15s，之后無菌水沖洗3遍，體積濃度0. 2%Hgcl2, Hgcl2溶液中包含有體積濃度0. 15%的吐溫20，浸泡12min，無菌水沖洗5遍，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中吸干水分等待接入培養(yǎng)基；混合了吐溫20后的Hgcl2溶液消毒效果比原先沒有混合的溶液無菌率提高T 10 倍。(2)莖段芽的誘導(dǎo)分化將莖上幼芽接種 MS+6-BA 4. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8培養(yǎng)基上，23± I°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，5周后直接分化形成葉片。誘導(dǎo)率達(dá)到了 81%。(3)生根的培養(yǎng)從中選取生長(zhǎng)健壯，葉片展開，長(zhǎng)度適中的誘導(dǎo)分化幼芽，轉(zhuǎn)入以1/3MS+NAA 0. 6mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L pH 5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23±1°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為7-10天；在3次重復(fù)處理，每次處理3組，每組9株的實(shí)驗(yàn)中，平均每個(gè)外植體生根7. 9條。(4)煉苗與移栽將生根后的成苗每隔25-30天重新轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，如此反復(fù)2-3次，這樣的成苗質(zhì)量?jī)?yōu)良，能經(jīng)受外界環(huán)境帶來的影響。將壯苗后的成苗瓶口打開，在培養(yǎng)室半遮光放置2-3日，期間適時(shí)補(bǔ)充水分，使組培苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境，達(dá)到煉苗的目的。將經(jīng)過煉苗的黃精從接種瓶中取出，用清水洗掉培養(yǎng)基，在質(zhì)量濃度0. 1%高錳酸鉀溶液中消毒lmin，用清水沖洗干凈后，假植在基質(zhì)[V(腐殖質(zhì)土)V(沙子)一1 1]上，保持空氣濕度95%以上，用遮光率75%遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭。30d后假植成活率達(dá)90%以上。以后每隔7d噴施I次MS營(yíng)養(yǎng)液。為了縮短培育時(shí)間，根據(jù)成苗的時(shí)間安排栽植，在春季以后成苗則選擇秋栽即9-10月下旬，在春季之前成苗則選擇春栽即3月下旬，將假植的黃精根莖栽種到整好的露地畦內(nèi)，將根莖段芽眼向上，每隔10 15cm平放I個(gè)根莖，行距20 25cm，覆土 4 6cm，澆足水；在土壤封凍前，畦面上蓋一層有機(jī)肥或薄膜，以利保暖越冬；成活率達(dá) 80%。實(shí)施例2(2)外植體的選擇與滅菌 選擇地藏黃精的當(dāng)年生(即栽植后第一年生長(zhǎng)出來的)帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖部分，塊莖先切成I. Ocm3左右的小塊，且每塊都必須帶有至少一個(gè)隱藏的芽點(diǎn)，自來水快速?zèng)_去泥沙，可用牙刷輔助沖洗，洗滌劑液浸泡30min并用軟刷輕輕刷去表面污垢，自來水沖洗3h，置于超凈工作臺(tái)上體積濃度75%酒精溶液滅菌15s，之后無菌水沖洗3遍，體積濃度0. 2%Hgcl2, Hgcl2溶液中包含有體積濃度0. 2%的吐溫20，浸泡14min，無菌水沖洗5遍；轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中吸干水分等待接入培養(yǎng)基?；旌狭送聹?0后的Hgcl2溶液消毒效果比原先沒有混合的溶液無菌率提高了 10倍。(2)塊莖的的分化增殖培養(yǎng)I)將帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖接種MS+6-BA 4. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5. 8培養(yǎng)基上，23± I°C、光照1500_2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為20-30天；中間剔除污染的外植體。81組平行試驗(yàn)中，I周后每個(gè)塊莖外植體長(zhǎng)出愈傷組織，但是在不轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基一直在分化培養(yǎng)基中6周后外植體也可獲得平均9. 8個(gè)不定芽，所需時(shí)間較長(zhǎng)，且最終產(chǎn)量不高。 2 )在塊莖組織分化形成愈傷組織后，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基為MS+6-BA 3. Omg/L+NAA0. 