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一種鮭鱒魚三倍體苗種的制備方法

文檔序號:193295閱讀:221來源:國知局
專利名稱:一種鮭鱒魚三倍體苗種的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及水產(chǎn)生物育種技術(shù)領(lǐng)域,具體地涉及鮭鱒魚的一種雜交三倍體苗種的制備方法。
背景技術(shù)
鮭鱒魚是目前世界上主要養(yǎng)殖的魚類之一,自然條件下它們多生長于常年水溫不超過20°C、水質(zhì)為貧營養(yǎng)性、沒有化學(xué)污染和有機(jī)污染的低溫泉水或清澈的溪流中,因此又稱之為冷水性魚類。由于鮭科魚類對生存水質(zhì)有非常高的要求,略有污染即無法生存,所以鮭鱒魚體干凈,無任何污染,是名副其實的無公害綠色食品,吃起來放心。另外,鮭鱒魚是一種高蛋白、高脂肪、低膽固醇(膽固醇含量微乎其微)的魚類。和其它魚相比,鮭鱒魚含有一般魚類所缺乏的甘氨酸,維生素A、B的含量也高于其它魚類,微量元素鐵的含量更是其它魚類所不及。鮭鱒魚肉質(zhì)鮮嫩,無邪味,無腥味,無需刮鱗,人每周吃兩次鮭鱒魚就可以預(yù)防血栓病的發(fā)生。意大利專家一項最新的研究結(jié)果表明,吃含有鮭鱒魚的保健品能夠大幅 度減少心臟病患者突然死亡的風(fēng)險。每天吃I克用鮭鱒魚魚油提煉的DHA,將會減少心臟病發(fā)作時突然死亡的風(fēng)險。因此,鮭鱒魚是一種肉質(zhì)鮮美且具有保健價值的魚類。由于其自身的品質(zhì)和對生活環(huán)境的特殊要求,決定了它綠色、環(huán)保營養(yǎng)食品的性質(zhì),因此頗受消費者的青睞。鮭鱒魚是我國目前主要的冷水性養(yǎng)殖魚類,由于長期近親繁殖、缺乏系統(tǒng)選育等原因,導(dǎo)致養(yǎng)殖個體出現(xiàn)了性早熟、個體小型化、病害滋生等問題,不能滿足消費者對大規(guī)格鮭鱒魚的需求,造成養(yǎng)殖效益下降。研究表明虹鱒魚三倍體具有可將能量全部用于體細(xì)胞生長,從而提高餌料轉(zhuǎn)化率,在幼魚期和成熟期三倍體普遍比二倍體生長快;避免了性腺發(fā)育階段和產(chǎn)卵季節(jié)因能量轉(zhuǎn)移和婚姻色出現(xiàn)而導(dǎo)致的魚肉品質(zhì)下降及表觀特征變化;抗病能力較二倍體更強(qiáng)(水霉病、IHN病毒病)等優(yōu)點,已成為國內(nèi)外水產(chǎn)科學(xué)工作者的研究熱點,自上世紀(jì)80年代以來,三倍體魚類的人工誘導(dǎo)工作取得了長足進(jìn)展。國內(nèi)對鮭鱒魚三倍體苗種制備的研究主要集中在純種虹鱒魚的三倍體制備,其方法為熱休克法或靜水壓方法。現(xiàn)有熱休克方法制備純種三倍體虹鱒魚的技術(shù)是當(dāng)在26. 5°C的條件下,受精卵發(fā)眼率為67. 80 % -70. 28 %,魚苗三倍體率能夠達(dá)到50% -65% ;當(dāng)在28°C條件下,受精卵發(fā)眼率為29. 78% -32. 75%,魚苗三倍體率能夠達(dá)到80.95% -83. 18% ;在30°C條件下,能夠得到非常高的三倍體率,達(dá)到90%以上,但其發(fā)眼率通常不超過10%,且苗種畸形率高,始終無法形成規(guī)?;a(chǎn),其原因為現(xiàn)有的純種生產(chǎn)三倍體苗種制備技術(shù)或無法達(dá)到生產(chǎn)要求的三倍體率或無法達(dá)到可用于生產(chǎn)的苗種成活率。因此,迫切需要一種技術(shù)成熟的鮭鱒魚三倍體育苗技術(shù),提高受精卵的發(fā)眼率和苗種三倍體率,從而實現(xiàn)鮭鱒魚雜交三倍體苗種的規(guī)模化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種鮭鱒魚雜交三倍體苗種制備方法,以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明提供的鮭鱒魚三倍體苗種的制備方法,包括以下步驟(I)鱒魚親魚卵子與鮭魚親魚精子進(jìn)行雜交;(2)熱休克法處理受精卵;
(3)降溫處理受精卵;(4)受精卵在養(yǎng)殖用水中孵化。本發(fā)明的鮭鱒魚雜交三倍體苗種的制備方法,優(yōu)選鱒魚親魚為硬頭鱒,鮭魚親魚為北極紅點鮭。進(jìn)一步地,本發(fā)明方法的步驟(I)雜交前按照常規(guī)方法使親魚同步發(fā)育成熟,硬頭鱒親魚培育水溫為10-13°C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為8-10°C,流水池水交換量為4h/次。本發(fā)明方法中,所述步驟(I)采用擠壓法將魚卵取出;精液用孵化用水清洗,方法為精液與孵化用水的體積比為1-1. 5 2500-3000,攪拌0. 5-1. 5min后倒掉水,同樣方法反復(fù)沖洗3-5次。本發(fā)明方法中,所述步驟⑵熱休克法處理方法為魚卵受精14_16min后,將受精卵迅速移入17. 