專利名稱：一種發(fā)酵飼料添加劑、制備方法及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及動物飼料技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及ー種發(fā)酵飼料添加剤。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的不斷提高，人們對食品質(zhì)量和食品安全的重視越來越高。特別是近幾年來發(fā)生的三聚氰胺、瘦肉精等一系列事件，越發(fā)引起人們對食品安全的重視。因此，作為動物性食品的源頭的動物飼料的質(zhì)量顯得尤為重要。目前，在動物飼養(yǎng)過程中，需要不斷添加抗生素、激素等粗生長添加剤，致使生產(chǎn)出的肉質(zhì)不僅ロ感很差，且含有很多藥物殘留，人食用后増加人的抗藥性，影響人們的身體健康。因此，為了增強(qiáng)養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)質(zhì)量和減少藥物殘留，利用生物工程手段生產(chǎn)ー種不含抗生素的發(fā)酵飼料技術(shù)，已成為飼料行業(yè)的必然趨勢。但限于發(fā)酵菌種和發(fā)酵エ藝的限制，發(fā)酵飼料技術(shù)難以健康快速發(fā)展。飼料行業(yè)的高速發(fā)展，使得飼料行業(yè)對糧食原料的需求量越來越高，甚至出現(xiàn)人和牲畜爭搶糧食能源等現(xiàn)象。為了緩和人畜相爭的局面，充分利用好原料副料，降低飼料成本和養(yǎng)殖成本，利用副料發(fā)展發(fā)酵飼料成為ー種趨勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的第一個技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種能減少抗生素的使用和應(yīng)激，增強(qiáng)動物免疫力、降低養(yǎng)殖成本并提高動物肉質(zhì)ロ感的發(fā)酵飼料添加剤。本發(fā)明所要解決的第二個技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種能減少抗生素的使用和應(yīng)激，增強(qiáng)動物免疫力、生產(chǎn)成本低、降低養(yǎng)殖成本并提高動物肉質(zhì)ロ感的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法。本發(fā)明所要解決的第三個技術(shù)問題是提供一種能減少抗生素的使用和應(yīng)激，增強(qiáng)動物免疫力、降低養(yǎng)殖成本并提高動物肉質(zhì)ロ感的發(fā)酵飼料添加劑在動物飼料中的應(yīng)
ο為解決上述第一個技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是
ー種發(fā)酵飼料添加剤，由混合菌種與包括以下原料的混合輔料發(fā)酵配制而成味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉，所述混合菌種是將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種按照1 5 :1 5 :1 5 :1 5 :1 5 :1 5的比例混合得到的。優(yōu)選的，所述混合輔料包括以下重量百分比的原料配制而成
味精蛋白8へ^ 15%,豆粕6へ‘10%,麩皮10 ‘ 20%,棉粕8へ‘12%,玉米纖維15 ‘ 25%,米糠 14 28%， 稻殼粉 20 35%。為解決上述第二個技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是 ー種發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟
(1)混合菌種的制備在無菌條件下，分別將所述嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌活化培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌活化培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌活化培養(yǎng)基中，在 36 38°C活化培養(yǎng)42 M小時；再將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌液體培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌液體培養(yǎng)基中，在 36 38°C擴(kuò)大培養(yǎng)68 82小時；然后將第一次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌液體培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌液體培養(yǎng)基中，接種量為體積比8 12%，在36 38°C第二次擴(kuò)大培養(yǎng)42 M小吋，所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種在第一次擴(kuò)大培養(yǎng)時在恒溫?fù)u床中進(jìn)行，在第二次擴(kuò)大培養(yǎng)時在通風(fēng)條件下進(jìn)行；將第二次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各菌種按照1 5:1 5:1 5:1 5:1 5 :1 5的比例混合得到混合菌種。