2mg/L+瓊脂 7g/L+蔗糖 30g/L，pH 5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度 23±1°C、光照 1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為10-20天。愈傷組織進(jìn)行增殖，進(jìn)行接下來的誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，將增殖后的愈傷組織切成I. 0cm*I. 0cm*I. Ocm大小然后再轉(zhuǎn)入原先的誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA 4. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8 培養(yǎng)基上，23± 1°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為15-25天。最終發(fā)現(xiàn)不定芽數(shù)量提高了 12倍左右，大大提高了組培苗量。同時(shí)也縮短了整個(gè)培育時(shí)間。(3)生根的培養(yǎng)從中選取生長(zhǎng)健壯，葉片展開，長(zhǎng)度適中的組織，切除多余的愈傷組織，轉(zhuǎn)入以1/3MS+NAA 0. 6mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L pH 5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23土1°C、光照1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為7_10天。在3次重復(fù)處理，每次處理3組，每組9株的實(shí)驗(yàn)中，平均每個(gè)外植體生根7. 7條。(4)煉苗與移栽生根后的成苗每隔25-30天重新轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基，如此反復(fù)2-3次，這樣的成苗質(zhì)量?jī)?yōu)良，能經(jīng)受外界環(huán)境帶來的影響。將壯苗后的成苗瓶口打開，在培養(yǎng)室半遮光放置2-3日，期間適時(shí)補(bǔ)充水分，使組培苗逐步適應(yīng)外界環(huán)境，達(dá)到煉苗的目的。
將經(jīng)過煉苗的黃精從接種瓶中取出，用清水洗掉培養(yǎng)基，在質(zhì)量濃度0. 1%高錳酸鉀溶液中消毒lmin，用清水沖洗干凈后，假植在基質(zhì)[V(腐殖質(zhì)土)V(沙子)一1 1]上，保持空氣濕度95%以上，用遮光率75%遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭。30d后假植成活率達(dá)90%以上。以后每隔7d噴施I次MS營(yíng)養(yǎng)液。為了縮短培育時(shí)間，根據(jù)成苗的時(shí)間安排栽植，在春季以后成苗則選擇秋栽即9-10月下旬，在春季之前成苗則選擇春栽即3月下旬，將假植的黃精根莖栽種到整好的露地畦內(nèi)，將根莖段芽眼向上，每隔10 15cm平放I個(gè)根莖，行距20 25cm，覆土 4 6cm，澆足水；在土壤封凍前，畦面上蓋一層有機(jī)肥或薄膜，以利保暖越冬；成活率達(dá) 75%。綜合以上各實(shí)驗(yàn)步驟，本發(fā)明的方法，在現(xiàn)有黃精、地藏黃精組織培養(yǎng)技術(shù)的基礎(chǔ)上添加了莖段芽直接誘導(dǎo)分化和塊莖組織培養(yǎng)過程。在增加的材料的利用率的同時(shí)對(duì)于不同的材料選擇不同的處理方法，能夠提高誘導(dǎo)率的同時(shí)增加增殖數(shù)量和質(zhì)量，從而適合大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)，解決原材料稀缺的問題，縮短的培育周期，使材料可以發(fā)揮更大的藥用 和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
權(quán)利要求
1.一種黃精的組織培養(yǎng)方法，其特征在于該方法按如下步驟進(jìn)行 (1)外植體的選擇與滅菌 選擇當(dāng)年生地下莖上的幼芽或當(dāng)年生帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖部分，所述塊莖將其切成小塊，且每塊都帶有至少一個(gè)隱藏的芽點(diǎn)； 將所述幼芽或塊莖用自來水快速?zèng)_去泥沙，并用洗滌劑液浸泡30min以除去表面污垢，然后自來水沖洗3h，再置于超凈工作臺(tái)用體積濃度75%酒精滅菌15s，無菌水沖洗3遍，再將其放入體積濃度0. 