5-18. 5°C水體中預(yù)熱4-6min ;之后迅速移入25. 5-26. 5°C水體中,處理19_21min0本發(fā)明方法中,所述步驟⑶降溫處理方法為將步驟2)熱處理的受精卵迅速移A 17. 5-18. 5°C水體中,降溫處理時間為4-6min。本發(fā)明方法中,所述步驟(4)受精卵的孵化條件為5_13°C水體孵化55-65天。本發(fā)明提供一種鮭鱒魚三倍體苗種的制備方法,具體操作為選取硬頭鱒雌魚魚卵和北極紅點鮭魚雄魚精子進(jìn)行雜交受精,魚卵受精15min后,將受精卵迅速移入18°C水體中預(yù)熱5min ;之后迅速移入26°C水體中開始熱休克處理,保持水溫26°C恒定,處理20min ;之后迅速將受精卵移入18°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為5min ;之后迅速將受精卵移入7-7. 5°C水體中正常孵化60天,得到鮭鱒魚三倍體魚苗。本發(fā)明制備方法所用的水體均為符合國家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的孵化用水。本發(fā)明提供了上述制備方法在鮭鱒魚三倍體苗種育種工作中的應(yīng)用。本發(fā)明采用硬頭鱒雌魚與北極紅點鮭雄魚的雜交技術(shù),通過熱休克的方法抑制受精卵第二極體的排出,實現(xiàn)了硬頭鱒雌魚與北極紅點鮭雄魚的雜交三倍體苗種的制備,受精卵發(fā)眼率達(dá)到75%,苗種孵化率達(dá)到90%以上,苗種三倍體率達(dá)到90% -95%,本發(fā)明方法受精卵發(fā)眼率與正常鮭鱒魚生產(chǎn)相同,三倍體率達(dá)到了生產(chǎn)需求,得到的苗種同時具有雜交優(yōu)勢和三倍體優(yōu)勢,從而提高鮭鱒魚養(yǎng)殖生產(chǎn)的商品魚規(guī)格和鮭鱒魚生長速度,緩解了虹鱒魚養(yǎng)殖過程中由于長期的近親繁殖和缺乏系統(tǒng)的選育,導(dǎo)致養(yǎng)殖個體出現(xiàn)了性早熟、個體小型化、病害滋生等問題,同時雜交三倍體具有雜交和三倍體兩種優(yōu)勢,在生長速度和抗病能力上明顯優(yōu)于現(xiàn)有的二倍體虹鱒魚,具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和市場價值。
具體實施例方式以下實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的內(nèi)容,但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。在不背離本發(fā)明精神和實質(zhì)的情況下,對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換,均屬于本發(fā)明的范圍。若未特別指明,實施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。本發(fā)明的硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚均為北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所由北歐瑪生物科技有限公司購買的發(fā)眼卵培育而成。實施例I鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(I)采用水流刺激,控制光照等手段,使硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚同步發(fā)育成熟。硬頭鱒親魚培育水溫為10°c,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為8°C,流水池水交換量為4h/次。魚卵采用干法受精。先將發(fā)育成熟的硬頭鱒雌魚采用擠壓法將魚卵擠入干凈的瓷盆內(nèi),每4尾雌魚為I組,再將2尾雄性北極紅點鮭的精液擠入水盆內(nèi),立即攪拌均勻,加入精液與孵化用水的體積比為I : 2500的孵化用水,輕輕攪拌,Imin后將水倒出,反復(fù)3次,將精液清洗干凈,放置等待處理。硬頭鱒魚卵受精15min后,將受精卵迅速移入18°C水體中預(yù)熱5min ;之后迅速移A 25. 5°C水體中,開始熱休克處理,期間保持水溫在25. 5°C,處理時間為20min ;之后迅速移入18°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為5min ;之后迅速移入13°C的孵化水體中正常孵化。經(jīng)過62天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為75%,苗種孵化率為92%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為93%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的81. 