(2)混合發(fā)酵將味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉分別按照 8 15%、6 10%、10 20%、8 12%、15 25%、14 28%和20 35%的重量比混合得到混合輔料；將所述混合菌種按照1:4 6的重量比用去離子水稀釋，加入與稀釋液重量比為 1 2 :50的糖得到混合菌液；將所述混合菌液按照25 35%的接種比，接種到所述混合輔料中并混合攪拌均勻，M 26°C在發(fā)酵室內(nèi)發(fā)酵5 7天，得到發(fā)酵飼料添加劑產(chǎn)品，所述發(fā)酵飼料添加劑中嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種的數(shù)量分別彡0. 3 X IO8個/克、0. 4X IO8個/克、0. 2 X IO8個/克、
0.6X IO8 個 / 克、0. 5X IO8 個 / 克和 0. 3X IO8 個 / 克。其中，所述乳酸菌活化培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10 12g/l、肉膏10 12g/l、酵母提取物5 8g/l、K2HP042 4g/l、檸檬酸三銨2 4g/l、乙酸鈉5 8g/l、葡萄糖20 25g/l、Tween80 1 2mL/l、MgS04 ·7Η20 0· 58 lg/l、MnS044H20 0· 25 0. 5g/l、瓊脂 20 25g/l和CaCO3IO 12g/l ；所述酵母菌活化培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯200 220g/l、葡萄糖 20 25g/l和瓊脂20 25g/l ；所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基的配方為酵母浸粉0. 7 0. 9g/
1、蛋白胨1 1. 2g/l、葡萄糖 1 1. 2g/l、MgS04 0. 2 0. 3g/l,K2HPO4I 1. 2g/l、硫酸銨
0.2 0. 3g/l 和瓊脂 20 25g/l。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10 12g/l、肉膏10 12g/l、酵母提取物5 8g/l、K2HP042 4g/l、檸檬酸三銨2 4g/l、乙酸鈉5 8g/l、葡萄糖20 25g/
1、Tween801 2mL/l、MgSO4 · 7H20 0. 58 lg/l、MnS044H20 0. 25 0. 5g/l 和 CaCO3IO 12g/l ；所述酵母液體培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯200 220g/l和葡萄糖20 25g/l ；所述芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的配方為酵母浸粉0. 7 0. 9g/l、蛋白胨1 1. 2g/l、葡萄糖1 1. 2g/l、MgSO4 0. 2 0. 3g/l、K2HPO4I 1. 2g/l 和硫酸銨 0. 2 0. 3g/l。優(yōu)選的，所述乳酸菌活化培養(yǎng)基或乳酸菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述各培養(yǎng)基配方混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 2 6. 4，在121°C滅菌15 20分鐘；所述酵母菌活化培養(yǎng)基或酵母菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述馬鈴薯制備成馬鈴薯汁再與各培養(yǎng)基配方混合；所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基或芽孢桿菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述各培養(yǎng)基配方混合后PH值調(diào)節(jié)至 7. 2 7. 4，在121°C滅菌15 20分鐘。作為ー種改進(jìn)，將所述混合菌液與所述混合輔料混合均勻后，用發(fā)酵飼料袋包裝后放入發(fā)酵室進(jìn)行發(fā)酵。所述發(fā)酵飼料袋為具有單向排氣功能的包裝膜，又名單向排氣閥袋，使用所述發(fā)酵飼料袋包裝發(fā)酵飼料后，既保證了發(fā)酵過程的通風(fēng)，還保證了發(fā)酵環(huán)境的無菌狀態(tài)。所述發(fā)酵飼料袋為市售產(chǎn)品，例如蒼南縣俊達(dá)包裝エ藝廠生產(chǎn)的發(fā)酵飼料袋。ー種動物飼料添加劑在動物飼料中的應(yīng)用，所述發(fā)酵飼料添加劑用作動物飼料時的添加量為動物飼料的5 100wt%。由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果是