2%Hgcl2溶液中浸泡12-14min，所述Hgcl2溶液中含有體積濃度0.15%-02%的吐溫20，之后無菌水沖洗5遍，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)皿中吸干水分，等待接入培養(yǎng)基； (2)幼芽叢生芽的誘導(dǎo)、塊莖叢生芽愈傷組織培養(yǎng)和增殖培養(yǎng) A、將經(jīng)過步驟(I)處理的幼芽轉(zhuǎn)入?yún)采空T導(dǎo)培養(yǎng)基中，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為MS+6-BA 4. 0mg/L+NAA0. 2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23土 1°C、光照1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為20-30天；然后直接轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)； B、①將經(jīng)過步驟(I)處理的帶有隱藏芽點(diǎn)的的塊莖接種MS+6-BA4. Omg/L+NAA0.2mg/L+ 瓊脂 7g/L+ 蔗糖 30g/L，pH=5. 8 培養(yǎng)基上，23± 1°C、光照 1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為20-30天；中間剔除污染的塊莖外植體；②在塊莖組織分化形成愈傷組織后，將誘導(dǎo)出的的愈傷組織轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基為MS+6-BA 3. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L，pH 5. 8 ;培養(yǎng)條件為溫度23±1°C、光照1500-2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為10-20天；愈傷組織進(jìn)行增殖，然后將增殖后的愈傷組織切成1.0cm*I. 0cm*I. Ocm大小，再轉(zhuǎn)入原先的誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BA 4. Omg/L+NAA 0. 2mg/L+瓊脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5. 8培養(yǎng)基上，23± 1°C、光照1500_2000Lx ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為15-25天； (3)生根的培養(yǎng) 將經(jīng)過步驟(2)處理的外植體轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述生根培養(yǎng)基的配方為l/2-l/3MS、NAA 0. 2-0. 5mg/L、瓊脂 6_8g/L、蔗糖 20_30g/L ;培養(yǎng)條件為溫度 23±1°C、光照1500-2000LX ;光照時(shí)間為10-12小時(shí)/天，培養(yǎng)時(shí)間為35-50天； (4)煉苗和移栽 將經(jīng)過煉苗的黃精根莖從接種瓶中取出，用清水洗掉培養(yǎng)基，在質(zhì)量濃度0. 1%高錳酸鉀溶液中消毒lmin，用清水沖洗干凈后，假植在腐殖質(zhì)土 沙子=1:1 (v v)的基質(zhì)上，保持空氣濕度95%以上，用遮陽(yáng)網(wǎng)遮蔭；根據(jù)成苗的時(shí)間安排栽植，在春季以后成苗則選擇秋栽即9-10月下旬，在春季之前成苗則選擇春栽即3月下旬，將假植的黃精根莖栽種到整好的露地畦內(nèi)，將根莖段芽眼向上，每隔10 15cm平放I個(gè)根莖，行距20 25cm，覆土 4 6cm，澆足水；在土壤封凍前，畦面上蓋一層有機(jī)肥或薄膜，以利保暖越冬。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種黃精的組織培養(yǎng)方法，對(duì)當(dāng)年生地下莖上的幼芽進(jìn)行叢生芽誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)、煉苗后進(jìn)行移栽；對(duì)當(dāng)年生帶有隱藏芽點(diǎn)的塊莖部分進(jìn)行愈傷組織培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗后進(jìn)行移栽，通過該方法可以對(duì)黃精進(jìn)行快速繁殖，并實(shí)現(xiàn)大面積工業(yè)化種植，以解決野生地藏黃精產(chǎn)量低、供應(yīng)少和自然栽培周期長(zhǎng)的問題。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102771395SQ20121028656
公開日2012年11月14日 申請(qǐng)日期2012年8月13日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月13日
發(fā)明者任潔, 湯鋒, 沈周高, 王進(jìn), 趙華琳, 項(xiàng)艷 申請(qǐng)人:安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)