5%。實施例2鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(2)采用水流刺激,控制光照等手段,使硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚同步發(fā)育成熟。硬頭鱒親魚培育水溫為13°C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為10°C,流水池水交換量為4h/次。魚卵采用干法受精。先將發(fā)育成熟的硬頭鱒雌魚采用擠壓法將魚卵擠入干凈的瓷盆內(nèi),每4尾雌魚為I組,再將2尾雄性北極紅點鮭的精液擠入水盆內(nèi),立即攪拌均勻,加入精液與孵化用水的體積比為I : 3000的孵化用水,輕輕攪拌,I. 5min后將水倒出,反復(fù)4次,將精液清洗干凈,放置等待處理。硬頭鱒魚卵受精14min后,將受精卵迅速移入18. 5°C水體中預(yù)熱4min ;之后迅速移入26°C水體中,開始熱休克處理,期間保持水溫在26°C,處理時間為21min ;之后迅速移A 18. 5°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為4min ;之后迅速移入7°C的孵化水體中正常孵化。經(jīng)過63天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為76%,苗種孵化率為91%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為90%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的79. 5%。實施例3鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(3)采用水流刺激,控制光照等手段,使硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚同步發(fā)育成熟。硬頭鱒親魚培育水溫為12°C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為9°C, 流水池水交換量為4h/次。魚卵采用干法受精。先將發(fā)育成熟的硬頭鱒雌魚采用擠壓法將魚卵擠入干凈的瓷盆內(nèi),每4尾雌魚為I組,再將2尾雄性北極紅點鮭的精液擠入水盆內(nèi),立即攪拌均勻,加入精液與孵化用水的體積比為I. 5 3000的孵化用水,輕輕攪拌,0. 5min后將水倒出,反復(fù)5次,將精液清洗干凈,放置等待處理。硬頭鱒魚卵受精16min后,將受精卵迅速移入17. 5°C水體中預(yù)熱6min ;之后迅速移入26. 5°C水體中, 開始熱休克處理,期間保持水溫在26. 5°C,處理時間為19min ;之后迅速移入17. 5°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為6min ;之后迅速移入5°C的孵化水體中正
常孵化。經(jīng)過60天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為80%,苗種孵化率為96%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為95%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的80. 2%。實施例4鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(4)采用水流刺激,控制光照等手段,使硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚同步發(fā)育成熟。硬頭鱒親魚培育水溫為11 °C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為10°C,流水池水交換量為4h/次。魚卵采用干法受精。先將發(fā)育成熟的硬頭鱒雌魚采用擠壓法將魚卵擠入干凈的瓷盆內(nèi),每4尾雌魚為I組,再將2尾雄性北極紅點鮭的精液擠入水盆內(nèi),立即攪拌均勻,加入精液與孵化用水的體積比為1.5 2500的孵化用水,輕輕攪拌,Imin后將水倒出,反復(fù)4次,將精液清洗干凈,放置等待處理。硬頭鱒魚卵受精15min后,將受精卵迅速移入18°C水體中預(yù)熱5min ;5min后迅速移入26°C水體中,開始熱休克處理,期間保持水溫在26°C,處理時間為20min ;之后迅速移入18°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為5min ;之后迅速移入10°C的孵化水體中正常孵化。