1、本發(fā)明的發(fā)酵飼料添加剤，采用嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種作為混合菌種，選取的菌種能迅速適應(yīng)強(qiáng)酸的胃環(huán)境，進(jìn)入腸道的通過率和定植率高；所述混合菌種發(fā)酵后能產(chǎn)生大量的益生菌、消化酶、B族維生素、溶菌酶、過氧化氫酶、代謝因子和其他代謝產(chǎn)物，益生菌進(jìn)入腸道后能迅速繁殖，刺激腸道附近的免疫細(xì)胞増殖，在腸道內(nèi)能有效控制內(nèi)毒素，對痢疾桿菌、傷寒桿菌、 副傷寒桿菌、彎曲桿菌、葡萄球菌等有拮抗作用，增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，減少動物飼養(yǎng)過程中抗生素藥物的使用；消化酶能促進(jìn)飼料的消化分解，特別是對粗纖維的分解利用，提高飼料的轉(zhuǎn)化利用率；溶菌酶、過氧化氫酶等物質(zhì)可降解或抑制腸道內(nèi)雜菌的生長，調(diào)理腸道菌群平衡；發(fā)酵后的飼料具有獨特的酵香氣味，誘食效果好，適ロ性佳，可促進(jìn)動物進(jìn)食。而且本發(fā)明在制備過程中不會排放廢液和廢物，減少了對環(huán)境的污染及環(huán)保處理費用。2、本發(fā)明將混合菌種接種到原料輔料中發(fā)酵后得到，充分利用豆粕、麩皮、棉粕等原料輔料，降低了動物養(yǎng)殖過程中的糧食消耗，緩解了人畜相爭的困境，生產(chǎn)的發(fā)酵飼料添加劑可以按比例添加到動物飼料中，也可以全部代替動物飼料使用，不僅可以減少或者避免使用抗生素類藥品，降低了養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖成本，減輕了養(yǎng)殖工作量，而且生產(chǎn)的動物產(chǎn)品肉質(zhì)鮮美，且沒有藥物殘留。3、本發(fā)明發(fā)酵過程采用發(fā)酵飼料袋包裝后進(jìn)行發(fā)酵，簡化了發(fā)酵條件，降低了發(fā)酵過程中因雜菌污染影響發(fā)酵質(zhì)量的問題，減少了發(fā)酵過程中因霉變因素對原料的浪費。
具體實施例方式下面結(jié)合具體的實施例，進(jìn)ー步闡述本發(fā)明。實施例1
在無菌條件下，分別將所述嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有乳酸菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述乳酸菌活化培養(yǎng)基是將蛋白胨10g/l、肉膏10g/l、酵母提取物5g/l、K2HP042g/l、檸檬酸三銨2g/l、乙酸鈉5g/l、葡萄糖 20g/l、Tween80 ImL/UMgSO4 · 7H20 0. 58g/l、MnS044H20 0. 25g/l、瓊月旨 20g/l 和 CaCO3IOg/ 1混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 2，在121°C滅菌15分鐘得到；將所述釀酒酵母菌的菌種用接種針刮取ー環(huán)，接種至盛有酵母菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述酵母菌活化培養(yǎng)基是將馬鈴薯 200g/l制備成馬鈴薯汁、葡萄糖20g/l和瓊脂20g/l混合后得到；將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有芽孢桿菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基是將酵母浸粉0. 7g/l、蛋白胨lg/Ι、葡萄糖lg/1、MgSO4 0. 2g/l、 K2HP04lg/l、硫酸銨0. 2g/l和瓊脂20g/l混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 2，在121°C滅菌15分鐘得到；各菌種在36°C活化培養(yǎng)42小時；再將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，并將三角瓶置于恒溫?fù)u床中，將所述釀酒酵母菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用無菌接種針刮取ー針，接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，各菌種在36°C擴(kuò)大培養(yǎng)68小時； 然后將第一次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，各菌種接種量均為體積比8%，在36°C第二次擴(kuò)大培養(yǎng)42小吋，其中枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的第二次擴(kuò)大培養(yǎng)需在通風(fēng)條件下進(jìn)行。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基是將蛋白胨10g/l、肉膏10g/l、酵母提取物5g/l、K2HP042g/l、檸檬酸三銨2g/l、乙酸鈉5g/l、 葡萄糖 20g/l、Tween8O ImL/UMgSO4 · 7H2O 0. 58g/l, MnS044H20 0. 25g/l 和 CaCO3IOg/!混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 2，在121°C滅菌15分鐘得到；所述酵母液體培養(yǎng)基是將馬鈴薯200g/l 制備成馬鈴薯汁然后和葡萄糖20g/l混合后得到；所述芽孢桿菌液體培養(yǎng)基是將酵母浸粉
