專利名稱：一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種組培苗葉柄的生根方法，特別是一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法。
背景技術(shù)：
廣豆根，也稱山豆根、南豆根，為豆科植物越南槐(Sophora tonkinensis Gapnep.)的干燥根及根莖，是著名的廣西道地藥材和常用中藥，為《中華人民共和國藥典》 所收載。主要分布在廣西，云南和貴州亦有產(chǎn)，但產(chǎn)量較小。廣豆根藥材味苦、寒，有毒，具有清熱解毒、消腫止痛等功效，可以治療喉癰、喉風(fēng)、喉痹、牙齦腫痛、喘滿熱咳、肝炎、便秘、 黃疸、下痢、痔疾、禿瘡、疥癬及蚊、蟲、犬咬傷等。廣豆根的藥用部位是干燥根及根莖，除了作為傳統(tǒng)的中藥材使用外，醫(yī)藥工業(yè)還以廣豆根作為原料，大量研制開發(fā)治療肝炎的針劑、咽喉腫痛的片劑以及抗腫瘤的中成藥， 因此廣豆根藥材的需求量越來越大。但廣豆根的地域分布范圍相當(dāng)有限，常零星生長于石山巖縫之中；在自然條件下，廣豆根開花結(jié)莢期的病蟲害嚴(yán)重、種子成熟時容易自然脫落， 且種子采收后活力容易衰退，這些常造成種子產(chǎn)量低、質(zhì)量差，生產(chǎn)上難以實現(xiàn)大面積栽培。但為了滿足市場需求，獲得經(jīng)濟利益，人們大量采挖廣豆根資源，致使野生廣豆根資源瀕臨枯竭。通過組織培養(yǎng)方法，從組培苗的葉柄中誘導(dǎo)產(chǎn)生大量不定根，可以為廣豆根藥材來源和有效成分的提取材料來源提供新途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法，它能夠快速獲得大量根類材料，滿足醫(yī)藥工業(yè)的需要。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案達到上述目的一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法，包括以下步驟(1)組培叢生芽壯苗培養(yǎng)取廣豆根組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001uX，光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，叢生芽木質(zhì)化后葉片展開，獲得帶三片葉片的帶柄復(fù)葉，所述MS壯苗培養(yǎng)基為含1. Omg/L的6-BA、 0. lmg/L的NAA、0. 5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3. 4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ；(2)組培苗葉柄生根培養(yǎng)將步驟(1)得到的帶三片葉片的帶柄復(fù)葉，從葉柄處切下，不帶腋芽，將葉柄接種到MS生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001UX， 光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，從葉柄基部萌發(fā)大量的不定根，所述MS生根培養(yǎng)基為含 0. 1-0. 5mg/L 的 IBA、1. 0-2. Omg/L 的 NAA,0-0. 2mg/L 的 IAA、30g/L 蔗糖和 3. 4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5. 8。本發(fā)明的突出優(yōu)點在于(1)本發(fā)明通過組織培養(yǎng)技術(shù)誘導(dǎo)廣豆根組培苗葉柄生根，在短時間內(nèi)獲得大量廣豆根不定根，為廣豆根藥材來源和有效成分的提取材料來源提供新途徑，以滿足醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)的需要。(2)在MS壯苗培養(yǎng)基中添加濃度為1. Omg/L的6_BA、0. lmg/L的NAA、0. 5mg/L的 IBA可促進叢生芽莖段長高、木質(zhì)化及葉片展開。(3)采用本發(fā)明所述的培養(yǎng)方法，得到的葉柄生根率在95%以上，每個葉柄平均帶6-8個根，根長為6-10厘米，直接收獲后可作為有效成分提取的原材料，且?guī)~葉柄可重復(fù)作為誘導(dǎo)材料誘導(dǎo)生根。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進一步說明。一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法，包括以下步驟(1)組培叢生芽壯苗培養(yǎng)取廣豆根組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001uX，光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，叢生芽木質(zhì)化后葉片展開，獲得帶三片葉片的帶柄復(fù)葉，其中MS壯苗培養(yǎng)基中含1. Omg/L的6-BA、 0. lmg/L的NAA、0. 5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3. 4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ；(2)組培苗葉柄生根培養(yǎng)將步驟(1)得到的帶三片葉片的帶柄復(fù)葉從葉柄處切下，不帶腋芽，將葉柄接種到MS生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001UX， 光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，從葉柄基部萌發(fā)大量的不定根，其中MS生根培養(yǎng)基中含有不同濃度的IBA、NAA和IAA，見表1，30g/L蔗糖和3. 4g/L的瓊脂外，培養(yǎng)基的PH值為5.8。表2結(jié)果表明IBA和IAA對廣豆根組培苗葉柄的生根率具有顯著影響， NAA對生根率的影響較小，根據(jù)生根率指標(biāo)確定的最佳培養(yǎng)基為A2B1C2，即培養(yǎng)基中添加激素為0. 3mg/L的IBA、1. Omg/L的NAA、0. lmg/L的IAA ；IBA對平均單株鮮重有顯著影響， 其次為IAA和NAA，但影響均不顯著，根據(jù)平均單株鮮重指標(biāo)確定的最佳培養(yǎng)基為A2B1C2， 即培養(yǎng)基中添加激素為0. 3mg/L的IBA、1. Omg/L的NAA、0. lmg/L的IAA。表1組培苗葉柄生根培養(yǎng)基的正交試驗因素水平表
權(quán)利要求
1. 一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法，其特征在于該方法包括以下步驟(1)組培叢生芽壯苗培養(yǎng)取廣豆根組培叢生苗，接種到MS壯苗培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001UX，光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，叢生芽木質(zhì)化后葉片展開，獲得帶三片葉片的帶柄復(fù)葉，所述MS壯苗培養(yǎng)基為含1. Omg/L的6-BA、 0. lmg/L的NAA、0. 5mg/L的IBA、30g/L蔗糖和3. 4g/L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5. 8 ；(2)組培苗葉柄生根培養(yǎng)將步驟(1)得到的帶三片葉片的帶柄復(fù)葉，從葉柄處切下， 不帶腋芽，將葉柄接種到MS生根培養(yǎng)基中，在培養(yǎng)溫度為23-27°C，光照強度15001UX，光照時間為12-14小時/天的條件下培養(yǎng)30天，從葉柄基部萌發(fā)大量的不定根，所述MS生根培養(yǎng)基為含 0. 1-0. 5mg/L 的 IBA、1. 0-2. Omg/L 的 NAA,0-0. 2mg/L 的 IAA、30g/L 蔗糖和 3. 4g/ L的瓊脂，培養(yǎng)基的pH值為5. 8。
全文摘要
一種廣豆根組培苗葉柄的生根方法，包括如下步驟(1)將廣豆根組培苗接種到MS壯苗培養(yǎng)基中壯苗，使組培苗葉片展開獲得完整的木質(zhì)化程度較高的帶柄復(fù)葉；(2)將帶柄復(fù)葉置于MS生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，誘導(dǎo)生根。采用本發(fā)明所述的方法可從廣豆根的組培苗葉柄中獲得大量的根部材料，為廣豆根藥材來源和有效成分的提取材料來源提供新途徑。
文檔編號A01H4/00GK102499083SQ201110327679
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月25日
發(fā)明者李林軒, 繆劍華, 韋坤華, 韋范 申請人:廣西壯族自治區(qū)藥用植物園