經(jīng)過55天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為77%,苗種孵化率為95%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為94%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的85. 3%。實施例5鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(5)采用水流刺激,控制光照等手段,使硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚同步發(fā)育成熟。硬頭鱒親魚培育水溫為12°C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為8°C,流水池水交換量為4h/次。魚卵采用干法受精。先將發(fā)育成熟的硬頭鱒雌魚采用擠壓法將魚卵擠入干凈的瓷盆內(nèi),每4尾雌魚為I組,再將2尾雄性北極紅點鮭的精液擠入水盆內(nèi),立即攪拌均勻,加入精液與孵化用水的體積比為I : 2800的孵化用水,輕輕攪拌,I. 5min后將水倒出,反復(fù)3次,將精液清洗干凈,放置等待處理。硬頭鱒魚卵受精16min后,將受精卵迅速移入18°C水體中預(yù)熱6min ;之后迅速移A 26. 2°C水體中,開始熱休克處理,期間保持水溫在26. 2°C,處理時間為19min ;之后后迅速移入18°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為6min ;之后迅速移入12°C的孵化水體中正常孵化。經(jīng)過65天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為79%,苗種孵化率為90%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為95%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的81. 5%。實施例6鮭鱒魚三倍體苗種制備方法(6)采用硬頭鱒親魚和北極紅點鮭親魚,親魚同步發(fā)育成熟、魚卵受精的方法與實施例1-5的方法相同。硬頭鱒魚卵受精I(xiàn)Omin后,將受精卵迅速移入20°C水體中預(yù)熱5min ;之后迅速移A 28°C水體中,開始熱休克處理,期間保持水溫在28°C,處理時間為15min ;之后迅速移入20°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為5min ;之后迅速移入12°C的水體中正常孵化。經(jīng)過32天孵化出魚苗,期間三倍體受精卵發(fā)眼率為70%,苗種孵化率為75%,其苗種經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測為三倍體率為90%的硬頭鱒與北極紅點鮭的雜交三倍體。發(fā)眼卵至4月齡階段三倍體成活率為發(fā)眼階段的5. 56%??梢娛褂帽緦嵤├姆椒ǖ玫降碾s交三倍 體發(fā)眼率、孵化率和成活率均低于實施例1-5方法得到的雜交三倍體。說明預(yù)熱水溫、熱休克水溫的不同對誘導(dǎo)雜交三倍體能夠產(chǎn)生不同的結(jié)果。因此,選擇(18±0. 5) °C的預(yù)熱水溫和(26±0. 5) °C的熱休克水溫能夠誘導(dǎo)高質(zhì)量的雜交三倍體。實施例7本發(fā)明培育的三倍體苗種生長速度和抗病能力驗證I、實驗用魚分別為實施例1-5方法制備得到的雜交三倍體魚種,虹鱒魚種(為正常二倍體魚種),均無傷病、體質(zhì)健壯;其中實施例1-5方法培育的雜交三倍體苗種平均規(guī)格為16. 8g/尾,共6000尾,虹鱒魚種平均規(guī)格為16. 5g/尾,共6000尾;投喂北京產(chǎn)冷水魚魚種配合飼料。2、試驗方法雜交三倍體魚種和虹鱒魚種分別在兩個魚種培育池中單獨喂養(yǎng),魚種培育池均采用水泥池流水培育,魚種培育池面積為40m2,水深0. 8m,水流量為151/s,苗種培育水溫在為13.9°C-14.8°C之間;魚種放養(yǎng)密度為150尾/m2;每天投喂3次,分別為8:00、12:00、16:00,投喂飼料量為魚體重的2. 7%。3、日常管理每隔5天,排干池水,清理池底I次,每天清晨檢測養(yǎng)殖池溶氧I次;試驗期間每隔20天隨機(jī)取樣100尾稱重I次。4、結(jié)果I、魚種培育試驗共經(jīng)歷100天,本發(fā)明實施例1-5方法培育的雜交三倍體魚種總重量從投放時的100. 8kg增重至977. 8kg,增重8. 7倍;虹鱒魚種總重量從投放時的99kg增重至796kg,增重7. I倍,雜交三倍體魚種的生長速度較虹鱒快22. 5%。2、兩種魚種投喂相冋的北點廣的冷水魚魚種詞料,投喂量均為魚體重的2.7*%,每20天調(diào)整一次投喂量,試驗期間雜交三倍體魚種池共投喂飼料947. 2kg,虹鱒魚種投喂飼料858. 2kg,經(jīng)測算后得到本發(fā)明育得的雜交三倍體鮭鱒魚的飼料系數(shù)為1.08 ;虹鱒的飼料系數(shù)為I. 23,可以發(fā)現(xiàn)雜交三倍體鮭鱒魚的飼料利用效率是虹鱒魚種飼料利用效率的