0.7g/l、蛋白胨 lg/Ι、葡萄糖 lg/1,MgSO4 0. 2g/l、K2HP04lg/l 和硫酸銨 0. 2g/l 混合后 PH值調(diào)節(jié)至7. 2，在121°C滅菌15分鐘得到。將第二次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各菌種按照1 :1 1 1 1 1的比例混合得到混合菌種。將輔料味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉分別按照8%、6%、10%、 8%、15%、14%和20%的重量比混合得到混合輔料；將所述混合菌種按照1:4的重量比用去離子水稀釋，加入與稀釋液重量比為1 :50的糖得到混合菌液；將所述混合菌液按照25%的接種比，接種到所述混合輔料中并混合攪拌均勻，用發(fā)酵飼料袋包裝后放入發(fā)酵室， 在發(fā)酵室內(nèi)發(fā)酵5天，得到發(fā)酵飼料添加劑產(chǎn)品，所述發(fā)酵飼料添加劑中嗜酸乳酸桿菌、 植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種的數(shù)量分別彡 0. 3X IO8 個 / 克、0. 4X IO8 個 / 克、0. 2X IO8 個 / 克、0. 6X IO8 個 / 克、0. 5X IO8 個 / 克和0. 3X IO8個/克。實施例2
在無菌條件下，分別將所述嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有乳酸菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述乳酸菌活化培養(yǎng)基是將蛋白胨12g/l、肉膏12g/l、酵母提取物8g/l、K2HP044g/l、檸檬酸三銨4g/l、乙酸鈉8g/l、葡萄糖 25g/l、Tween8O 2mL/l、MgSO4 · 7H20 lg/1、MnS044H20 0. 5g/l、瓊月旨 25g/l 和 CaC0312g/ 1混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 4，在121°C滅菌20分鐘得到；將所述釀酒酵母菌的菌種用接種針刮取ー環(huán)，接種至盛有酵母菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述酵母菌活化培養(yǎng)基是將馬鈴薯 220g/l制備成馬鈴薯汁、葡萄糖25g/l和瓊脂25g/l混合后得到；將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有芽孢桿菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基是將酵母浸粉0. 9g/l、蛋白胨1. 2g/l、葡萄糖1. 2g/l、MgSO4 0. 3g/
1、K2HPO4L2g/l、硫酸銨0. 3g/l和瓊脂25g/l混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 4，在121°C滅菌20分鐘得到；各菌種在38°C活化培養(yǎng)M小時；再將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，并將三角瓶置于恒溫?fù)u床中，將所述釀酒酵母菌的菌種用無菌接種針刮取ー針，接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，各菌種在38°C擴(kuò)大培養(yǎng)82小時；然后將第一次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，各菌種接種量均為體積比12%，在38°C第二次擴(kuò)大培養(yǎng)M小吋，其中枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的第二次擴(kuò)大培養(yǎng)需在通風(fēng)條件下進(jìn)行。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基是將蛋白胨12g/l、肉膏12g/l、酵母提取物8g/l、K2HP044g/l、檸檬酸三銨4g/l、乙酸鈉 8g/l、葡萄糖25g/1、Tween8O 2mL/l、MgSO4 ·7Η20 lg/l、MnS044H20 0. 5g/l 和 CaC0312g/l 混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 4，在121°C滅菌20分鐘得到；所述酵母液體培養(yǎng)基是將馬鈴薯220g/l 制備成馬鈴薯汁然后和葡萄糖25g/l混合后得到；所述芽孢桿菌液體培養(yǎng)基是將酵母浸粉
0.9g/l、蛋白胨 1. 2g/l、葡萄糖 1. 2g/l、MgS04 0. 3g/UK2HPO4L 2g/l 和硫酸銨 0. 3g/l 混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 4，在121°C滅菌20分鐘得到。將第二次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各菌種按照5 5:5: 5 :5:5的比例混合得到混合菌種。將輔料味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉分別按照15%、10%、 20%、12%、25%、28%和35%的重量比混合得到混合輔料；將所述混合菌種按照1:6的重量比用去離子水稀釋，加入與稀釋液重量比為2 50的糖得到混合菌液；將所述混合菌液按照 35%的接種比，接種到所述混合輔料中并混合攪拌均勻，用發(fā)酵飼料袋包裝后放入發(fā)酵室， 26°C在發(fā)酵室內(nèi)發(fā)酵7天，得到發(fā)酵飼料添加劑產(chǎn)品，所述發(fā)酵飼料添加劑中嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種的數(shù)量分別彡 0. 3X IO8 個 / 克、0. 4X IO8 個 / 克、0. 2X IO8 個 / 克、0. 6X IO8 個 / 克、0. 5X IO8 個 / 克和0. 3X108個/克。實施例3
在無菌條件下，分別將所述嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有乳酸菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述乳酸菌活化培養(yǎng)基是將蛋白胨1 lg/Ι、肉膏1 lg/Ι、酵母提取物6g/l、K2HP043g/l、檸檬酸三銨3g/l、乙酸鈉6g/l、葡萄糖 22g/l、Tween80 1. 5mL/l、MgSO4 · 7H20 0. 7g/l、MnS044H20 0. 3g/l、瓊月旨 22g/l 和 CaCO3Ilg/ 1混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 3，在121°C滅菌15分鐘得到；將所述釀酒酵母菌的菌種用接種針刮取ー環(huán)，接種至盛有酵母菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述酵母菌活化培養(yǎng)基是將馬鈴薯 210g/l制備成馬鈴薯汁、葡萄糖22g/l和瓊脂22g/l混合后得到；將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用接種針刮取一環(huán)，接種至盛有芽孢桿菌活化培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基是將酵母浸粉0. 8g/l、蛋白胨1. lg/Ι、葡萄糖1. lg/1,MgSO4 0. 25g/
1、K2HPO4Llg/1、硫酸銨0. 25g/l和瓊脂22g/l混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 3，在121°C滅菌15 分鐘得到；各菌種在37°C活化培養(yǎng)48小時；再將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，并將三角瓶置于恒溫?fù)u床中，將所述釀酒酵母菌的菌種用無菌接種針刮取ー針，接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種用無菌接種針刮取一針，接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的三角瓶中，各菌種在37°C擴(kuò)大培養(yǎng)72小吋；然后將第一次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種用接種至盛有乳酸菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至盛有酵母菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至盛有芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的種子罐中，各菌種接種量均為體積比10%，在37°C第二次擴(kuò)大培養(yǎng)48小吋，其中枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的第二次擴(kuò)大培養(yǎng)需在通風(fēng)條件下進(jìn)行。所述乳酸菌液體培養(yǎng)基是將蛋白胨1 lg/Ι、肉膏1 lg/Ι、酵母提取物6g/l、K2HP043g/l、檸檬酸三銨3g/l、乙酸鈉 6g/l、葡萄糖22g/l、Tween80 1. 5mL/l、MgSO4 ·7Η20 0. 6g/l、MnS044H20 0. 3g/l 和 CaCO3Ilg/ 1混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 3，在121°C滅菌15 20分鐘得到；所述酵母液體培養(yǎng)基是將馬鈴薯200 220g/l制備成馬鈴薯汁然后和葡萄糖22g/l混合后得到；所述芽孢桿菌液體培養(yǎng)基是將酵母浸粉0. 8g/l、蛋白胨1. lg/Ι、葡萄糖1. lg/1,MgSO4 0. 25g/l,K2HPO4L lg/1和硫酸銨0. 25g/l混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 3，在121°C滅菌15分鐘得到。