I.2 倍。3、試驗所用魚種均為體格健壯,無傷病的魚種,在試驗期間沒有發(fā)病現(xiàn)象,因此本次試驗魚種培育的成活率均很高,雜交三倍體魚種培育成活率達(dá)到99. 7%,虹鱒苗種培育成活率達(dá)到99. 6%,無明顯的差異。綜上所述,雜交三倍體魚種無論在生長速度上還是在飼料利用效率上,都較虹鱒有明顯的優(yōu)勢,具有 廣闊的推廣空間,生產(chǎn)中甚至有取代虹鱒的趨勢。
權(quán)利要求
1.一種鮭鱒魚雜交三倍體苗種的制備方法,其特征在于,包括以下步驟 1)鱒魚親魚卵子與鮭魚親魚精子進(jìn)行雜交; 2)熱休克法處理受精卵; 3)降溫處理受精卵; 4)受精卵在養(yǎng)殖用水中孵化。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,所述鱒魚親魚為硬頭鱒,所述鮭魚親魚為北極紅點鮭。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法,其特征在于,步驟I)雜交前按照常規(guī)方法使親魚同步發(fā)育成熟,硬頭鱒親魚培育水溫為10-13°C,流水池水交換量為2h/次;北極紅點鮭親魚培育水溫為8-10°C,流水池水交換量為4h/次。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,所述步驟I)采用擠壓法將魚卵取出;精液用孵化用水清洗,方法為精液與孵化用水的體積比為1-1.5 2500-3000,攪拌1-1. 5min后倒掉水,同樣方法反復(fù)沖洗3-5次。
5.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,所述步驟2)熱休克法處理方法為魚卵受精14-16min后,將受精卵迅速移入17. 5-18. 5°C水體中預(yù)熱4_6min ;之后迅速移入25. 5-26. 5°C水體中,處理 19-21min。
6.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,所述步驟3)降溫處理方法為將步驟2)熱處理的受精卵迅速移入17. 5-18. 5°C水體中,降溫處理時間為4-6min。
7.如權(quán)利要求I所述的制備方法,其特征在于,所述步驟4)受精卵的孵化條件為5-13°C水體孵化55-65天。
8.一種鮭鱒魚雜交三倍體苗種的制備方法,其特征在于,選取硬頭鱒雌魚魚卵和北極紅點鮭魚雄魚精子進(jìn)行雜交受精,魚卵受精15min后,將受精卵迅速移入18°C水體中預(yù)熱5min ;之后迅速移入26°C水體中開始熱休克處理,保持水溫26°C恒定,處理20min ;之后迅速將受精卵移入18°C水體中進(jìn)行降溫處理,處理時間為5min ;之后迅速將受精卵移入7V水體中正常孵化60天,得到鮭鱒魚三倍體魚苗。
9.如權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述水體為符合國家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的孵化用水。
10.權(quán)利要求1-9任一所述方法在鮭鱒魚雜交三倍體苗種育種工作中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種鮭鱒魚三倍體苗種的制備方法。本發(fā)明將硬頭鱒雌性親魚與北極紅點鮭雄性親魚雜交,7℃條件下,受精卵受精20min后移入26℃水體中熱休克20min后,入7℃水體中孵化60天左右,受精卵孵化出仔魚。孵化期間受精卵發(fā)眼率為75%以上,苗種孵化率達(dá)到90%以上,得到的仔魚經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測,三倍體率為90%-95%。本發(fā)明提供的鮭鱒魚三倍體苗種制備方法,緩解了虹鱒魚養(yǎng)殖過程中由于長期的近親繁殖和缺乏系統(tǒng)的選育,導(dǎo)致養(yǎng)殖個體出現(xiàn)了性早熟、個體小型化、病害滋生等問題,同時雜交三倍體具有雜交和三倍體兩種優(yōu)勢,在生長速度和抗病能力上明顯優(yōu)于現(xiàn)有的二倍體虹鱒魚,具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和市場價值。
文檔編號A01K61/00GK102696515SQ20121018003
公開日2012年10月3日 申請日期2012年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月1日
發(fā)明者徐紹剛, 楊曉飛, 楊貴強(qiáng), 王躍智 申請人:北京市水產(chǎn)科學(xué)研究所
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