將第二次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各菌種按照2 2 3 2 3 1的比例混合得到混合菌種。將輔料味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉分別按照10%、8%、 15%、10%、20%、20%和25%的重量比混合得到混合輔料；將所述混合菌種按照1:5的重量比用去離子水稀釋，加入與稀釋液重量比為1 :50的糖得到混合菌液；將所述混合菌液按照 30%的接種比，接種到所述混合輔料中并混合攪拌均勻，用發(fā)酵飼料袋包裝后放入發(fā)酵室， 25°C在發(fā)酵室內(nèi)發(fā)酵6天，得到發(fā)酵飼料添加劑產(chǎn)品，所述發(fā)酵飼料添加劑中嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種的數(shù)量分別彡 0. 3X IO8 個 / 克、0. 4X IO8 個 / 克、0. 2X IO8 個 / 克、0. 6X IO8 個 / 克、0. 5X IO8 個 / 克和0. 3X108個/克。實施例4
將實施例1、實施例2、實施例3得到的發(fā)酵飼料添加劑按照5%的重量添加量添加到雞飼料中，對雞進(jìn)行飼喂。實施例5
將實施例1、實施例2、實施例3得到的發(fā)酵飼料添加劑按照20%的重量添加量添加到雞飼料中，對雞進(jìn)行飼喂。實施例6
將實施例1、實施例2、實施例3得到的發(fā)酵飼料添加劑作為雞飼料對雞進(jìn)行飼喂。對比實施例1
進(jìn)行對比試驗，試驗在23周齡的蛋雞上進(jìn)行，將試驗蛋雞分為三組對照組和實驗ー 組、實驗ニ組，其中對照組用普通雞飼料飼喂，實驗ー組和實驗ニ組分別用實施例1和實施例2得到的發(fā)酵飼料添加劑按照5%的重量添加量添加到雞飼料中進(jìn)行飼喂，實驗過程均不使用抗生素類藥品，試驗時間從2010年8月27日至2010年11月25日共91天，實驗結(jié)果見下表。
權(quán)利要求
1.ー種發(fā)酵飼料添加剤，其特征在于由混合菌種與包括以下原料的混合輔料發(fā)酵配制而成味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉，所述混合菌種是將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種按照1 5 :1 5 :1 5 :1 5 :1 5 :1 5的比例混合得到的。
2.如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵飼料添加剤，其特征在于所述混合輔料包括以下重量百分比的原料配制而成味精蛋白8へ‘15%,豆粕6へ一 10%,麩皮10 ‘ 20%,棉粕8へ一 12%,玉米纖維15 ‘ 25%,14 ‘ 28%,稻殼粉20 ‘ 35%。
3.如權(quán)利要求1或2所述的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)混合菌種的制備在無菌條件下，分別將所述嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌活化培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌活化培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌活化培養(yǎng)基中，在 36 38°C活化培養(yǎng)42 M小時；再將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌液體培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌液體培養(yǎng)基中，在 36 38°C擴(kuò)大培養(yǎng)68 82小時；然后將第一次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌和干酪乳桿菌的菌種接種至乳酸菌液體培養(yǎng)基中，將所述釀酒酵母菌的菌種接種至酵母菌液體培養(yǎng)基中，將所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種接種至芽孢桿菌液體培養(yǎng)基中，接種量為體積比8 12%，在36 38°C第二次擴(kuò)大培養(yǎng)42 M小吋，所述枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種在第一次擴(kuò)大培養(yǎng)時在恒溫?fù)u床中進(jìn)行，在第二次擴(kuò)大培養(yǎng)時在通風(fēng)條件下進(jìn)行；將第二次擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各菌種按照1 5:1 5:1 5:1 5:1 5 :1 5的比例混合得到混合菌種；(2)混合發(fā)酵將味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉分別按照8 15%, 6 10%、10 20%、8 12%、15 25%、14 28%和20 35%的重量比混合得到混合輔料；將所述混合菌種按照1:4 6的重量比用去離子水稀釋，加入與稀釋液重量比為1 2 50的糖得到混合菌液；將所述混合菌液按照25 35%的接種比，接種到所述混合輔料中并混合攪拌均勻，M 26°C在發(fā)酵室內(nèi)發(fā)酵5 7天，得到發(fā)酵飼料添加劑產(chǎn)品，所述發(fā)酵飼料添加劑中嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌菌種的數(shù)量分別彡0. 3X IO8個/克、0. 4X IO8個/克、0. 2X IO8個/克、 0. 6X IO8 個 / 克、0. 5X IO8 個 / 克和 0. 3X IO8 個 / 克。
4.如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述乳酸菌活化培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10 12g/l、肉膏10 12g/l、酵母提取物5 8g/l、K2HP042 4g/l、檸檬酸三銨2 4g/l、乙酸鈉5 8g/l、葡萄糖20 25g/l、Tween80 1 2mL/l、 MgSO4 ·7Η20 0. 58 lg/1、MnSO4·4Η20 0. 25 0. 5g/l、瓊月旨 20 25g/l 和 CaCO3IO 12g/\1 ；所述酵母菌活化培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯200 220g/l、葡萄糖20 25g/l和瓊脂20 25g/l ；所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基的配方為酵母浸粉0. 7 \0. 9g/l、蛋白胨1 1. 2g/l、 葡萄糖 1 1. 2g/l、MgSO4 0. 2 0. 3g/l、K2HPO4I 1. 2g/l、硫酸銨 0. 2 0. 3g/l 和瓊脂 20 25g/l。
5.如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述乳酸菌液體培養(yǎng)基的配方為蛋白胨10 12g/l、肉膏10 12g/l、酵母提取物5 8g/l、K2HP042 4g/l、檸檬酸三銨2 4g/l、乙酸鈉5 8g/l、葡萄糖20 25g/l、Tween80 1 2mL/l、 MgSO4 · 7H20 0. 58 lg/1、MnSO4·4Η20 0. 25 0. 5g/l 和 CaCO3IO 12g/l ；所述酵母液體培養(yǎng)基的配方為馬鈴薯200 220g/l和葡萄糖20 25g/l ；所述芽孢桿菌液體培養(yǎng)基的配方為酵母浸粉0. 7 0. 9g/l、蛋白胨1 1. 2g/l、葡萄糖1 1. 2g/l、MgSO4 0. 2 0. 3g/l、K2HPO4I 1. 2g/l 和硫酸銨 0. 2 0. 3g/l。
6.如權(quán)利要求4或5所述的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，其特征在于所述乳酸菌活化培養(yǎng)基或乳酸菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述各培養(yǎng)基配方混合后PH值調(diào)節(jié)至6. 2 6. 4， 在121°C滅菌15 20分鐘；所述酵母菌活化培養(yǎng)基或酵母菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述馬鈴薯制備成馬鈴薯汁再與各培養(yǎng)基配方混合；所述芽孢桿菌活化培養(yǎng)基或芽孢桿菌液體培養(yǎng)基制備時，將所述各培養(yǎng)基配方混合后PH值調(diào)節(jié)至7. 2 7. 4，在121°C滅菌15 20分鐘。
7.如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵飼料添加劑的制備方法，其特征在于將所述混合菌液與所述混合輔料混合均勻后，用發(fā)酵飼料袋包裝后放入發(fā)酵室進(jìn)行發(fā)酵。
8.如權(quán)利要求1或2所述的發(fā)酵飼料添加劑在動物飼料中的應(yīng)用，其特征在于所述發(fā)酵飼料添加劑用作動物飼料時的添加量為動物飼料的5 100wt%。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種發(fā)酵飼料添加劑、制備方法及其應(yīng)用，所述發(fā)酵飼料添加劑是由混合菌種與包括味精蛋白、豆粕、麩皮、棉粕、玉米纖維、米糠和稻殼粉的混合輔料發(fā)酵配制而成，所述混合菌種是將活化培養(yǎng)得到的嗜酸乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、干酪乳桿菌、釀酒酵母菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的菌種按照1～51～51～51～51～51～5的比例混合得到的。所述發(fā)酵飼料添加劑用作動物飼料時的添加量為動物飼料的5～100wt%。本發(fā)明充分利用豆粕、麩皮、棉粕等原料輔料，降低了動物養(yǎng)殖過程中的糧食消耗，可以部分或者全部代替動物飼料使用，可減少或者避免使用抗生素類藥品，沒有藥物殘留，降低了養(yǎng)殖戶的養(yǎng)殖成本。
文檔編號A23K1/14GK102550815SQ20111041762
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月14日
發(fā)明者劉玉江, 潘玉林, 王永剛 申請人:潘玉林